果胶酶的生产技术
果胶酶
果胶酶的生产一、概况:果胶酶(pectinase)是一类包含多种组分,能分解果胶酶的复合酶系,是由一种优良的曲霉菌株,经液体深层发酵和现代生物后提取技术制备的高活力酶制剂。
外观呈浅黄色粉末状,广泛分布于高等动物、植物和微生物中,在某些原生动物和昆虫中也有发现。
果胶酶主要用于饮料及果酒的榨汁及澄清,对分解果胶具有良好的作用。
此外,在饲料加工、造纸、环境保护等方面也有重要的应用价值,是工农业生产中的一种重要的新兴酶类。
二、果胶酶的特点及分类(一)特点1、PH值:作用PH:2.5-6.0,最适作用PH3.5。
2、温度:作用温度为15-55℃左右。
最适作用温度为50℃。
3、其他特点1)果胶酶各组分较齐全,包含有解聚酶和果胶酯酶,能有效地分解原料中的果胶质,提高水果的出汁率或饲料中营养物质的释放。
2) 除了产果胶酶外,还产酸性蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶和淀粉酶等,各酶种在使用过程中起到协同作用的效果。
3) 固体法生产果胶酶活力高(5000U/g)。
发酵成熟曲烘干后可直接使用(特别是应用于饲料工业)或经提取制备高活力的液体或固体果胶酶成品.(二)分类1、分类标准(1)果胶、果胶酸、原果胶是否为其优先底物;(2)对D-半乳醛酸间的糖苷键作用是被反式消去作用还是水解作用;(3)切断糖苷键的方式是随意的(内切酶)还是发生在末端方向的(外切酶)。
2、分类:果胶酶是指分解果胶质的多种酶总称,可分为原果胶酶、解聚酶和果胶酯酶果胶酶A-型果胶酶(A-PPase)原果胶酶B-型果胶酶(A-PPase)果胶质解聚酶主要对果胶作用的解聚酶(1)聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)(endo-PMG和exo-PMG)(2)聚甲基半乳糖醛酸裂解酶(endo-PMGL和exo-PMGL)对果胶酸作用的解聚酶聚半乳糖醛酸酶(PG)(endo-PG和exo-PG)聚半乳糖醛酸裂解酶(PGL)(endo-PGL和exo-PGL)果胶酯酶三、果胶酶来源:果胶酶最初是由MacDonnell从桔子里提取得到的。
果胶酶的生产与应用研究
果胶酶的生产与应用研究引言:果胶酶是一种具有广泛应用价值的酶类,可以提取自多种植物和微生物中。
它在食品、医药和生物科技领域中有着重要的作用。
本文将探讨果胶酶的生产方法和其应用研究的现状,以及其在食品和医药产业中的潜在应用前景。
一、果胶酶的生产方法1. 从植物中提取:传统的从植物中提取果胶酶的方法主要包括机械法和酶解法。
机械法指的是通过研磨、搅拌等物理力量来释放果胶酶。
而酶解法则是通过添加外源酶来加速果胶的分解过程。
这两种方法在大规模生产中往往效率低下且成本较高。
2. 通过微生物发酵生产:通过微生物发酵生产果胶酶是一种高效、经济的方法。
目前,主要利用大肠杆菌、毕赤酵母等微生物进行大规模生产。
通过改良微生物的基因工程技术,可以提高果胶酶的产量和活性。
二、果胶酶的应用研究现状1. 食品工业中的应用:果胶酶在食品工业中有广泛的应用,如果汁和果酱的生产过程中可用于果胶的降解,使得果汁和果酱更加浓稠。
此外,果胶酶还可以用于面包的加工和调味料的制备中,以改善产品的质地和口感。
2. 医药领域中的应用:果胶酶具有抗炎、抗肿瘤和免疫调节等多种生物活性,因此在医药领域有着广阔的前景。
研究表明,果胶酶可以用于治疗人类白血病和胰腺癌等恶性肿瘤,并能有效减轻患者的症状。
三、果胶酶在食品产业中的潜在应用前景1. 提高产品品质:果胶酶可以在果汁和果酱制备过程中改善产品的质地和口感,使其更加浓稠和顺滑,提升消费者的口感体验。
2. 促进食品加工的创新与改良:果胶酶可以应用于面包和调味料的制备中,使得产品更加柔软可口,并增加产品的活性成分。
3. 降低生产成本:通过优化果胶酶的生产工艺和提高产量,可以降低生产成本,提高企业的竞争力。
4. 促进食品工业的可持续发展:果胶酶是一种天然的酶类,不会对环境造成污染,符合可持续发展的要求。
结论:果胶酶的生产和应用研究已经取得了一定的突破,其在食品和医药产业中的应用前景广阔。
未来的研究应该进一步优化果胶酶的生产工艺,提高产量和活性,以满足不断增长的市场需求。
《果胶酶的制作方法及作用》 学习任务单
《果胶酶的制作方法及作用》学习任务单一、果胶酶的简介果胶酶是一类分解果胶的酶的总称,广泛存在于植物和微生物中。
它能够分解果胶物质,使细胞壁破裂,释放出细胞内的物质,在食品、纺织、造纸、饲料等多个领域都有着重要的应用。
二、果胶酶的制作方法(一)微生物发酵法这是目前工业上生产果胶酶的主要方法。
首先需要筛选出能够产生果胶酶的微生物菌株,如黑曲霉、青霉等。
然后将这些菌株在特定的培养基中进行培养,控制好温度、pH 值、氧气供应等条件,使微生物大量繁殖并分泌果胶酶。
培养结束后,通过离心、过滤等方法将微生物细胞和培养基分离,得到含有果胶酶的粗酶液。
最后,对粗酶液进行进一步的提纯和浓缩,得到高纯度的果胶酶产品。
(二)基因工程法随着生物技术的发展,基因工程法也逐渐应用于果胶酶的生产。
首先从产生果胶酶的微生物中克隆出果胶酶的基因,然后将其导入到合适的宿主细胞(如大肠杆菌、酵母等)中,使宿主细胞能够表达出果胶酶。
通过对宿主细胞的培养和发酵,可以获得大量的果胶酶。
基因工程法具有生产效率高、酶的性质易于调控等优点,但技术难度较大,成本也相对较高。
(三)提取法从富含果胶酶的植物材料中直接提取果胶酶。
例如,从柑橘皮、苹果渣等中提取。
这种方法的优点是原料来源广泛,但提取过程较为复杂,酶的纯度和活性往往较低。
三、果胶酶的作用(一)在食品工业中的作用1、果汁生产在果汁生产中,果胶酶可以分解水果中的果胶物质,降低果汁的黏度,提高出汁率。
