正常人尿蛋白质组学研究
正常人尿蛋白质组学研究
各种信息 ， 也可反映机体整体代谢状态 ， 与血清 等其 他 体液样本相 比， 其获 取无创 、 收集便利 ， 且蛋 白组成 并 相对 简单 、 易于分析 。蛋 白质组学 则是诠 释蛋 白所携
１２ １ 样 品 处 理 ．．
收 集 晨 起 清 洁 中段 尿 １０ｍ ， ｈ ０ Ｌ ２
北 京 世 纪坛 医 院 、 京 大 学第 九 临 床 医学 院 、 都 医科 大 学 肿 瘤 学 系 、 北 首 临床 检 验 中心 （ 北京 １０ ３ ） ００ ８
【 摘要 】 目的
异 研 究作 参 考 。方 法
初步建立正常人 尿液蛋白质双 向电泳图谱 ， 分析正 常尿蛋 白基本组成 ， 为疾病 下尿 液蛋 白差
的平 衡 液 。 （ ） Ｄ ３ Ｓ Ｓ—Ｐ Ｇ 垂 直 电 泳 ： 平 衡 后 的 Ａ Ｅ 将 ＩＧ胶 条 移 至 １％ 的凝 胶 上 端 ， 始 电压 为 １０Ｖ， Ｐ ２ 起 ０ 待 样 品 进 入 Ｓ Ｓ胶 浓 缩 成 一 条 线 ，． Ｄ ０ ５ｈ后 加 大 电 压 到 ２０Ｖ。直 至 溴 酚 蓝 到 达 凝 胶底 边 处 停 止 电泳 。 ０
处理 的尿液蛋白质双 向电泳图谱 ， 选择 重复性 好 、 独立
清 晰 的蛋 白质 位 点 进 行 质 谱 鉴 定 ， 点 全 方 位 同 时 分 多
１ ｉ ， ２００ｒｍ ｎ离心 ５ｍｎ 弃上清 ， ５ｍ ｎ １ ０ ｉ ／ ｉ， 将沉 淀溶于
样 品 裂 解 液 （ ＬＬ Ｕ ｅ 、 ％ Ｃ ＡＰ 、 ５ ｍｍｏ Ｌ ９ ｍｏ／ ｒａ ４ Ｈ Ｓ ６ ｌ ｆ
内 ４ １ ０ ｍｎ ℃ ０ｒ ｉ 离心 １ ｉ， ５ ／ ５ｍ ｎ 收集上清液 ， 弃去细胞 碎片和核 ， 上清液在血 细胞计数板观察无细胞或颗粒 ，
尿液蛋白质组学在肾脏病研究中的应用
【 要】 利 用 蛋 白质 组 学 研 究 技 术 检 测 肾病 患 者 尿 液 中 各 种 特 异 性 生 物 学 指 标 ， 现 与 疾 病 相 摘 发 关 的 特 殊 蛋 白质 标 志 分 子 ， 成 为 肾 脏 病 早 期 诊 断 、 理 生 理 研 究 的 前 沿性 手 段 。该 领 域 的 进 一 步 发 已 病 展 将 有 助 于 肾脏 病 的疗 效 观察 、 后 判 断 与 病 理 机 制 研 究 。现 将 国 外 尿 液 蛋 白 质 组 学 在 肾 脏 病 研 究 预 中 的应 用 作 一 介 绍 。
Ｒ ＮＡ 被 翻译成 具有 各种 功能 的蛋 白质 。这 些 功 能 蛋
征兆 。
人 的尿液 是一 种能轻 易 获 得 的生 物 学液 体 ， 重 更 要 的是它 还包 含 有 多种 生 物 标 志 ， 此 ， 用 蛋 白质 因 利 组学 研究 技 术 来 检测 患 者 尿 液 中 的各 种 特 异 性 生 物 学 指标具 有较 强 的可行性 与可 操作 性 ， 也 可 以 给 肾 这 脏疾 病 的早期 诊 断 、 鉴别 诊 断 以及 发 病 机理 的研 究 提 供 了更 多 的研 究依 据 。 利 用该工 具 ， 国外研 究 者 尝试 建 立 了正 常 人 群 的 尿 液蛋 白质 双 向凝胶 电 泳 图谱 ［ ， 且 对 肾脏 病 患者 １并 ］ 的肾脏 组织 、 血清 以及 尿液 的蛋 白质 表 达 差异 也 进行 了有关 分析 与 比对 ， 目的 ： 一 是 为 了发 现 有 助 于 其 第 肾脏疾 病早 期诊 断 的潜 在 性 生物 学 指标 ， 以此 确 立 可 靠 有效 的非 侵 害性 的常规 学 检测 方 法 ； 二探 讨 这些 第 生物学 指 标 是 否 与 疾 病 进 展 、 效 之 间存 在 某 种 关 疗 联 ； 三通 过发 现特 异性 差 异 蛋 白 ， 一 步探 讨 疾病 第 进 的生 理病 理机制 州Ｊ 。 尿 液蛋 白质组 学在 肾脏病 研 究 中的主要 应用 １ ｇ 肾病 ： 国有研 究报 道利用 蛋 白质 双 向凝 ．ＩＡ 韩 胶 电泳技 术 ， 已建 立 了 ＩＡ 肾病 尿 液 蛋 白质 组 学 图 ｇ 谱， 研究 表 明 ，ｇ 肾病 患 者 的尿 液 蛋 白质 图 谱 存 在 ＩＡ 着 极大 的相 似性 。与 正 常人 相 比 ，ｇ 肾病 患 者 的尿 ＩＡ 液 中分别 有 ８ ２种 特异性 高 表 达 与 １ ４种低 表 达 的蛋 ３ 白质 ， 这 ２ ６种 差异表 达 蛋 白质 点 中 ， ８ 在 １ 有 ４种被 认 为与 ＩＡ 肾病 有 关 。用 基 质 辅 助 激 光 解 吸 电 离 飞行 ｇ 时 间 质 谱 （ｍａｒ －ｓｉ ｅ ａｅ ｅｏｐ ｉｎ ｉｎｚ— ｔｉ ａｓｓ ｄ ｌｓｒｄ ｓｒ ｔ ／ｏ ｉ ｘ ｔ ｏ ａ
尿液蛋白质组学
尿液蛋白质组学简介尿液蛋白质组学是一种研究尿液中蛋白质的组成、结构和功能的方法。
通过对尿液中蛋白质的分析，可以了解人体健康状况、疾病发展过程以及治疗效果等信息。
尿液作为一种非侵入性的样本来源，具有易采集、操作简便等优势，因此在临床诊断和生物医学研究中得到广泛应用。
尿液蛋白质组学的方法尿液样本采集与处理尿液样本采集通常使用无菌容器收集晨尿或随机尿样。
为了避免污染和降解，应及时将样本转移到低温条件下，并加入蛋白酶抑制剂等辅助剂以保护蛋白质完整性。
蛋白质提取与富集从尿液中提取和富集目标蛋白质是进行后续分析的关键步骤。
常用的方法包括有机溶剂沉淀法、超滤法、离心浓缩法和亲和层析法等。
这些方法可以去除干扰物质，提高目标蛋白质的检测灵敏度。
蛋白质分离与鉴定分离和鉴定是尿液蛋白质组学研究的核心环节。
