现代免疫分析方法最新进展
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势 。现 代 免 疫 分 析 方 法 最 早 的 形 式 就 是 放 射 免 疫 分 析 法 （ Ｉ ，９ ９年 由 Ｂ ｒ ｎ和 Ｙ ｌ ｗ 等 人 首 次 使 Ｒ Ａ） １５ ｅｓ ｏ ａｏ ｌ 用 ‘ 。这 种 传 统 的 分 析 方 法 特 异 性 强 ， 敏 度 高 ， 灵 抗
有效 降低采 样偏 差 ， 量更高 ， 通 检测 下限浓度 低 ， 敏 灵
度高， 可进 行痕量 检测 ， 有效提 高筛选 质量 ， 从而减 少
昂贵分析 样 品的用量 ， 极大地 降低 了分析成 本 。
多 元 免 疫 分 析 方 法 发 展 至 今 已 有 免 疫 聚 合 酶 链 反 应 技 术 、 白质 微 阵 列 芯 片 技 术 、 式 细 胞 术 以 及 蛋 流
重复性 较差 等 。流 式 细胞 术 是 发展术 ， 其 检测 所需 的 没备 和试 剂 盒 昂贵 ， 但
导致分 析测 试成本 较高 。 而量子 点技术 是最 近应 用 于免疫 分 析 中 的。量
辨荧 光免疫 分 析等 等 。尽 管 这些 分 析 方法 通 过 不 断
医 研 杂 ２１年１月 学 究 志 ０ ０ Ｏ 第３卷 第１期 ９ ０
・ 述 与遢 展 ・ 综
现 代 免 疫 分 析 方 法 最 新 进 展
劳 海 苗 吴 英 松 刘 天 才
现代 免疫分 析技 术 是 免 疫分 析 技 术在 现 代 生 物
医 学 领 域 一 个 重 要 的 研 究 课 题 。 本 文 重 点 介 绍 现 代 免 疫 分 析 技 术 方 法 的 最 新 进 展 情 况 ， 测 了 其 发 展 趋 预 势 为 基 于 量 子 点 技 术 的 一 种 新 型 多 元 均 相 时 间 分 辨
量 子点技 术等 等 。免疫 聚 合 酶链 反 应技 术 这种 基 因 扩增技术 因其 简单 易 行 ， 应用 现 已极 为广 泛 ， 其 受 但 到影响 的因素很 多 ， 核酸纯 化过程 中 出现 的扩增 反 如
应 抑 制 物 、 增 仪 孔 问 温 度 的 差 异 以 及 核 酸 提 取 中 的 扩 随机误差 均可导 致 假 阴性 的出 现 ； 如 ， 酸 提取 中 又 核
改进 日趋成 熟 ， 是 ， 们依 然 存 在检 测 样 品下 限浓 但 它 度 不够低 ， 灵敏度 不 高 ， 难定 性 定量 地 一 次性 检 测 很
同一 个 分 析 体 系 中 产 生 的 不 同 检 测 信 号 ， 且 微 量 而
化、 自动化 、 通量 化 程度 都 不高 等缺 点 。克 服传 统 高
免疫 分 析方 法 的不 足 ， 发 更 加快 捷 、 效 、 敏 、 研 高 灵 可
荧光 免疫分 析方 法 ， 今后实 现快 速便捷 、 为 高灵 敏 度 、 微 量化及 高通量 化 的 现代 免 疫分 析 技 术 提供 科 学 依
据 ， 有 十分广 阔的发 展前景 。 具
一
靠 、 全 的多元免 疫分析 方法 已经成 为现代 免疫技 术 安
标本 问的交 叉污染 ， 以及前 扩增产 物的污染 等也 易导
致 假 阳性 结 果 。 诸 多 影 响 因 素 给 检 验 结 果 带 来 许 多
不确定性 ， 因此该分 析方法 对实验 室环境要 求极 为严
格 ， 宜 普 及 化 。 蛋 白 质 微 阵 列 芯 片 技 术 具 有 高 通 不 量 、 型化 、 微 自动 化 和 成 本 低 等 特 点 ， 于 一 种 固 相 免 属
特性 的优 势 ： 一 次 性 对 多个 待 分析 物 进 行检 测 ， 可 能
疫 分析技 术从传 统走 到现代 ， 从放 射免 疫分析 法发 展 到均相 时间分 辨荧光 免疫分 析方 法 的出现 ， 是科学 研
究 不断 深入 的 结 果 ， 免 疫 分 析 技 术 发 展 的 必 然 趋 是
