大小鼠眼眶取血方法附图)
小鼠摘除眼球采血及分离血清
小鼠摘除眼球采血及分离血清
一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器
二．步骤
1. 摘除眼球采血
（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意： 1. 采血前，可给小鼠喂点水； 2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血； 5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
实验小鼠眼眶静脉丛采血方法
实验小鼠眼眶静脉丛采血方法
优点：眼眶后静脉丛采血法方法简单，便于掌握。
血流较快，采血量多，能在较短时间内采约0.5mL血。
伤口较小，愈合较快。
成功率高，死亡率低。
缺点：不能避免组织液的混入，对于血样要求较高的研究应谨慎使用。
小鼠经气体麻醉后，左手拇指及食指压迫小鼠的颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静脉丛充血。
也可以将小鼠放置在侧卧位，拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌，将皮肤向后及向下拉。
抓握时要避免对气管施压，否则可能会影响小鼠呼吸。
将毛细采血管（建议采用0.5*100mm规格的毛细管，在使用前折成小段，每段大约3-4cm）置于内侧眼角处，并且以与鼻翼平面成30-45度沿内眦插入内眼角，滑入眼球后方，轻轻向眼底方向刺入。
当感到有阻力时即轻轻旋转采血管的同时施加压力以切开静脉丛，血液将通过毛细作用流入采血管。
不能刺地过深，一般2-3mm即可。
采血结束后，立即松开手指对小鼠的压迫，使眼球复位，同时将采血器拔出。
可用干棉球压住眼眶，确保止血。
一般眼眶静脉丛采血量可以达到0.2-0.3ml。
大小鼠眼眶取血方法(附图)课件
实验之后，外用消炎药涂布眼部
Page *
注射 一般 呈现 降低 趋势，给药后较短时间内采集的点数适当增加； 灌胃 存在Cmax-tmax，需通过考察tmax，根据一般原则，适当调整时间间隔。
取血 容量 时间 安排
选点一般原则
预实验建立
药物性质
给药途径
分布相 3-4个点
吸收相 3-4个点
吸收相 3-4个点
一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% （v/w）
每次0.25- 0.5 mL
容量 时间
Page *
6样品摇匀
1.将大鼠按压在鼠笼上，拇+中+食指固定住头部
3.右手持毛细管从眼内眦部，与鼠面成45 ℃夹角，旋转刺入
2.紧握颈部，压迫颈两侧，使眼突出，眶后静脉丛充血
Page *
血浆/全血（V/V） 前五点低于40%--后续60%
单击此处添加副标题
感谢您的欣赏
转载自网络，谢谢！
5去管止血
Step5.取血完成，立即除去颈部压力，将采血器拔出，按压止血
Step 5 A 当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。 B 尽量把眼睛周围的血渍搽干净，避免结块影响下次取血。
6样品摇匀
Step6.血样管轻轻混匀，防止凝血、溶血
Page *
大鼠眼眶取血流程
Page *
大鼠眼眶取血流程
Page *
大鼠眼眶取血流程
Page *
大鼠眼眶取血流程
Page *
Page *
大鼠眼眶取血流程
Page *
大鼠眼眶取血流程
Page *
大鼠眼眶取血流程
Page *
小鼠眼球取血技巧 根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流
小鼠眼球取血技巧小鼠摘除眼球采血及分离血清一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器二．步骤1. 摘除眼球采血（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意：1. 采血前，可给小鼠喂点水；2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血；5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
另附其他几种采血方法1）尾尖取血：当所需血量很少时采用本法。
固定动物并历出鼠尾，将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟，也可用二甲苯等化学药物涂擦，使局新血管扩张。
