【参考借鉴】生物化学实验.docx
生物化学实验
生物化学实验指导书蛋白质浓度测定（Foin-酚试剂法）一、实验目的:熟悉并掌握Folin-酚法测定蛋白质浓度的原理和方法。
二、实验原理蛋白质或（多肽）分子在含有酪氨酸或色氨酸，能与Folin- 起氧化还原反应，生成合物，蓝色的深浅与蛋白质浓度成正比，可用比色法测定蛋白质浓度。
此法也适用酪氨酸或色氨酸的定量测定。
三、仪器、原料和试剂（1）仪器：可见分光光度计（2）试剂：Folin-酚试剂A：将1g 碳酸钠溶于L 0.1mol/L氢氧化钠溶液。
另将0.5g CuSO4•5H2O溶于 L 1%酒石酸钾（或酒石酸钠）溶液。
将前者与硫酸铜-酒石酸钾1mL混合，混合后的溶液1日内有效。
Folin-酚试剂B：在1.5L容积的磨口回流瓶中加入100g钨酸钠（Na2WO4•2H2O），（Na2MoO4•2H2O），及700m L 85%磷酸，L浓盐酸充分混合，烧瓶内加小玻璃珠数颗，以防溶液溢出，接上回流冷凝管以文火回流10h。
回流结束后，加入150g硫酸锂（LiSO4），L蒸馏水及数滴液溴，开口继续沸腾15min，以除去多余的溴。
冷却后溶液呈金黄色（如果仍呈绿色，须再重复的步骤），定容至1L，过滤，滤液置棕色瓶中保存，可在冰箱长期保存。
若此贮存液使用过久，颜色由可加几滴液溴，煮沸数分钟，恢复原色仍可继续使用。
使用时用标准NaOH滴定酸度，以酚酞为指示剂。
该试剂的酸度应为2mol/L左右，将之稀释至相当于1mol/L酸度使用，即为Folin-酚试剂。
酪蛋（0.5%）。
四、实验步骤（1）蛋白浓度标准曲线制作取7支干净试管，分两组按表1顺序加入试剂。
混匀，室温放置10min，各管再加Folin-酚试剂B 0.5mL，30min后比色（500nm），以标准蛋白量为横坐标，吸光值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。
表1 Folin-酚法测定蛋白质浓度——标准曲线的制作管号0123456试剂酪蛋白00.050.10.20.30.40.5蒸馏水(mL)0.50.450.40.30.20.10 Folin- 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0（2）样液测定准确吸取样液0.5mL置干净试管内，加入4mL Folin-酚试剂A，10min后，再加试剂B 0.5mL，30min后比色（500nm），对照标准曲线求出样液蛋白质浓度。
生物化学实验报告（共2篇）
生物化学实验报告（共2篇）篇一：生物化学实验报告2012年生物化学实验b姓名：学号：实验时间：实验分组：组内成员：任课教师：实验报告xxxx 2012年11月17日摘要1. 实验部分1.1试剂与仪器1.试剂：（2）1 mol/l 醋酸，1 mol/l naoh，硫酸铵。
（3）平衡缓冲液：0.01 mol/l tris-hcl，ph 8.0。
（5）酶的底物溶液：用底物缓冲液配制15×10-3 mol/l 对硝基苯磷酸二钠溶液。
（7）分离胶缓冲液：1.5 mol/l tris-hcl缓冲液，ph 8.8，已加入10% sds。
（8）浓缩胶缓冲液：0.5 mol/l tris-hcl缓冲液，ph 6.8，已加入10% sds。
（13）脱色液：500 ml 10%甲醇和10%冰醋酸的脱色液1000 ml。
匀浆机、eppebdorf5型冷冻离心机、gsy—2型恒温水浴、uv762型紫外可见分光光度计。
1.2 小牛肠碱性磷酸酶提取方法2）将小肠粘膜液集中倒入匀浆机中，加冰冷蒸馏水，高速匀浆，重复多次。
3）缓慢加入冰冷正丁醇高速匀浆重复多次。
在4℃，10000 rpm条件下离心。
4）用滤布过滤去除杂质，倒入分液漏斗中，静止分层，取下层水相，用hac溶液调ph到4.9。
5）得到上清后放入离心管中，用naoh溶液调ph至6.5，称取硫酸铵加到离心管中溶解；再加冰冷丙酮，混匀，4℃静置30 min以上。
6）上清液中加入冰冷丙酮，4℃放置30 min以上。
4℃，10000 rpm，离心。
7）取沉淀溶于平衡缓冲液至全部溶解至冰箱保存待用。
1.3 小牛肠碱性磷酸酶酶活检测方法2）紫外分光光度计检测条件为405 nm波长，测定时间60 s，取值2 s，记录范围0.0-1.5。
上下倒2次，放回分光光度计中，测定酶动力学曲线1.4 聚丙烯凝胶制备分离胶制备（浓度10%，制备量10 ml）试剂用量 h2o30% 丙烯酰胺1.5 mol/l tris-hcl缓冲液ph 8.810% 过硫酸铵temed4.1 ml 3.4 ml 2.4 ml 100 μl 10 μl浓缩胶制备（浓度5%，制备量6 ml）试剂 h2o30% 丙烯酰胺0.5 mol/l tris-hcl缓冲液ph 6.810% 过硫酸铵temed用量3.4 ml 1.0 ml 1.5 ml 60 μl 8 μl1.5 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量3）各取100 μl加入到5 ml考马斯亮蓝试管中，混匀，反应5 min以上。
生物化学实验报告范例
生物化学实验报告范例
实验目的
本次实验的目的是研究生物化学中的某一特定现象/理论/反应。
实验原理
在这一部分，我们对本次实验所涉及的生物化学理论或原理进
行介绍。
这有助于读者了解实验的背景和相关知识。
实验材料
列出本次实验所用到的材料和试剂，包括其名称、规格、供应
商等信息。
实验步骤
详细描述实验的操作步骤，包括使用的仪器和试剂的准备，以
及各个步骤的操作方法。
实验结果
将实验过程中所得的数据和观察结果进行记录。
可以使用表格、图表或文字描述的形式展示实验结果。
数据分析与讨论
对实验结果进行分析和讨论，解释实验所得结果与理论之间的
关系。
如果有多组数据进行比较，可以使用统计方法进行数据的处
理和分析。
结论
总结本次实验的结果和主要发现，给出一个简明扼要的结论。
实验总结
针对本次实验，总结实验的优点和不足之处，提出改进的建议。
同时，还可以对进一步研究的方向提出一些建议。
参考文献
列举实验中所涉及的参考文献，包括教科书、期刊论文等。
确
