木聚糖酶固体发酵条件的试验
金针菇产木聚糖酶固态发酵条件优化和酶学性质研究
金针菇产木聚糖酶固态发酵条件优化和酶学性质研究
吴萍;李正鹏
【期刊名称】《华中师范大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2010(044)003
【摘要】以豆秸粉为主要原料,通过单因素和正交试验确定金针菇(Flammulina velutipes)固态发酵生产木聚糖酶最佳培养条件,并对其粗酶的酶学性质进行了研究.结果表明,碳源为豆秸粉∶玉米芯∶麸皮=7∶2∶1,氮源为1.5%的黄豆粉,pH为5,接种量为干料的20%,装瓶量为6 g/100 mL 三角瓶装,料水比为1∶2.1,培养天数5 d,在此培养条件下得到的酶活力最高,产量可达52 768.91 U/g.粗酶液的最适反应温度为60℃,最适反应pH为6.酶的pH稳定性及热稳定性较好,80℃时相对酶活力仍保持在40.41%.
【总页数】6页(P472-477)
【作者】吴萍;李正鹏
【作者单位】安徽科技学院,生命科学学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院,生命科学学院,安徽,凤阳,233100
【正文语种】中文
【中图分类】Q819
【相关文献】
1.金针菇菌糠中木聚糖酶的分离纯化及其酶学性质研究 [J], 杨云龙;黄彩梅;白植成;胡开辉
2.杏鲍菇产木聚糖酶液态发酵条件优化及酶学性质研究 [J], 吴萍;何庆元
3.一株霉菌产木聚糖酶固态发酵培养基的优化及酶学性质研究 [J], 吴萍;李正鹏;侯玮玮
4.高产芽孢杆菌MS12木聚糖酶发酵条件优化及酶学性质研究 [J], 马焕;张永战;王一雯;权淑静;解复红
5.杏鲍菇产木聚糖酶固态发酵条件优化及其酶学性质 [J], 吴萍;史钧;李正鹏;祝嫦巍
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黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的研究
黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的研究作者：王娟王菲高娜刘东波来源：《农业与技术》2012年第08期摘要：本文对一株黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的条件进行初步优化，优化因子分别为：Mandel盐、氮源、含水量、培养温度、培养时间、初始pH值，接种量。
利用单因素实验，以木聚糖酶的酶活力为评价指标，测得该菌株产木聚糖酶的最佳培养条件。
在此最佳培养条件下培养，酶活力比优化前提升倍。
关键词：玉米芯；黑曲霉；木聚糖酶；固体发酵；条件优化中图分类号：TQ925文献标识码：A中国年产约3000万吨的玉米芯，然而作为富含纤维素、半纤维素的农业废弃物，除了少量用于生产木糖醇、糠醛等外，绝大部分在田间放火焚烧，既浪费资源又污染环境。
木聚糖是植物半纤维素的最主要成份，其水解产物可应用于饲料、造纸及工业原料生产等多个领域。
因此，寻找高产木聚糖酶系的菌株并深入研究提高菌体产酶活性的方法势在必行。
本文以微生物教研室保存的一株黑曲霉为出发菌株，以玉米芯为主要原料，进行该菌株固体发酵产木聚糖酶的条件优化研究，旨在提高玉米芯的利用率的同时为黑曲霉产木聚糖酶的大规模工业化生产和应用提供参考。
1材料和方法材料菌株黑曲霉菌株（Aspergillus niger），东北师范大学生科院微生物教研室保存；固态基础发酵培养基：麸皮1g，玉米芯9g，含水量15ml，pH值自然。
木聚糖酶酶活定义及酶活力测定方法木聚糖酶酶活力国际单位定义为：标准反应条件下，每分钟生成1umol木糖所需要的酶量（以木聚糖为底物）为1个酶活单位。
酶活检测采用DNS还原糖测定法。
固体发酵粗酶液的制备在培养后的固体发酵物中加入100ml自来水，震荡摇匀，尼龙纱布过滤后，取至离心管中，12000r/min、4℃离心20min除去孢子，10倍稀释后测定酶活。
2结果与分析盐对发酵产酶的影响对照组采用固态基础发酵培养基，实验组在对照组基础上添加Mandel盐溶液（A盐：溶液=10%，B盐：溶液），28℃培养72h，测定并比较酶活力。
芽孢杆菌木聚糖酶固体发酵工艺研究
糖１ 所需酶量定义为 １ 个酶活单位 。
２１ 培养 基质 的选择 ．
Ｋ ２Ｏ ．ｇ、 Ｈ）０ ０ｇ 、 Ｓ ４ Ｈ００ 、 ２ 结果与讨 论 ＨＰ ４ ０ ｌＮ ４ ４． ｌ ３ （ ２ ２ Ｍｇ０・ ２ ． Ｓ ７ ５ Ｎ Ｎ ３ ．ｇ 、ａ １０５ｇ。 ａ Ｏ ０ ／Ｃ Ｃ２ ． ／ ４ ｌ ｌ
％木聚糖溶液（ ｐ Ｈ值 ９０ ５Ｉ １ 的 Ｇｙ Ｎ Ｏ 、． ｏ １ ０ １／ １ ｌ— ａ Ｈ缓冲溶 ＭｇＯ ・ＨＯ０ ／Ｋ ２Ｏ ３ ／、琼 脂 １． ｇ ，Ｈ Ｓ ４７ ２ ． ｇ 、 ＨＰ ． ｇ ２ ｌ ０ ｌ ８ ／ｐ １ ０ ｌ 值为 ６ 液配制１准确计时 １ ｎ 立 即加入 Ｄ Ｓ ． ０ ｍｉ。 Ｎ 试剂 ２ｍ 。将 ｌ
陈雄 ， 湖北工业大学生物工程 学院， ， 博士 副教授 ， ０６ ， ４ ０８ ３
湖北武汉武 昌南湖。
碳 源是 微 生物 生 长过 程 中为 微 生物 提供 碳 素 来
王实玉、 王金 华 ， 单位及通讯地址 同第一作者。
收 稿 日期 ：０ ６ ０ — ４ ２ｏ—９０
源 的物 质 。微 生物 利用碳 素物 质具有 选择性 ． 糖类 是 微生物 容易利 用 的碳源 和能源 物质 ． 微生 物对 不 同 但
１ ＿ 种子 培养基 ．２ ２
３ 支试管放入沸水浴 中反应 １ ｎ ５ ｍｉ 后立 即取 出 ． 流水冷
用蒸馏水定容 至 ５ ｌ于 ５ ０ｎ ０ｍ ， ４ ｍ处测定 吸光度。 酶 蛋 白胨 ５０ｇ 、酵母 膏 ５０ｇ 、半 纤维素 ５ ／ 却 ， ． ／ ｌ ． ／ ｌ ．ｇ、 ０ ｌ 活定义 为 ： 在上述条 件下 。 分钟产 生 ｌ ｏ 还 原糖（ 每 ｌ ｍ 木 Ｍｇ０，Ｈ００２ｇ 、ＨＰ ４ ， ｇ ，Ｈ值为 ６ Ｓ ４７ ２ ． ／Ｋ ２Ｏ ０ ／ｐ ｌ ３ ｌ 。
木聚糖酶高产菌株的筛选及固态发酵条件的研究
Ａ ｓｒ ｃ ： Ｍ Ｉ ａ ｔ ｒ ｍ ｔａｎｏ ｐ ｒ ｉ ｕ ｉ ｅ ｉ ｈ ｗａ ｉ ｈ ｆ ｒｐ ｏ ｕ ｔ ｃ ｘ ｌｎ ｓ ｓｆ ｔａｅ ｒ ｍ ｉ ｔａｎ ．Ｔｈ ｂ ｔａ ｔ Ａ ｃ ｅ ｕ ｓ ｒｉ ｆ ｂ ｉ Ａｓ ｅ ｇｌ ｓｎ ｇ ｒｗｈｃ ｓｈｇ ｏ ｒ ｄ ｃｅｌ ｙａ ａ ｅｗａ ｌ ｔｄ ｆｏ ｓｘ ｓｒ ｉｓ ｌ ｉｒ ｅ
木 聚糖酶（ ｙ ｎｓ， Ｃ ２・１・ ） ｘ ｌ ａｅ Ｅ ３・ ａ ８ 是一 类重 要
了研 究 ， 木聚 糖 酶 的工业 化 生 产及 其应 用 提供 依 为
据。
的木糖苷键水解 酶 ， 对于水解植物材 料 中的半纤维 素 有着重要 的作用 。木聚糖酶可用 于纸浆 的预漂 白 ， 有 效降低含氯化 合 物 的用 量 ， 降低环 境 污染 ， 决 严重 解