同时,还能使果汁澄清,改善果汁的口感和稳定性。
2、葡萄酒酿造在葡萄酒酿造过程中,果胶酶可以促进葡萄汁的澄清和过滤,提高葡萄酒的质量和稳定性。
3、果蔬加工有助于软化果蔬组织,改善果蔬的口感和质地。
(二)在纺织工业中的作用在棉麻纤维的处理过程中,果胶酶可以去除纤维表面的果胶物质,提高纤维的吸水性和柔软度,改善纺织品质。
(三)在造纸工业中的作用用于纸浆的预处理,可以降低纸浆中的果胶含量,提高纸张的强度和质量。
果胶酶生产菌株的筛选过程
果胶酶生产菌株的筛选过程
果胶酶是一种水解果胶的酶,广泛应用于饮料、果汁、果酱等果蔬加工行业,因此具
有广阔的市场前景。
果胶酶的生产需要先筛选出高效的产酶菌株,这是整个生产链中的重
要环节之一。
本文将介绍果胶酶生产菌株的筛选过程。
一、菌株筛选的目的
菌株筛选的目的是选择能够高效稳定产生果胶酶的菌株,并进行进一步的优化。
其中,首先对原料的化学成分进行分析,确定产酶菌株种类;然后利用生物学方法进行初步筛选,筛选出具有较高产酶活力的菌株;最后通过构建适合产酶环境的基因工程菌株,提高果胶
酶产量及质量。
二、原料分析
果胶酶生产的原材料主要是果胶。
在根据应用对象的要求确定产酶菌株种类前,需要
对果胶的化学成分进行分析。
化学成分分析涉及果胶的多种指标,如果胶的含量、分子量、分枝度等。
三、生物学初筛
四、构建基因工程菌株
生物学初筛之后,还需要进一步构建基因工程菌株,进一步提高产酶能力。
通常采用
两种策略:一是通过原位突变构建高酶力突变菌株;二是将产酶基因转化到优良的生产菌
株中,形成高产酶菌株。
这两种策略的原理是一样的,都是通过改变产酶基因的表达水平,实现在原生菌株中快速构建高效产酶菌株的目的。
以上就是果胶酶生产菌株的筛选过程的详细介绍。
通过该过程的步骤,可以产生高效、稳定、可持续产酶的菌株,促进果胶酶的产业化发展。
酶制剂类饲料添加剂-果胶酶
生产微 生 物果胶 酶 的菌种 很 多 , 来 源极 其广 泛, 包 括 细菌 、 霉菌 、 酵母 菌 和放线 菌 。许 多 微生 物都 具有 产生 果胶 酶 的能力 , 目前 研究 和应 用较 多的是真菌 , 并 且 在 真 菌 中尤 以 曲霉 属 最 为 常
用 。真菌 中的果胶 酶产 生菌 主要包 括 曲霉 属 、 青
霉属 、 镰孢属 、 克 鲁维 氏酵 母 , 其 中曲霉 属 有 : 黑 曲酶 、 米 曲酶 、 黄 曲酶 、 日本 曲酶 、 酱 油 曲酶 。 目 前研 究最 多 的是黑 曲霉 , 国内许 多用其 作 为果胶 酶 的来 源 。能 够 生 产 果胶 酶 的细 菌 一 般 属 于假
单孢 菌 属 、 黄单孢 菌属 、 欧文 氏菌属 、 芽 孢 杆 菌
某 一种 酶 制剂 , 因为 每 一种 酶 都具 有 其 专一 性 , 因此 大多 数情 况 下 是 添 加 复合 酶 制 剂 。虽 然 淀
C a v a l i t t o 采 用 响应面分 析 对 G e o t i f c h u m k l e b a h n i i A T C C 4 2 3 9 7产 原 果 胶 酶 的发 酵 条 件 进 行 了 优 化, 结 果 显示 p H和 F e 对 原果胶 酶产 率有 显 著 影 响, 在 较 优 条件 下 原 果 胶 酶 产 率 达 到 2 3 6
究表 明在 带循 环流 动填 充床 生物 反应 器 中 , 多 空
玻璃载体和纤维素载体均适合 固定化 K l u y v e r o .
m y c e s ma r x i a n u s C C T 3 1 7 2细胞 生 产果胶 酶 。
属、 梭菌 属等 。其 中菌 种包括 节 杆菌 、 芽孢 杆菌 、
果胶酶载体的应用和制备
果胶酶载体的应用和制备1. 引言果胶酶是一类能够降解果胶的酶,广泛应用于食品加工、饲料工业、纺织工业等领域。
为了提高果胶酶的稳定性和活性,科研人员开始探索果胶酶载体的应用,并研发制备了多种果胶酶载体。
本文将介绍果胶酶载体的应用和制备方法。
2. 果胶酶载体的应用果胶酶载体在果胶酶的应用上发挥着重要作用。
主要应用包括:2.1 食品加工果胶酶可用于制备果胶酸酯酶和低甲氧基化果胶酶,从而在食品加工中提高果胶的降解效率和产品质量。
果胶酶载体可以增强果胶酶的稳定性和活性,使得果胶在加工过程中更加均匀地被降解,提高果汁、果酱等产品的流变性和口感。
2.2 饲料工业果胶酶可用于饲料中果胶的水解,提高饲料的可溶性和利用率。
果胶酶载体可以增强果胶酶的稳定性,使得果胶在饲料中更好地被降解,提高饲料的营养价值,减少饲料中果胶的浪费。
2.3 纺织工业果胶酶可用于纺织品的脱胶和漂白处理。
果胶酶载体可在纺织工业中发挥辅助作用,增加果胶酶的稳定性和活性,提高果胶的脱胶效果,降低能耗,提高脱胶的效率。
3. 果胶酶载体的制备方法果胶酶载体的制备方法包括物理吸附法、化学共价键结合法和基因工程法。
3.1 物理吸附法物理吸附法是将果胶酶通过物理吸附的方式固定在载体上。
常见的载体包括活性炭、硅胶等。
制备方法如下: - 将载体与果胶酶溶液混合; - 搅拌一定时间,使果胶酶充分吸附在载体表面; - 离心或过滤,将载体与果胶酶分离; - 干燥载体,得到果胶酶载体。
3.2 化学共价键结合法化学共价键结合法是通过化学反应将果胶酶与载体共价键结合。
常见的载体包括聚乙烯醇、甲基丙烯酸酯聚合物等。
制备方法如下: - 预处理载体,使其具有反应活性基团; - 将果胶酶与活性载体共反应,形成共价键结合; - 过滤或离心,将载体与果胶酶分离; - 干燥载体,得到果胶酶载体。
3.3 基因工程法基因工程法是通过基因工程技术将果胶酶基因导入宿主微生物中,使得宿主微生物自身能够产生果胶酶载体。
果胶酶的生产工艺