体抗原 易用碘 放射性 核素 标记 ， 应用广 泛 。但 其 最大
的缺憾 是带来 的放射 性污 染难 以处理 ， 操作人 员 的健
康受 到威胁 ， 这大 大 限制 了试 剂 的使 用 寿命 ， 为放 因 射性核 素的衰 减周期 等 因素 ， 以获得 长期 稳定 的标 难 准线 ， 致较 高 的操 作 成 本 。即使 有 所改 善 ， 实现 导 并 了商业 化 ， 仍然 难 以克 服 检 测 昂贵 的检测 成 本 ， 但 仍 无法 实现理想 的长 时间 连续 自动化分 析 ， 以消 除非 难
基 金项 目 ： 家 自然科 学 基 金 资 助 项 目（０ ９， ０ ０ ３ ２ ； 等 学 国 ２０ ３９ １８ ） 高 校 搏 士 学 科点 专 项 科 研 基 金新 教 师基 金课 题 ； 东 省 高 校 人 才 引 进 专 广
疫分析方 法 ， 在 冲洗 未反 应的游离 标志物 等分离 步 存 骤， 生产 和检测 过程 人为干 扰 因素 多 、 以标准 化 ， 难 生
化 反 应 条 件 和 过 程 不 可 控 、 应 效 率 较 低 ， 测 结 果 反 检
月异 ： 酶联免 疫分 析 、 物发光 分析 、 生 电化学 发光 免疫 分析 、 化学发 光免疫 分 析 、 荧光 偏振免 疫分 析 、 间分 时
发展 的必然 趋势 。 二 、 元 免 疫 分 析 方 法 多
、
现 代 免 疫 分 析 方 法 的 研 究 进 展
免 疫 分 析 技 术 已 广 泛 应 用 于 临 床 分 析 检 测 ， 现 是 代 生 物 医 学 领 域 一 个 重 要 的研 究 课 题 。 时 至 今 日 ， 免
多元 免 疫 分析 方 法拥有 较 传统 免 疫分 析更 具 独
特异性 干扰信 号等 等缺点 。因此 ， 该技 术 的发展 还存
在 困难 ， 致 现 代 免 疫 分 析 减 少 采 用 放 射 性 核 素标 导 记 ， 结果就 是 ， 放 射 性 免疫 分 析 方法 在 分 析 检验 其 非
领 域 逐 渐 得 到 普 及 。 近 半 世 纪 以来 ， 种 非 放 射 性 免 疫 分 析 技 术 日新 多
有效 降低采 样偏 差 ， 量更高 ， 通 检测 下限浓度 低 ， 敏 灵
度高， 可进 行痕量 检测 ， 有效提 高筛选 质量 ， 从而减 少
昂贵分析 样 品的用量 ， 极大地 降低 了分析成 本 。
多 元 免 疫 分 析 方 法 发 展 至 今 已 有 免 疫 聚 合 酶 链 反 应 技 术 、 白质 微 阵 列 芯 片 技 术 、 式 细 胞 术 以 及 蛋 流
重复性 较差 等 。流 式 细胞 术 是 发展术 ， 其 检测 所需 的 没备 和试 剂 盒 昂贵 ， 但
导致分 析测 试成本 较高 。 而量子 点技术 是最 近应 用 于免疫 分 析 中 的。量
辨荧 光免疫 分 析等 等 。尽 管 这些 分 析 方法 通 过 不 断
医 研 杂 ２１年１月 学 究 志 ０ ０ Ｏ 第３卷 第１期 ９ ０
・ 述 与遢 展 ・ 综
现 代 免 疫 分 析 方 法 最 新 进 展
劳 海 苗 吴 英 松 刘 天 才
现代 免疫分 析技 术 是 免 疫分 析 技 术在 现 代 生 物
医 学 领 域 一 个 重 要 的 研 究 课 题 。 本 文 重 点 介 绍 现 代 免 疫 分 析 技 术 方 法 的 最 新 进 展 情 况 ， 测 了 其 发 展 趋 预 势 为 基 于 量 子 点 技 术 的 一 种 新 型 多 元 均 相 时 间 分 辨
量 子点技 术等 等 。免疫 聚 合 酶链 反 应技 术 这种 基 因 扩增技术 因其 简单 易 行 ， 应用 现 已极 为广 泛 ， 其 受 但 到影响 的因素很 多 ， 核酸纯 化过程 中 出现 的扩增 反 如