活 力 最 高可 达 ３８ ｍｏ ｍｉ １・ － 。 ６９ 卜 ｎ Ｉ ｇ。
关 键 词 ： 聚糖 酶 ； 选 ； 酵 木 筛 发 中图 分类 号 ： ５ Ｑ ５ 文献 标识 码 ： Ａ 文 章编 号 ：０ ８ ｌ １ ２ ０ ）３— ０ ０ ３ １０ —３ １ （ ０ ７ ０ ０ １ 一Ｏ
Ｌ ｉ ｕ ａ ｄＬＩ Ｃｈ ｎ ｅ ＩＨｕ—ｊｎ ｎ Ｕ ａ ｇ
（ ．ｅｏ ｏ ｏ ｐｒｔ ｎｃ ｎｅ ｏ ｘｅｎ ｌＨｅａ ｒｖｃ －Ｈｅ ａ ｈ ｎ ｚｏ －５ ０ １Ｃｈｎ ； １ ｃ ｎ ｍｙｃｏ ｅａｉ ｅ ｔｒｆｒｅ ｔｒａ ｎ ｎ ｐｏ ｉ ｏ ｅ ｎｎ ｚｅ ｇ ｈ ｕ ４ ０ １ ｉａ ２ Ｂｉｌｇ ｅ ａｔ ｎ ｆ ｅ ｇｈ ｕｈ ｓ ａ ｄｙａ ｄｅ ｇ ｅ ｎ ｏｌｇ ．Ｈｅａ ｈ ｎ ｚ ｏ － ５ ０ １Ｃ ｉａ ． ｏｏ ｙ ｄ ｐｒｍｅ ｔｏ ｎ ｚ ｏ ｕｂ ｎ ｒ ｎ ｎ ｅｒ ｇ ｃｌ ｅ Ｚｈ ｉ ｅ ｎ ｎｚ ｅ ｇ ｈ ｕ ４ ０ １ ｈｎ ）
木聚糖酶产生菌固体发酵条件的初步研究
木聚糖酶产生菌固体发酵条件的初步研究
关宏;翟立萍;邹东辉;姜智敏
【期刊名称】《高师理科学刊》
【年(卷),期】2001(021)003
【摘要】木聚糖酶产生菌(Aspergillus niger)1-13菌株以白酒丢糟作为碳源进行固体发酵生产木聚糖酶.采用单因素搜索对其最适产酶的氮源和发酵条件进行优化,结果表明:添加的最适氮源为硫酸铵,最适加入量为1.6%(以白酒糟干质量计);最适产酶发酵条件:温度为30℃,初始含水量为55%,接种量为1 mL菌悬液(浓度为7×107个/mL)接种到10 g固体培养基中.在此优化条件下培养72 h,木聚糖酶活力可达最高为370 IU/g酒糟粉.
【总页数】4页(P53-55,66)
【作者】关宏;翟立萍;邹东辉;姜智敏
【作者单位】齐齐哈尔大学,食工系,黑龙江,齐齐哈尔,161006;齐齐哈尔大学,食工系,黑龙江,齐齐哈尔,161006;齐齐哈尔大学,食工系,黑龙江,齐齐哈尔,161006;齐齐哈尔大学,食工系,黑龙江,齐齐哈尔,161006
【正文语种】中文
【中图分类】Q949.32
【相关文献】
1.康氏木霉固体发酵木聚糖酶条件的研究 [J], 冯波;尹翌;易旭东;林元山
2.木聚糖酶产生菌黑曲霉SP-1液体发酵条件的研究 [J], 李市场;古绍斌;李爱江
3.桔绿木霉产木聚糖酶固体发酵条件研究 [J], 权淑静;张永战;徐文涛;马焕;解复红
4.耐碱性木聚糖酶产生菌的筛选及发酵条件研究 [J], 孙丰慧;李安明
5.木聚糖酶产生菌的选育及发酵条件研究 [J], 李用芳;李学梅;张建新;聂国兴;黄艳琴;赵利霞
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金针菇产木聚糖酶固态发酵条件优化和酶学性质研究
（） １ 斜面 培养 基 （ 富 Ｐ Ａ） 马 铃 薯 ２ Ｏ ｇ 加 Ｄ Ｏ ， 蛋 白胨 １ ， 萄 糖 ２ ， ０ｇ 葡 ０ ｇ ＫＨ２ Ｏ ， Ｓ Ｐ ｌ ｇ Ｍｇ Ｏ
０ ５ｇ ＶＢ ． ， １ ２粒 ， 脂 １ ～ ２ ， １０ ０ｍＩ， Ｈ 琼 ８ ０ｇ 水 ０ ｐ 自然 ， １ １ 下 灭 菌 ２ ｉ． 在 ２℃ ０ｒ ｎ ａ
１ １ ４ 培 养 基 ．．
值ｌ ］此 酶属于 诱导酶 ， ３． 。 主要通 过微 生物发 酵而 生 产 ， 发酵 的 方法 主 要 有 液 体 发 酵 和 固体 发 酵 两 其
种 ． 体 发 酵 一 般 需 要 在 培 养 基 中 加 入 价 格 昂 贵 的 液
木 聚糖 才能 高效产 酶． 固体发酵 则能利 用廉价 的 而 植物纤 维质材料 如秸杆 、 玉米 芯 、 蔗渣 、 麸皮 等作为 碳 源生 产木聚糖酶． 因此 ， 来越受 到科 研工作 者的 越 关 注 ． ］本试验主要利用廉 价的豆秸粉 为诱导物 ， 以 食用真 菌中金 针菇 为菌种对木聚糖酶 的固态发酵条 件及酶学性质 进行研 究 ， 以期为 大豆 秸秆 的再 利用 提供有效途径 ， 也为木 聚糖 酶开发利用提供依据．
秆 置 ６ ℃ 烘 箱 内 烘 干 ， 万 能粉 碎 机 粉 碎 备 用 ． Ｏ 用 １ １ ３ 药 品 及 仪 器 ３ ５二 硝 基 水 杨 酸 （中 国 医 ．． ，一
接 的木 糖 聚合 物 ， 广泛存 在于植 物体 内的一种 半 是 纤维 素 ， 占植 物化 合 物 的 １ ３ 在 自然 界 中是继 它 ／， 纤维素之 后 的含 量第 二的可 再生生 物资源 ＿ ． 聚 】木 ］
下 灭 菌 ２ ｎ Ｏｍｉ．
１ 材 料 和 方 法
一种利用树干毕赤酵母固态发酵生产木聚糖酶的方法
一种利用树干毕赤酵母固态发酵生产木聚糖酶的方法植物纤维素富含木聚糖，这是一种可溶于水的多糖，可以提供糖分和能量给生物体。
而木聚糖酶则可以将木聚糖分解为各种单糖，因此在生物制造、化学和环境领域有着广泛的应用。
本文讨论了一种利用树干毕赤酵母固态发酵生产木聚糖酶的方法。
首先，我们需要了解什么是毕赤酵母。
毕赤酵母，也称“木质素分解真菌”，是一种在自然环境中广泛存在的真菌。
它主要生长在植物表面、土壤和水中，可以分解植物纤维素和木质素。
毕赤酵母通过培养和生长，可以大量生产木聚糖酶。
毕赤酵母固态发酵的方法是种植毕赤酵母菌株在物理或化学反应器内，以自然或添加的固态基质为生长基质进行发酵。
该方法比传统的液体发酵方法更加高效，环保和经济。
目前，毕赤酵母固态发酵已经被证明是一种可行的生产木聚糖酶的方法。
接下来，我们将详细介绍毕赤酵母固态发酵生产木聚糖酶的步骤。
1. 筛选毕赤酵母菌株用一定方法筛选出适合固态酵素生产的毕赤酵母菌株。
在此过程中，考虑到毕赤酵母的生长条件需要有更好的适应性，因此将根据原始环境，筛选生长适应性更强的毕赤酵母菌株。
2. 选取适合的基质调配好相应的培养基，选择适合的固态基质，为毕赤酵母生长和繁殖提供营养，促进木聚糖酶的产生。
同时要确保基质的来源和化学成分、水分、酸碱度都能达到适宜的水平，以保证所生产出的木聚糖酶的纯度和活性。
3. 倒放法在倒放法中，先将经过有效灭菌处理的基质填充到反应器中，然后加入所筛选出的毕赤酵母菌株。
接着，进行表面打平，以保持反应器顶部平整。
4. 发酵条件使反应器维持一定的温度和湿度，具体的温度范围和湿度数值取决于毕赤酵母菌株和所选取的基质类型。
同时，要保证反应器内部通风良好，这可以帮助加速生长和减少气泡的产生以及发酵筛选条件的优化。
5. 收取、组织提取与测定当反应到达一个指定的时间段后，可以进行对所生产出的木聚糖酶的收获。
在此过程中，采取先将基质采获，然后进行适当的干燥以控制其湿度量，并用适量的缓冲液提取酵素，接着才作为酵素来为后续项目的进行提供所需的需要。
木聚糖酶产生菌的筛选、发酵条件和酶纯化的研究的开题报告
木聚糖酶产生菌的筛选、发酵条件和酶纯化的研究的开题报告一、选题背景及意义木聚糖酶是一种可以降解木质素和纤维素等复杂聚合物的酶，广泛用于木浆漂白、造纸、饲料添加剂等方面。