果胶酶的生产工艺
果胶酶的生产工艺包括以下几个步骤:
1. 选材:选用高果胶含量的水果,如苹果、梨、柿子、西瓜等。
2. 切碎:将选好的水果清洗干净后切碎,以便于后续的提取。
3. 溶解:将切碎的水果加水溶解在酸性条件下,如pH值为3-5左右,可使用柠檬酸、醋酸等。
4. 液态发酵:在酸性条件下,将加入酸的果汁加入产果胶酶的微生物(如大肠杆菌、酵母菌)中进行液态发酵。
发酵温度通常在25-30,发酵时间根据不同的微生物而有所不同。
5. 固态发酵:将果汁与产酶微生物混合后,加入发酵介质,如豆粕、麦麸、玉米粉等,进行固态发酵。
发酵温度通常在35-45,发酵时间需3天以上。
固态发酵可以提高酶的产量和保存时间。
6. 分离提取:将发酵后的混合物过滤或离心,得到果胶酶,可通过超滤、逆流、醋酸盐析等方法进一步纯化。
7. 调整活性:根据实际需要,可以通过加温、调节pH值等方法调整果胶酶的
活性。
8. 包装保存:将调整好活性的果胶酶装入适当的包装中,如瓶装、袋装等,存放在低温干燥处,以延长保存期限。
黑曲霉生产果胶酶工艺流程
黑曲霉生产果胶酶工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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1. 菌种培养。
选择高产果胶酶的黑曲霉菌株。
果胶酶的制备
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2.处理方法——酶解法
常用的酶及其作用特点如下:
组成
本 质
作用
果 多聚半乳糖醛酸酶
胶 果胶分解酶
酶
果胶酯酶
蛋 白 质
催化果胶分解成为可 溶性半乳糖醛酸
有些微生物,如黑曲霉、苹果青霉等都可用于生产果胶酶。在果 汁生产中应用果胶酶可以提高出汁率(果汁量)和澄清度.
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制备果胶酶并观察其作用
1.制备果胶酶
预冷 10%的NaCl
过滤
离心
2.观察果胶酶对苹果匀浆液的作用 制作苹果匀浆液
设置 对照实验
观察 现象 并得出 结论
高频考点突破
考点一 影响果汁产量的物质及处理方法 1.影响果汁产量的物质
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知识延伸
(1)注意事项:在苹果泥和果胶酶混合之前,一定 要保证底物和酶达到相应的条件(温度或pH), 避免混合后条件变化,确保实验结果的准确性。
(2)衡量实验结果的指标 ①在相同时间内,滤出苹果汁的体积多少。 ②观察苹果汁的澄清度。
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对位训练
2.下图横轴均表示酶的反应条件,纵轴为酶促反应
速度,能正确反映温度、pH与酶反应速度关系的
是
( D)
A.甲和乙 C.甲和丙
B.乙和丙 D.都是甲
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考点三 探究果胶酶的最适用量 1.原理
在压榨果汁时,我们可以加入适量的果胶酶来获 取澄清的果汁。但不同浓度的果胶酶对果汁得率 是有直接关系的。 提醒 不同pH、温度条件下酶活性不同,所需果 胶酶的最适量也不相同,故酶的最适用量应标明 pH和温度。
果胶酶的生产工艺
果胶酶的生产工艺果胶酶是一种重要的工业酶,广泛应用于食品、医药和化工等领域。
果胶酶的生产工艺主要分为发酵法和微生物共代谢法两种。
发酵法是目前最常用的果胶酶生产工艺。
其主要步骤如下:1. 菌种培养:选择高效果胶酶生产菌株,并进行预培养。
预培养在适宜的培养基中进行,培养条件包括温度、pH值和培养时间等。
2. 发酵产酶:将预培养好的菌株接种到大规模发酵罐中,进行主发酵。
主发酵条件需调控合适,包括温度、pH值、发酵时间和转速等。
主发酵过程中,菌体会分泌出大量的果胶酶。
3. 分离与纯化:主发酵结束后,将发酵液进行固液分离,得到含果胶酶的液体部分。
然后通过酒精沉淀、离心和过滤等步骤进行粗提纯,将酶从其他杂质中分离出来。
4. 浓缩与干燥:将粗提纯后的果胶酶液进行浓缩,通常采用薄膜浓缩或离心浓缩。
然后将浓缩后的果胶酶溶液进行干燥,通常采用喷雾干燥或冷冻干燥技术。
5. 成品包装:将经过干燥的果胶酶进行包装,常见的包装方式包括塑料袋、铝箔袋和灌装瓶等。
另外,微生物共代谢法也是一种常用的果胶酶生产工艺,主要步骤如下:1. 菌种培养:选择具有果胶酶合成代谢途径的菌株,并进行预培养。
预培养条件与发酵法类似。
2. 子代发酵:将预培养好的菌株接种到适宜的培养基中,进行子代发酵。
子代发酵的目的是增加菌株的数量并促进果胶酶的合成。
3. 产酶代谢产物提取:子代发酵结束后,通过离心和过滤等方法,将微生物中的产酶代谢产物提取出来。
4. 分离与纯化:将提取的产酶代谢产物进行分离纯化,通常采用柱层析、超滤和透析等方法将果胶酶从其他杂质中分离出来。
5. 浓缩与干燥:与发酵法类似,将纯化后的果胶酶溶液进行浓缩和干燥,最终得到成品。
总的来说,果胶酶的生产工艺主要包括菌种培养、发酵产酶、分离与纯化、浓缩与干燥以及成品包装等步骤。
不同的生产工艺会根据具体情况和需求进行选择。
果胶酶的制作工艺及流程
果胶酶的生产工艺流程一、生产工艺流程原料→预处理→抽提→脱色→浓缩→干燥→成品。
二、具体过程1.原料及其处理鲜果皮或干燥保存的柚皮均可作为原料。
鲜果皮应及时处理,以免原料中产生果胶酶类水解作用,使果胶产量或胶凝度下降。
先将果皮搅碎至粒径2~3mm,置于蒸汽或沸水中处理5~8min,以钝化果胶酶活性。
