高效毛细管电泳分离模式知识分享
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四、毛细管等电聚焦
capillary isoelectric focusing，CIEF 1. 根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术；
2. 毛细管内充有两性电解质（合成的具有不同等电点范 围的脂肪族多胺基多羧酸混合物），当施加直流电压（6～8V） 时，管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯度；
2020/4/18
分离类型
八种分离类型，介绍常用的几种； 根据试样性质不同，采用不同的分离类型； 每种机理的选择性不同；
2020/4/18
一、毛细管区带电泳
capillary zone electrophoresis ，CZE
带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流 出； 阴离子：两种效应的运动方向 相反；ν电渗流 >ν电泳时,阴离子在 负极最后流出,在这种情况下,不但 可以按类分离,同种类离子由于差 速迁移被相互分离。
2020/4/18
2. 电泳流和电渗流的方向相反，且ν电渗流 > ν电泳 ，
负电胶束以较慢的速度向负极移动； 3.中性分子在胶束相和溶液（水相）间分配，疏水性
强的组分与胶束结合的较牢，流出时间长； 4.可用来分离中性物质，扩展了高效毛细管电泳的应
用范围； 5.色谱与电泳分离模式
的结合。
2020/4/18
4. 特点：界面明显，富集、浓缩作用；
2020/4/18
六、毛细管电渗色谱
capillary electroosmostic chromatography ，CEC 在毛细管壁上键合或涂渍高效液相色谱的固定液，以电
渗流为流动相，试样组分在两相间的分配为分离机理的电动 色谱过程；
2020/4/18
第九章 高效毛细管电泳
分析法
high performance capillary electrophoresis,HPCE
第四节 高效毛细管电泳
分离模式
separate types of HPCE
一、毛细管区带电泳(CZE)
capillary zone electrophoresis
二、毛细管凝胶电泳(CZE)
2020/4/18
五、毛细管等速电泳
capillary isotachophoresis ，CITP 1. 将两种淌度差别很大的缓冲液分别作为前导离子(充满 毛细管)和尾随离子，试样离子的淌度全部位于两者之间， 并以同一速度移动。 2. 负离子分析时，前导电解质的淌度大于试样中所有负 离子的。所有试样都按前导离子的速度等速向阳极前进，逐 渐形成各自独立的区带而分离。阴极进样，阳极检测。
最基本、应用广的分离模式；
2020/4/18
二、毛细管凝胶电泳
capillary gel electrophoresis ，CGE
将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶。 其具有多孔性，类似分子筛的作用，试样分子按大小分 离。能够有效减小组分扩散，所得峰型尖锐，分离效率高。 蛋白质、DNA等的电荷/质量比与分子大小无关，CZE模 式很难分离，采用CGE能获得良好分离，DAN排序的重要手段。 特点：抗对流性好，散热性好，分离度极高。 无胶筛分技术：采用低粘度的线性聚合物溶液代替高粘 度交联聚丙烯酰胺。柱便宜、易制备。
capillary gel electrophoresis
三、胶束电动毛细管色谱
micelle electrokinetic capillary electrophoresis
四、毛细管等电聚焦(CIEF)
capillary isoelectric focusing
五、毛细管等速电泳
capillary isotachophoresis
3. 氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有关， 在酸性溶液中带正电荷，反之带负电荷。在其等电点时，呈 电中性，淌度为零；
2020/4/18
4. 聚焦：具有不同等电点的生物试样在电场力的作用下 迁移，分别到达满足其等电点pH的位置时，呈电中性，停止 移动，形成窄溶质带而相互分离；
5. 阳极端装稀磷酸溶液，阴极端装稀NaOH溶液； 6. 加压将毛细管内分离后的溶液推出经过检测器检测； 7. 电渗流在CIEF中不利，应消除或减小。
2020/4/18
capillary isotachophoresis ，CITP 3. 不同离子的淌度不同，所形成区带的电场强度不同
(ν=μE)，淌度大的离子区带电场强度小；
沿出口到进口，将不同区带依次排序1、2、3、4 电场强度依次增大。假设“2”号中离子扩散到“3”号， 该区电场强度大，离子被加速，返回到“2”区；当“2”号 中离子跑到“1”号区，离子被减速使之归队；
四、毛细管等电聚焦