将鼠尾擦干，剪去尾尖，血自尾尖流出，让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。
如需间隔一定时间，多次采取鼠尾尖部血液，每次采血时，将鼠尾剪去很小一段，取血后，先用棉球压迫止血并立即用6％液体火棉胶涂于尾巴伤口处，使伤口外结一层火棉胶薄膜，保护伤口。
老鼠眼眶取血
.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。
右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3～4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm)，使采血器与鼠面成45℃的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
刺入浓度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm。
当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽。
若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。
若技术熟练，用本法短期内可重复采血均无多大困难。
左右两眼轮换更好。
体重20-25g 的小鼠每次可采血0.2-0.3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可适用于某些生物化学项目的检验。
小鼠取血方法
固定动物并露出鼠尾，将尾部侵入 45-50度温水中数分钟,小鼠取血方法主要有三类方法: 1、少量取血：鼠尾采血法使静脉充血，擦干，再用酒精棉球擦拭消毒。
剪掉尾尖约 用毛细管定量吸取尾血。
采血完毕用棉球压迫止血2、中等量取血：眼眶静脉丛采血 一一左手拇指及食指紧紧握住小鼠颈部，压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血，但用力要恰当，防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦 部以45度角刺入，刺入深度为 2-3mm 。
若遇阻力稍后调整角度后再刺入，如穿刺恰当，血 液能自然流入毛细管内。
得到血厚，即除去颈部压力，拔出毛细管，用干棉球压迫止血 3、大量采血：断头采血 一一用于动物实验结束后。
左手握住小鼠，右手持剪刀，快速剪掉 头颈部，倒立动物让血液滴入容器。
注意防止断毛落入剪脛取耻法：将材暑鼠较入深融也0^布養中，将試身瑕塩.竊卅厘巴•川洎精涂泡址曲 管扩帐r 剪《遲?;庇蜃曲瞳血卿盯流出，皿子轻轻地从尾根郛向尾次挤捏，吋取到一疋S 的血械U UllL 后，川柿刊斥迫止血-也可采用交眷切割厘静脉方肚联血.fDF 利7J 片在屁尖部切破一fitSiSVSS”诲脉 血即可流岀.母次刃収63〜0.5 ml,供一^^^^(1帯况宾验=三狠尽欝牀可普换切剖.d 厘瓷冋椒部切別. 由卜毆恤易题 需要仝血时，慚事先将抗礙剂直P 采血管中*如用MDlfa 泡恳减 则壷即与i 理赴K 混合.狼球后前献从审血注,左千持罷* ^fi/指与中指拥忤烦用应扶.侑捋按乐％部向下■阴滞押IB:冋甌倬 谨球石前聯風充虬喂球外如 右于品1斌卩索落被^^牠过的11制吸血益.从内毗部刺、消内N 関雌, 向眼球厉推进4-5 DIDI. 切开WA. Ibl.液n 初进入吸血计简，槿抽吸啊管〔EF 止負用用 迫甜脉M 柚拥血弟ffisft},拔出吸血比 放松手床力，出血可rm 梓止.也可用特制的破璃取Ik 管(管长？〜 10 cm,前關世成孔则智*内泾0. 1・=1, Smkh 长为1血 丘端管栓为0飞cJdr 此硬时可在同一刺孔型 見取『1"此袪也适用，暉鼠和專岛-0.2-0.3cm 。
大小鼠眼眶取血方法(附图)
• 介绍 • 眼眶取血方法 • 眼眶取血的优点与局限性 • 眼眶取血的实际应用 • 结论
01
介绍
眼眶取血的目的
01
眼眶取血是一种常用的动物实验 取血方法，主要用于获取鼠类的 血液样本。
02
通过眼眶取血可以检测和分析动 物血液中的各种成分，用于评估 药物效果、生理和病理状态等研 究。
对大小鼠眼眶取血的总结
眼眶取血是一种方便、快捷、对 动物损伤较小的采血方法，适用
于大小鼠等小型哺乳动物。
在进行眼眶取血时，应掌握正确 的操作技巧和注意事项，以确保
采血过程的安全和有效性。
眼眶取血可用于多种实验研究领 域，如药理学、毒理学、生理学
等，具有广泛的应用价值。
对未来研究的建议
进一步研究眼眶取血方法的最佳操作流程和注意 事项，以提高采血效率和动物福利。