杀酶后的原料再在水中清泡30min,并加热到90℃5min,压去汁液,用清水漂洗数次,尽可能除去苦味、色素及可溶性杂质。
榨出的汁液可供回收柚苷。
干皮温水浸泡复水后,采取以上同样处理备用。
2.抽提通常用酸法提取。
将处理过的柚皮倒入夹层锅中,加4倍水,并用工业盐酸调ph至1.5~2.0,加热到95℃,在不断搅拌中保持恒温60min。
趁热过滤得果胶萃取液。
待冷却至50℃,加入1%~2%淀粉酶以分解其中的淀粉,酶作用终了时,再加热至80℃杀酶。
然后加0.5%~2%活性炭,在80℃下搅拌20min,过滤得脱色滤液。
因柚皮中钙、镁等离子含量较高,这些离子对果胶有封闭作用,影响果胶转化为水溶性果胶,同时也因皮中杂质含量高,而影响胶凝度,故酸法提取率较低,质量较差。
为解决以上问题,西南农业大学食品学院(1995)对酸法提取作了改进,即在酸法基础上,按干皮重量加入5%的732阳离子交换树脂或按浸提液重量加入0.3%~0.4%六偏磷酸钠,前者果胶得率可提高7.2%~8.56%,胶凝度提高30%以上,而后者得率提高25.35%~35.2%,其胶凝度可达180±3。
3.浓缩采用真空浓缩法,在55~60c的条件下,将提取液的果胶含量提高到4%~6.5%后进行后续工序处理。
近来作者和国内其他单位研究表明,超滤可用于果胶液浓缩,如用切割分子量为50 000u的管式聚丙烯腈膜超滤器,在温度45℃、ph3.0、压力0.2mpa条件下进行超滤浓缩,可将果胶浓度浓缩至4.21%,而其杂质含量和经常性生产费用分别仅为真空浓缩的1/5和1/2~1/3。
《果胶酶的制作方法及作用》 学习任务单
《果胶酶的制作方法及作用》学习任务单一、学习目标1、了解果胶酶的定义和分类。
2、掌握果胶酶的制作方法。
3、理解果胶酶在不同领域的作用。
二、学习内容(一)果胶酶的定义和分类果胶酶是指分解果胶的多种酶的总称,它主要包括果胶酯酶、果胶水解酶和原果胶酶等。
果胶是植物细胞壁的重要组成成分,存在于水果和蔬菜中。
(二)果胶酶的制作方法1、微生物发酵法微生物发酵是生产果胶酶的常用方法之一。
首先,需要筛选出能够产生果胶酶的优良微生物菌株,如黑曲霉、青霉等。
然后,将这些菌株在适宜的培养基中进行培养。
培养基的成分通常包括碳源(如葡萄糖、蔗糖等)、氮源(如铵盐、硝酸盐等)、无机盐和生长因子等。
在一定的温度、pH 值和通气条件下,微生物会大量繁殖并分泌果胶酶。
培养结束后,通过离心、过滤等方法将微生物细胞与发酵液分离,再对发酵液进行浓缩和纯化,得到果胶酶成品。
2、基因工程法随着生物技术的发展,基因工程法也被用于果胶酶的生产。
首先,从产生果胶酶的微生物中克隆出果胶酶基因,然后将其导入到合适的宿主细胞(如大肠杆菌、酵母等)中。
通过对宿主细胞的培养和诱导表达,使其产生大量的果胶酶。
最后,对表达产物进行分离和纯化,获得高纯度的果胶酶。
(三)果胶酶的作用1、在食品工业中的作用(1)果汁生产在果汁生产过程中,果胶酶可以分解水果中的果胶,降低果汁的黏度,提高出汁率。
同时,它还能使果汁澄清,改善果汁的口感和品质。
(2)果酒酿造果胶酶可以分解葡萄等水果中的果胶,有利于葡萄汁的提取和发酵,提高果酒的产量和质量。
(3)食品加工在果酱、果冻等食品的加工中,果胶酶可以调整果胶的含量和性质,改善产品的质地和口感。
2、在纺织工业中的作用在麻类纤维的脱胶过程中,果胶酶可以分解纤维表面的果胶物质,使纤维分离得更加容易,提高纺织纤维的质量。
3、在造纸工业中的作用果胶酶可以用于处理造纸原料中的果胶,改善纸张的强度和质量,降低生产成本。
4、在环境保护中的作用果胶酶可以用于处理含有果胶的废水,降低废水的化学需氧量(COD)和生物需氧量(BOD),减少环境污染。
果胶酶生产工艺
果胶酶生产工艺果胶酶是一种重要的工业酶,广泛应用于食品、制浆造纸、纺织、饲料、制药等领域。
果胶酶的生产工艺主要包括菌种选育、发酵、分离纯化和产品包装等步骤。
首先,果胶酶的生产需要选择优良的产菌菌种。
常用的产菌菌种有枯草杆菌、红霉菌等。
通过菌种选育,筛选出产酶效果好、产酶量高的菌种。
同时,为了提高果胶酶的产量和稳定性,还可以通过基因改造的方式对产菌菌种进行优化。
其次,果胶酶的生产主要依靠发酵技术。
发酵过程中需要控制好温度、pH、氧气供应和酶基质的添加等因素。
常用的发酵方式包括固体发酵和液体发酵。
固体发酵是将产菌菌种和固体底物(如玉米渣、苹果渣等)混合,进行发酵。
液体发酵是将产菌菌种和液体培养基(如葡萄糖、麦芽糊精等)放入发酵罐中,进行发酵。
发酵时间一般在24-48小时左右。
然后,果胶酶的生产需要进行分离纯化工艺。
首先要将发酵液进行澄清,去除其中的固体颗粒和胶体物质。
然后,通过离心、超滤、凝胶过滤等手段,将果胶酶从发酵液中分离出来。
最后,通过浓缩、冷冻干燥等操作,得到果胶酶的粉状或液状产品。
最后,果胶酶的产品还需要进行包装和质量控制。
果胶酶的包装一般采用塑料桶、塑料袋等容器进行封装,并在包装上标明产品名称、批号、生产日期等信息。
对于果胶酶的质量控制,需要检测其活力、纯度和稳定性等指标,保证产品的质量和安全。
综上所述,果胶酶的生产工艺包括菌种选育、发酵、分离纯化和产品包装等步骤。
通过科学的生产管理和工艺控制,可以提高果胶酶的产量和质量,满足市场需求。
同时,还可以通过技术创新和优化,提高果胶酶的生产效率和降低生产成本,推动果胶酶产业的发展。
果胶酶的工业化生产方法
果胶酶的工业化生产方法一. 前言果胶是可溶性纤维素的一种,在植物体内常与半纤维素和木质素相结合,形成中间细胞壁。
果胶水溶性,不溶于有机溶剂,在保持植物细胞强度和形态的同时还为植物提供了一定的抗菌性。
可溶性果胶占总果胶的70%-80%。
果胶酶是针对可溶性果胶的酶,可以将多种结构和分子量的果胶拆解成较小的分子,为果蔬加工提供有益物质。