保引用的内容是可靠和可确认的。
附录
如果有需要的话，将实验中的详细数据、图表、记录表格等附
在文档的末尾。
致谢
感谢在实验中提供帮助的老师、同学以及其他相关人员，在这一部分对他们表示感谢。
以上是一份生物化学实验报告的范例。
根据实际情况，可以适度增加和调整各个部分的内容。
生物化学实验(整理版)
生物化学实验（整理版）一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能，提高实验技能。
3. 培养科学探究能力，提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作：了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项：严格按照实验步骤进行操作，注意实验安全，保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式：包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
2. 实验报告的要求：内容完整、条理清晰、数据准确、分析深入、讨论充分、结论明确。
五、实验拓展1. 结合实验内容，查阅相关文献，了解生物化学领域的最新研究进展。
2. 尝试设计新的实验方案，对生物化学现象进行深入探究。
3. 参加学术讲座、研讨会等活动，拓宽生物化学知识面。
生物化学实验（整理版）一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
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生物化学实验报告格式范文
生物化学实验报告格式范文
生物化学实验报告格式范文主要包括以下几个部分：实验名称、实验目的、实验原理、实验材料与试剂、实验过程、实验结果与分析、结论。
下面是一个具体的实验报告范例：
实验名称：蛋白质的提取与分离
实验目的：掌握蛋白质的提取与分离方法，了解蛋白质纯化的过程。
实验原理：蛋白质是生物体内重要的功能分子，其提取与分离在生物研究和应用中具有重要意义。
本实验通过盐析、透析等方法对蛋白质进行提取，然后利用凝胶色谱技术对蛋白质进行分离纯化。
实验材料与试剂：蛋白质溶液、盐析剂、透析袋、凝胶色谱柱、缓冲液、标签试剂等。
实验过程：
1.蛋白质的提取：将蛋白质溶液与盐析剂混合，静置后收集上清液，进行透析，得到纯化的蛋白质溶液。
2.蛋白质的分离：将纯化的蛋白质溶液上样到凝胶色谱柱，用缓冲液洗脱，收集目标蛋白质峰。
3.蛋白质的鉴定：对分离得到的蛋白质进行SDS-PAGE电泳，然后转移到膜上进行Western Blot分析，验证蛋白质的分离效果。
实验结果与分析：
1.SDS-PAGE电泳结果显示，提取的蛋白质分子量与理论值相符。
2.Western Blot分析结果显示，分离纯化的蛋白质能够与对应的抗体特异性结合，说明分离效果良好。
结论：通过本实验，我们成功提取并分离了蛋白质，掌握了蛋白质纯化的基本方法。
实验结果表明，盐析、透析和凝胶色谱技术等方法可以有效地用于蛋白质的提取与分离。
生物化学实验
生物化学实验实验一、考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白质含量【实验目的】学习、掌握考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理和方法。
【实验原理】考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合则呈现蓝色。
染料的最大吸收从465nm变为595nm，蛋白质－染料复合物在595nm具有很大的光吸收值，蛋白质测定的灵敏度较高，最低检出量为1ug蛋白质。
本方法操作简便快捷，灵敏度高，测定范围1-1000ug。
【实验材料、仪器及试剂】1．材料：新鲜的植物材料2．仪器：722分光光度计，天平，离心机，研钵，容量瓶，试管，移液管，漏斗（1）标准牛血清蛋白质溶液：0.1mg/ml （2）考马斯亮蓝G-250溶液：【实验步骤】1．样品的提取：准确称取鲜样2克，用2ml蒸馏水在冰浴中研成匀浆，转移到25ml 容量瓶中并定容。
在8000rpm冷冻离心10min，取上清液待测。
2．标准曲线的绘制：取8支具塞试管，按表1加入试剂。
表1-1不同蛋白质含量的牛血清蛋白质液配制表试剂标准蛋白质溶液（ml）样品提取液（ml）蒸馏水量（ml） G-250试剂（ml）蛋白质含量（ug） 595nm吸光值将上面8支试管摇匀，放置5分钟后，用1cm光径比色杯在595nm下比色，记录吸光值，以蛋白质浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标绘制标准曲线。
根据样品吸光值在标准曲线查得蛋白质含量。
【结果计算】C × VT样品中蛋白质含量（ug/g.FW）＝VS×WF×1000式中： C为查标准曲线值（ug）； VT 为提取液总体积（ml）；管号 1 0 0 1.0 5 0 2 0.2 0 0.8 5 20 3 0.4 0 0.6 5 40 4 0.6 0 0.4 5 60 5 0.8 0 0.2 5 80 6 1.0 0 0 5 100 7 0 0.2 0.8 5 x 8 0 0.2 0.8 5 x VS 为测定时加样量（ml）； WF为样品鲜重（g）。
茶叶生物化学(含实验)DOCX(一)2024
茶叶生物化学(含实验)DOCX（一）茶叶生物化学 (含实验)引言概述茶叶是一种被广泛饮用的饮品，也是中国传统文化中的重要组成部分。
茶叶中含有丰富的生物化学成分，这些成分不仅赋予了茶叶独特的香气和口感，还对人体健康具有一定的益处。
本文将对茶叶的生物化学成分进行探讨，并介绍与茶叶相关的实验。
一、茶叶中的多酚类化合物茶叶中含有丰富的多酚类化合物，包括儿茶素、黄酮类化合物和茶多酚等。
这些化合物具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤和降低心血管疾病风险等生物活性。