优化实验设计 根据实验需求合理设计实验方案， 尽量减少对动物的损伤和实验误 差。
提高操作技巧 为提高取血的准确性和动物舒适 度，操作者应熟练掌握操作技巧， 尽量减少对动物的损伤和实验误 差。
注意动物凝血状况 对于凝血功能异常的动物，应避 免使用眼眶取血方法，以防止出 血不止或形成血肿。
04
眼眶取血的实际应用
适用于需要反复或连 续采血的实验场景。
02
眼眶取血方法
大小鼠眼眶取血步骤
固定动物
将大小鼠固定在装 置中，确保其舒适 且稳定。
采血
使用采血针从大小 鼠的眼眶静脉丛中 采集血液。
准备工具
准备大小鼠固定装 置、酒精棉球、采 血针等工具。
消毒
用酒精棉球对大小 鼠眼部周围进行消 毒。
注意事项
采血过程中要轻柔， 避免对动物造成伤 害。
小鼠眼眶静脉丛采血方法经验总结
小鼠眼眶静脉丛采血1、器材碘伏、1ml注射器或长颈(3～4cm)硬质玻璃管(毛细管内径0.5-1.0mm×100mm，对半折断)、5%葡萄糖注射液或生理盐水。
2、步骤先麻醉小鼠。
（可在采血前给予相应量5%葡萄糖注射液或生理盐水腹腔注射，这样可提高穿刺失血后小鼠的存活率）碘伏消毒眼周皮毛。
（必须等碘伏干后才可穿刺，否则会溶血）采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。
当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。
右手持注射器或玻璃管。
玻璃管平端先沿着鼻侧眼角慢慢滑动至眼球正下方的眼皮内，此时左手微微顺时针旋转，使小鼠头部相对位置微向右下偏转，即相当于玻璃管刺入时是对着口腔方向的（这样做可避免小鼠失明）。
从眼眶下端中间垂直于鼠面略斜向内眦方刺入，针头斜面先向眼球，当感到有阻力时即停止推进，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。
（刺入深度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm，不能插过深！）这个动作应稳且迅速。
一般情况下，即会有血液流出，若不行，则将针退出约0.1-0.5mm，若还不行，可快速拧搓毛细管，进一步破坏内眦静脉丛，加快出血速度。
（若血量还是不足或要不惜处死小鼠以尽可能多取血，可使臀部高于头部）如出血速度满意，最好计数出血小滴数目，一般25g左右的小鼠28小滴血（0.4毫升）的出血量不会危及小鼠生命。
当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，清洁棉球压迫眼部片刻，碘伏消毒眼部。
若要重复采血，可左右两眼轮换，同一动物可反复交替穿刺双眼多次。
（每次采血后需要3到4周才可采下一次）。
大小鼠眼眶取血方法(附图)课件
在实际操作中，需要注意压迫的力度和时间，以 免对动物造成不必要的损伤或影响实验结果。
采血后需要对动物进行适当的护理和观察，以确 保其健康和生存。
结论应用
眼眶取血方法适用于需要反复采血的 实验，如药物筛选、毒理学研究等。
需要注意的是，眼眶取血方法不适用 于需要大量采血的实验，如血液生理 研究等。
由于该方法对动物损伤小，因此在需 要长时间观察的实验中具有优势。
尽量快速地完成采血过程，以减少动物的不适感 。
观察动物状态
在采血过程中，要密切观察动物的状态，如出现 异常反应应及时停止操作。
操作注意事项
01
02
03
04
消毒措施
在操作前应确保所有工具和材 料都已经消毒，以减少感染的
风险。
动物福利
在采血过程中，要确保动物的 福利，避免对其造成不必要的
பைடு நூலகம்痛苦和应激。
避免损伤其他组织
眼眶取血针
专用的眼眶取血针，确保取血 准确、快速、方便。
试管
用于存放采集的血液样本，根 据需要选择不同规格的试管。
实验台和实验器具
实验台应保持清洁，准备好其 他必要的实验器具，如手术刀 、棉球等。
实验环境
清洁度
实验环境应保持清洁，定期进行消毒，确保无菌操 作。
温度和湿度
控制实验环境的温度和湿度，保持适宜的温湿度， 以减少对实验结果的影响。
光照
实验环境的光照应适度，避免过强或过弱的光照对 实验结果产生影响。
03
方法
操作步骤
准备工具与材料
准备大小鼠固定装置、消毒棉球、 眼科剪、眼科镊、试管、抗凝剂等 。
固定动物
将大小鼠置于固定装置中，确保其 舒适且稳定。
大鼠小鼠采血标准操作规程
目的规范实验人员进行大、小鼠采血的操作程序。
适用范围适用于需要对大、小鼠的采血操作。
职责.1 管理人员负责监督、管理；.2 实验动物中心技术员负责指导、教学；.3 实验人员选择合适的采血方法，并严格遵守本规程。
规程.1 大小鼠常用的采血方法有：眼眶静脉丛采血、剪尾采血、摘眼采血、心脏采血。