目前已有一些来源于真菌、细菌和微生物的木聚糖酶被应用于工业生产中，然而成本较高、酶活性不稳定等问题仍限制了其进一步开发和应用。
因此，筛选、发酵条件和酶纯化的研究对于开发高效、稳定、低成本的木聚糖酶具有重要意义。
二、论文研究内容本论文将以筛选、发酵条件和酶纯化的研究为主要内容，包括：1、从自然环境中筛选出木聚糖酶产生菌，并通过形态学、生理学、分子生物学等手段对其进行鉴定和分析。
2、优化木聚糖酶产生菌的培养基和发酵条件，包括碳源、氮源、培养温度、pH 值等参数的优化，以提高其酶活性和产酶量。
3、对发酵液进行酶的提取、分离和纯化，包括异丙醇沉淀法、离子交换层析和凝胶过滤层析等技术的应用和比较，以获取高纯度的木聚糖酶。
三、研究方法本研究将主要采用以下方法：1、从自然环境中进行样品采集和预处理，包括土壤、水体、动物消化道等多种来源，采用琼脂平板培养、液体培养等方法筛选出木聚糖酶产生菌。
2、优化木聚糖酶产生菌的培养基和发酵条件，采用单因素试验和正交试验等方法，以提高其酶活性和产酶量。
3、对发酵液进行酶的提取、分离和纯化，包括异丙醇沉淀法、离子交换层析和凝胶过滤层析等技术的应用和比较，采用SDS-PAGE和酶活性测定等方法对酶进行分析和判定。
四、预期结果和意义本研究的预期结果是从自然环境中筛选出高效产酶的木聚糖酶菌株，并优化其培养条件，提高其酶活性和稳定性；同时，通过对酶的提取、分离和纯化，获取高纯度的木聚糖酶，并对其进行初步的性质和功能分析。
这些预期结果将为开发高效、稳定、低成本的木聚糖酶奠定基础，具有重要的应用价值和推广意义。
木聚糖酶产生菌的选育及发酵条件研究
木聚糖酶产生菌的选育及发酵条件研究李用芳;李学梅;张建新;聂国兴;黄艳琴;赵利霞【期刊名称】《生物技术》【年(卷),期】2004(14)1【摘要】采用富集培养、透明圈平板筛选 ,从长期在其上堆放秸秆的土壤中分离到一株木聚糖酶产生菌黑曲霉C2。
对该菌株进行紫外线诱变处理 ,然后采用自然选育的方法筛选到一株木聚糖酶高产菌株C2 - 5 6 ,并对该菌株的适宜发酵条件和酶学特性进行了初步研究。
结果表明 ,C2 - 5 6三角瓶发酵酶活达 6 5 6 .8U/g ,比出发菌株C2提高了 14 0 % ;发酵条件以 80 %麸皮和 2 0 %玉米芯为培养基 ,采用 3%接种量 ,在曲盘上发酵 72h为宜 ,酶活达 175 0U/g ;该菌株产生的木聚糖酶具有较差的热稳定性和较好的pH稳定性 ,适宜反应温度和pH分别为5 0℃和pH4 .2。
【总页数】3页(P25-27)【关键词】木聚糖酶;产生菌;选育;发酵条件;霉菌【作者】李用芳;李学梅;张建新;聂国兴;黄艳琴;赵利霞【作者单位】河南师范大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】Q936;TQ925【相关文献】1.木聚糖酶产生菌固体发酵条件的初步研究 [J], 关宏;翟立萍;邹东辉;姜智敏2.木聚糖酶产生菌黑曲霉SP-1液体发酵条件的研究 [J], 李市场;古绍斌;李爱江3.诱变选育木聚糖酶高产菌及其发酵条件优化 [J], 朱慧霞;方桢;汪水玲;马晓静;姚日生4.耐碱性木聚糖酶产生菌的筛选及发酵条件研究 [J], 孙丰慧;李安明5.一株碱性木聚糖酶产生菌的筛选及发酵条件的优化 [J], 易旭东;潘虎;田云;刘博伦;林元山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黑曲霉固体发酵木聚糖酶条件的优化
木 聚糖 酶 （ ｌ ａｅ是 指 可 将 木 聚 糖 降 解 成 低 ｘ ａ ｓ） ｙｎ
聚糖 和木糖 的一组 酶 的总称 ，主要包 括 外切 ／— ， ３１
面菌种 的孢 子 冲洗下 来 ，并用 玻 璃珠 打 散摇 匀 ， 制
成 １ Ｆ ／ Ｌ的孢 子悬液 。 ０Ｃ Ｕｍ
４ 一木 聚糖酶 、 内切 ／— ，一木 聚糖 酶 和 ／一木 聚糖 ３ １ ４ ３ 酶。 它可 以将 饲料 中的非 淀粉 多糖 （ Ｓ Ｓ分解 成较 ＮＰ） 小 聚合 度 的低 聚 木糖 ， 而 改善 饲 料性 能 ， 除 或 从 消 降 低 非淀 粉 多 糖 在 动物 肠 胃 中因粘 度 较 大 而 引起 的抗 营养 作 用 （ ｅｆｒ Ｂ ｄｏｄＭ Ｒ等 ，９２ ； 时它 可 以 １９ ）同 破 坏 植 物 细胞 壁 的结 构 ，提 高 内源性 消 化 酶 的活
位 Ｕ。 ２结 果与分 析 ２１不 同碳 源对 菌株 产酶 的影响 ．
黑 曲霉 Ｙ ２由广 东 溢 多利 生 物 科技 股 份 有 限 一
公 司分 离筛选 得 到 。
１２试 剂 ．
桦木木 聚糖购于 Ｓｇ ａ 司 ， ｉ 公 ｍ 其余都为分 析纯。
１ ． ３固体发 酵培 养
采 用 麸 皮 、 米 秸 秆 、 草秸 秆 、 米 芯粉 、 玉 稻 玉 小
因此 ，碳 源 的类 型 和性 质 直 接影 响微 生 物 木 聚 糖
随之减少 ， 从而导致菌株产酶量大幅降低 （ 李秀婷
等 ，０ ４ 杨 燕凌 ，０ ５ 。 ２０； ２ ０ ）
２２不 同 氮源对 菌株 产酶 的影响 ．
酶 的分 泌和 产量 （ 秀 婷等 ，０４ 。而麸 皮 中木 聚 李 ２０ ） 糖 的含 量 较 高 ， 含 有 多 糖 、 白质 、 生 物 和 矿 也 蛋 微 物 质 等 常 用 的培 养 基 成 分 ，它既 是 碳 源 ，又 是 氮 源 ，还 含 有某 些 对 微 生 物 生 长 和产 酶 能 起 促 进 作
嗜热真菌的分离鉴定及其固态发酵产木聚糖酶的初步研究的开题报告
嗜热真菌的分离鉴定及其固态发酵产木聚糖酶的初步研究的开题报告题目：嗜热真菌的分离鉴定及其固态发酵产木聚糖酶的初步研究一、研究背景和意义：木聚糖酶是一种具有广泛应用前景的重要酶类，可以在纸浆、食品、医药和生物燃料等领域中得到广泛应用。
目前，固态发酵已成为生产木聚糖酶的重要方法之一，其优点包括不需要半透膜的装置、易于操作、能够利用多种不同的贡献物质等。
而嗜热真菌是一种能在高温条件下生长和繁殖的微生物，其产酶量高、催化效率高等特点也为其在木聚糖酶生产中的应用提供了可行性。
本研究旨在分离鉴定具有生产木聚糖酶潜力的嗜热真菌，并对其进行固态发酵产木聚糖酶的初步研究，为探索高效生产木聚糖酶的新途径提供基础支持。
二、研究内容和方法：1. 嗜热真菌的分离与鉴定。
收集来源于不同地区的土壤样品并通过平板分离法进行菌落分离，采用生理生化及分子生物学方法鉴定分离的嗜热真菌品系。
2. 木聚糖酶产酶菌种的筛选与优化。
采用响应面分析及Box-Behnken法优选产酶菌种的培养基组成，评价最优条件下的木聚糖酶产酶能力。
3. 固态发酵制备木聚糖酶。
通过响应面分析及Box-Behnken法优化制备木聚糖酶的固态发酵条件，并对酶产量、酶特性进行评价和分析。
三、预期成果：1. 成功分离鉴定具有生产木聚糖酶潜力的嗜热真菌品系。
2. 确定最优条件下的木聚糖酶产酶能力较高的菌种。
3. 成功制备出嗜热真菌固态发酵产木聚糖酶的方法，并得到了具体的酶产量和酶特性等数据。