常用的方法包括二维凝胶电泳（2-DE）、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）和免疫沉淀等。
2-DE可以将蛋白质按照等电点和分子量进行分离，LC-MS/MS则可以通过质谱技术鉴定蛋白质的氨基酸序列。
数据分析与生物信息学尿液蛋白质组学数据量庞大，需要进行复杂的数据分析和生物信息学处理。
主要包括差异表达蛋白质的筛选、功能注释、互作网络构建以及通路富集分析等。
这些方法可以帮助研究人员挖掘出与特定疾病相关的生物标志物。
尿液蛋白质组学在临床应用中的意义疾病诊断与预测尿液蛋白质组学可以通过分析尿液中的蛋白质组成，帮助医生进行疾病的早期诊断和预测。
例如，尿液中某些特定蛋白质的表达水平与肾脏疾病、泌尿系统肿瘤等密切相关。
通过检测这些蛋白质的异常表达，可以提前发现潜在的疾病风险。
疾病机制解析与药物靶点发现通过对尿液中蛋白质组成的深入研究，可以揭示特定疾病的发生机制以及相关信号通路。
这有助于寻找新的治疗靶点，并推动药物开发。
同时，尿液蛋白质组学还可以评估药物治疗效果，为个体化治疗提供指导。
健康管理与个体化医学随着健康管理和个体化医学理念的兴起，尿液蛋白质组学在健康监测和预防保健方面也有广泛应用。
蛋白质组学在疾病研究中的应用
蛋白质组学在疾病研究中的应用
随着科学技术的不断进步，蛋白质组学作为生物医学研究中的重要分支，在疾病研究领域发挥着越来越重要的作用。
蛋白质组学是研究生物体内所有蛋白质的总体结构、功能和相互作用的科学，通过对蛋白质的组成、表达、修饰等方面的研究，可以深入了解疾病的发病机制、诊断方法及治疗策略。
在疾病研究中，蛋白质组学可以帮助科学家们快速准确地发现潜在的生物标志物，这对于疾病的早期诊断和治疗至关重要。
通过比较健康人群和患病人群的蛋白质组学数据，可以发现特定蛋白质在某种疾病中的表达水平是否异常，从而为疾病的早期诊断提供重要依据。
例如，乳腺癌的早期诊断可通过检测血清中特定蛋白质的表达水平来实现，这为患者尽早接受治疗提供了可能。
蛋白质组学还可以帮助科研人员深入了解疾病的发病机制。
通过研究蛋白质在疾病发生发展过程中的变化，可以揭示疾病发生的生物学基础，为疾病的治疗提供新的思路和方法。
例如，糖尿病的发病机制与蛋白质的糖基化修饰密切相关，通过研究这些修饰对蛋白质功能的影响，可以为糖尿病的治疗提供新的靶点。
蛋白质组学在药物研发领域也发挥着重要作用。
通过研究药物与蛋白质相互作用的机制，可以为新药的开发提供重要信息。
例如，通过蛋白质组学技术可以筛选出与某种药物相互作用的蛋白质，从而
加快新药的研发进程。
总的来说，蛋白质组学在疾病研究中的应用，不仅可以帮助科学家们发现新的生物标志物，提高疾病的诊断准确性，还可以深入了解疾病的发病机制，为疾病的治疗提供新的思路和方法。
随着蛋白质组学技术的不断发展，相信在未来的疾病研究中，蛋白质组学将发挥越来越重要的作用，为人类健康做出更大的贡献。
人尿液蛋白质N-糖肽富集和质谱鉴定的新方法研究
人尿液蛋白质N-糖肽富集和质谱鉴定的新方法研究HUANG Jun-jie;JIAO Feng-long;WANG He-ping;ZHU Li-hua;QIN Wei-jie;QIAN Xiao-hong【摘要】蛋白质的N-糖基化修饰参与了许多重要的生理过程,是研究多种重大疾病诊断标志物的热点.与其他体液活检样本相比,尿液可以无创、大量获取,并且不受稳态调节的影响,能够在一定程度上反映整个机体的生理和病理状态.因此,人尿液蛋白质N-糖基化的规模化研究对疾病诊断标记物的筛选和治疗靶点的发现均具有重大意义.由于人尿液中的N-糖蛋白含量有限,修饰比例较低,在质谱分析时N-糖肽易被高丰度的非糖肽所掩盖,难以鉴定.因此,发展高效、高选择性的富集材料是实现尿蛋白N-糖基化深度覆盖的必要前提.本研究利用巯基-烯点击化学反应,使用[3-(甲基丙烯酰氨基)丙基]二甲基(3-硫代丙基)氢氧化铵内盐(SPP)制备了两性离子修饰亲水硅胶材料(SPP-SiO2).该材料成功地应用于标准糖蛋白和健康人尿蛋白N-糖肽的富集和质谱检测,共鉴定了包含1065个位点的633个尿液糖蛋白,比文献报道的鉴定规模提高了12.2％,证明了该亲水材料在尿液糖蛋白质组研究中的应用潜力.【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2018(039)002【总页数】9页(P149-157)【关键词】巯基-烯点击化学法;尿蛋白;N-糖肽;富集;质谱鉴定【作者】HUANG Jun-jie;JIAO Feng-long;WANG He-ping;ZHU Li-hua;QIN Wei-jie;QIAN Xiao-hong【作者单位】;;;;;【正文语种】中文【中图分类】O657.63N-糖基化修饰作为一种重要的蛋白质翻译后修饰，在细胞粘附、信号转导、细胞凋亡、免疫应答等生物学过程及生理机能的调节中发挥着关键的作用[1-4]。
异常的糖基化修饰与人类多种重大疾病，如肿瘤、炎症以及神经退行性疾病等密切相关[5]。
尿蛋白检查的临床意义
汇报人：
202X-01-06
目录
尿蛋白检查的基本知识尿蛋白检查在肾脏疾病中的应用尿蛋白检查在其他疾病中的应用尿蛋白检查的临床意义及局限性
01
CHAPTER
尿蛋白检查的基本知识
01
02
尿蛋白是肾脏疾病的重要标志，也是肾脏损伤和肾功能减退的早期预警信号。
尿蛋白是指在尿液中出现蛋白质的现象，正常尿液中含有微量蛋白质，当尿中蛋白质含量超查在其他疾病中的应用
总结词
尿蛋白检查是糖尿病肾病的重要诊断依据，通过检测尿液中的蛋白质含量，有助于判断肾脏损伤程度。
详细描述