.2 眼眶静脉丛采血操作规程（如图）.2.1 采血前可按《大鼠小鼠麻醉标准操作规程》(CCAL-SY-SOP-24)将实验动物浅麻醉，但一般情况下不用。
.2.2 按抓取方法抓取实验动物，左手拇指、食指从背部较紧地握住实验动物的颈部（应防止动物窒息）。
.2.3 取血时，左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使头部静脉血液回流困难，眼球充分外突，眶静脉丛充血。
右手持长颈(3-4cm)硬质毛细玻璃管（内径 0.5-1.0mm），将采血管与面部成 45°的夹角，在泪腺区域内，用采血管由眼内角在眼睑和眼球之间向喉头方向刺入。
.2.4 刺入深度小鼠约为 2-3mm，大鼠约为 4-5mm，当达到蝶骨感到有阻力时，再稍后退 0.1-0.5mm，边退边抽。
.2.5 将采血管保持水平位，稍加旋转并后退吸引，由于血压的关系，血液回自动流入玻璃管中。
.2.6 得到所需的血量后，立即除去加于颈部的压力，同时拔出采血管。
为防止术后穿刺孔出血，用消毒纱布压迫眼球 30 秒。
.2.7 20-30g小鼠每次可采血0.2-0.3ml，200-300g大鼠每次可采血0.4-0.6ml 采血部位大约 3-7d 修复）。
.3 小鼠眼眶采血简易方法：用注射器针头代替毛细玻管，插入后挑起或压迫眼球，血液自动流出滴下。
.2 剪尾采血操作规程需血量较少时常用此法。
先将实验动物固定，将鼠尾浸在 45-50℃温水中浸泡数分钟或使用酒精棉球反复擦拭擦鼠尾，使尾部血管充盈，剪去尾尖1-2mm(小鼠)或 5-10mm(大鼠)，血自尾尖流出，让血液滴入盛器或直接使用吸管吸取。
小鼠眼眶采血的正确方法
小鼠眼眶采血的正确方法
小鼠眼眶采血是一种常用的实验动物采血方法，以下是正确的小鼠眼眶采血方法：
1. 术前准备：在采血前，要先给小鼠适当的麻醉，通常使用合适的麻醉剂，如异氟醚，在充分麻醉后，将小鼠放在一个舒适的采血台上。
2. 术中操作：用一只手轻轻地按住小鼠头部，小鼠的眼眶区域会突出一些，用另一只手用消过毒的棉签或纱布在眼眶区域上轻轻搽拭，以保持清洁。
3. 采血：使用专业的眼眶采血针或毛细管，将其插入到小鼠眼眶下方的眶隔内，稍微向后侧运动并慢慢吸取血液。
注意要控制好采血的力度和速度，以免对小鼠产生过多伤害。
4. 采血后处理：完成采血后，用消毒纱布或棉签在小鼠的采血点轻轻按压几秒钟，以避免出血。
然后将小鼠放回适当的饲养环境，等待其从麻醉中恢复。
需要注意的是，小鼠眼眶采血是一项技术要求较高的操作，需要经过专业培训并遵循相关的实验动物使用和操作规范，以确保采血的成功率和对小鼠的伤害最小化。
实验小鼠摘除眼球采血方法
实验小鼠摘除眼球采血方法
小鼠是科研实验中常用的实验动物，但由于其体积小，血管细，采血难度大，进而影响采血的质量，小编简要总结了实验小鼠摘除眼球采血方法，仅供参考：
用左手拇指、食指和中指抓取小鼠的颈部头皮，小指和无名指固定尾巴，轻压需要摘取的眼部皮肤，使眼球充血突出。
用眼科剪剪去小鼠的胡须，防止血从胡须处留下引起溶血。
用眼科弯镊夹取眼球并快速摘取，并使血液从眼眶内流入0.5mlEP管中。
待小鼠取血完毕后，断颈处死。
动物的采血方法
动物的采血方法动物的采血方法一、小鼠、大鼠的采血1.眼眶后静脉丛采血左手拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定，并轻轻压迫颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外凸。
右手持玻璃采血管，将其尖端插入内眼角与眼球之间，轻轻向眼底方向刺入，小鼠刺入2~3mm，大鼠刺入4~5mm，当感觉有阻力时即停止刺入，放置取血管以切开静脉丛，血流即流入取血管。
采血结束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。
本方法在短期内可重复采血。
小鼠一次可采血0.2~0.3ml，大鼠一次可采血0.5~1.01ml。
为防止血液在取血管中凝固，可将取血管进入1%肝素溶液，干燥后使用。
2.摘眼球采血此方法用于鼠类大量采血。
采血时，用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球凸出，右手用弯头镊子摘除眼球，眼眶内很快流出血液。
二、兔的采血1.耳中央动脉、耳沿静脉采血左手固定兔，并用酒精棉球消毒采血部位，右手持注射器，在兔耳血管的末端，沿着与血管平行的向心方向刺入血管，即可见血液流入针管，注意固定好针头。
采血结束后，拔出注射器，用棉球压迫止血2~3min。