1. 儿茶素 1.1 儿茶素的分类 1.2 儿茶素对人体健康的影响 1.3 儿茶素的提取方法2. 黄酮类化合物 2.1 黄酮类化合物的种类和分布 2.2 黄酮类化合物的生物活性 2.3 黄酮类化合物的检测方法3. 茶多酚 3.1 茶多酚的种类和含量 3.2 茶多酚的生物活性 3.3 茶多酚的提取和分离方法二、茶叶中的咖啡因咖啡因是茶叶中的重要成分之一，具有兴奋神经系统、提神醒脑的作用。
了解茶叶中咖啡因的含量及其释放规律对于合理饮用茶叶具有重要意义。
1. 咖啡因的含量测定 1.1 咖啡因的提取方法 1.2 咖啡因的定量分析方法2. 咖啡因的释放规律 2.1 不同种类茶叶中咖啡因的释放规律 2.2 咖啡因在体内的代谢过程 2.3 咖啡因对人体的影响三、茶叶中的氨基酸氨基酸是茶叶中的重要组成部分，不仅赋予了茶叶特有的香气和口感，还对茶叶的品质具有重要影响。
1. 主要氨基酸类别 1.1 茶叶中常见的氨基酸 1.2 氨基酸在茶叶中的作用2. 氨基酸的分析与检测 2.1 氨基酸的提取方法 2.2 氨基酸的定量分析方法四、茶叶中的挥发性成分茶叶的香气来自于其中存在的挥发性成分，这些成分不仅赋予了茶叶特有的芳香，还对人体健康具有一定的影响。
1. 主要挥发性成分 1.1 茶叶中常见的挥发性成分 1.2 挥发性成分与茶叶的香气关系2. 挥发性成分的分析与检测 2.1 挥发性成分的提取方法 2.2 挥发性成分的定性和定量分析方法五、茶叶的发酵过程及影响因素茶叶的发酵过程是指茶叶中的一些化学成分在微生物和酶的作用下发生变化的过程，这个过程对茶叶的品质和风味具有重要的影响。
生物化学实践报告(2篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在通过生物化学实验，加深对生物大分子结构和功能的理解，掌握蛋白质、核酸等生物大分子的提取、分离和鉴定方法，并学会使用相应的实验技术和仪器。
二、实验原理1. 蛋白质的提取与鉴定：蛋白质是生命活动中的重要物质，其提取和鉴定是生物化学研究的重要内容。
本实验通过蛋白质的盐析、电泳等方法，实现对蛋白质的提取和鉴定。
2. 核酸的提取与鉴定：核酸是生物遗传信息的携带者，其提取和鉴定对于研究生物遗传具有重要意义。
本实验通过酚-氯仿法提取DNA，通过比色法测定DNA的浓度。
3. 酶的活性测定：酶是生物体内催化反应的催化剂，其活性测定是研究酶的重要方法。
本实验通过测定酶促反应速率，计算酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜动物组织、化学试剂、缓冲液、电泳凝胶等。
2. 仪器：高速离心机、电泳仪、分光光度计、显微镜等。
四、实验步骤1. 蛋白质的提取与鉴定（1）取一定量新鲜动物组织，加入适量缓冲液，研磨。
（2）将研磨液离心，取上清液即为蛋白质提取液。
（3）将蛋白质提取液加入等体积的95%乙醇，混匀，静置。
（4）取沉淀，用少量双蒸水洗涤，干燥，溶解于适量双蒸水中。
（5）将蛋白质溶液进行SDS-PAGE电泳，观察蛋白质条带。
2. 核酸的提取与鉴定（1）取一定量新鲜动物组织，加入适量缓冲液，研磨。
（2）将研磨液加入等体积的酚-氯仿，混匀，静置。
（3）取上清液，加入等体积的异丙醇，混匀，静置。
（4）取沉淀，用少量双蒸水洗涤，干燥，溶解于适量双蒸水中。
（5）用分光光度计测定DNA的浓度。
3. 酶的活性测定（1）配制底物溶液。
（2）将底物溶液加入酶溶液，记录反应速率。
（3）根据反应速率计算酶的活性。
五、实验结果与分析1. 蛋白质的提取与鉴定：通过SDS-PAGE电泳，成功分离出多条蛋白质条带，表明实验中成功提取了蛋白质。
2. 核酸的提取与鉴定：通过比色法测定，成功提取出DNA，浓度为0.5μg/μL。
生化实验报告格式范文(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握实验原理和方法。
2. 学会使用实验仪器和试剂。
3. 通过实验，加深对生物化学知识的理解。
二、实验原理（在此处简要介绍实验原理，包括反应机理、反应条件等。
）三、实验材料与仪器1. 实验材料- 样品：待测物质- 试剂：各种试剂名称及浓度- 试剂配制方法：详细说明各试剂的配制过程2. 实验仪器- 仪器名称：仪器名称- 仪器型号：仪器型号- 仪器功能：简要介绍仪器功能四、实验步骤1. 准备阶段- 样品处理：说明样品处理方法，如提取、纯化等。
- 试剂准备：按照试剂配制方法配制各种试剂。
2. 实验操作- 步骤一：详细描述实验步骤，包括试剂加入顺序、反应条件、观察现象等。
- 步骤二：按照步骤一的方法进行操作，记录观察到的现象。
3. 数据处理- 根据实验结果，进行数据处理，如计算、绘图等。
五、实验结果与分析1. 实验结果- 列出实验数据，如反应速率、浓度等。
- 以表格、图表等形式展示实验结果。
2. 结果分析- 分析实验结果，解释现象产生的原因。
- 讨论实验误差的来源。
六、实验讨论1. 实验现象- 分析实验现象，解释反应机理。
2. 实验误差- 分析实验误差的来源，提出改进措施。
3. 实验结论- 总结实验结论，说明实验结果的意义。
七、实验报告1. 报告格式- 标题：实验报告标题- 作者：姓名、学号、班级- 指导教师：姓名- 实验日期2. 报告内容- 按照实验报告格式，将实验目的、原理、材料、步骤、结果与分析、讨论等内容依次列出。
八、附录1. 试剂配制方法- 详细列出各种试剂的配制方法。
2. 实验数据- 列出实验数据，如反应速率、浓度等。
3. 参考文献- 列出实验过程中参考的文献。
九、注意事项1. 实验过程中应注意安全，遵守实验操作规程。
2. 实验数据应真实、准确，不得篡改。
3. 实验报告应规范、完整，字迹清晰。
十、实验总结1. 总结实验过程中遇到的问题和解决方法。
2. 提出改进实验的建议。
生物化学实验报告_2
生物化学实验报告
蛋白质的定量测定
第四组
2015.10.15
姓名: XXX
学号: XXXXXXXX
学院: XXXXXXXXXXXXX 班级: XXXXXXXXX
蛋白质的定量测定（BCA试剂盒法）
一、实验内容: 蛋白质的定量测定
二、实验目的: 求知蛋白液浓度
三、实验器材: 96孔板、微版比色仪、酶标仪、定量移液器及吸头、离心管、H2O、WR、不同浓度的BSA标准品。