四、研究意义：本研究将开拓木聚糖酶生产的新途径，对寻找高效、节能、环保的工业化生产木聚糖酶的新方法具有推动作用。
此外，还为深入探索嗜热微生物在工业和生物技术领域中的应用提供了基础支持。
黑曲霉XZ-3S产木聚糖酶固态发酵条件的研究
木聚糖酶（ ｘ ｙ ｌ ａ ｎ ａ ｓ ｅ ， Ｅ Ｃ ３ ． ２ ． １ ． ８ ） 是一种专 门降解木 聚糖 的复合酶 ， 主要包括 卢一１ ， ４一内切 一木 聚糖酶和 一木糖 苷 酶ｕ ， 它们是木聚糖分解酶系统的主要成分 ， 以内切方式 作 用于 一１ ， ４一糖苷键 ， 将 木聚糖 转变成 木二糖 、 低 聚木糖 及 少量木糖和阿拉 伯糖 等更 容易被 生物利 用 的形 式 。Ｊ ， 木 聚 糖酶在食品 、 动物饲料 、 造纸等众多行业 中有着广阔的应用前 景， 研究木聚糖酶具有很好 的商业价 值和科学 意义 ］ 。由于 固态发酵经济实用 ， 采用廉价 的农副 产品生产木 聚糖酶是 减
少 成本 的 一 条有 效 途 径 ， 目前 已 成 为 国 内 外 重 要 的 研 究 手 段
础发酵培养基 中， 在３ ０℃下培养 ７ ２ ｈ ， 其间翻曲 ２— ３次 。分 别调整碳源 、 氮 源、 培养条件各参数 ， 研究最适的产酶条件 。
１ ． ２ ． ２ 粗酶液 的制备方法
向一定量的成熟曲中加入 ２ ９倍
６ ０ ０ ０
， 一 、
系酶与发酵工程实验室保存 。 １ ． １ ． ２ 培养 基 斜 面 培养 基 ： 去 皮 马铃 薯 ２ ０ ％， 蔗糖 ２ ． ０ ％， 琼脂 ２ ． ０ ％， ｐ Ｈ值 自然 ； 此 培养基用 于菌种保 藏、 斜 面 种子 和平板分离 。
０ ０ ０ ０ ０ ０ 期
周晨妍 ， 王 燕， 周 锋， 等．黑曲霉 Ｘ Ｚ一 ３ Ｓ 产木聚糖酶 固态发酵条件的研 究［ Ｊ ］ ．江苏农 业科学 ， ２ ０ １ ３ ， ４ １ （ １ ） ： ３ １ ９ — ３ ２ １
一 ３ １ ９一
黑 曲霉 Ｘ Ｚ一 ３ Ｓ产木 聚糖酶 固态发酵条件 的研究
木聚糖酶固态发酵工艺及酶学特性研究
１ 材 料与方法
１ 菌 种 ． １
１ ． 木 聚糖酶酶 活 的测定 ．２ ３ 以 １ ｌ ． ｍ ｖ木 聚糖 溶液 为 底物（ ｐ ． ｔ ０ ／） ０ ｎ ２ ％（ 用 Ｈ值
中图分类号 Ｔ２１５ Ｓ０． ２
０３ｇＮａ １ ． ｇＭｇ ０４７ ０ ０３ｇ ＮＨ４ ０３ ． ｇ Ｆ Ｓ ． ， Ｃ ２ ， Ｓ ＂Ｈ２ ． ， ０ Ｎ ５ ， ｅ ０４ ０
木 聚糖酶 （ ｙａａｅ 是最 主要 的一 种木 聚糖 降解 Ｘ ｌ ｓ） ｎ
酶类 ， 主要 通过 内切方式 降解木聚糖 中的 Ｂ １４木 ０ 、 它 一， ．ｇ琼脂 ２ 、 馏水 １ ０ ｌ 自然 ｐ １ ０ｇ 蒸 ０ｍ ， ０ Ｈ值 。
维普资讯
《 唧删工业》２０ 鲫 ・０６
２ 一簟 ２ 期 ７ ４
术聚糖酶国态发酵 艺及酶学特性研究
刘德海 周 伏忠 王红云 安 明理 陈小鸽
摘
要
筛选 出一株 高产木 聚糖 酶的 菌株 ｕ’ 茵体 固态发 酵产 酶条件 的研 究表 明 ， ６， ５ 最佳发 酵培
ｇ 、可溶性淀粉 ２ ，Ｈ Ｐ ４ ． ｇ （ Ｈ ） ｏ ．ｇ ． ｇＫ ２Ｏ ０ 、 ｓ ４０ 、 ０ １ Ｎ ， － ５ 琼 脂 ２ ，Ｈ值 ６ 。 ０ｇｐ ． ０ 孢 子增殖 培 养 基：葡 萄糖 ５ ０ 蛋 白胨 ０２ 、 ．０ｇ
豆 汁 培 养 基 ：￣ｅ 汁 １０ ０ ｍｌＭｇＯ ・Ｈ ０ ５ 豆 Ｂ ０ 、 Ｓ ４７ ２ ２１ 培养基 的优 化研究 ． ２１１ 不同碳源 的影 响 （ 图 １ 。． 见 ）
糖苷键 ． 水解产 物 以低 聚木 糖 为主 ． 伴有 少量 的木 并
一株产木聚糖酶菌固体发酵条件的优化
构 成绿色 植物 细胞壁 主要成 分 的纤 维素 ，被认 为是世 界上 最丰 富 的可再 生资源 …．如 何对其 进行 充 分利 用 ，对 缓解全 球 能源 危机 、食 品和饲料 资源
紧 张 以及环 境污 染有 着 重大意 义．自然 界 当中能分
解 纤 维 素 的生 物 主 要 为真 菌 类 及 部分 细 菌， 以木 霉 、曲霉 、青霉 的能力 最为突 出Ｉ １ ２ ．木聚糖 是一类 ， ３ 重要 的半纤 维素 ，木 聚糖酶 是一类 重要 的半纤维 素
斜面 种子 培养 基 ；Ｐ Ａ 培 养基 ；三角瓶 国体发 Ｄ
收稿 日期 ：２ １＿ ｏ — １ ００－７ ３ ＿
２ ５ 不 同氮源 对产酶 的影 响 ．
作者简介：吾 尔恩 ．阿合别 尔迪 （ ９９ ），男，在读硕士研究生，研 究方向 ：微 生物 学； １７一 通讯作者 ：刘 东波
第１ 期
酶活．
分 别用 １０ Ｌ的蒸 馏水 ， 自来水 ，生 理盐 水 ， ０ｍ
ｐ ． 的醋酸 一 酸钠缓 冲液 加入 培养 ７ ｈ 固态发 Ｈ４８ 醋 ２的
酵 培养基 中，置 ４ ℃摇床 ， ｌ０／ ｎ震 荡培养 １ ， ０ ２ｒ ｍｉ ｈ
尼 龙纱布 过滤 后 ，１０ ０／ ｎ ４ ２ ０ ｒ ， ℃离心 ２ ｍｉ ｍｉ ０ ｎ除去
备 固体 发酵 酶液 ，适 当稀 释后 测 定酶活 ．
３ 结 果 与 分 析
３ 一 不 同培养 条件 对产 酶 的影 响
３１１ 不 同碳 源对产 酶 的影 响 ．．
２ ７ 不同起 始 ｐ ． Ｈ值对 产酶 的影 晌
。
用磷 酸氢 二钠一 柠檬 酸缓 冲液 将培 养基初 始 ｐ Ｈ 分别 调 成 ２８ ．，４８ ．，６８ ．，研 究 ６个 ．，３８ ．，５ ８ ．，７８ 不 同起 始 ｐ Ｈ对 菌株 产酶 的影 响． ２ ８ 不 同培 养 时 间对产 酶 的影 响 ． 将新 制备 的孢 子悬 液 （ ０ １７个／ ｍＥ） ，以 １％的 ０ 接 种 量接 入灭 菌后 的基 础 固态 发酵 培养基 中 ，２ ℃ ８
香菇紫金I号产木聚糖酶固体发酵条件及酶学性质研究
１ ． ２ ． ２ 培 养基
（ １ ） 斜 面 培 养 基 ：磷 酸 二 氢 钾 （ Ｋ Ｈ Ｐ Ｏ ）
１ ｇ 、 马铃 薯 ２ ０ ０ ｇ 、 硫酸镁 （ Ｍｇ Ｓ Ｏ ４・ ７ Ｈ２ Ｏ） ０ ． ５ ｇ 、
正．
是木 聚糖 ． 基于此 ， 一 些 专 业 科 研 人 员 深 入 的 探 究 了啤酒糟 的利用 价值 ， 如制 备 功 能性 乳酸 发 酵 纤 维 饮料所 需 的膳食 纤 维可从 啤酒糟 中提取 ； 复 合 氨基 酸 营养 液 、 蛋 白饲 料可 利用 啤酒糟 发 酵来 生产 等 ． 该 试 验 试 图在 添 加 其 他 辅 料 情 况 下， 以啤酒 糟 作 为 主 要 原 料 ， 香 菇紫金 Ｉ 号 为 菌
１ ． ２ ． ４ Ｄ Ｎ Ｓ试剂 该 试 验参 考 Ｍｉ ｌ ｌ ｅ ｒ ＿ ５ 的文 献配 置 Ｄ Ｎ Ｓ试剂 ．
０ ． ４ ％、 磷Ｏ ５ ７ ％ 其 中无 氮 浸 出物 的主 要 成 分