2.颈静脉采血将兔麻醉后，仰卧在固定台上固定，剪去一侧颈部被毛，用碘酒、酒精棉球消毒皮肤，手术刀轻轻划破皮肤，钝性分离静脉，颈静脉暴露后，用注射器针头沿血管平行的远心方向刺入，采血结束后，拔出注射器，缝合切口。
三、狗的采血1.前、后肢皮下静脉血此方法一次可取较多的血，操作可参照相应的静脉注射。
如需采少量血。
则可用5.5号针头直接刺入静脉。
如需采一定量的血，最好用静脉滴注针头与注射器连接，以防狗挣扎时针头刺破血管。
2.股动脉采血将狗仰卧后固定，伸展后肢向外拉直，暴露腹股沟，在腹股沟三角区动脉搏动的部位剪去被毛，用碘酒、酒精消毒。
左手中指、食指探摸股动脉搏动部位并固定好血管，右手区静脉滴注针，针头由动脉搏动处慢慢刺入，当血液流入针头后的朔料管时，固定好针头，连接好注射器可抽到大量血液。
3.心脏采血将狗仰卧固定，前肢向背侧方向固定，暴露胸部，剪去左侧第3~5肋间的被毛，用碘酒、酒精消毒皮肤。
大小鼠各种采血方法与最大采血量
大小鼠各种采血方法与最大采血量1 剪尾采血小鼠每次采血量0.1ml，大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤，将鼠头朝下，鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟，使尾部血管充盈。
擦干尾部，再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm，用试管接流出的血液，同时自尾根部向尾尖按摩。
取血后用棉球压迫止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。
2 摘除眼球采血小鼠采血量0.6-1ml左手抓住小鼠颈部皮肤，轻压在实验台上，取侧卧位，左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压，使眼球突出。
用眼科弯镊迅速夹去眼球，将鼠倒立，用器皿接住流出的血液。
采血完毕立即用纱布压迫止血。
大鼠少用。
3 心脏采血小鼠采血量0.5-0.6ml，大鼠采血量1-1.5ml鼠仰卧位固定，剪去胸前区被毛，皮肤消毒后，用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处，右手持带有4-5号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺，当刺中心脏时，血液会自动进入注射器。
4 断头采血小鼠采血0.8-1.2ml，大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤，将鼠头朝下，右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5，让血液流入试管。
5 眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.3ml，大鼠采血量为0.4-0.6ml取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管，临用前折断成1～1.5cm长的毛细管段，浸入1％肝素溶液中，干燥后用。
取血时左手抓住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部，轻轻向下压迫颈部两侧，引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血，右手持毛细管由内眦部插入结膜，再轻轻向眼底部方向推进，轻轻旋转毛细管以划破静脉丛，让血液顺毛细管流出，接收入事先准备的容器中。
采血后纱布轻压眼部止血。
小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采取此法取血。
刺入深度小鼠为2-3mm，可采血0.2-0.3ml；大鼠为4-5mm，可采血0.4-0.6ml。
大小鼠眼眶取血方法附图演示文稿
取血时必须提前检查管的质量，标号分组， 适当多备。
Page 3
动物处理
动物 体重要求 一般 不低于250g 给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按 0.5-1.0%（V/W）给水
大鼠眼眶取血流程
Page 12
大鼠眼眶取血流程
Page 13
大鼠眼眶取血流程
Page 14
Page 15
大鼠眼眶取血流程
Page 16
大鼠眼眶取血流程
Page 17
大鼠眼眶取血流程
Page 18
大鼠眼眶取血流程
Page 19
大鼠眼眶取血流程
Page 20
大鼠眼眶取血流程
Page 21
Page 9
大鼠眼眶取血流程
4固定采血