目前,果胶酶已经广泛应用于果蔬加工、饲料、食品、医药和生物技术等领域。
本文主要介绍果胶酶工业化生产的方法。
二. 研发发展历程果胶酶离子钙抑制对酶的研究始于20世纪初。
1963年,西日本化学工业公司(现为“杜邦”)的研究员发现,在含有2%石灰的酪蛋白溶液中,酵素的活性下降。
随后,1980年代初,美国贝克曼国际公司开发了一种具有抗离子钙抑制能力的果胶酶,被应用于饲料、果蜜酒及食品工业中。
目前,果胶酶的发展主要依托于生物技术和深度海洋行业的开发。
生物技术采用了基因工程、蛋白质工程、发酵工程等技术,为果胶酶的产业化生产奠定了坚实的基础。
深度海洋则寻找到了生物技术无法突破的生物资源,如海藻等。
三. 生产方法果胶酶的制备一般分为以下几个步骤:(一)源菌的选取和保藏果胶酶源菌通常从天然环境中进行筛选,如发酵食品、果蔬垃圾、土样等。
通过筛选,得到菌株后,进行分离、鉴定和保藏。
分离是指分离出单个的细菌菌株,通过放大培养而得到足够的无菌菌株,以便随时利用。
鉴定是指确定其生物学特性、分类地位和与其他有用菌株的比较等。
保藏是指长期保存有用的细菌菌株以备将来利用之用,含冻干法和冷冻法。
(二)构建菌种及基因重组通过将源菌进行基因重组,代表的是由不同菌株的实体核酸组装而成的“合成”酶。
这些重组果胶酶的酶学性质和活性可以被改变或进化来满足市场需求。
通过这种方法,可以得到活力、效果、酶稳定性等都很好的果胶酶。
(三)发酵和纯化通过将构建好的菌株分别培养进行菌液发酵。
发酵条件控制好,在菌种发酵完成后,通过离心、上清液回收、如四效分离、层析、扩散等步骤,从发酵液中提取果胶酶。
果胶酶的制作工艺及流程
果胶酶的生产工艺流程一、生产工艺流程是:原料→预处理→抽提→脱色→浓缩→干燥→成品。
二、具体过程1.原料及其处理鲜果皮或干燥保存的柚皮均可作为原料。
鲜果皮应及时处理,以免原料中产生果胶酶类水解作用,使果胶产量或胶凝度下降。
先将果皮搅碎至粒径2~3mm,置于蒸汽或沸水中处理5~8min,以钝化果胶酶活性。
杀酶后的原料再在水中清泡30mi n,并加热到90℃5min,压去汁液,用清水漂洗数次,尽可能除去苦味、色素及可溶性杂质。
榨出的汁液可供回收柚苷。
干皮温水浸泡复水后,采取以上同样处理备用。
2.抽提通常用酸法提取。
将处理过的柚皮倒入夹层锅中,加4倍水,并用工业盐酸调ph 至1.5~2.0,加热到95℃,在不断搅拌中保持恒温60min。
趁热过滤得果胶萃取液。
待冷却至50℃,加入1%~2%淀粉酶以分解其中的淀粉,酶作用终了时,再加热至80℃杀酶。
然后加0.5%~2%活性炭,在80℃下搅拌20m in,过滤得脱色滤液。
因柚皮中钙、镁等离子含量较高,这些离子对果胶有封闭作用,影响果胶转化为水溶性果胶,同时也因皮中杂质含量高,而影响胶凝度,故酸法提取率较低,质量较差。
为解决以上问题,西南农业大学食品学院(1995)对酸法提取作了改进,即在酸法基础上,按干皮重量加入5%的732阳离子交换树脂或按浸提液重量加入0.3%~0.4%六偏磷酸钠,前者果胶得率可提高7.2%~8.56%,胶凝度提高30%以上,而后者得率提高25.35%~35.2%,其胶凝度可达180±3。
3.浓缩采用真空浓缩法,在55~60c的条件下,将提取液的果胶含量提高到4%~6.5%后进行后续工序处理。
近来作者和国内其他单位研究表明,超滤可用于果胶液浓缩,如用切割分子量为50000u的管式聚丙烯腈膜超滤器,在温度45℃、ph3.0、压力0.2mpa 条件下进行超滤浓缩,可将果胶浓度浓缩至4.21%,而其杂质含量和经常性生产费用分别仅为真空浓缩的1/5和1/2~1/3。
果胶酶的制作工艺及流程
果胶酶的制作工艺及流程果胶酶是一种能够分解果胶的酶,能够被广泛应用于食品、农业、生物技术等领域。
本文将介绍果胶酶的制作工艺及流程。
一、原料果胶酶的制作原料包括菌种、培养基和辅料。
1、菌种:一般采用高产果胶酶的微生物菌株,如枯草芽孢杆菌等。
2、培养基:果胶酶的培养基要求含有一定量的碳源、氮源、无机盐和辅料等。
常见的培养基有液体培养基和固体培养基。
液体培养基主要用于大规模生产,而固体培养基则用于微生物单克隆的筛选和选育。
3、辅料:包括调节PH值的酸碱剂、营养元素和稳定剂等。
常用的酸碱剂有氢氧化钠和磷酸,常用的营养元素包括葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨等。
稳定剂则用于增强果胶酶的稳定性。
二、制作流程1、制备菌种:将选好的菌株加入特定的营养培养基,经过适当的处理和培养,使其成长到一定程度后进行分装和保存。
分装后的菌种应该储存于低温条件下,以免失活。
2、制备种苗:将分装好的菌种接种到适当的培养基上,经过发酵后制成菌种。
3、制备发酵液:将制好的种苗接种到发酵罐中,加入适当的培养基和辅料,控制好温度、pH值等环境参数,进行发酵。
发酵液经过发酵后即为一定量的果胶酶。
4、提取酶液:将发酵得到的酶液通过离心、微过滤等方法进行提取、除杂和浓缩处理,得到纯化后的果胶酶。
5、干燥和包装:将纯化后的果胶酶进行干燥处理,使其形成可储存和使用的粉末或颗粒状物,最后进行包装上市销售。
三、总结以上就是果胶酶的制作工艺及流程。
制作果胶酶涉及到微生物学、工程学、化学等多个领域的知识,在具体制作过程中需要注意控制环境参数、提高酶的纯化度和活性等问题,以满足不同领域的需求。
酶解法促进果胶降解制备果胶酶
酶解法促进果胶降解制备果胶酶一、酶解法概述酶解法是一种利用生物酶对特定物质进行分解或转化的技术手段。
在众多生物转化过程中,酶解法凭借其高效性、特异性和温和的反应条件而备受关注。