糖尿病肾病是糖尿病的常见并发症之一，长期高血糖状态导致肾脏微血管病变，进而引起肾功能损害。尿蛋白检查可以检测尿液中的白蛋白、转铁蛋白等蛋白质含量，当出现持续性蛋白尿时，提示肾脏受损。
通过定期检测尿液中的蛋白质含量，可以了解肾脏病变的进展情况，及时调整治疗方案，延缓疾病进展。
急性肾损伤是一种紧急情况，可能导致肾功能衰竭和死亡。尿蛋白检查可以预测急性肾损伤的发生风险和严重程度。
高浓度的尿蛋白是急性肾损伤的预测因子之一，通过检测尿液中的蛋白质含量，可以及早发现急性肾损伤，及时采取治疗措施，降低风险。
04
CHAPTER
尿蛋白检查的临床意义及局限性
尿蛋白检查是诊断肾脏疾病的重要手段之一，通过检测尿液中蛋白质的含量，可以判断肾脏功能是否受损。
诊断肾脏疾病
对于已经确诊肾脏疾病的患者，定期进行尿蛋白检查可以评估治疗效果，指导治疗方案调整。
评估治疗效果
尿蛋白水平的变化可以预测肾脏疾病的进展情况，有助于及时采取干预措施，延缓病情恶化。
正常尿蛋白值
正常尿液中蛋白质含量极微，通常不超过150mg/24h。
尿液蛋白质组 实验流程
尿液蛋白质组实验流程一、实验准备样本收集选择清洁无菌的尿液收集容器，避免样本被污染。
采集早晨第一次尿液样本，因其含有的蛋白质浓度较高，能更好地代表体内状态。
标记样本，记录收集时间和其他相关信息。
样本处理收集的尿液样本应立即处理，以防蛋白质降解。
样本处理步骤如下：将尿液样本离心，去除沉淀物和细胞碎片。
将上清液转移至干净的离心管中，进行冷冻保存。
保存温度通常为80℃。
处理样本时，应穿戴适当的防护装备，并在无菌条件下操作。
二、蛋白质提取样本解冻取出冷冻的尿液样本，放置于4℃冰箱中解冻。
解冻过程应缓慢进行，以避免蛋白质变性。
蛋白质沉淀通过加入适当的沉淀剂（如三氯乙酸、冰醋酸等），使尿液中的蛋白质沉淀。
常见的沉淀方法包括：加入沉淀剂后，充分混匀样本，通常在室温下静置一定时间。
通过离心分离沉淀的蛋白质，弃去上清液。
用适当的缓冲液洗涤沉淀物，以去除多余的沉淀剂。
蛋白质溶解将洗涤后的沉淀物重新溶解在适当的缓冲液中，通常使用含有去垢剂（如尿素、硫脲）的溶液，以帮助溶解蛋白质。
三、蛋白质定量与分离蛋白质定量使用比色法（如BCA法、Bradford法）测定蛋白质浓度。
定量方法的选择应根据实验需求和样本特性来决定。
蛋白质分离常用的蛋白质分离方法包括：SDSPAGE：用于初步分离蛋白质，评估样本中蛋白质的分子量范围。
液相色谱：例如反相色谱（RPHPLC）和离子交换色谱（IEC），用于进一步分离和纯化蛋白质。
四、蛋白质鉴定与分析蛋白质酶解将分离纯化后的蛋白质进行酶解，常用的酶有胰蛋白酶。
酶解过程如下：根据蛋白质的性质选择合适的酶解条件。
在适宜的温度和pH条件下进行酶解，通常在37℃的水浴中进行。
酶解完成后，将消化液进行冷冻保存，或立即进行下一步的分析。
质谱分析采用质谱（MS）技术进行蛋白质鉴定和定量。
常见的质谱方法包括：MALDITOF MS：用于蛋白质的质谱分析，适用于大分子蛋白质。
LCMS/MS：液相色谱联用质谱技术，适用于复杂样本的详细分析。
尿液蛋白质组学
尿液蛋白质组学
尿液蛋白质组学指以尿液为样本进行蛋白质组学研究，尿液是临床蛋白质组学研究的主要样本之一，可用于疾病的机制研究和生物标志物的发现。
百泰派克生物科技提供基于质谱的尿液蛋白质组学分析服务。
尿液蛋白质组学
尿液蛋白质组学指利用蛋白质组学技术在整体水平上系统性地分析尿液中的蛋白质组成及其生物学功能。
尿液易于通过无创程序大量重复收集，是临床蛋白质组学研究的一个较好的资源。
与在取样期间和取样后容易发生蛋白质水解降解的血浆或血清等其他生物体液相比，尿液的蛋白质组成相对稳定。
虽然正常尿液中的蛋白质总量远小于血浆，但是超过数千个蛋白质已经在尿液中被发现。
由于70％的尿蛋白来自肾脏和泌尿道，而30％的尿蛋白来自分泌到血液循环中的其他器官，因此尿液蛋白质可以被用于研究全身性和肾脏疾病的病理过程，以及发现新的生物标志物等。
随着技术的发展，尿液蛋白质组学已成为最为普遍的生物标志物发现研究领域之一。
尿液蛋白质组学。
尿液蛋白质组检测
尿液蛋白质组学分析主要包括鉴定不同疾病或治疗阶段的尿排泄蛋白和多肽，并确定其数量、功能和相互作用等。
常见的尿液蛋白质组检测方法包括二维凝胶电泳结
合质谱技术、液相色谱与质谱联用技术、毛细管电泳与质谱联用技术，以及蛋白质微阵列等。
其中，质谱技术是蛋白质组鉴定和定量分析的一个主要技术。
尿液蛋白质组学研究现状及其在体育科学中的应用
（ 广州体育学院 ， 广东 广州
摘
５ ００ ） １５ ０
要 ： 蛋 白组 份 是 反 映 运 动 负荷 的一 项灵 敏 指 标 ， 由 于研 究方 法 的 限制 ， 液 蛋 白质 组 份研 究在 运 动 训 练 中的 尿 但 尿
应 用一 直 处 于停 滞 状 态 ， 白质 组 学研 究技 术 的 出现 为尿 蛋 白组 份 在 运 动 训 练 中的 广 泛 应 用提 供 了可 能 。 综 述 了尿 蛋 液蛋 白质 组 学研 究 现 状 ， 展 望 了尿 液 蛋 白质 组 学研 究在 体 育科 学 中的 应 用 ， 尿 液 蛋 白质 组 学研 究在 体 育科 学 中的 并 为
应 用提 供 思 路 。
关键词 ： 液； 白质组学 ； 尿 蛋 体育科 学 中图分类号 ：８ ４ ７ Ｇ ０ ． 文献标识码 ： Ａ 文章 编号 ：０７—３３ ２ １ ）６—０７ ０ １０ ２ Ｘ（００ ０ ０ ２— ５
Ｒｅ ｅ ｒ ｈ ｏ ｉ ｏ ｅ ｍ ｉｓ ａ ｔ ｓ ａ ｃ ｆＵｒｎｅ Ｐｒ ｔ ｏ ｃ ｎｄ ｉｓ Ａｐｐ ｉ ａ ｉ ｎ ｉ ｏ ｔ ｃ ｅ ｃ ｌｃ ｔｏ ｎ Ｓｐ ｒ ｓ Ｓ ｉ ｎ ｅ