Step4.固定身体，压住 后肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
Step 4
A 一般血流速度快，证明插破了眼眶动脉， 如果血流速度慢，证明要调整毛细管的位置， 血液都流到组织中了，没顺毛细管流出来；
B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔 毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深或 浅的挑正一下 血会重新流出；
大小鼠眼眶取血方法附图演示文稿
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
环境 材料
A 通风台面 B 毛细管 C 抗凝EP管 D 计时工具
长时间操作，透气通风 宽敞台面，便于多组多步骤同时操作
小鼠眼球取血技巧 根据需要捻动拇指与食指的方向,使血液从眼眶内以不同速度垂直流
小鼠眼球取血技巧小鼠摘除眼球采血及分离血清一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器二．步骤1. 摘除眼球采血（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意：1. 采血前，可给小鼠喂点水；2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血；5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
另附其他几种采血方法1）尾尖取血：当所需血量很少时采用本法。
固定动物并历出鼠尾，将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟，也可用二甲苯等化学药物涂擦，使局新血管扩张。
将鼠尾擦干，剪去尾尖，血自尾尖流出，让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。
如需间隔一定时间，多次采取鼠尾尖部血液，每次采血时，将鼠尾剪去很小一段，取血后，先用棉球压迫止血并立即用6％液体火棉胶涂于尾巴伤口处，使伤口外结一层火棉胶薄膜，保护伤口。
小鼠摘除眼球采血及分离血清
小鼠摘除眼球采血及分离血清
一．器材离心管，弯头镊子，离心机，移液器
二．步骤
1. 摘除眼球采血
（1）左手拇、食指抓取小鼠双耳及颈后皮肤，小指固定尾部；（2）中指将小鼠左侧前肢轻压在胸骨心脏部位，无名指按在腹部，捻动拇指，轻压取血侧眼部皮肤，使眼球充血突出；（3）用弯头镊夹取眼球；（4）根据需要捻动拇指与食指的方向，使血液从眼眶内以不同速度垂直流入离心管；（5）同时用左手中指轻按小鼠心脏部位，以加快心脏泵血速度；（6）当血液流尽时，用脱臼法处死小鼠。
2. 分离血清（1）将离心管中的血置37℃温箱或水浴1小时，也可室温2小时；（2）再置4℃冰箱内3～4小时或过夜；（3）待血液凝固血块收缩后，4000rpm离心10分钟；（4）取上清于干净的离心管中，保存于-20℃，或加入防腐剂(0.01％硫柳汞或0.02％叠氮钠)，置4℃冰箱中保存备用。
三．注意： 1. 采血前，可给小鼠喂点水； 2. 摘眼球采血取血量能达0.8～1.2ml，但老年和疾病小鼠血量会降低；3. 采血场所有充足的光线；室温夏季保持在25～28℃，冬季，15～20℃为宜；4. 防止血液浸入眼部周围毛发，否则会造成污染和溶血； 5. 按压心脏时，用力一定要适度，若用力过度，一是会造成动物采血中途死亡，使采血不完全，二是有可能引起溶血现象发生，影响实验结果；6. 采血用的器材和试管必须保持清洁干燥；7. 采血时要防止小鼠挣扎，否则会损失比较多的血样；8. 血液凝固后不宜在4℃放置过久，否则会溶血。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
C 不要使用管的尖锐锋利端插入， 易留玻璃碎片在眼内，造成持续伤害， 使得下次反抗增加；
D 拿管的手要保持干净，带血渍的 手指不要接触管的两端，易造成凝血， 可用醇水擦洗。
Page 9
大鼠眼眶取血流程
4固定采血
Step2 A 可用管试探性触碰眼球是否已经 突出； B 此时大鼠反抗挣扎最厉害，保证 抓紧的同时，不能太过，使其窒息死亡。
Page 8
大鼠眼眶取血流程
3旋转刺入
Step3.眼内眦部， 45 ℃夹角，旋转刺 入，旋转退出。
Step3 A 针头斜面先向眼球，刺入后再转
一定角度使斜面对着眼眶后界； B 刺入深度，小鼠约2-3mm，大鼠
大小鼠眼眶取血方法交流（附 图）
2014-5-5
交流提纲
实验环境 实验材料
具体操作
动物处理
大鼠 PK 取血
血样处理
.