capillary isoelectric focusing，CIEF 1. 根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术；
2. 毛细管内充有两性电解质（合成的具有不同等电点范 围的脂肪族多胺基多羧酸混合物），当施加直流电压（6～8V） 时，管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的pH梯度；
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分离类型
八种分离类型，介绍常用的几种； 根据试样性质不同，采用不同的分离类型； 每种机理的选择性不同；
2020/4/18
一、毛细管区带电泳
capillary zone electrophoresis ，CZE
带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流 出； 阴离子：两种效应的运动方向 相反；ν电渗流 >ν电泳时,阴离子在 负极最后流出,在这种情况下,不但 可以按类分离,同种类离子由于差 速迁移被相互分离。
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2. 电泳流和电渗流的方向相反，且ν电渗流 > ν电泳 ，
负电胶束以较慢的速度向负极移动； 3.中性分子在胶束相和溶液（水相）间分配，疏水性
强的组分与胶束结合的较牢，流出时间长； 4.可用来分离中性物质，扩展了高效毛细管电泳的应
用范围； 5.色谱与电泳分离模式
的结合。
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4. 特点：界面明显，富集、浓缩作用；
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六、毛细管电渗色谱
capillary electroosmostic chromatography ，CEC 在毛细管壁上键合或涂渍高效液相色谱的固定液，以电
渗流为流动相，试样组分在两相间的分配为分离机理的电动 色谱过程；
2020/4/18
第九章 高效毛细管电泳
分析法
high performance capillary electrophoresis,HPCE
第四节 高效毛细管电泳
分离模式
separate types of HPCE
一、毛细管区带电泳(CZE)
capillary zone electrophoresis
二、毛细管凝胶电泳(CZE)
2020/4/18
五、毛细管等速电泳
capillary isotachophoresis ，CITP 1. 将两种淌度差别很大的缓冲液分别作为前导离子(充满 毛细管)和尾随离子，试样离子的淌度全部位于两者之间， 并以同一速度移动。 2. 负离子分析时，前导电解质的淌度大于试样中所有负 离子的。所有试样都按前导离子的速度等速向阳极前进，逐 渐形成各自独立的区带而分离。阴极进样，阳极检测。
最基本、应用广的分离模式；
2020/4/18
二、毛细管凝胶电泳
capillary gel electrophoresis ，CGE
将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶。 其具有多孔性，类似分子筛的作用，试样分子按大小分 离。能够有效减小组分扩散，所得峰型尖锐，分离效率高。 蛋白质、DNA等的电荷/质量比与分子大小无关，CZE模 式很难分离，采用CGE能获得良好分离，DAN排序的重要手段。 特点：抗对流性好，散热性好，分离度极高。 无胶筛分技术：采用低粘度的线性聚合物溶液代替高粘 度交联聚丙烯酰胺。柱便宜、易制备。
capillary gel electrophoresis
三、胶束电动毛细管色谱
micelle electrokinetic capillary electrophoresis
四、毛细管等电聚焦(CIEF)
capillary isoelectric focusing
五、毛细管等速电泳
capillary isotachophoresis
3. 氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有关， 在酸性溶液中带正电荷，反之带负电荷。在其等电点时，呈 电中性，淌度为零；
2020/4/18
4. 聚焦：具有不同等电点的生物试样在电场力的作用下 迁移，分别到达满足其等电点pH的位置时，呈电中性，停止 移动，形成窄溶质带而相互分离；
5. 阳极端装稀磷酸溶液，阴极端装稀NaOH溶液； 6. 加压将毛细管内分离后的溶液推出经过检测器检测； 7. 电渗流在CIEF中不利，应消除或减小。
2020/4/18
capillary isotachophoresis ，CITP 3. 不同离子的淌度不同，所形成区带的电场强度不同
(ν=μE)，淌度大的离子区带电场强度小；
沿出口到进口，将不同区带依次排序1、2、3、4 电场强度依次增大。假设“2”号中离子扩散到“3”号， 该区电场强度大，离子被加速，返回到“2”区；当“2”号 中离子跑到“1”号区，离子被减速使之归队；