酶作为生物催化剂,能够在不改变反应平衡的前提下,显著加速化学反应速率,使复杂的生物分子分解或转化为更有价值的产物。
这种方法在食品、制药、化工等多个领域都有广泛应用,为生产高附加值产品和解决工业难题提供了重要途径。
二、果胶的结构与性质果胶是一种复杂的多糖类物质,广泛存在于植物细胞壁中,对植物细胞起着粘连和支撑的重要作用。
其结构主要由半乳糖醛酸及其甲酯通过α - 1,4 - 糖苷键连接而成,分子中还含有一定数量的鼠李糖、阿拉伯糖等中性糖支链。
果胶的性质与其结构密切相关,它具有良好的水溶性,在水溶液中能够形成粘稠的胶体溶液,这一特性使其在食品工业中被广泛用作增稠剂和稳定剂。
然而,果胶的存在也给某些工业生产过程带来了挑战,例如在果汁加工中,果胶会导致果汁浑浊、出汁率低,影响产品质量和生产效率。
三、果胶酶的分类与作用机制果胶酶并非单一的酶,而是一类能够分解果胶的酶的总称,主要包括多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲酯酶(PME)和果胶裂解酶(PL)等。
这些酶各自具有独特的作用机制,共同协作实现对果胶的有效降解。
多聚半乳糖醛酸酶(PG)主要作用于果胶分子中的α - 1,4 - 糖苷键,随机水解半乳糖醛酸之间的键,将长链果胶分子逐步分解为较短的片段,从而降低果胶溶液的粘度。
果胶甲酯酶(PME)则专注于催化果胶分子中甲酯基的水解反应,去除甲基基团,使果胶分子中的羧基暴露出来,这一过程有助于后续其他果胶酶对果胶的进一步分解,同时也会影响果胶的电荷性质和胶体稳定性。
果胶裂解酶(PL)通过β - 消除反应断裂果胶分子中的糖苷键,产生不饱和的半乳糖醛酸末端,这种裂解方式在特定条件下能够更有效地破坏果胶的结构,加快果胶的降解速度。
这些酶在不同的环境条件下(如温度、pH值等)表现出不同的活性,并且相互协同作用,形成一个复杂而高效的果胶分解体系。
果胶酶的生产技术
果胶酶的生产技术课程:食品生物技术专业:班级:学号:姓名:完成时间:2011 年5月15日果胶酶的生产技术摘要:果胶酶是一类分解果胶质的酶的总称,它能将复杂的果胶分解为半乳糖醛酸等小分子。
目前果胶酶在食品、纺织、医药、造纸、环境、生物技术、饲料等领域得到广泛应用。
果胶酶主要来自微生物。
综述了微生物果胶酶生产茵的菌种、选育、鉴定、发酵方法和发酵条件优化,酶的分离纯化、酶学性质和分子生物学方面的研究进展,并介绍了果胶酶的应用进展,最后展望了微生物果胶酶研究的广阔前景。
关键词:微生物果胶酶果胶;果胶酶;几丁聚糖;固定化研究现状展望1 果胶果胶分子是由不同酯化度的半乳糖醛酸以a一1,4糖苷键聚合而成的多糖链,常带有鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、海藻糖、芹菜糖等组成的侧链,游离的羧基部分或全部与钙、钾、钠离子,特别是与硼化合物结合在一起m.它存在于所有的高等植物中,沉积于初生细胞壁和细胞间层,在初生壁中与不同含量的纤维素、半纤维素、木质素的微纤丝以及某些伸展蛋白(extensin)[2]相互交联,使各种细胞组织结构坚硬,表现出固有的形态.果胶分子的结构因植物的种类、组织部位、生长条件等的不同而不同,总体可分为光滑区(smooth region)和须状区(hairy region)两部分,主要由HGA、RG-I和RG-II三个结构区域构成,其中RG-II常以二聚体的形式存在.同其它植物多糖一样,果胶也是多分子的、多分散的、多结构的、有高级空间构象的,也具有一定的相对分子质量分布.2 果胶酶2.1 果胶酶(pectolytic enzyme or pectinase)是指能够分解果胶物质的多种酶的总称.2.2 果胶酶的分布许多霉菌及少量的细菌和酵母菌都可产生果胶酶,主要以曲霉和杆菌为主.新近报道的其它茵有青霉如意大利青霉(Penicillium itaticum)、扩展青霉(Penicillium expansum)以及Penicilliumgriseoroseumt。
果胶酶在果汁生产中的应用
葡萄汁
果胶酶能够提高葡萄汁的澄清 度和透明度,使葡萄汁更具市 场竞争力。
果胶酶与果汁品质的关系
1 口感改善
果胶酶使果汁更加顺滑 口感,提高果汁的品质 和口感体验。
2 渗透性增加
果胶酶降解果胶分子, 使果汁更易渗透,增加 果汁的可吸收性。
3 色泽提升
通过去除杂质和浑浊物 质,果胶酶可以使果汁 色泽更鲜艳、更吸引人。
果胶酶在果汁行业的发展前景
随着人们对食品安全和品质要求的提高,果汁生产商对果胶酶的需求越来越 大。未来,果胶酶应用将进一步扩大,更多的果汁产品将受益于果胶酶的应 用。
通过降解果胶,果胶酶能够使果汁的粘度降低,使其更易流动,并增加果汁的稳定性。
果胶酶提取方法
1 酶源选择
果胶酶可从多种酶源中 提取,例如细菌、真菌 等。
2 提取工艺
常用的提取工艺包括发 酵、浸提和分离纯化等 步骤。
3 纯化和精制
通过沉淀、过滤等技术, 可以纯化和精制果胶酶, 提高其活性和纯度。
果胶酶在果汁生产过程中的作用
1
果胶降解
果胶酶能够降解果汁中的果胶分子,改善果汁的质地和口感。
2
澄清和过滤
通过加入果胶酶,可以使果汁更易澄清和过滤,去除杂质和浑浊物质。
3
改善稳定性
果胶酶能够增加果汁的稳定性,使其更耐储存,延长果汁的保质期。
果胶酶在果汁生产中的优势
提高产品质量
果胶酶能够使果汁更清亮、 丰富口感,提高产品质量 和口感体验。
增加生产效率
通过降低果汁的粘度,果 胶酶能够提高生产效率和 流水线的产能。
节约成本
果胶酶能够提高果汁的收 率,减少浪费,从而节约 生产成本。
果胶酶的应用案例介绍
果胶酶加工工艺 陈
班级:食检122 学号:1201121242 姓名:陈海燕
果胶酶的加工工艺
一、实验目的
1. 了解果酒制作的流程。