１ ． ２ ． １ 缓 冲液 配制 浓度 为 ０ ． ０ ５ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ 、 ｐ Ｈ为 ２ ． ５～ ６ ． ０的 柠 檬酸 一柠檬 酸钠 缓 冲 液 和 ｐ Ｈ为 ６ ． ５～７ ． ５的 柠 檬 酸 一磷 酸 氢 二 钠 缓 冲 液 ， 用精密 ｐ Ｈ 计 校
麸皮 ＝ ６ ： ２ ： ２ ， １ ． ５ ％ 的 酵母 膏作 为 氮 源 ， ｐ Ｈ 为 ５是 最适 反 应 ， 三 角瓶 装 装 瓶 量 为
５ ｇ ／ １ ２ ５ ｍ Ｌ， ２ ５ ％ 的接 种 量 ， 为期 ８ ｄ的培 养 ， １ ： ３ ． ２的料 水 比． 粗 酶液 的最适 反应 温 度为 ５ ０℃ ， 最适 ｐ Ｈ为 ５ ， 相 对酶 活在 ３ Ｏ一 ６ ０ ℃ 范 围 内仍 保持 在 ８ ０ ％ 以上 ， 适应 的
白灵菇产木聚糖酶发酵条件的研究
白灵菇产木聚糖酶发酵条件的研究吴萍张海珍(安徽科技学院生命科学学院,安徽凤阳 233100 江苏灌云伊山高级中学江苏灌云 222200)摘要:通过多因子的摇瓶液体发酵优化试验，以白灵菇为始菌，研究其产木聚糖酶的情况。
以甘蔗渣为唯一碳源，来测定处于不同条件下的培养基中的白灵菇所产木聚糖酶的酶活力，同时测定其相应条件下的菌丝体生物量。
结果表明：其最适温度为24℃，PH为6.0，接种量为12.5%，摇瓶装液量为60ml/瓶，摇床转速为160rpm，培养天数为7天。
最后以各个因子的最佳梯度做优化培养。
其发酵液体中木聚糖酶活力高达71.342IU/ml，菌丝体生物量也高达1.043g/60ml。
关键词:白灵菇;木聚糖酶;甘蔗渣;发酵条件.木聚糖酶（endo—1,4—β—D—xylan xylanohydrolase,EC·3·2·1·8）是一类以内切方式降解木聚糖分子中的β—1，4—木糖苷键的水解酶类。
包括内切β—木聚糖酶、外切β—木聚糖酶和β—木二糖苷酶。
其主要水解产物为木二糖和木二糖以上的低聚木糖，还有少量木糖和阿拉伯糖[1]。
木聚糖酶体（xylanosome）是在微生物表面分离到的多酶复合体[2]。
这些复合体在半纤维素的降解中起重要作用。
现在已知能够产木聚糖酶的微生物包括细菌、放线菌、真菌中的黑曲霉和木霉等，不同来源的木聚糖酶其催化特性是有差异的，而且它们有其各自不同的最适PH值和最适温度。
据报道放线菌和细菌的最适生长和产酶PH接近于中性；耐碱性杆菌PH值在9—10；而真菌却较适合酸性条件，且能分泌木聚糖酶的水平高于酵母菌和细菌，从而格外引起研究人员的关注[3]。
木聚糖的酶法降解在造纸、饲料、食品、制药等众多工业中有着十分诱人的应用前景[4]。
所以人们对各种产木聚糖酶的微生物，包括细菌、真菌等各方面的性质及其发酵特性进行了详细的研究，对于它们各自所产生的木聚糖酶的使用特性也进行了探索，包括最适PH值、最适温度等，并且已经动用发酵工程技术得到了各种木聚糖酶产品。
高产木聚糖酶嗜热真菌的筛选、固态发酵条件及酶学性质的初步研究的开题报告
高产木聚糖酶嗜热真菌的筛选、固态发酵条件及酶学性质
的初步研究的开题报告
一、研究背景及意义
木聚糖酶是一种能够水解木聚糖为单糖的酶类。
由于木聚糖广泛存在于植物细胞壁中，因此木聚糖酶具有广泛的应用前景，如在传统纸浆工业中，生物质燃料的生产
和利用等领域。
与此同时，真菌生产的木聚糖酶具有反应条件温和、清洁环保等优点，因此受到了研究人员的广泛关注。
本研究旨在筛选嗜热真菌中高产木聚糖酶的菌株，探索该酶的固态发酵条件，并初步研究其酶学特性，为其在实际应用中的推广和应用提供理论支持。
二、研究内容及关键技术
1.嗜热真菌的筛选
从温泉、火山岩、沸腾泉等自然环境中采集样品，利用分离培养的方法筛选出能够产生木聚糖酶的嗜热真菌菌株。
利用分光光度计检测其菌种产酶量，并从中选择产
酶量较高的优质菌株进一步研究。
2.固态发酵条件研究
利用响应面试验法，研究木聚糖酶的最佳固态发酵条件，包括温度、pH、发酵
时间、发酵底物含量等因素。
通过分析建立数学模型，以及确定各因素对于酶活力的
主次影响因素。
3.木聚糖酶的酶学特性研究
通过对木聚糖酶的基本酶学特性的测定，如酶活力、pH和温度的稳定性、吸收
光谱、电泳等分析方法，初步探索木聚糖酶在实验条件下的酶学性质。
三、研究预期成果
本研究将筛选出高产木聚糖酶的嗜热真菌菌株，并探索了该菌株的最佳固态发酵条件，初步研究了木聚糖酶的酶学特性，为实际应用提供了一定的理论基础和实验依据。
对于推广和应用嗜热真菌生产木聚糖酶具有重要的指导意义。
利用甘蔗渣固态发酵生产木聚糖酶
!",
正交实验表 为降低成本， 本实验通过四因素多水平正交实
!"!
培养基中添加麸皮对产酶的影响 在传统的麸皮固体培养基中添加蔗渣粉可以提
高菌种产酶活力 （表 3） 。当 % （蔗渣） （麸皮）’ <% 时， 木聚糖酶活力达到最大值， 麸皮中含有大量 4<! 的营养因子能够改善菌丝的生长条件， 提高产酶量， 但添加过量麸皮会产生不利影响， 这可能与麸皮中 存在的某些非木聚糖成分具有刺激产酶效应有关。
蔗渣作为一类大量存在的天然纤维质和可再生
［!］ 利用的重要资源， 受到越来越广泛的重视 。蔗渣
约含有 #$( 的半纤维素， 微生物产生的纤维素酶可 以将其降解为单糖及少量寡糖。国内外不少研究者
［"］ ［#］ ［%］ 对康宁木霉 、 绿色木霉 、 嗜热纤维菌 等菌产生 ［- 7 &］ 的纤维素酶分解蔗髓或蔗渣进行了研究 。考虑
瓶
号
酶活 $ % & ’/’// ’,. ’/. ’/* ’/. ’/0 ’,0 .-" * 2 *0" * 2 ,.0 " * 2 *0* ’ -1. *0
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表’ （水） （干物质） % <% 木聚糖酶活力 $ # ・" / ! 含水量对产酶的影响 .<! 3!! 4<! 43. ,<! .26 5<! 396
“固态机械发酵生产木聚糖酶的研究”项目通过了鉴定
利用率；喂养泌乳奶牛试验表明，每天每头奶牛
比对照组平均增加产奶 0.57 千克，乳脂率提高 了0.13%，每头奶牛全年可增加收益约356.85元；
无言相对，从此不再说话，精浓醪发酵，发酵酒精浓度提高
1.16 度，出酒率提高 3.06%。该木聚糖酶生产工 艺先进，酶活力高，具有较好的应用前景，达到
校企合作完成的"固态机械发酵生产木聚糖
酶的研究"项目通过了鉴定
天津科技大学和承德避暑山庄企业有限责
任共同完成的"固态机械发酵生产木聚糖酶的研 究"项目,于 2009 年 4 月 11 日在天津市通过了省
无言相对，从此不再说话，行同陌路，一笑而过不回头
科技成果转化服务中心组织的鉴定。该项目采用
固态机械发酵法生产木聚糖酶的工艺，解决了传 统固态发酵易污染、传热和传质困难、发酵过程
了国际先进水平。
2df0f9c9f 凤凰开户
无言相对，从此不再说话，行同陌路，一笑而过不回头
参数无法控制等技术难题，填补了国内木聚糖酶
固态机械化生产的空白；通过诱变育种获得了高 产木聚糖酶菌株黑曲霉 S13-15，固态发酵木聚糖
无言相对，从此不再说话，行同陌路，一笑而过不回头