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蛋白质组学在肾小球疾病研究中的应用
ＥＩ Ｓ —Ｍｓ 制作 了肽谱和蛋 白质 片段 图谱 ， ） 他们 鉴定 了 ３ ４个 用 Ｓ Ｌ —Ｔ Ｆ—ＭＳ技术研究了活动期和静 止期狼疮性 肾炎 Ｅ ＤＩ Ｏ
多肽和蛋白质片段 。但 是 ， 由于 当时 的技 术条件 所 限 ， 这些 鉴 之间的蛋 白质组学差异 。Ｎ ａ等Ｌ Ｊ ｇ ｉ ｌ 使用 ２ ５ 一Ｄ技术 ， 研究 了大
２ 利用肾小球标本进行 蛋白质组学研究 肾小球是研究 肾脏病 发病机 制 的重要研究 材料 。肾小 球
质， 这些 蛋 白质包括 转运 蛋 白， 补体 ， 侣蛋 白， 附分子 ， 伴 黏 受 病变类型和病变程度 可 以直 接影 响肾小球 的蛋 白质成分 的变
体 ， 细胞 信号蛋 白以及 基质 蛋 白等 。还 有一些 学者利 用表 化。研究肾小球蛋白质 组学有 助于 阐明 肾小 球 肾炎 的发病 机 酶， 面增强激光解析 电离 飞行 时 间质谱 （ ｄ ｉ Ｓ ｄ —Ｔｏ —ＭＳ ｔ 和毛 制 ， ｆ ）ｊ ４ 促进 肾脏病 的治疗 。 细管电泳 一质谱技术 （ Ｅ—ＭＳ ＿６检测正 常人 尿液 中的多肽 Ｃ ）ｌ ５ Ｊ
中国中西医结合肾病杂志 ２１ 年 ４ ００ 月第 ｌ 鲞筮 翅
Ｃ ｒ ｐ Ｊ ＮＡ
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３７ ・ ５
蛋 白质组 学 在 肾小球 疾 病研 究 中的应用
吕 杨① 谢 院生① 陈香 美① △
希望在尿液 中找 到该疾 病 的生物 标志 物。Ｉ ｕ ｉ 等 利 － ｂｔ ￣ ｚ 蛋 白质组 学是 以细胞 内所 有蛋 白质 为研 究 目标 的学科 。 化 ， 在完成 了人类基因组计划之后 ， 白质组学 已经成 为了生命科 用 Ｃ 蛋 Ｅ—ＭＳ技术 ， 分析 了健康人群 、ｇ ＩＡ肾病 、 性肾病尿液 中 膜
尿液蛋白质组学
常的 尿液蛋 白质组 学研 究发展 历程 ， 生理 情 况下的 尿液 蛋 白质 组 学研 究进展 及 在 尿 液 中 已检 测 到疾 病 相 关 蛋 白标记 物 的研 究， 列举 了一 些收 集和整 合尿 液蛋 白质 组数据 的共 享平 台。 目前 ， 正 常尿液 中的大 多数 蛋 白 种 类 已近被 发 现 ， 建立基 本 的尿液蛋 白质 数据 库非 常 必要 的 ； 病理 状 态生物标 记物 的检 测 已进 入 临床 应 用阶
动 物 医学进 展 ， ２ ０ １ ３ ， ３ ４ （ ２ ） ： １ ０ ４ — １ ０ ８
Ｐｒ ｏ ｇｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎ Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄｉ ｃ ｉ ｎ ｅ
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尿 液 蛋 白质 组 学
赵 国顺 ， 赵 兴 绪 ， 张 勇 ， 武 小虎 ， 刘姗 姗 。 ， 陶金 忠
（ １ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｉ ｏ ｎ ｔ ｒ ａ ｐ — ｏ ｒ ｂ ｉ ｔ ｒ ａ ｐ ｍａ ｓ ｓ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｍｅ ｔ ｅ ｒ 。 Ｉ ＴＱ—
Ｏ ｒ ｂ ｉ ｔ ｒ ａ ｐ ） 技 术从正 常人 的尿样 中鉴定 出 １ ５ ３ ４种 蛋 白， 其 中大 多数 是 膜 蛋 白 。２ ０ ０ ９年 ， Ａｌ ｅ ｘ Ｋ 等 通
（ １ ． 甘肃农业大学动物医学院 ， 甘肃 兰州 ７ ３ ０ ０ ７ ０ ； ２ ． 甘肃 农 业 大学 生命 科学 技 术 学 院 ， 甘肃兰州 ７ ３ ０ ０ ７ ０
３ ． 宁夏 大学 农 学 院 ， 宁夏银川 ７ ５ ０ ０ ２ １ ）
摘 要 ： 随着新技 术的 出现 与 多种技 术之 间的交 叉融合 ， 尿液蛋 白质组 学研 究发展 迅速 。论 文概述 了正
尿蛋白检验的临床分析
2.5组织性蛋白尿：标志性蛋白为α2巨球蛋白、载脂蛋白A－I。指肾小管代谢产生的、组织破坏分解的、炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质(如Tamm－Horsfall糖蛋白)等。尿蛋白定性±～1+，定量0.5～1.0g／24h。
3.检验干扰因素
3.1分析前
3.1.1标本因素：尿蛋白测定结果与标本采集时气候、体力活动程度、营养状况和液体摄入等有关。特别是24h的尿量可有5～10倍变化，而在多尿期更可高达30倍之差。故一般采用次日清晨尿液，通常是相对可靠的检测标本。标本不应冷冻，否则将导致清蛋白和IgG丢失。标本保存：室温下7天；4～8℃稳定30天。如鉴别直立性蛋白尿，应采集2份12小时尿标本分别检测(1份昼尿，1份为卧床休息后夜间尿)。疑应激性蛋白尿时，应弃用第1次尿，在休息后重新采集第2次尿标本检测。尿蛋白标本应调节pH在5.0～6.0为宜，因尿pH≥9使尿蛋白测定假阳性，尿pH<3使尿蛋白测定假阴性。
尿蛋白检验的临床分析