2. 探索果酒酿造的适宜条件。
二、原理
发酵:利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体及各种不同代谢产物的过程。
酒精发酵需要适宜的条件:1)温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。
2)充足的糖源。
3)生活在呈酸性(pH)、缺氧环境中。
三、材料
1、材料新鲜苹果、果胶酶、抗坏血酸溶液
2、仪器和器具天平、榨汁机、循环水真空泵、可见分光光度计、色差计、水浴锅、压榨机或离心分离机。
四、实验步骤
1、灭菌:用高压蒸汽灭菌锅将锥形瓶等容器灭菌备用。
2、取材:取充分成熟、色泽鲜艳的新鲜苹果
3、预处理:洗净苹果用刀子将苹果切成碎块,用柠檬酸、维生素C溶液浸泡防止氧化(护色)。
4、榨汁:加入适量的水(护色液)榨汁。
5、果胶酶预处理:加入果胶酶并放入45℃的水浴中预处理2h。
6、过滤:过滤滤去部分杂质。
7、杀菌:80℃、5min。
8、调液:调整果汁的糖度为18%,pH4.0。
9、发酵:接种活化后的安琪干酵母,将调好的果汁转移至发酵容器中,封口,然后在28℃下发酵。
10、后续观察及记录:实验过程中的观察以及各项指标的监控(糖度、菌数、pH)
11、陈酿、澄清 12、调配、灭菌、成品
五、实验风采录。
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果胶酶的生产技术课程:食品生物技术专业:班级:学号:姓名:完成时间:2011 年5月15日果胶酶的生产技术摘要:果胶酶是一类分解果胶质的酶的总称,它能将复杂的果胶分解为半乳糖醛酸等小分子。
目前果胶酶在食品、纺织、医药、造纸、环境、生物技术、饲料等领域得到广泛应用。
果胶酶主要来自微生物。
综述了微生物果胶酶生产茵的菌种、选育、鉴定、发酵方法和发酵条件优化,酶的分离纯化、酶学性质和分子生物学方面的研究进展,并介绍了果胶酶的应用进展,最后展望了微生物果胶酶研究的广阔前景。
关键词:微生物果胶酶果胶;果胶酶;几丁聚糖;固定化研究现状展望1 果胶果胶分子是由不同酯化度的半乳糖醛酸以a一1,4糖苷键聚合而成的多糖链,常带有鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖、海藻糖、芹菜糖等组成的侧链,游离的羧基部分或全部与钙、钾、钠离子,特别是与硼化合物结合在一起m.它存在于所有的高等植物中,沉积于初生细胞壁和细胞间层,在初生壁中与不同含量的纤维素、半纤维素、木质素的微纤丝以及某些伸展蛋白(extensin)[2]相互交联,使各种细胞组织结构坚硬,表现出固有的形态.果胶分子的结构因植物的种类、组织部位、生长条件等的不同而不同,总体可分为光滑区(smooth region)和须状区(hairy region)两部分,主要由HGA、RG-I和RG-II三个结构区域构成,其中RG-II常以二聚体的形式存在.同其它植物多糖一样,果胶也是多分子的、多分散的、多结构的、有高级空间构象的,也具有一定的相对分子质量分布.2 果胶酶2.1 果胶酶(pectolytic enzyme or pectinase)是指能够分解果胶物质的多种酶的总称.2.2 果胶酶的分布许多霉菌及少量的细菌和酵母菌都可产生果胶酶,主要以曲霉和杆菌为主.新近报道的其它茵有青霉如意大利青霉(Penicillium itaticum)、扩展青霉(Penicillium expansum)以及Penicilliumgriseoroseumt。
]等,白绢菌(Selerotium rolfsii)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、微小毛霉(IVlucorpusilus)r钉、高大毛霉(Mucor mucedo)~钉、热解糖(Cloctridiumthermosaccharolyticum)、匐枝根霉(Rhizopus stolonifer)、粗糙链孢霉(Neurospora rassa)L6]嗜热侧孢霉(Sporotrichum thermophile)[7]等.由于真菌中的黑曲霉(Aspergillus niger)属于公认安全级(GRAS,General Regarded As Safe),其代谢产物是安全的,因此目前市售的食品级果胶酶主要来源于黑曲霉,最适pH值一般在酸性范围.近年来,一些来源于细菌杆菌属的碱性果胶酶日益受到重视,.随着分子生物学技术的不断提高,也可利用基因克隆技术实现果胶酶在其它微生物宿主的表达.3 生产果胶酶的微生物3.1 果胶酶生产菌种目前生产微生物果胶酶的菌种很多,来源极其广泛,包括细菌、霉菌、酵母菌和放线菌。
如芽孢杆菌属(日0c Ms) ,,”·,、青霉属(Penicillum) 、欧文氏菌(Erwinia) 、根霉属(Rhizopus) 、曲霉属( 一pergillus) “'”圳、克鲁维酵母属(Kluyveromy —ces) 。
、侧孢霉属(Sporotrichum) 、多子菌属(Pol—yporus) 3]、密螺旋体菌属(Treponema) ]、酵母(Saccharomyces) 、刺盘孢属(Colletotrichum) 、螺孢菌属Spirillospora) 、假单胞菌属(Pseudomonas) 、毛霉属(Mucor) 、毕赤氏酵母属(Pichia)[40I4 等。
3.2 果胶酶生产茵的选育菌株品质好坏直接关系着能否产生高质量的酶液,优秀的菌株不仅能提高酶制剂的品质、产量以及发酵原料的利用率,而且还能增加品种,缩短发酵生产周期,改进发酵和提炼工艺条件等。