四、实验步骤
配制不同浓度蛋白标准品:
1、配制工作液
（标准品6个+空白1+待测1）·平行孔2个·200ul=3200ul
取10ml离心管1个
BCA Reagent 5ml
Cu Reagent 100ul
2、预温烘箱40℃
3、40℃30min（盖盖孵育, 以免蒸发）, 放至常温后, 570nm读数
4、标准曲线绘制（Excel表）
五、实验结果
溶液吸光度和浓度呈正比关系, 待测样品吸光度平均值为X=0.415, 则Y=413.40得出待测样品蛋白浓度为413.40ug/ml。
生物化学实验3篇
生物化学实验第一篇：分离和纯化酶酶是一种具有催化作用的蛋白质，在生物化学研究中具有重要意义。
为了研究酶的性质和机制，需要对酶进行分离和纯化。
一、酶的分离方法1.分离基于酶的物理性质的方法，包括沉淀法、沉降法、过滤法和电泳法等。
2.基于酶的化学性质进行分离的方法，包括离子交换色谱法、凝胶过滤法、亲和层析法和扩散法等。
二、酶的纯化方法酶纯化的目的是通过不同的技术方法消除干扰因素，获得特异性高和纯度高的酶。
酶纯化一般通过以下步骤完成：1.初步分离：选择一种合适的分离方法（如沉淀法、凝胶过滤法或离子交换色谱法等），使酶从细胞或组织中分离出来。
2.活性测定：确定所分离出的物质是否为酶。
3.酶的纯化：经过不断的纯化步骤（如扩散法、凝胶层析法、电泳法、亲和层析法等），获得特异性高和纯度高的酶。
4.酶的结构与功能分析：对纯化后的酶进行结构与功能分析，探索其催化机理和调控机制。
三、酶的应用酶在生命科学和工业生产中应用广泛，主要应用包括：1.生命科学领域：用于疾病诊断、药物设计、基因工程、蛋白质工程和代谢组学等研究。
2.工业生产领域：用于食品加工、医药生产、纺织印染、制浆造纸、环境治理和能源生产等领域。
总之，酶的分离和纯化为酶的结构与功能分析和应用提供了基础。
随着生命科学和工业生产的不断发展，酶的应用前景日益广阔。
第二篇：酶催化反应酶是一种生物催化剂，能够加速生物化学反应，提高反应速率和效率。
酶催化反应的基本原理是：酶与底物结合，形成酶底物复合物，通过降低反应的活化能，促进反应速率，使底物转化成产物，最终释放出酶和产物。
具体而言，酶催化反应通常包括以下步骤：1.酶与底物的结合：酶与底物之间形成酶底物复合物，通常通过酶和底物之间的亲和性实现。
2.转化过渡态形成：酶催化的反应需要一定的能量（活化能）才能进行。
酶通过与底物结合，改变底物的构象，使底物转化成具有更高自由能的过渡态。
3.过渡态降解：在过渡态中，酶通过结构变化（催化中心的变化）降低了催化反应的活化能，促进了底物的转化，并释放出产物和酶。
生物化学实验报告
实验一糖类的性质实验（一）糖类的颜色反应一、实验目的1、了解糖类某些颜色反应的原理。
2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。
二、颜色反应（一）α-萘酚反应1、原理糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100 mL，贮于棕色瓶内。
用前配制。
1％葡萄糖溶液100 mL1％果糖溶液100 mL1％蔗糖溶液100 mL1％淀粉溶液100 mL0.1％糠醛溶液100 mL浓硫酸 500 mL4、实验操作取5支试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、0.1％糠醛溶液各1 mL。
再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂，充分混合。
倾斜试管，小心地沿试管壁加入浓硫酸1 mL，慢慢立起试管，切勿摇动。
观察记录各管颜色。
（二）间苯二酚反应1、原理在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反应是酮醣的特异反应。
醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反应。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂塞氏试剂：0.05％间苯二酚－盐酸溶液1000 mL，称取间苯二酚0.05 g溶于30 mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000 mL。
1％葡萄糖溶液100 mL1％果糖溶液100 mL1％蔗糖溶液100 mL4、实验操作取3试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5 mL。
再向3支试管中各加入塞氏试剂5 mL，充分混合。
将试管同时放入沸水浴中，。
观察记录各管颜色。
(二)糖类的还原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的还原性质；2、学习常用的鉴定糖类还原性的方法。
生物化学实验报告参考模板
实验一考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质的含量（p24）一、目的要求掌握考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）法测定蛋白质含量原理和方法。
二、实验原理考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质─染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。
这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。
这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。
考马斯亮兰G-250染料在酸性溶液中为棕红色，当它与蛋白质通过范德华键结合后，变为蓝色。
在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰（lmax）的位置，由465nm变为595nm。