正常时，肾小球毛细血管滤过膜允许分子质量<7万的蛋白质分子滤过；允许分子质量<4万的蛋白质自由通过，如清蛋白、β2微球蛋白、α2微球蛋白、溶菌酶等[1]。但能阻止血浆分子质量>7万的蛋白质分子滤过。清蛋白占总滤过蛋白的40％，滤过的清蛋白又几乎全部被近曲肾小管重吸收，故正常人尿液中清蛋白量仅为30～130mg／24h。一次随机尿中蛋白质为0～80mg／L，用加热醋酸法、磺基水杨酸法及试带法无法测出。尿蛋白>100mg／L或>150mg／24h尿时，蛋白质定性试验可阳性，则为蛋白尿。
2.2肾小管性蛋白尿：
标志性蛋白为α1微球蛋白、β2微球蛋白、视黄醇结合蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制物C、N－乙酰－β－D葡萄糖胺酶(β－NAG)。尿清蛋白／β2－微球蛋白比值一般<10；而肾小球病变时，比值>300；混合性病变则比值界于两者之间。尿β2－微球蛋白、溶菌酶增高，尿清蛋白正常或轻度增高，尿蛋白定性1+～2+，定量1.0～2.0g／24h。常见于肾小管损害疾病。
一般人群中尿蛋白水平对主要不良心脑血管事件及全因死亡的影响
一般人群中尿蛋白水平对主要不良心脑血管事件及全因死亡的影响王剑利;李俊娟;周靖;刘艳;吴寿岭【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2017(25)3【摘要】目的研究一般人群中尿蛋白水平对主要不良心脑血管事件(MACCE)及全因死亡的影响。
方法采用前瞻性队列研究方法,入选2006年7月至2007年10月参加开滦集团健康体检人群中资料完整者共87292例作为研究对象,平均年龄51.12±12.29岁。
采用尿常规试纸法检测晨尿,以尿蛋白水平分为3组:尿蛋白阴性组(-)、微量尿蛋白组(±/+)、大量尿蛋白组(≥2+)。
应用COX比例风险模型分析尿蛋白与MACCE及全因死亡的关系。
结果平均随访6.90±0.72年,随访期间共发生MACCE 3091例,累积发病率为5.25/千人年;全因死亡事件4087例,累积发病率为6.84/千人年。
3组MACCE累积发病率分别为4.84/千人年、7.34/千人年、12.06/千人年;全因死亡率分别为6.10/千人年、10.28/千人年、19.30/千人年,差异均具有统计学意义(P<0.01)。
校正其他传统危险因素后,与尿蛋白阴性组相比,微量尿蛋白组、大量尿蛋白组发生MACCE的RR值分别为1.24(95%CI 1.10~1.40)、1.58(95%CI 1.38~1.81),全因死亡的RR值分别为1.41(95%CI 1.27~1.56)、2.15(95%CI 1.93~2.39)。
结论尿常规显示的尿蛋白是一般人群MACCE及全因死亡的独立危险因素。
【总页数】5页(P288-292)【关键词】尿蛋白;主要不良心脑血管事件;全因死亡【作者】王剑利;李俊娟;周靖;刘艳;吴寿岭【作者单位】开滦集团开滦总医院;开滦集团开滦职工健康保障中心【正文语种】中文【中图分类】R18【相关文献】1.慢性肾功能不全对中老年非瓣膜性房颤患者全因死亡、心脑血管疾病死亡及血栓终点事件的影响 [J], 王海军;郭艳;司全金;王玉堂2.尿蛋白对糖尿病人群心脑血管事件及全因死亡的影响 [J], 王剑利;李俊娟;周靖;刘艳;吴寿岭3.健康行为和因素评分对心脑血管事件及全因死亡的影响及研究 [J], 张立杰;王晓玲;宋巧凤;王希柱;周文华;李志坤;刘小雪4.老年男性人群血尿酸对心脑血管事件及全因死亡的影响 [J], 王丹; 王剑利; 陈朔华; 周靖; 李慧心; 吴寿岭5.静息心率对老年人群心脑血管事件及全因死亡的影响 [J], 王丹; 陈朔华; 刘颖辉; 李璐; 吴寿岭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
从健康人尿液筛选年龄相关蛋白质
基础医学与临床Basic & Clinical MedicinvApdi 2021VoV41 NeD2221年 4月 第41卷第4期文章编号：144)-6325(2421)44-4528氟5研究论文从健康人尿液筛选年龄相关蛋白质郑舒心、，赵敏迪4,邵 晨2孙海丹、，刘晓燕、，郭正光、，孙 伟、**收稿日期：2424W 、W4 修回日期：242、氟、表3基金项目：中国医学科学院医学科学创新基金(2417D2M-)909)* 通信作者(ccrresponding authoe ) : sunwei@ iSms.4111110.1X44/(1.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院药理系，北京140045；2.北京医院国家老年医学中心检验医学科，北京144732； 8.国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心北京生命组学研究所，北京142202)扌商要：目的筛选健康成人尿液中与年龄相关的差异表达蛋白质，探讨成人因年龄增长而发生的蛋白质改变。
方法选取2名健康男性及2名健康女性,按年龄各分为3组(24~ 34、44~ 53和M 64周岁)，用非标记定量蛋白质组学 技术进行尿液蛋白质组分析，筛选年龄相关尿液蛋白。
结果从男性尿液中共获得14个与年龄增长相关的尿蛋白，其中上调66个，下调34个。
从女性尿液中共获得94个与年龄增长相关尿蛋白，其中上调77个，下调15个。
获得男女共有的年龄增长相关尿蛋白1个。
蛋白功能分析显示,这些蛋白与凝血系统、蛋白泛素化.LXR/RXR 激活、糖酵解等通路相关。
结论尿液中存在与年龄增长相关的蛋白质，有可能成为衰老相关的尿液标志物，并为后续疾病生物标志物发现提供基础。