应 抑 制 物 、 增 仪 孔 问 温 度 的 差 异 以 及 核 酸 提 取 中 的 扩 随机误差 均可导 致 假 阴性 的出 现 ； 如 ， 酸 提取 中 又 核
改进 日趋成 熟 ， 是 ， 们依 然 存 在检 测 样 品下 限浓 但 它 度 不够低 ， 灵敏度 不 高 ， 难定 性 定量 地 一 次性 检 测 很
同一 个 分 析 体 系 中 产 生 的 不 同 检 测 信 号 ， 且 微 量 而
化、 自动化 、 通量 化 程度 都 不高 等缺 点 。克 服传 统 高
免疫 分 析方 法 的不 足 ， 发 更 加快 捷 、 效 、 敏 、 研 高 灵 可
荧光 免疫分 析方 法 ， 今后实 现快 速便捷 、 为 高灵 敏 度 、 微 量化及 高通量 化 的 现代 免 疫分 析 技 术 提供 科 学 依
据 ， 有 十分广 阔的发 展前景 。 具
一
靠 、 全 的多元免 疫分析 方法 已经成 为现代 免疫技 术 安
标本 问的交 叉污染 ， 以及前 扩增产 物的污染 等也 易导
致 假 阳性 结 果 。 诸 多 影 响 因 素 给 检 验 结 果 带 来 许 多
不确定性 ， 因此该分 析方法 对实验 室环境要 求极 为严
格 ， 宜 普 及 化 。 蛋 白 质 微 阵 列 芯 片 技 术 具 有 高 通 不 量 、 型化 、 微 自动 化 和 成 本 低 等 特 点 ， 于 一 种 固 相 免 属
特性 的优 势 ： 一 次 性 对 多个 待 分析 物 进 行检 测 ， 可 能
疫 分析技 术从传 统走 到现代 ， 从放 射免 疫分析 法发 展 到均相 时间分 辨荧光 免疫分 析方 法 的出现 ， 是科学 研
究 不断 深入 的 结 果 ， 免 疫 分 析 技 术 发 展 的 必 然 趋 是
体抗原 易用碘 放射性 核素 标记 ， 应用广 泛 。但 其 最大
的缺憾 是带来 的放射 性污 染难 以处理 ， 操作人 员 的健
康受 到威胁 ， 这大 大 限制 了试 剂 的使 用 寿命 ， 为放 因 射性核 素的衰 减周期 等 因素 ， 以获得 长期 稳定 的标 难 准线 ， 致较 高 的操 作 成 本 。即使 有 所改 善 ， 实现 导 并 了商业 化 ， 仍然 难 以克 服 检 测 昂贵 的检测 成 本 ， 但 仍 无法 实现理想 的长 时间 连续 自动化分 析 ， 以消 除非 难
基 金项 目 ： 家 自然科 学 基 金 资 助 项 目（０ ９， ０ ０ ３ ２ ； 等 学 国 ２０ ３９ １８ ） 高 校 搏 士 学 科点 专 项 科 研 基 金新 教 师基 金课 题 ； 东 省 高 校 人 才 引 进 专 广
疫分析方 法 ， 在 冲洗 未反 应的游离 标志物 等分离 步 存 骤， 生产 和检测 过程 人为干 扰 因素 多 、 以标准 化 ， 难 生
化 反 应 条 件 和 过 程 不 可 控 、 应 效 率 较 低 ， 测 结 果 反 检
月异 ： 酶联免 疫分 析 、 物发光 分析 、 生 电化学 发光 免疫 分析 、 化学发 光免疫 分 析 、 荧光 偏振免 疫分 析 、 间分 时
发展 的必然 趋势 。 二 、 元 免 疫 分 析 方 法 多
、
现 代 免 疫 分 析 方 法 的 研 究 进 展
免 疫 分 析 技 术 已 广 泛 应 用 于 临 床 分 析 检 测 ， 现 是 代 生 物 医 学 领 域 一 个 重 要 的研 究 课 题 。 时 至 今 日 ， 免
多元 免 疫 分析 方 法拥有 较 传统 免 疫分 析更 具 独
特异性 干扰信 号等 等缺点 。因此 ， 该技 术 的发展 还存
在 困难 ， 致 现 代 免 疫 分 析 减 少 采 用 放 射 性 核 素标 导 记 ， 结果就 是 ， 放 射 性 免疫 分 析 方法 在 分 析 检验 其 非
领 域 逐 渐 得 到 普 及 。 近 半 世 纪 以来 ， 种 非 放 射 性 免 疫 分 析 技 术 日新 多