且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律，通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。
研究发现，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。
考马斯亮蓝染色法的突出优点是：（1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。
这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。
（2）测定快速、简便，只需加一种试剂。
完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。
由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。
因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。
（3）干扰物质少。
如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。
此法的缺点是：（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此考马斯亮蓝染色法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。
（2）仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）等。
生物化学实验
【实验试剂和器材】
（一）试剂
1. 标准蛋白溶液: (1) Lowry 法：配置成 250μg / ml 的蛋白溶液。（2）考马斯亮蓝 法：配置成 100μg / ml 的蛋白溶液。以上蛋白溶液均可用生理盐水配制。
4
然蛋白质的性质，若减低盐的浓度时，还能溶解。
沉淀不同的蛋白质所需中性盐的浓度、种类不同，所以在不同条件下，采用不同浓 度的盐类可将各种蛋白质从混合溶液中分别沉淀析出，这种方法称为蛋白质的分级盐 析。它在酶的生产和制备等工作中被广泛应用。
2. 不可逆的沉淀反应
在发生沉淀反应时，蛋白质的分子内部结构，空间构象遭到破坏，失去其天然蛋白 质的性质，这时蛋白质已发生变性。变性后的蛋白质沉淀不能再溶解于原来的溶液中， 这种沉淀反应称为不可逆沉淀反应。重金属盐、生物碱试剂、过酸、过碱、加热、震荡、 超生波、有机溶剂等都能使蛋白质发生不可逆沉淀反应。
蛋白质在有机酸的作用下带正电荷，与酸根的负电荷结合成为溶解度很小的盐类而 沉淀。三氯乙酸和磺基水杨酸最有效，可将血清等生物体液中的蛋白质完全除去，因此 得到广泛应用。
【实验试剂和器材】
（一）试剂
1. 卵清蛋白溶液：取 5ml 鸡蛋清，用蒸馏水稀释至 100ml，搅拌均匀后用 4—8 层 纱布过滤,新鲜配制。
2. 茚三酮反应
蛋白质、多肽和各种氨基酸具有茚三酮反应。除无α-氨基的脯氨酸和羟脯氨酸呈 黄色外，其他氨基酸生成紫红色，最终为蓝色化合物。
除蛋白质、多肽和各种氨基酸能进行茚三酮反应外，氨、β-丙氨酸和许多一级胺 化合物都有此反应。该反应灵敏度达 1：1500 000（pH5-7）。现已广泛地用于氨基酸定 量测定。
生物化学实验指导书.docx
生物化学实验指导书生命科学与工程学院2007. 09实验一总糖的测定 (2)实验二蛋白质及氨基酸的呈色反应 (5)实验三蛋白质的等电点测定和沉淀反应 (9)实验四氨基酸的分离鉴定一纸层析法 (13)实验五血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 (15)实验六酪蛋白的制备 (18)实验七酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 (20)实验八肝细胞核中核酸（RNA和DNA）的分离与测定 (22)实验九紫外吸收法测定DNA含量 (25)实验十维生素C的定量测定 (26)实验-一酶的特性 (29)实验十三小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 (37)实验十四植物体内的转氨基作用 (40)实验十五SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 (44)实验十六葡聚糖凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 (50)实验十七质粒DNA的提取 (55)实验十八质粒DNA的酶切 (57)实验十九PCR基因扩增 (59)实验二十琼脂糖凝胶电泳检测DNA (61)实验二十一真核生物基因组DNA制备 (63)附录 (65)实验一总糖的测定一、目的掌握肓接测定法测定总糖的原理和方法。
二、原理样品经处理除去蛋白质等杂志后，加入盐酸，在加热条件下使蔗糊水解为还原性单旃, 以直接滴定法测定水解后样品屮的还原糖总量。
三、器材1•电炉2.滴定管3.锥形瓶4.容量瓶四、试剂1.6moI/L盐酸溶液2.0. 1%甲基红乙醇溶液:称取0. lg甲基红,用60%乙醇溶解并定容至100mlo3.20%氧氧化钠溶液。
4.0. 1%转化糖标准溶液：称取105°C烘干至恒重的纯蔗糖1.9000g,用水溶解并移入1000ml容量瓶中,定容，混匀。
取50ml于100ml容量瓶中,加6mol/L盐酸5ml,在68-70°C 水浴中加热15min,取出于流动水下迅速冷却,加甲基红指示剂2滴，用20%Na0H溶液中和至小性，加水至刻度，混匀。
此溶液每毫升含转化糖lmg。
5•费林氏A液:称取15g (CuS04 ・5H20)及0.05g次甲基蓝,溶于水并稀释到1L。
生物化学实验
标准曲线管
试剂(ml) 试剂(ml) 血清溶液(ml) 血清溶液(ml) 蒸馏水(ml) 蒸馏水(ml) 试剂甲(ml) 试剂甲(ml) 试剂乙(ml) 试剂乙(ml) 立即摇匀，置室温30分钟 立即摇匀，置室温30分钟 血清蛋白含量(ml) 血清蛋白含量(ml) 光吸收值(A 光吸收值(A650) 空
