质量检验方法验证管理规定

质量检验方法验证管理规定

建立一个对新开发的检验方法、药典或客户提供的检验方法（检验方法仅限于GC、HPLC），需进行的可行性及适用性的验证的规范程序，确保新开发的检验方法、转移应用的检验方法有效实施。

1. 范围

适用于对开发和新建立的分析方法、药典方法及客户提供的方法转移应用进行验证。

2.引用标准

根据ICH的GMP指南要求、«中国药典»2010版及中国制药企业GMP指南要求而制定。

3．管理职能

3.1质量检验中心负责本标准的制定与修订。

3.2质量检验中心负责检验方法验证方案、计划模板的制、修订。

3.3各单位负责本部门的验证方案、计划的制作审核并质量检验中心批准。

3.4各单位负责本部门检验方法验证工作的实施。

3.5各单位负责当工艺等发生重大变化时所需进行的检验方法的再验证。

4管理内容

4．1新开发的GC或HPLC方法验证

4.1.1 选择性（或专属性）

选择适当的仪器、试剂（包括仪器型号、GC或HPLC色谱柱，流动相配比等）使原料药生产工艺中可能存在的杂质（包括原料，中间体，前体及降解产物）与成品较好地分开，并确保主成份峰中没有其他干扰物质峰存在，必要时可采用二极管阵列检测器或质谱对组分的单一性进行评价和确认。

4.1.2精密度

4.1.2.1 系统精密度

通过对单个测定值与平均值之间的偏差程度来衡量系统的误差。

对同一均匀的样品溶液或标准品溶液，连续重复进样六次，记录每次进样后各组分的响应，峰面积或峰高，计算各响应值与平均值之间的偏差——相对标准偏差RSD。

4.1.2.2 方法精密度

通过测定样品含量与真值（平均值）的偏差程度来衡量样品制备过程（包括称量，稀释）中的误差。

分别对同一批号的样品称量六次，按含量测定方法测定其含量，计算每一单一含量与平均含量之间的相对标准偏差RSD，除另有规定外通常RSD 2.0%。

4.1.2.3 中间精密度

4.1.2.3.1按验证确定的方法，同一人用同一仪器检测三批样品，每间隔24小时以上，测定一次，共测定3次。

4.1.2.3.2由两人使用不同的仪器分别检测同三批样品。

4.1.3 方法的线性范围

4.1.3.1 在含量测定浓度的80～120%选择五个不同的浓度点，每一个浓度需测定二次，记录各对应浓度下的相应响应值（峰高，峰面积或峰面积的比值），以衡量样品量与检测器响应间的线性对应关系。

4.1.3.2 接受标准：相关系数r＝0.99－1.00

4.1.3.3 在HPLC法有关物质测定时，测定浓度从总杂质120%至LOQ浓度选取五个点，每个浓度点测定二次。

GC法残留溶剂测定时，测定浓度从残留溶剂限度的120%至LOQ浓度选取五个点，每个浓度点测定二次。

4.1.4 方法的准确度

衡量该方法的实测结果与真实值的吻合程度，即方法的回收率。

4.1.4.1取已知浓度的样品（浓度范围为含量测定浓度的80%、100%、120%）各三份，每份进样测定三次，计算该方法的百分回收率。

4.1.4.2用HPLC法进行有关物质测定准确度试验，取杂质的LOQ、50%、100%、120%浓度四个点（也可根据产品质量情况选择其他点），每个浓度点测定三次。计算百分回收率。

4.1.4.3 GC法残留溶剂准确度试验，取残留溶剂限度的LOQ、50%、100%、120%四个浓度点（也可根据产品质量情况选择其他点）溶液，若样品测定浓度值低于限度值的10%时，应增加测定限度的10%的浓度点溶液。加入样品中，每个浓度点测定三次，计算扣除样品浓度后的百分回收率。

4.1.5 最小检测限

4.1.

5.1 仪器能检测到样品中各组分的最低检测浓度，不需定量。

4.1.