取血容量 时间安排
问题讨论
环境 材料
A 通风台面 B 毛细管 C 抗凝EP管 D 计时工具
长时间操作，透气通风 宽敞台面，便于多组多步骤同时操作
0.9mm × 100mm，看个人习惯使用， 经常一管三断，30mm/管，弃去中间段。
5.取血完成，立即除 去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血。
1左手保定 2压迫颈部 3旋转刺入 4固定采血 5去管止血 6样品摇匀
2.紧握颈部，压迫颈 两侧，使眼突出，眶 后静脉丛充血
4.固定身体，压住后 肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
6血样管轻轻混匀， 防止凝血、溶血。
大鼠眼眶取血流程
1左手保定
药物性质
预实验建立
给药途径
注射 一般 呈现 降低 趋势，给药后较短时间内采集的点数适当增加； 灌胃 存在Cmax-tmax，需通过考察tmax，根据一般原则，适当调整时间间隔。
Page 5
大鼠眼眶取血流程
1.将大鼠按压在鼠 笼上，拇+中+食指 固定住头部
3.右手持毛细管从眼 内眦部，与鼠面成45 ℃夹角，旋转刺入
Step4.固定身体，压住 后肢，放松手指，调整 毛细管，流畅出血。
Step 4
A 一般血流速度快，证明插破了眼眶动脉， 如果血流速度慢，证明要调整毛细管的位置， 血液都流到组织中了，没顺毛细管流出来；
B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔 毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深 或浅的挑正一下 血会重新流出；
5去管止血
Step5.取血完成，立即 除去颈部压力，将采血 器拔出，按压止血
Step 5 A 当得到所需的血量后，即
除去加于颈部的压力，同时，将 采血器拔出，以防止术后穿刺孔 出血。
B 尽量把眼睛周围的血渍搽 干净，避免结块影响下次取血。
6样品摇匀 Step6.血样管轻轻混匀， 防止凝血、溶血
Page 11
Step1.将大鼠按压 在鼠笼上，拇+中+ 食指固定住头部
Step 1 A 建议笼子内放置重物 防止摇晃； B 一定要带手套； C 开始必须牢牢固定住头部 头部 乱动，扎位置容易得偏离，且易被咬伤； D 可在此时将大鼠取血侧的胡须剪 掉，防止接触凝血。
Page 7
大鼠眼眶取血流程
2压迫颈部
Step2.紧握颈部，压迫 颈两侧，使眼突出，眶 后静脉丛充血
Page 22
转载自网络，谢谢！
C 如看见血液已经在毛细管中凝固 必须迅 速拔除ຫໍສະໝຸດ 细管，再搽干净眼睛，重新换管扎针；
D 等到出血后 将力道转移到大鼠的身体上 大鼠出现乱动的情况很大的一部分力是他的后 肢使出来的 保证她的后肢无法乱蹬就能很好 的保定大鼠，然后将中指和食指处解除一半的 力道，可以保证血液的顺畅
Page 10
大鼠眼眶取血流程
大鼠眼眶取血流程
Page 12
大鼠眼眶取血流程
Page 13
大鼠眼眶取血流程
Page 14
Page 15
大鼠眼眶取血流程
Page 16
大鼠眼眶取血流程
Page 17
大鼠眼眶取血流程
Page 18
大鼠眼眶取血流程
Page 19
大鼠眼眶取血流程
Page 20
大鼠眼眶取血流程
Page 21
血样处理
血样处理
血清 不抗凝
A全血37℃ 水浴0.5~1h，
B全血 室温静置 0.5-1h，
低温冰箱 过夜）
离心，取上清液， 低温保存
短时间内 （< 30 min）
血浆 肝素钠抗凝
低速（< 4000） 离心（10min）
血浆/全血（V/V） 前五点低于40%--后续60%
离心，取上清液， 低温保存
EP 管 加入0.1% 肝素钠 （＞150U/mg） 0.1 mL，均匀润湿， 50℃以下干燥； 适用 1mL 全血的抗凝，效果良好。
取血时必须提前检查管的质量，标号分组， 适当多备。
Page 3
动物处理
动物 体重要求 一般 不低于250g 给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按 0.5-1.0%（V/W）给水
实验期间 ，补充体液 ，目前常规为：取血后灌胃给予 等统计生理盐水/葡萄糖溶液。
实验之后，外用消炎药涂布眼部
Page 4
容量 时间
取血 容量 时间 安排
选点一般原则
吸收相 3-4个点 吸收相 3-4个点 分布相 3-4个点
一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% （v/w）
每次0.25- 0.5 mL