关键词：尿液蛋白质组学;个体差异;年龄中图分类号:R32文献标志码:AScreening aying related protein) in udnc from hea/hy adult)ZHENG SSuwin 1, ZHAO Mis-dO, SHAO Chen 7, SUN HaOdan 、，LIU XOe-ysn 、，GUO Zhepg-auang 1, SUN Wei 1 *(1. DepaPmeo) of Pharmacologp , Institute of Basic Medical Sciences CAMS , School of Basic Medicixc PUMC , BeijOg 120005 ；4. Depadmeo) of Lakoratop McdRixc , National Center of Gerontologp , BeijOg Hospital ,BeijOg 120736 ；3. Beijmg Institute of Lifeomics, National Centos for Protein Sciences (Beijmg),BeijOg Proteomc Research Ceotes, BeijOg 122226, Chixa)Abstrach : Objective To screen the diOerextial proteins related W aping in human udne and W find out the func-tioxal changes of proteins related te aping. M ethods Fondeen healthy men and 15 healthy women woo oplUdand divided them inte three gAups accorVing W their ages (22-36, 40-54 and over 66 years olU) . The diOerential proteins were screened Sy laXel-Zrev quanti/cahox and 2DLC-MS/MS. R csu IS s In male gAVp , there were 120 pre Wins di/erentially expres/d in three gAups ； 66 wca over-axpres/d and 34 wca under-axpres/d. In female gAnp , there were 94 proteins UPoo/XU expressed in three gAups, 77 were overexpressed and 15 were undo a x -pressed. Thera were 1 diPerextial expressed proteins related W aping in Soth male and female gAups. Thou protein pathways mainly fochsed on coagulation system , protein uUiqui/na/ox pathway , LXR RXR vhWxWn and lactoso UepraSatiox III, etc. Conclusions Proteins related te aping can Sv found in udne , which may Sv used as SiomarVers of aping and previding Seis far suUsepuext discaveA of iisoso SiomarVers.郑舒心从健康人尿液筛选年龄相关蛋白质529 Key words:uh/c proteomics;individual vaha/on;aging近年来，尿液逐渐成为寻找疾病标志物的重要来源⑴。
尿液蛋白质检验一
二
蛋白尿形成的原因和机制
三
尿液蛋白质的检验
四
尿液蛋白质检验的临床意义
4
一、蛋白尿的定义
肾小球的滤过
肾小管与集合管的重吸收
肾小管的分泌 正常人尿液中蛋白质的含量很少！
5
一、蛋白尿的定义
健康人尿液蛋白质含量很少，当尿液蛋 白质超过150mg•24h-1或超过100mg•L-1时,蛋 白质定性试验为阳性称为蛋白尿(proteinuria)。
溢出性 蛋白尿
组织性 蛋白尿
病变部位
尿液蛋白质特点
肾小球
中分子量蛋白、大分子量蛋白质增加
肾小管
肾小球、 肾小管
肾前性
小分子量蛋白质增加为主 肾小球、肾小管受损程度不同而有一定的差异
小分子量蛋白质
肾小管、泌尿组织
T-H蛋白质增加为主
12
三、尿液蛋白质的检验 尿液中有无蛋白质？ 尿液中蛋白质的量？ 尿液中有哪一类蛋白质？
急性肾小管坏死
45
课堂小结
尿液标本
蛋白质定性
蛋白质定量
干化学试带法 磺基水杨酸法
染料结合法 比浊法
蛋白质分类
46
自主设计实验 合成三种人工尿液，要求：
加热乙酸法
1
-
2
+
3
-
思考题
干化学试带法 + -
磺基水杨酸法 + + +
47
谢谢！
27
尿液蛋白质定量
三、尿液蛋白质的检验
双缩脲法 比浊法
染料结合法
需要对尿液标本进行浓缩处理！
28
尿液蛋白质定量
三、尿液蛋白质的检验
方法 双缩脲法 比浊法 染料结合法
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２．２质谱分析从左到右ｐＨ值为３—１０，从上到下 分子量递减。选取图中表达点分子量约１８—９４ ｋＤ， ｐＨ值在３一１０范围内重复性好、染色清晰、界限明显 的３０个蛋白位点进行质谱分析，位点位置见图２。