5.2 操作

在仪器系统性实验符合检测要求的条件下，测定三次空白样品，洗脱时间需用覆盖整个样品中所有组分的流出。计算平均噪声水平。根据产品检验规程规定的检测浓度配制梯度浓度，单针进样。当信噪比为3.0±1.0，确定该浓度为待确定的最小检测限。将该浓度溶液重复进样三次，若三次所得图谱的信噪比均为3.0±1.0，则确定该浓度为最小检测限。

4.1.6 最小定量限

4.1.6.1能够重复的、准确的测量峰面积（相当于供分析物）的进样量。峰高等于噪声高的10.0±1.0。

4.1.6.2 操作：按检测限方法测定仪器的平均噪声，按最小检测限操作方法操作，将按信噪比为10.0±1.0的浓度定为最小定量限。

4.1.7 方法耐用性（仅在新开发的方法的第一次验证时进行）

HPLC法，方法耐用性要求进行改变流动相比例和流动相PH值的测试，主要考察原料药生产工艺中可能存在的杂质（包括原料中间体、前体及降解产物）与成品主峰的分离度达到要求，并确保成品主峰中没有干扰峰存在，同时观察杂质峰的出峰顺序是否发生变化。

GC法，方法耐用性要求进行改变柱温和载气流速测试，主要考察所有残留溶剂峰之间的分离度是否仍达到标准要求。

4.1.8溶液稳定性

HPLC法，将配制好的溶液每隔半小时进样一次，连续进样5次（即放置两小时），比较含量和有关物质的变化。

4.2 药典、客户提供的检验方法的转移应用确认

4.2.1 方法选择性

选择适当的仪器、试剂（包括仪器型号、GC或HPLC色谱柱，流动相配比等）使原料药生产工艺中可能存在的杂质（包括原料，中间体，前体及降解产物）与成品较好地分开，并确保成品峰中没有其他干扰物质峰存在，必要时可采用二极管阵列检测器或质谱对组分的单一性进行评价和确认。

4.2.2 系统适应性

按药典方法及客户方法规定操作。

4.2.3系统精密度、中间精密度、最小检测限、最小定量限、耐用性、溶液稳定性六项分别按4.1.2.1、4.1.2.3、4.1.5、4.1.6、4.1.7及4.1.8操作。

4.3 中间体分析（面积归一化法）的方法验证

4.3.1 选择性

选择适当的仪器、试剂（包括仪器型号、GC或HPLC色谱柱，流动相配比等）使原料药生产工艺中可能存在的杂质（包括原料，中间体，前体及降解产物）与成品较好地分开，并确保成品峰中没有其他干扰物质峰存在，必要时可采用二极管阵列检测器或质谱对组分的单一性进行评价和确认。

4.3.2 系统精密度

通过对单个测定值与平均值之间的偏差程度来衡量系统的误差。

对同一均匀的样品溶液连续重复进样六次，记录每次进样后各组分的响应，峰面积或峰高，计算各响应值与平均值之间的偏差——相对标准偏差RSD。

4.3.3 最小检测限

在仪器系统性实验符合检测要求的条件下，测定三次空白样品，洗脱时间需用覆盖整个样品中所有组分的流出。计算平均噪声水平。根据产品检验规程规定的检测浓度配制梯度浓度，单针进样。当信噪比为3.0±1.0，确定该浓度为待确定的最小检测限。将该浓度溶液重复进样三次，若三次所得图谱的信噪比均为3.0±1.0，则确定该浓度为最小检测限。

4.3.4 最小定量限

按检测限测定方法测定仪器平均噪音，然后按信噪比等于10.0±1.0配制中间体前一步主原料的样品溶液。连续进样三次，计算组分的最小定量限。

4.3.5 准确度

取常规检测浓度的150%、50%，检测所得含量，应与100%浓度所测含量SD≤2.0%。4.3.6溶液稳定性

HPLC法，将配制好的溶液每隔1进样一次，连续进样5次（即放置5小时），比较含量和有关物质的变化。

4.4不同的检验项目在进行分析方法验证或分析方法确认时须进行的验证或确认内容参考下表：

性能参数

鉴别含量有关物质（定量）有关物质（限度）验证确认验证确认验证确认验证确认

准确度No No Yes No Yes 可能No No