EmCD CHO 瞬转培养基使用说明书
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细胞已经适应了 EmCD CHO®瞬转培源自文库基。
⚫ 瞬转过程 1. 在瞬转开始前,细胞应完全适应 EmCD CHO®瞬转培养基,CHO 细胞生长状态正常,传代倍增时
间稳定(一般 20-24hr),细胞活率维持 95%以上,方可进行瞬时转染测试。 2. 按照原瞬转操作程序进行操作,转染过程无需更换培养基,转染前 24 小时进行传代培养。 3. 在转染之后整个培养过程中,应密切注意细胞活率和活细胞密度,注意葡萄糖含量应不低于 2g/L,
直接适应
1. 以高于常用接种密度将 CHO 细胞接种到 100% EmCD CHO®瞬转培养基中。例如,常用接种密度 为 0.3 x 106 个/mL,则以 0.5 x 106 个/mL 的密度接种到 EmCD CHO®瞬转培养基中。
2. 每 3 - 4 天传代一次,或根据需要以更高的接种密度传代,直到细胞达到要求的生长状态。 3. 一旦达到理想的细胞生长状态,接种密度应该降低到常用水平。在这一阶段,我们认为细胞已经适
EmCD CHO®瞬转培养基使用说明书 LN20100
产品简介 EmCD CHO®瞬转培养基是化学成分限定的培养基,不含血清、血清替代物、蛋白及任何动物来源组分, 保证细胞培养过程的安全性和稳定性;培养基中不含酚红和谷氨酰胺。
产品货号 LN20100.1000 LN20100.0500
包装规格 1000ml 500ml
应了 EmCD CHO®瞬转培养基。
驯化适应 1. 使用正常接种密度将细胞接种到原始培养基和 EmCD CHO®瞬转培养基的混合物中,通常的初始比
例为 50:50;细胞接种密度 0.3 x 106 个/mL。 2. 需要每 3 - 4 天或当细胞密度达到 2.0-3.0 x 106 个/mL 时传代一次,在以上过程中,细胞活率必须
储存条件 2-8℃,避光保存 2-8℃,避光保存
有效期 12 个月 12 个月
产品指标 检测项目
性 状(Appearance) 溶解性(Solubility) pH(添加碳酸氢钠)
渗透压(Osmolality,mOsm/kg) 细菌内毒素(Endotoxin,EU/ml)
使用方法
标准限度 橘色液体
澄清 7.00-7.60 270~300
如果葡萄糖含量低于 2g/L,补加至 4g/L。 4. 根据需求可以在转染后 24 小时通过添加补料的方式进行高密度高产量表达。 5. 当细胞活率低于 80%,培养结束收获培养上清纯化目标产物。
⚫ 注意事项 请根据不同细胞的培养条件,按要求加入合适的细胞培养特异补充物。如果 EmCD CHO®瞬转培养基出 现沉淀,请停止使用。请在标签注明保质期前使用。
≤1
⚫ 用途
EmCD CHO®瞬转培养基主要用于 CHO 细胞瞬时转染表达,转染后高密度高活率生长和表达目标蛋白, 可快速获得 mg 甚至 g 级抗体或重组蛋白。该培养基可提供 GMP 级别和非 GMP 级别的产品,其中非 GMP 级别的产品仅限于在研发和评估过程中使用。
⚫ 推荐测试过程
大多数 CHO 细胞可以直接从无血清或无动物成分培养基适应到 EmCD CHO®瞬转培养基。如果有需要, CHO 细胞也可以用驯化的方法使其适应于在 EmCD CHO®瞬转培养基生长。在开始适应过程前,细胞 活率必须高于 90%,并且细胞必须处于对数生长中期。 EmCD CHO®瞬转培养基不含 L-谷氨酰胺,使用前请添加 6mM L-谷氨酰胺。
保持≥90%。 3. 逐步根据提高 EmCD CHO®瞬转培养基在原始培养基中的比例(从 75:25 到 90:10),直到将原始
培养基完全替换成 EmCD CHO®瞬转培养基。在这一过程中,细胞活率应保持≥90%。 4. 当细胞在 100% EmCD CHO®瞬转培养基中生长达到理想状态时(倍增时间为 24 小时),我们认为