酶活力达到 8 万单位/克以上，酶活力为国内同
类产品 4 倍左右；该酶应用于草粉粗纤维降解， 粗纤维的含量比对照降低了 3.24%，提高了饲料
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第26卷第5期2005年 10月河南科技大学学报(自然科学版)Journal of Henan University of Science and T echnology(Natural Science)V ol.26N o.5Oct.2005基金项目:国家自然科学基金资助项目(30471028)作者简介:杨燕凌(1974-),女,陕西渭南人,助理实验师.收稿日期:2005-04-11文章编号:1672-6871(2005)05-0093-02木聚糖酶固体发酵条件的试验杨燕凌(福建农林大学生命科学院,福建福州350002)摘要:对采用黑曲霉C3486固态发酵生产木聚糖酶的条件进行了研究。
确定了所试因素的最佳组合:麸皮与玉米芯的比例为7∶3,氮源是1.0%硫酸铵,培养基起始pH值为自然pH值,250m L三角瓶中装培养基15g,培养时间为72h,温度为40℃,接种量为5%。
在上述条件下木聚糖酶的平均产量可达14kU/g。
关键词:木聚糖酶;固态发酵;产酶条件中图分类号:TS201.3;T Q929文献标识码:A0 前言木聚糖是一类分子结构为β21,42木糖苷键连接的木糖聚合物,是广泛存在于植物体内的一种半纤维素。
木聚糖在动物消化道内不能被消化吸收,并且阻碍其它营养成分的消化利用,因而具有很强的抗营养特性[1]。
木聚糖酶是一类水解木聚糖主干链内部β21,42木糖苷键的酶,该酶不仅在食品、饲料、纺织、能源工业中有着广阔的应用前景,而且在农作物残渣的利用及纸浆造纸工业中也有较大应用价值[2]。
杨翔华[2]等分离、筛选出一株产木聚糖酶比活力高的优良菌株CY8,文献[3]等对嗜热真菌生产木聚糖酶的条件作了研究。
但所有这些菌株所产木聚糖酶的活力都不高,工业化应用前景不大。
由于固态发酵经济实用,采用廉价的玉米芯原料代替纯玉米芯木聚糖生产木聚糖酶是减少成本的一条有效途径[3,4]。
为此本文进行了以麸皮玉米芯为主要原料进行固态发酵生产木聚糖酶的研究。
1 材料和方法(1)菌种:黑曲霉C3486由武汉隆华生物股份有限公司技术中心提供。
(2)试剂:桦木木聚糖为Sigma公司产品;DNS(3,5-二硝基水杨酸)为中国医药集团上海化学试剂公司产品;DES(硫酸二乙酯)为上海硫酸厂双流工贸公司产品,其它试剂均为国产化学纯试剂。
(3)主要仪器:722型分光光度计测定分光光度值。
(4)培养基及培养条件[3,4]液体种子培养基:马铃薯20%,葡萄糖2%,pH值为6.0,在100m L三角瓶中装入30m L,灭菌后接种,制成菌悬液的斜面孢子。
产酶培养基:培养基为玉米芯和麸皮按不同质量比混合,在250m L三角瓶中装入培养基约15g,于121℃灭菌30min,按5%的量接入液体菌种培养72h。
(5)木聚糖酶的测定方法木聚糖酶活力的测定参照DNS法[3],酶样干燥后粉碎,用0.05m ol/L的柠檬酸缓冲液(pH6.3)浸提, 0.1m L适当稀释的酶液加入到0.9m L用0.05m ol/L、pH6.5柠檬酸钠缓冲液配制的1%桦木木聚糖底物溶液中,500℃反应10min,用DNS法测定释放的还原糖量。
木聚糖酶活力单位U的定义为:在上述条件下,每分钟水解木聚糖生成1μm ol木糖所需要的酶量。
2 结果与分析(1)麸皮和玉米芯的比例对产酶的影响。
用10g麸皮和玉米芯按不同比例混合配制发酵培养基,接表1 麸皮和玉米芯的比例对产酶的影响麸皮∶玉米芯9∶18∶27∶36∶45∶54∶63∶72∶81∶9酶活/(U/g )12350137201457013020123208430630045003200种后培养72h ,测其酶活,结果见表1。
从表1可看出麸皮比例有一最佳值,这是因为麸皮是富含多糖、蛋白质、维生素和矿物质等常用的培养基成分,它既是碳源,又是氮源,还含有某些对微生物生长和产酶能起促进作用的因子。
但麸皮过多,培养基粘性增大,不利于透气,影响生产规模和产量;而玉米芯含有丰富木聚糖,又能增加培养基孔隙,且成本比麸皮低得多,但玉米芯过多,菌丝生长缓慢,酶活低[4～7]。
综合以上分析,本研究选用麸皮与玉米芯的比例为7∶3作为最佳配比。
表2 硫酸铵的添加量对产酶的影响硫酸铵添加量/%0.51 1.52 2.53 3.5酶活/(U/g )1230014610146201432012310111308200 (2)硫酸铵的添加量对产酶的影响。
用7g 麸皮和3g 玉米芯的混合物,与不同添加量的硫酸铵配制发酵培养基,接种后培养72h ,测其酶活,结果见表2。
从表2可看出硫酸铵添加量在1%、1.5%和2%时没有太大差异,从降低成本的角度考虑,宜选择1%的硫酸铵。
图1 培养基起始pH 值对产木聚糖酶的影响(3)起始pH 值对产酶的影响。
用7g 麸皮和3g 玉米芯的混合物,与1%的硫酸铵配制发酵培养基,接种后培养72h ,测其酶活。
培养基初始pH 值对木聚糖酶的合成有重大影响,pH 值不仅会影响细胞膜所带的电荷,引起细胞对营养物质吸收状况的变化,而且可以通过改变培养基中有机化合物的离子化作用程度,对细胞施加间接影响,改变某些化合物分子进入细胞的状况,从而促进或抑制微生物的生长差。
(4)培养温度对产酶的影响。
用7g 麸皮和3g 玉米芯的混合物,与1%的硫酸铵配制发酵培养基,自然pH 值。
在25～45℃接种培养72h ,测其酶活,结果见表3。
可以看出40℃最好。
(5)培养时间对产酶的影响。
用7g 麸皮和3g 玉米芯的混合物,与1%的硫酸铵配制发酵培养基,自然pH 值。
40℃下接种培养24～96h ,测其酶活。
结果见表4,可以看出发酵72h 产酶量可达最大,因此72h 为最佳产酶时间。
表3 温度对产酶的影响温度/℃2530354045酶活/(U/g )3670806012980132106540表4 培养时间对产木聚糖酶的影响时间/h 24364860728496酶活/(U/g )12703350129801321013890126708970 (6)不同瓶装量对产酶的影响。
用7g 麸皮和3g 玉米芯的混合物,与1%的硫酸铵配制发酵培养基,自然pH 值。
在250m L 三角瓶中装入培养基5～20g ,40℃下接种培养72h ,测其酶活,结果表明瓶装量15g 为最好,产酶量为13910U/g 。
图2 接种量对产木聚糖酶的影响(7)接种量对产酶的影响。
用7g 麸皮和3g 玉米芯的混合物,与1%的硫酸铵配制发酵培养基,自然pH 值。
在250m L 三角瓶中装入培养基15g ,不同接种量接种,40℃培养72h ,测其酶活。
结果表明(图2):5%为最适宜的接种量。
3 结论本研究对黑曲霉C3486固态发酵生产木聚糖酶的条件进行了优化,其最佳组合为∶麸皮与玉米芯的比例为7∶3,氮源是1.0%硫酸铵,培养基起始pH 值为自然pH 值,250m L 三角瓶中装培养基15g ,培养时间为72h ,温度为40℃,接种量为5%。