圈ｌ正常人尿蛋白电泳图谱
圈２正常人尿蛋白龟泳 图谱取点后
２．３正常３０个尿液蛋白匹配结果将每个切取蛋白 点做质谱，质谱结果进行生物信息学分析，每个点取最 高分值对应的蛋白质作为匹配结果，共有２８个点获得 有效匹配，其中编号１８与２０的两个点未得到有效匹 配。见表１。
·３００·
广东医学２０１０年２月第３ｌ卷第３期
Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｆｅｂ．２０１０，Ｖ０１．３１．Ｎｏ．３
正常人尿蛋白质组学研究
雷婷，赵旭宏，张曼△ 北京世纪坛医院、北京大学第九临床医学院、首都医科大学肿瘤学系、临床检验中心（北京１０００３８）
【摘要ｌ 目的初步建立正常人尿液蛋白质双向电泳图谱，分析正常尿蛋白基本组成，为疾病下尿液蛋白差 异研究作参考。方法用丙酮沉淀法对４例正常人尿液中蛋白质进行浓缩，用固相ｐＨ梯度双向凝胶电泳技术分 离蛋白样品。凝胶考马斯亮蓝染色，ＧＳ一８００ Ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ Ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｅｒ凝胶成像系统获取图像，ＰＤＱｕｅｓｔ２Ｄ分析软件 对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析，寻找表达蛋白。应用基质辅助激光解析电离 飞行时间质谱（ＭＡＵＤＩ—ＴＯＦ）得到相应的肽指纹图谱，搜索相关数据库对蛋白质点进行鉴定。结果对染色明 显且独立的３０个蛋白斑点进行鉴定，并对结果进行数据库检索，共有２８个点获得有效匹配，包括各种血清白蛋 白、免疫分子以及补体分子、载脂与转运蛋白、肤酶Ｓｌ家族、细胞结构蛋白、蛋白酶抑制因子等，鉴定出的蛋白质 大部分ＰＩ在４—７之间。结论应用蛋白质组学方法分析正常人尿液蛋白质组成成分可行，初步建立了正常人尿 液２８个蛋白质图谱，为分析疾病状态下尿液蛋白质成分的改变提供了基础资料。
５．９３ ５．５２
一 甲状腺素结合蛋白
５．６１ ５．５６
甘露聚糖结合凝集索丝氨酸蛋白酶２ 载脂蛋白Ａｌ
６．３３
一
５．９３
一
６．８１
血清转铁蛋白；转铁蛋白；Ｂ—ｌ铁结合球蛋白
６．４３ ６·２ｌ
ｔｔＭｔｔ黼１２０ 间一ｎ一胰蛋白酶抑制剂重链１１４蛋白
问一ａ一胰蛋白酶抑制剂重链Ｈ４；血浆激肽释
¨－芝二：瓣≯笔嚣：㈨黼解
日立７０８０２ＩＳＥ生化分析仪购自日本；ＰＲＯＴＥＡＮ ＩＥＦ Ｃｅｌｌ等电聚焦仪购自于ＢＩＯＲＡＤ公司；ＰＲＯＴＥＡＮ Ⅱ】【ｉ ２一Ｄ Ｃｅｌｌ垂直电泳槽，ＧＳ一８００ Ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ Ｄｅｎｓｉ．
·国家高技术研究发展计划（编号：２００６ＡＡ０２０９），北京市优秀人 才培养Ｄ类专项基金资助项目（编号：２００４／Ｄ０３０３１５４）
△通信作者ｏ Ｅ—ｍａｉｌ：ｍｚｈａａ９６２＠ｙａｈｏｏ．ｃ响．ｃｎ
ｔｏｍｅｔｅｒ凝胶成像系统获取图像，用ＰＤＱｕｅｓｔ２Ｄ分析软 件对图像进行凝胶图像分析。 １．２ 方法
１．２．１样品处理 收集晨起清洁中段尿１００ ｍＬ，２ ｈ 内４℃ｌ ５００ ｒ／ｒｅ．ｉｎ离心１５ ｍｉｎ，收集上清液，弃去细胞 碎片和核，上清液在血细胞计数板观察无细胞或颗粒， 取上清液与一２０℃预冷纯丙酮１：１混匀，４℃静置 １５ ｍｉｎ，１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心５ ｍｉｎ，弃上清，将沉淀溶于 样品裂解液（９ ｍｏｌ／Ｌ Ｕｒｅａ、４％ＣＨＡＰＳ、６５ ｍｍｏｌ／Ｌ ＤＴｒ、０．５％两性电解质）中，超声ｌＯ Ｈｚ、１０ ｓ冷却５０ ８ 重复６次，４℃１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ，取上清，过除 盐柱除盐，蛋白质千粉溶于裂解液中，日立７０８０一ＩＳＥ 生化分析仪检测总蛋白浓度。分装，一８０℃冻存备用。 １．２．２ 双向凝胶电泳 （１）固相等电聚焦：参照ＢＩＯ —ＲＡＤ公司操作指南进行，电泳上样总体积约４５０ ｔｒＬ （约ｌ ５００ ＩＬｇ总蛋白），一向条件为：５０ Ｖ低压水化 １６ ｈ，然后进行等电聚焦，总电压时间为６０ ０００ Ｖｉａ。 （２）平衡：等电聚焦后，迅速取出ＩＰＧ胶条分别于第一 步和第二步平衡液中振摇１５ ｍｉｎ，用滤纸条吸取多余 的平衡液。（３）ＳＤＳ—ＰＡＧＥ垂直电泳：将平衡后的 ＩＰＧ胶条移至１２％的凝胶上端，起始电压为１００ Ｖ，待 样品进入ＳＤＳ胶浓缩成一条线，０．５ ｈ后加大电压到 ２００ Ｖ。直至溴酚蓝到达凝胶底边处停止电泳。 １．２．３考马斯亮蓝染色凝胶固定液（４０％乙醇，１０％ 乙酸）固定３０ ｍｉｎ后，双蒸水冲洗５ ｍｉｎ ３次，考马斯亮 蓝Ｇ２５０染液（０．１２％考马斯亮蓝Ｇ２５０，１０％硫酸铵， １０％磷酸，２０％甲醇）染色过夜，脱色液（４０％甲醇，１０％ 乙酸，双蒸水至１００％）进行褪色直至背景清晰。 １．２．４ 图像分析利用ＧＳ一８００ Ｃａｌｉｂｒａｔｅｄ Ｄｅｎｓｉｔｏｍ－
本实验室在蛋白质组学方面有着独特优势，靳胜 等№１利用２Ｄ—ＰＡＧＥ结合ＭＡＬＤＩ—ＴＯＦ技术研究分 析膀胱癌组织与正常组织之间的固定差异表达蛋白 质，赵旭宏等一。对前列腺增生的尿液蛋白质学进行了 研究，建立了成熟而稳定的技术平台，在此平台的基础 上本实验选择了正常人的尿液为研究对象，初步建立 正常人尿蛋白图谱，多点全方位同时分析正常尿蛋白 基本组成，为疾病的比较做正常参照体系，利于与不同 疾病状态下的尿蛋白图谱进行鉴定、分析。