NH2 R COO
+ + -H Nhomakorabea+ -
NH3 R
H
NH3 R
+
OH
COO
-
OH
COOH
酸性 AAs 在酸性条件下所带的净电荷比碱性条件时少，而碱性 AAs 则 与此相反。（借此性质用酸相和碱相溶剂进行双向层析，可使酸碱性不同的 AAs 得到分离。） 溶剂的 pH 还可影响有机溶剂（流动相）的含水量 —— 溶剂酸性大，含 水量就 多 —— 影响 Rf 值。 滤纸的质量（密度，含 Ca2+、Mg2+、Cu2+ 等杂质…） 等杂质…
附:722型分光光度计的操作方法及注意事项： :722型分光光度计的操作方法及注意事项 型分光光度计的操作方法及注意事项：
1 ）操作方法： （2）操作方法： 注意事项： 注意事项： ① 接通电源，打开比色皿暗厢盖，预热 20 分钟； 务必保持比色皿透光面的清洁，不要用手摸比色皿的光滑 面，更不要用毛刷刷洗比色皿，以免影响读数的准确； ② 旋扭旋至[T]档，调节波长旋扭至所需要的单色光波长，选 旋扭旋至[T]档，调节波长旋扭至所需要的单色光波长，选 ② 择相应的放大灵敏度档，再用零位电位器校正电表指针指 比色皿外边沾有水或待测溶液时，可先用滤纸吸干，再用 在零位； 镜头纸揩净； ③ 将装有空白液和待测液的比色皿依此放入暗厢内的比色皿 把比色皿放入比色皿架时，要注意尽量使它们的位置前后 一致 架上，此时空白掖应位于光路上。盖上暗厢，使光电管见 光，旋转光量调节器，使电表指针正确处于100%； 光，旋转光量调节器，使电表指针正确处于100%； ④ 按上述方法连续几次调整零位和使电表指针指在100%，即 按上述方法连续几次调整零位和使电表指针指在100%，即 可进行测定； ⑤ 将旋扭旋至[A]档，轻拉比色皿定位装置的拉杆，使待测 将旋扭旋至[A]档，轻拉比色皿定位装置的拉杆，使待测 溶液进入光路，此时即可直接读出光吸收值的读数。
茶叶生物化学(含实验)DOCX(二)
茶叶生物化学(含实验)DOCX（二）茶叶生物化学(含实验)引言概述:茶叶是一种经济重要且广泛消费的饮料，其生物化学组成对其质量和风味有着重要影响。
本文将详细介绍茶叶的生物化学特性，并阐述与实验相关的内容。
正文:I. 茶叶中的主要生物化学成分茶叶中含有丰富的生物化学成分，下面列举了茶叶中的主要成分：1. 多酚类化合物a. 儿茶素b. 黄酮类化合物c. 类黄酮糖苷2. 氨基酸a. 茶氨酸b. 茶多肽c. 谷氨酰胺3. 挥发性化合物a. 芳香烃类b. 羰基化合物c. 硫醇类4. 矿物质a. 钾b. 钙c. 铁d. 锌5. 维生素a. 维生素Cb. 维生素Ec. 维生素B9II. 茶叶中生物化学成分的功能和作用茶叶中的生物化学成分具有多种功能和作用，以下为其中的几个重要功能和作用：1. 抗氧化作用a. 儿茶素对抗自由基b. 类黄酮化合物的抗氧化活性2. 抗菌作用a. 茶氨酸对抗细菌和病原体的作用b. 茶多肽的抗菌活性3. 抗肿瘤作用a. 黄酮类化合物抑制肿瘤细胞生长b. 茶多肽对肿瘤细胞的毒性4. 降低血脂和血压a. 多酚类化合物降低血脂和血压的作用5. 改善心血管健康a. 茶叶中的多酚类化合物对心血管系统的保护作用III. 茶叶生物化学实验方法为了研究茶叶的生物化学特性，以下为茶叶生物化学实验的常用方法：1. 提取茶叶中的多酚类化合物a. 使用溶剂提取法b. 使用超声辅助提取法2. 测定茶叶中的儿茶素含量a. 使用高效液相色谱法b. 使用分光光度法3. 分析茶叶中的氨基酸含量a. 使用气相色谱法b. 使用高效液相色谱法4. 测定茶叶中的挥发性化合物a. 使用气相色谱-质谱联用法b. 使用头空热解-气相色谱法5. 分析茶叶中的矿物质含量a. 使用原子吸收光谱法b. 使用电感耦合等离子体发射光谱法IV. 茶叶生物化学与茶叶品质的关系茶叶的生物化学成分与其品质有着密切的关系，以下为茶叶生物化学与茶叶品质的主要关联：1. 多酚类化合物含量与茶叶的滋味和香气有关a. 儿茶素含量与苦涩味有关b. 黄酮类化合物对茶叶的香气有贡献2. 氨基酸含量决定茶叶的鲜爽度和甜度3. 挥发性化合物的种类和含量影响茶叶的香气4. 矿物质的含量与茶叶的风味和口感有关5. 维生素含量影响茶叶的营养价值总结:茶叶是一种生物化学丰富的饮品，其中的多酚类化合物、氨基酸、挥发性化合物、矿物质和维生素等成分在茶叶的品质和健康价值上发挥着重要作用。
高校生物化学实验报告范文及模板
高校生物化学实验报告范文及模板实验目的：研究酶在体内消化食物的作用及其适宜环境。
实验原理：酶是一种生物催化剂，它可以降低活化能，加速生物体内的化学反应。
本实验以淀粉分解酶为研究对象，通过测定不同温度和pH值对淀粉分解的影响，探究酶的最适环境条件。
实验材料与仪器：1. 淀粉溶液2. 淀粉分解酶溶液3. 碘液4. 不同温度的水浴器5. pH值测定仪器6. 试管实验步骤：1. 准备不同温度的水浴器，分别设定为30℃、40℃、50℃、60℃和70℃。
2. 准备含有不同pH值的溶液，分别调整为pH4、pH6、pH8、pH10和pH12。
3. 取5个试管，分别加入适量的淀粉溶液。
4. 将试管1放入30℃的水浴器中，试管2放入40℃的水浴器中，以此类推，每个水浴器只放一个试管。
5. 在试管中加入适量的淀粉分解酶溶液，同时启动计时器，计时10分钟。
6. 在10分钟后，取出试管，加入适量的碘液进行观察。
根据颜色的变化，判断淀粉是否分解。
7. 重复步骤5和6，记录并比较不同温度条件下淀粉的分解情况。
8. 重复步骤5和6，记录并比较不同pH值条件下淀粉的分解情况。
实验结果：根据实验观察和记录，得到以下结果：1. 不同温度对淀粉分解的影响：- 在低温（30℃和40℃）条件下，淀粉几乎未被分解，添加碘液后仍呈现蓝色。
- 在适中温度（50℃和60℃）条件下，淀粉有部分被分解，添加碘液后呈现棕色至深棕色。
- 在高温（70℃）条件下，淀粉完全被分解，添加碘液后呈现黄色至无色。
2. 不同pH值对淀粉分解的影响：- 在酸性条件（pH4）下，淀粉几乎未被分解，添加碘液后仍呈现蓝色。
- 在中性条件（pH6和pH8）下，淀粉有部分被分解，添加碘液后呈现棕色至深棕色。