木聚糖酶的平均产量达14kU/g 。
(下转第101页)・49・河南科技大学学报(自然科学版) 2005年(3)工业区的酸雨发生频率>居民区>清洁区,这与大气局部污染有密切关系,并直接影响到位于下风向的居民区和清洁区。
城市在发展和扩容的同时,必须注意调整城市燃料构成,提高集中供热程度,提高燃煤效率,减少S O 2的排放,预防酸雨的发生。
参考文献:[1] 王加权,吴劲兵,李如中.酸雨研究进展与问题探讨[J ].水科学进展,2004,15(4):527-530.[2] 张晓红,赵彦淑,刘建英,等.洛阳市酸雨现状及成因[J ].甘肃环境与研究,2000,3(4):213-215.[3] 冯砚青.中国酸雨状况和自然成因综述机防治对策探究[J ].云南地理环境研究,2004,16(1):25-28.[4] 王文兴.中国降水酸度和离子浓度的时空分布[J ].环境科学研究,1997,10(2):1-7.[5] 徐 渝.大气S O 2降水洗脱及其对酸雨的贡献[A].酸雨文集[C].北京:中国环境科学出版社,1989.[6] 张 龚,曾光明,蒋益民,等.湖南省酸雨变化特征、现状及成因分析[J ].环境科学研究,2003,16(5):15-17.[7] 丁卫东,王建英,张兰英,等.河南省城市酸雨状况及成因分析[J ].中国环境监测,2004,20(5):11-14.[8] 杨复沫,贺克斌,雷 宇,等.2001-2003年间北京大气降水的化学特征[J ].中国环境科学,2004,24(5):538-541.[9] 王桂芳,金永民.北方重工业城市降水pH 值与相关性因素关系的研究[J ].中国环境监测,2004,20(4):39-43.(上接第94页)参考文献:[1] 薛业敏,曹建平,毛忠贵,等.木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达及表达蛋白的纯化[J ].无锡轻工大学学报,2003,22(3):57-61.[2] 杨翔华,洪 新.产木聚糖酶菌株的筛选及其产酶特性[J ].辽宁石油化工大学学报,2004,24(4):32-35.[3] 李秀婷,李里特,江正强.嗜热真菌耐热木聚糖酶的产酶条件和酶谱分析[J ].微生物学通报,2004,31(2):49-54.[4] 张建新,李学梅,姜丽娜,等.黑曲霉固态发酵木聚糖酶中试条件的研究[J ].微生物学杂志,2003,23(4):20-22.[5] 曾 艳,刘铁汉,周培瑾,等.嗜碱菌(Bacillus sp.)Z BAW6的木聚糖酶的分离纯化及其性质[J ].微生物学报,2004,44(1):75-78.[6] 张红莲,姚斌,王亚茹,等.具有高比活性的新木聚糖酶XY NB 的酶学性质研究及其编码基因的克隆和表达[J ].科学通报,2003,48(4):364-368.[7] 司丽芳,任洪涛,杨自军,等.E M 发酵鸡粪与秸秆粉制作饲料的最佳比例[J ].河南科技大学学报(农学版),2003,23(2):33-36.・101・第5期张晓红等:洛阳市酸雨形势及成因分析・Ⅷ・Journal of Henan University of Science and T echnology(Natural Science)2005…………………………………General Conclusion of Second Mean Value Theorem for Inteyrals(90) LI U Wen2Wu (Editoral Department,Qiannan Normal College for Nationalities,Duyun558000,China) Abstract:Based on the knowledge of differential and integral calculus,the similarity between the intermediate point in the second mean value theorem for integrals and the m oment when the integral interval tending to zero are explored.Meanwhile,tw o conclusious are reached and introduced to other fields as well.K ey words:Second mean value theorem for integrals;Intermediate point;Asym ptotic situationC LC number:O172.2 Document code:A Article I D:167226871(2005)0520090203・Chemistry,Chemical Engineering and Others・Study on Optimum Conditions of Aspergillus Niger C3486Solid State Fermentation to Produce Xylana se(93)………………………………………………………………………………………………………Y ANG Y an2Ling (College o f Life Science,Fujian Agriculture&Forestry Univer sity,Fuzhou350002,China) Abstract:The study was conducted to explore the optimum conditions of Aspergillus niger C3486s olid state fermentation to produce xylanase.It was established that the optimum conditions were listed as follow:the proportion of wheat bran to corncob was7∶3,the nitrogen s ource was1.0%(NH4)2S O4and15g media were filled in250m L flask with medium nature pH,72h culture time,40℃culture tem perature and5%inoculation am ount.Under optimum condition,C3486was able to accumulate an average of14kU/g of xylanase.K ey words:X ylanase;S olid state fermentation;Optimum conditionC LC number:TS201.3;T Q929 Document code:A