带信息的最有效方法，为建立适合常规检验人群尿样
处理的尿液蛋白质双向电泳图谱，选择重复性好、独立
清晰的蛋白质位点进行质谱鉴定，多点全方位同时分
析正常尿蛋白基本组成，为疾病的比较做正常参照体
系，我们挑选了一定蛋白含量、一定清晰度、适合目前
检验方法最小检测限之上的３０个点进行分析，为分析
泌尿系统疾病的尿液差异性改变提供对比资料。
甲状腺紊结合蛋白 甘露聚糖结合凝集素丝氨酸蛋白酶２亚型
１５ ８７７ ２０ ６１５．９
载脂蛋白Ａｌ 尚有争议的不具白蛋白特征的假定白蛋白 白蛋白２３ ｋＤａ片段 血清转铁蛋白
３０ ７５８ ７１ ６５７ ２２ ８４４ ７６ ９９９
间一ａ一胰蛋白酶抑制剂重链１－１４（ＩＴＩＨ４）
１０３ ８１６．２２２问一ａ一胰蛋白酶抑制剂重链１－１４亚型２
２２ ８４４ ３２ ０９７ ６９ ３２１．５ ６９ ３２１．５
白蛋白４５ １３０．４
ｅＤＮＡ ＦＬｌ５０８３０，ＡＭＢＰ高度相似蛋白
５９ ５３５．Ｉ
血清白蛋白亚型１
６９ ３２１．５
人补体片段４ｂ
１９２ ６２７．５
ｅＤＮＡ ＦＬＪ５０８３０，高度类似白蛋白 自蛋白２３ ｋＤａ片段
５９ ５３５．１ ２２ ８４４
·
１材料与方法
１．１材料 １．１．１标本来源 收集我院２００９年３月体检中心４ 例正常人的清洁中段尿，男女各２例，平均年龄为３５．５ 岁，均为体检健康的志愿者。 １．１．２ 实验试剂 二硫苏糖醇（ＤＴＴ）、碘乙酰胺 （ＩＸａ）和考马斯亮蓝购自于美国Ｓｉｇｍａ公司；固相ＰＨ 梯度干胶条（ＩＰＧ，Ｓｔｒｉｐ３—１０，１７ ｃｍ）、两性电解质 （Ｐｈａｒｍａｌｙｔｅ，ＰＨ３—１０）、覆盖液、低分子量标准蛋白 质、尿素、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、ＳＤＳ、Ｔｒｉｓ —ＨＣＬ和ＣＨＡＰＳ购自于美国ＢＩＯ—ＢＡＤ公司；其余试 剂均为国产分析纯。
裹１正常３０个尿液蛋白匹配结果
编号
Ｏｌ ０２ ０３ ０４ ０５
嘶 ０７ ０８ ∞ ｌＯ
１１ １２ １３ １４ １５ １６ １７ １９ ２ｌ
搜索匹配结果 ｅＤＮＡ ＦＬＪ５１４４５，ＡＭＢＰ高度相似蛋白 ＡＭＢＰ蛋白（人口ｌ微球蛋白／ｂｉｋｕｎｉｎ前体）
分子鼍 ２９ ７５９．４ ３８ ９７４
白蛋白２３ ｋＤａ片段 ＩＧＫＣ蛋白（免疫球蛋白Ｋ恒定区） 血清白蛋白噩型ｌ 血清白蛋白亚型ｌ
２４
ＩＧＨＶ４—３１抗ＲｈＤ单克隆Ｔ１２５ １重链前体
５２ ３２９．３
２５
肌动蛋白Ａ２（主动脉平滑肌）４１ ９８１．８
２６
血清转铁蛋白
７６ ９９９．６
２７
ｅＤＮＡ ＦＵ５０８３０，高度类似血清白蛋白
５９ ５３５．１
２８
ＳＥＲＰＩＮＡＩ ＰＲ０２２７５
１３ ０８８．９
２９
载脂蛋白＾一Ｉ
３０ ７５８．９
１２ ：旦璺垒兰堂２１：！：壹鏖耋型查塑皂垩自
主竺！堑
８．６４ ５．２３ ６．８１ ６．８８ ８．９３ ５．５６
曼：！！
抗ＲｈＤ单克隆Ｔ１２５＿ｒ重链前体 肌动蛋白Ａ２ 血清转铁蛋白 未命名蛋白产物 ＰＲ０２２７５
载脂蛋白Ａ—Ｉ
查鱼鱼堡鱼主丝
３讨论 自从提出“尿蛋白组学”（ｕｒｉｎａｒｙ ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ）概念
【关键词】 双向凝胶电泳；尿液；蛋白质组；肽指纹图谱
尿液是血液经肾小球滤过、肾小管和集合管重吸 收、排泄及分泌产生的终末代谢产物，其组成、数量与 性状的变化携带有泌尿系统疾病发生、发展及预后的 各种信息，也可反映机体整体代谢状态，与血清等其他 体液样本相比，其获取无创、收集便利，并且蛋白组成 相对简单、易于分析。蛋白质组学则是诠释蛋白所携
以来，利用蛋白质组学技术对尿液蛋白质进行高通量、 系统性地分析和鉴定得到快速发展，并用于解释生理
万方数据
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广东医学２０１０年２月第３１卷第３期
ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｆｅｂ．２０１０，Ｖ０１．３１，Ｎｏ．３
学代谢、毒理及许多疾病的进程，尤其泌尿系统疾病中 蛋白质的改变可直接经尿道分泌到尿液中，因此研究 尿液中蛋白质改变可以帮助理解疾病发病机制、寻找 早期诊断的生物学标记。尽管尿液的成分非常复杂， 但由于尿液易获取无创伤，国内外学者目前热衷于对 生理和疾病状态下的尿液进行蛋白质组学分析，获得 了正常尿液标准蛋白图谱¨以１、并研究疾病状态下尿 蛋白的变化ｐ。１。
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尿液蛋白图谱上蛋白重复性好、表达清晰、界限较明显 的蛋白斑点，送中国科学院生物物理研究所基质辅助 激光解吸电离飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ—ＴＯＦ）进行肽指 纹图谱鉴定。 １．２．６蛋白质序列数据库检索将质谱结果放人互 联网上用ＭＡＳＣＯＴ软件在相关数据库进行肽指纹图谱 检索分析，网址为：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｍａｔｒｉｘｓｃｉｅｎｃｅ．ｃｏｗ．／，其 参数设定如下：Ｄａｔａｂａｓｅ：ＭＳＤＢ；Ｅｎｚｙｍｅ：ｔｒｙｐｓｉｎ；Ｐｅｐｔｉｄｅ