- 在碱性条件（pH10和pH12）下，淀粉完全被分解，添加碘液后呈现黄色至无色。
实验讨论：根据实验结果，可以得出以下结论：1. 酶在体内消化食物的作用受温度的影响。
在适宜的温度范围内（50℃至60℃），酶活性最高，能够有效地分解淀粉。
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生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一：糖的颜色反应实验1.1莫氏实验一、目的掌握莫氏（molisch）实验鉴定糖的原理和方法。
二、原理糖经浓无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称“紫环反应”，其反应如下图：利用这一性质可以鉴定糖。
三、实验器材1、棉花或滤纸。
2、吸管1.0ml(K4)、2.0ml(K1)。
3、试管1.5K15cm(K4)。
四、实验试剂1、莫氏试剂：称取α-萘酚5g，溶于95%乙醇并稀释至100ml。
此试剂需新鲜配置，并贮于棕色试剂瓶中。
2、1%蔗糖溶液：称取蔗糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。
3、1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液：讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加边搅。
最后以沸蒸馏水稀释至100ml。
五、操作于4支试管中，分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素（棉花或滤纸浸在1ml水中）。
然后各加莫氏试剂2滴1，摇匀，讲试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇！)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无紫色环出现。
六、注意事项1、试管中加入各种糖后，应做好标记，浓硫酸加入的方式应保持一致。
2、莫氏反应非常灵敏，所用的试剂应洗净，不可再样品中混入纸屑等杂物。
3、当糖浓度过高时，由于浓硫酸对他的焦化作用，将呈现红色及褐色而不呈现紫色，需稀释后再做。
思考题：1、解释α-苯酚反应的原理。
2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些？试验1.2塞氏试验一、目的掌握塞氏（Seliwanoff）实验鉴定酮糖的原理和方法。
二、原理酮糖在浓酸的作用下，脱水生产5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色反应，有时亦同时产生棕色沉淀，此沉淀溶于乙醇，呈鲜红色沉淀2，以果糖为例，其反应如下：三、实验器材1、吸管0.5ml(K3)、5.0ml(K1)。
2、试管1.5cmK15cm（K3）。
3、水浴锅。
四、实验试剂O):V(HCl)=2:1],临用1、塞氏试剂：溶50mg间苯二酚于100ml盐酸中[V(H2时配制。
2、1%果糖溶液：称取果糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。
3、1%葡萄糖溶液：见实验1.1。
4、1%蔗糖溶液：见实验1.1。
五、操作于3支试管中分别加入1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液和1%果糖溶液各0.5ml。
各加塞氏试剂2.5ml，摇匀。
同时至沸水浴内。
比较各管颜色变化及红色出现的先后次序。
六、注意事项1、试管中加入各种糖后，应做好标记，并按顺序置于沸水锅内。
2、实验过程中，要仔细观察溶液颜色的变化情况。
思考题1、在塞氏实验中，反应产生的沉淀为何能够溶于乙醇溶液并产生鲜红色？2、蔗糖为何有塞氏反应？实验1.3杜氏实验一、目的掌握杜氏（Tollen）实验鉴定戊糖的原理和方法。
二、原理戊糖在浓硫酸溶液中脱水生成糠醛，后者与间苯三酚结合成樱桃红色物质：本实验虽常用以鉴定戊糖，但并非戊糖的特有反应。
果糖、半乳糖和糠醛等都是呈阳性反应、戊糖反应最快，通常在45s内即产生樱桃红色沉淀。
三、实验器材1、吸管1.0ml(K3)2、试管1.5cmK15cm(K3)3、水浴锅四、实验试剂1、杜氏试剂：2%间苯三酚乙醇溶液（2g间苯三酚溶于100ml95%乙醇中）3ml，缓缓加入浓盐酸15ml及蒸馏水9ml即得，临时用配制。
2、1%阿拉伯糖溶液：称取阿拉伯糖1g，溶于蒸馏水并稀释至100ml。
3、1%葡萄糖溶液，见实验1.1。
4、1%半乳糖溶液：称取半乳糖1g，溶于蒸馏水并稀释至100ml。
五、操作于三支试管中加入杜氏试剂1ml，再分别加入1滴1%葡萄糖溶液、1%半乳糖溶液和1%阿拉伯糖溶液，摇匀。
将试管同时加入沸水浴中，观察颜色变化，并记录颜色变化的时间。
六．注意事项1、试管中加入各种糖后，应做好标记，并按顺序置于沸水浴锅中。
2、实验过程中，要仔细观察溶液颜色的变化情况。
思考题1、在Tollen反应分析位置样品时，应注意些什么问题？2、列表总结和比较本实验三种颜色反应的原理及其应用。
二、多糖的性质多糖的实验一、目的1、熟悉淀粉多糖的碘实验反应原理和方法。
2、进一步了解淀粉的水解过程。
二、原理淀粉分布于植物界，谷、果实、种子、块茎中含量丰富，工业用的淀粉主要来源于玉米、山芋、马铃薯。
本实验以马铃薯为原料，利用淀粉不溶于或难溶于水的的性质来制备淀粉。
淀粉遇碘呈蓝色1，是由于碘被吸附在淀粉上，形成一复合物，此复合物不稳定，极易被醇、氢氧化钠和加热等使颜色褪去，其他多糖大多数能与碘呈特异的颜色，此类呈颜色物质也不稳定。
淀粉在酸催化下加热，逐步水解成分子较小的糖、最后水解成葡萄糖，（C6H10O5）（C4H10O5）C17H22O11C4H12O4淀粉各种糊精麦芽糖葡萄糖淀粉完全水解后，失去与碘的作用，同时出现单糖的还原性。