Article I D:167226871(2005)0520093202Ba sic Structure and Parameters of Batch Typed Three2cell E lectrodialysis Stack for Strong Oxidized Water …………………………………………………………………………………………………Making(95) H ONG Y an,DONG T ie2Y ou,ZH U Na (Food&Bioengineering College,Henan Univer sity o f Science& Technology,Luoyang471003,China)Abstract:A method of producing strong oxidized water using three2cell electrodialysis stack by membrane electrodialysis was proposed.Operating priniciples and processing data were provided,and the selections of com position materials were discussed.Depending on the experiment,the optimal conditions for producing strong oxidized water were obtained,i.e.when the distance of electrode pairs is10cm,the concentration of NaCl is 5132%and the v oltage is32V,the efficiency for producing strong oxidized water with this kind of device is the highest.The relation between operation current density and current efficiency was als o discussed.K ey words:Membrane electrodialysis;Strong oxidized water;Three2cellC LC number:TS203;T Q460.3 Document code:A Article I D:167226871(2005)0520095203………………………Characteristics of Acid Rain Formation in Luoyang and Analysis of Cause s(98) ZH ANG X iao2H ong,ZH ANG Y ong2Hui,CHE N Hui (Luoyang Environmental Monitoring Station,Luoyang 471002,China)Abstract:Based on the1997-2003years of rain fall quantity,the analysis of the reas on of Louyang acid rains formation by using the multi-factor contrast and statistics indicates that there has been great correlationships between the acid rains formation and the quantity of rain fall or the dustfall.The m ore it rains,or the less dust it contains,the m ore possible it is to have acid rain.In the summer and fall,the plentiful sunlight,high tem perature, su fficient atm osphere rain fall and high humidity are conducive to trans formation of sulfur dioxide(S O2)into the sulfate ion.Although it is advantageous to the formation of acid rain if there is m ore acidic pollutant in the air,acid rain is hard to be formed with less rain fall quantity.K ey words:Rain fall quantity;Dust fall quantity;Acid rain;P olluting factorC LC number:X517 Document code:A Article I D:167226871(2005)0520098204Water Quality and Pollution Trend of Luo River in luoyang Section and Preventing Countermea sure s (102)………………………………………………………………………………………………………DONG Meng,ZH ANG Fan,J I A D ong2Sheng (Luoyang Environmental Monitoring Station,Luoyang471002, China)Abstract:Based on the environmental m onitoring in formation to Luo river for many years,the water quality,current situation and trend of pollution of Luo river in Luoyang section have been analyzed.The results show that the water quality of upper reaches of Luo river is better,the water of middle and lower reaches is seriously polluted.S o s ome countermeasures are put forward for prevention.K ey words:Luo river;Water quality;P ollution;Environmental m onitoring;C ountermeasuresC LC number:X522 Document code:A Article I D:167226871(2005)0520102203。