GC 气相色谱方法建立

液体样品
➢分析部分组分 固相萃取 液液萃取 柱层析 ➢是否满足进样要求 （1）浓度太高:用溶剂稀释或减小进样量 （2）浓度太低:浓缩样品或增加分析技术的进样体积 （3）样品热稳定性差：衍生化处理（柱前衍生、柱内衍生、柱后衍生）; 将样品冷冻处理 （4）高分子化合物的分离： 体积排阻色谱、透析、超滤、沉淀、膜分离 （5）固体颗粒： 过滤、沉淀、离心
检测器选择
依据分析对象和目的来确定。（参考前面所 讲检测器原理选择）
载气选择
作为气相色谱载气的气体，要求要化学稳定性好； 纯度高；价格便宜并易取得；能适合于所用的检测器。 常用的载气有氢气、氮气、氩气、氦气、二氧化碳气 等等。
主气要流包速尝括。：试进分样量离，检确测定温度初，始进样条温件度，色谱柱温和载
4.利用其它仪器分析结合定性。（需配备多种仪器，投 资大，运行成本高）
5.利用检测器定性。（最简便易行，但定性的范围较窄）
定量分析
定量分析：定量分析是GC的强项，一般采用以下三种方 法：
峰面积归一法 内标法 外标法
峰面积归一法
把所有组分的含量之和按100%计算，当样品中所有的均能流 出色谱柱，并在检测器上都能产生信号。
工作场所中微量腈化物的热解吸分析
取样的捕集管：取150mm×3mm的U形不锈钢管，分别用10%NaOH和盐酸（1：1） 溶液处理，用蒸馏水冲洗到中性，再用甲醇冲洗5次，用氮气吹干。用丙酮将 chromosorb102浸泡0.5h，过滤后用丙酮冲洗3次，待丙酮挥发干后，装入不锈钢管， 两端用玻璃毛塞好。这就是用于取样的捕集管。 活化：将捕集管在240℃下通氮气（30ml/min）活化10h。 取样：把捕集管接到流量经校正的真空泵上取样，待设定体积的空气通过捕集管后， 取下捕集管，密封冷藏。 GC分析：将捕集管与GC的热解吸装置中，与240℃解吸进样。
Wi=fi’Ai/∑ fi’Ai×100%
如果被分析样品的组份是同系物，校正因子相近可直接用 峰面积求出组份的百分含量。如果被分析样品的组份不是同 系物，则要知道每种组份的相对校正因子。优点：不必准确 知道进样量，操作条件略为变动对结果影响较小，计算方便， 适合于多组份的工厂例行分析。
外标法
外标法是以被测组分的纯品（或已知其含量的标样）作为标准品进行对比定量的 一种方法。 不论样品中的所有的组份是否全部出峰，均可采用外标法对出峰组份做定量分析。 就定量参比物而言，外标法是最为准确的方法，因为是同质组份进行比较；然而 由于检测器的响应性能、工作温度和载气流速等GC条件很难绝对稳定，而且进样 量也很难完全相同，因此外标法容易出现较大的误差。 计算公式 校正因子：
气载颗粒物中PAHs的测定
滤膜
吸附管
用二氯甲烷索氏提取18h 无水Na2SO4干燥
K-D浓缩（50℃水浴） K-D溶剂交换 浓缩至1.0ml GC/FID分析
5ml环己烷 加5ml环己烷定容
蔬菜水果中的农残分析
蔬菜水果20g粉碎
均匀化
加入100ml丙酮×2
过滤 浓缩至25ml
加入100ml10%NaCl
GC 气相色谱方法建立
气相色谱方法开发步骤
样品极其来源
文献调研
样品预处理 样品溶液
否 满意吗？ 是 定量方法
样品尝试分离 优化分离 定性鉴定
仪器配置 确定初始条件
方法验证
样品处理
(1)气体样品(可直接进样分析) (2)固体样品 (3)液体样品
固体样品
❖分析固体样品中的挥发性组分 顶空进样 吹扫-捕集 热萃取(热解吸) ❖分析部分组分(转化成液体) 固液萃取： 蒸馏 索氏提取 超声波萃取 快速溶剂萃取 微波萃取 超临界流体萃取 ❖样品全分析-----转化成液体样品 消化 有机溶剂溶解 水溶解
分离条件优化
分离条件的优化目的： 在最短的分离时间内达到符合要求的分离 结果。（分析时间、分离度） 主要包括三方面的参数优化： ❖更换色谱柱（选择性） ❖改变色谱柱温（分离度） ❖载气流速。（分离度）
定性分析
定性分析：定性分析是GC的弱项，一般有以下几种方法 1.利用已知物对照定性。（使用得较为广泛） 2.利用文献保留数据定性。（需要有大量的文献资料库） 3.利用化学反应定性。（比较麻烦，一般要进行样品的 前处理）
萃取 有机层干燥
CH2Cl2：正己烷（1：4）100ml×2 无水Na2SO4
浓缩至5ml（40℃以下）
GC分析
谷类中农残分析
前处理同蔬菜水果处理 萃取（震荡5min） CH3CN层
加正己烷5ml CH3CN20ml×3 二甲苯1ml
蒸发浓缩
正己烷5ml
固相萃取（硅胶柱） 洗脱
浓缩至5ml
丙酮：正己烷（1：1）50ml
GC分析
水中醛的分析
取水样50ml 衍生化 盐化 萃取
己烷层干燥脱水 GC/ECD分析
盐酸0-（2，3，4，5，6）五苄基羟基胺 3ml，静置2小时
NaCl18g和1：1硫酸0.8ml
己烷5ml，萃取5分钟
无水Na2SO4
血液中乙醇含量的测定（静态顶空）
乙醇储备液：10g/L 内标溶液储备液：1.0%正丙醇，使用时稀释到0.25% 标准溶液：将乙醇储备液稀释10倍，然后取该溶液（1g/L）1ml置于10ml顶空 瓶中，同时加入1ml内标溶液，迅速密封。用于测定校正因子。 血样：取1ml充分混合均匀的血液样品于10ml顶空瓶中，同时加入1ml内标溶 液，迅速密封。 注意顶空条件： 平衡温度：50℃ 平衡时间：10min 加压：13.8KPa 压力平衡时间：0.15min 进样时间：0.15min
确定仪器配置
❖色谱柱 ❖进源自文库器的选择 ❖检测器 ❖载气
色谱柱的选择
GC常用色谱柱有填充柱和毛细管柱。 填充柱是常用的GC色谱柱，其分离性能和分析 速度都比毛细管差，但制备简单。 填充柱种类：气固色谱填充柱和气液色谱填充 柱。
进样方法选择
色谱分离要求在最短的时间内，以“塞子”形式打进一定量的试样， 进样方法可分为： １、气体试样：大致进样方法有四种： （１）注射器进样，（２）量管进样，（３）定体积进样，（４） 气体自动进样。 一般常用注射器进样及气体自动进样。注射器进样的优点是使用灵 活，方法简便，但进样量重复性较差。气体自动进样是用定量阀进 样，重复性好，且可自动操作。 ２、液体试样：一般用微量注射器进样，方法简便，进样迅速。也 可采用定量自动进样，此法进行重复性良好。 ３、固体试样：通常用溶剂将试样溶解，然后采用和液体进样同样 方法进样。也有用固体进样器进样的。