三、实验器材1、马铃薯3、布氏漏斗（K1）、抽滤瓶500ml（K1）2、纱布、研钵（K1）4、表面皿10cm（K1）、白瓷板、皮头滴管5、试管1.5cmK15cm(K4)8、量筒25ml（K1）6、电炉、石棉网9、吸管1.0ml(K1)7、烧杯50ml（K1）10、木质试管四、实验试剂1、稀释液：配制2%碘化钾溶液，加入适量碘，使溶液呈淡棕黄色即可。
2、0.1%淀粉：称取淀粉1g，加少量水，调匀，倾入沸水，边加边搅，并以热水稀释至1000ml，可加数滴甲苯防腐。
3、10%NaOH溶液:称取NaOH10g，溶于蒸馏水并稀释至100ml。
4、本尼迪特试剂：见实验2.5、20%硫酸（V/V）：量取蒸馏水78ml置烧杯中，加入浓硫酸20ml（相对密度1.84）.摇匀，冷却后贮于试剂瓶中。
6、10%碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠10g，溶于蒸馏水并稀释至100ml。
五、操作1、马铃薯淀粉的制备讲生马铃薯去皮，在研钵中充分研碎，加水混合，用纱布过滤，除去粗颗粒，滤液中的淀粉很快沉到底部，多次用水洗淀粉，抽滤，滤饼放在表面皿上，在空气中干燥即得。
2、淀粉与碘的反应（1）置少量自制淀粉于白瓷板上，加1至3滴稀碘液，观察颜色变化。
（2）取试管1支，加0.1%淀粉液5ml，再加2滴稀碘液，摇匀后，观察其颜色变化。
将管内液体分成3分，其中1分加热，观察颜色是否褪去。
冷却后，颜色是否全部恢复。
另2份分别加入乙醇或10%NaOH溶液，观察颜色变化并解释之。
3、淀粉的水解在一小烧杯内加入1%淀粉溶液25ml及20%硫酸1ml，放在石棉网上小火加热，微沸后每隔2min取出反应2滴置于白瓷板上做碘试验。
与此同时另取反应液3滴，用10%碳酸钠溶液中和后，做本尼迪特试验（参阅试验2），记录试验结果并解释之。
六、注意事项1、淀粉提取时可适当加热以促进淀粉聚沉，但温度不能超过50℃，否则会因溶解度增大而减少产量。
2、用水洗涤淀粉时需待淀粉沉降完全后再小心倾出上清液，亦可直接用滴管吸去上清液。
思考题淀粉有没有还原性？如何验证？三、植物组织中可溶性总糖的测定一、目的掌握蒽酮比色法定糖的原理和方法。
二、原理糖在浓硫酸作用下，脱水生成糠醛或羟基糠醛，糠醛或羟基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在60nm处有最大吸收。
在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量。
蒽酮法几乎可以测定所有的糖类物质，不但可以测定戊糖于己糖，而且可以测定寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素、糖原等（因为反应液中的浓硫酸可以将多糖水解成单糖而发成反应），所以用蒽酮法测出的糖含量，实际上是溶液中的总糖含量。
此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。
三、实验器材1、新鲜植物叶片5、水浴锅、电炉2、吸管1.0ml（K2）、5ml（K1）、0.1ml6、电子分析天平（K1）、0.2ml(K1)、0.5ml(K3).7、容量瓶100ml（K1）、玻璃漏斗。
3、试管1.5cmK15cm(K7)8、量筒、研钵、三角烧杯4、紫外可见分光光度计。
四、实验试剂1、蒽酮试剂：取2g蒽酮溶于1000ml80%（V/V）的硫酸中，当日配制使用。
2、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）：100ml葡萄糖溶于蒸馏水并稀释至1000ml（可滴加几滴甲苯作防腐剂）五、操作1、制作标准曲线取干净试管6支，按表6进行操作。
以吸光度为纵坐标，各标准溶液浓度（mg/ml）为横坐标作为图得标准曲线。
取新鲜植物叶片，洗净表面污物，用滤纸吸去表面水分。
称取0.5g，剪碎、加入3ml蒸馏水，在年播种磨成匀浆，转入锥形瓶，并用12ml蒸馏水冲洗研钵2至3次，洗出液也转入锥形瓶中。
用塑料薄膜封口，于沸水中提取30min，冷却后过滤并定容至100ml，此为待测液，吸取待测液0.5ml于试管中，加蒸馏水0.5ml，浸于冰水浴中冷却，再加入4ml蒽酮试剂，沸水浴中煮沸10min，取出用自来水冷却后比色，其他条件与做标准曲线相同，测得的吸光度值有标准曲线查算出样品液的糖含量。
六、计算（总糖）=[(CKV)/m]K100%式中（总糖）：总糖的质量分数（%）；C:从标准曲线上查出的糖含量（mg/ml）;V:样品稀释后的体积（ml）m:样品的质量（mg）七、注意事项1、若提取物中过多色素会干扰显色，须事先除去。
2、参见实验8注意事项。
思考题1、本实验蒽酮法用于测定植物叶片的可溶性糖，非可溶性糖可用此方法除去吗？2、制作标准曲线时应注意哪些问题？三、蒽酮-硫酸比色定糖法一、目的掌握蒽酮比色法定糖的原理和方法。
二、原理蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。
蒽酮可以和游离得的己糖或多糖中的己糖基，戊醛糖及己糖醛酸起反应，反应溶液呈蓝绿色，在620nm出有最大吸收。
蒽酮可与其他一些糖类发生反应，单显现的颜色不同，当样品中存有含有较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈红色，对于以上特定的糖类，反应较稳定。
本法多用于测定糖原含量，亦可用于测定葡萄糖含量。
三、实验器材1、无蛋白滤液或其他材料4、紫外可见光光度计2、吸管1.0ml（K2）、5ml（K1）、0.1ml5、水浴锅（K1）、0.2ml(K1)、0.5ml(K3).6、电炉3、试管1.5cmK15cm(K7)7、电子分析天平。
四、实验试剂1、蒽酮试剂：取2g蒽酮溶于1000ml体积分数为80%(V/V)的硫酸中，当日配制使用。
2、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml），100mg葡萄糖溶于蒸馏水并稀释至1000ml （可滴加几滴甲苯作为防腐剂）。
3、标准唐宇溶液（0.1mg/ml）:100mg糖原溶于蒸馏水并稀释至1000ml（可滴加几滴甲苯作为防腐剂）。