李瑜等从腐烂苹果中定向分离筛选出适合液态发酵生产聚半乳糖醛酸酶的菌株YL-9,鉴定为扩展青霉选出一株产碱性果胶酶活力较高的菌株和一定量的Bacillus(PeniciUiumexpansum)。
Li从碱性土壤中筛gibsonii S-2。
Souza等从土壤样品中筛选到一株产内切聚半乳糖酸活力较高的菌株Peacilomyces2A.UMIDA.1。
Noomen等,以野生型菌株Penicillium occitanis CLIO0为出发菌株,经亚硝酸诱变育种后得到一株产果胶酶较高的突变株Peni—cillium occitanis Po16,其果胶酶活力高达原始菌株的50倍。
诸葛斌等对基因工程育种得到的产碱性果胶酯裂解酶(PL)的基因工程菌Pichia pastoris进行了研究,使碱性果胶酯裂解酶(PL)表达量达到一定量3.3 果胶酶生产菌的鉴定目前,果胶酶生产菌多采用经典法和分子生物学方法相结合对新分离菌株进行鉴定。
基于形态学与ITS序列分子系统进化分析,将新分离的高产果胶酶菌株EIM 一6鉴定为AspergiUusniger。
Li等结合经典方法和分子生物学方法将株新分离的产碱性果胶酶活力较高的菌株S-2鉴定为Bacillus gibsonii。
柯崇榕等基于18S rDNA序列的系统发育进化分析将果胶酶高产菌EIM.4鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。
4 微生物果胶酶的发酵4.1 发酵方法目前,微生物果胶酶的发酵方法主要有3种方法,包括液态发酵法、固态发酵法和固定化细胞法。
4.1.1 液态发酵法Tari等采用Aspergillus SO—he ATCC 20235经液态发酵生产聚半乳糖醛酸酶。
Sharma等采用Bacillus pumilus dcsrl经液态发酵生产高碱性和热稳定性的果胶酶。
Patil等以葵花盘作为基质,分别接种Aspergillus niger DMF 27和Aspergillus niger DMF 45进行液态发酵和固态发酵生产果胶酶。
4.1.2 固态发酵法Botella等采用葡萄皮渣为基质,接种一定数量Aspergillus awamori 2B.361 U2/1经固态发酵生产外切聚半乳糖醛酸酶。
Jing等采用一pergillus niger经固态发酵生产果胶酶。
Silva等以农产品加工废弃物柑橘皮渣和麸皮为基质,采用菌种Penicillium viridicatum RFC3经固态发酵生产果胶酶。
4.1.3 固定化细胞法 Almeida等研究显示带循环流动填充床生物反应器更适合固定化Kluyvero—myces marxianus CCT 3172细胞生产果胶酶。
Almei—da等研究表明在带循环流动填充床生物反应器中,多空玻璃载体和纤维素载体均适合固定化Kluyveromyces marxianus CCT 3 1 72细胞生产果胶酶。
4.2 发酵条件优化发酵是菌种产生代谢产物的主要环节,除菌种固有的遗传因素外,发酵条件是影响产酶的重要因素。
Patil等以葵花盘作为基质,分别接种Asper—gillus niger DMF 27和DMF 45进行液态和固态发酶,结果表明液态和固态发酵的适宜温度和pH 均分别为34~C和pH5.0,最佳接种量分别为1×10 g/mL和1 X 10 g/mL,最大产酶率分别为12.6 U内切果胶酶/g和34.2 U外切果胶酶/g。
Cavalitto等采用响应面分析对Geotrichum klebahnii ATCC42397产原果胶酶的发酵条件进行了优化,结果显示pH和Fe“对原果胶酶产率有显著影响,在较优条件下原果胶酶产率达到236 U/mL。
5 微生物果胶酶的分离纯化国内外学者对微生物果胶酶的分离纯化进行了研究,常采用的分离纯化和鉴定方法有超滤、硫酸铵沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等点聚焦等。
Yadav等采用硫酸铵沉淀、DEAE.纤维素和G.100凝胶过滤层析对Aspergillusflavu,MTCC 7589所产碱性果胶裂解酶进行了分离纯化,经SDS-PAGE显示为单一条带;纯化酶的最适温度和pH分别为50℃和8.0,Km和kcat值分别为0.59 mg/mL和52.2 S~,酶的分子量为38±01 kD,具有良好的脱胶能力。
Sehnitzhofer从Sclerotium rolfsii CBS 350.80所产聚半乳糖醛酸酶粗酶液中经等点聚焦制备电泳得到两个聚半乳糖醛酸酶分别为PG1和PG2,它们的分子量和等电点分别为39.5 kD和pI 6.5与38 kD和pI 5.4,它们性质非常相似,都是内切聚半乳糖醛酸酶。
Pichia Pastoris中实现了Bacillus subtil~XZ2产原果胶酶基因的真核表达。
Gonza lez 等¨研究了61株Saccharomyces cerevisiae产酒菌株中的聚半乳糖醛酸酶活性,寻找其中含有表达内切聚半乳糖醛酸酶的基因(PGU1)并研究其表达的聚半乳糖醛酸酶活性,从中筛选出菌株S.cerevisiae UCLMS.39,并对其表达内切聚半乳糖醛酸酶的基因(PGU1)进行了克隆测序。
Walker等对菌株Treponema pectinovo.rum ATCC 33768中编码果胶盐裂解酶的基因pelA进行了克隆和表达,重组酶蛋白的性质与其他细菌果胶盐裂解酶有相似之处,它们的最适作用pH均为碱性范围,酶活对钙离子有依赖性6 微生物果胶酶的性质国内外学者对微生物果胶酶的性质进行了研究,为果胶酶的深入研究和应用奠定了基础。
Ce—lestino等纯化了Acrophialophora nainiana所产胞外果胶酶,纯化酶经SDS.PAGE和质谱得到分子量分别为35.5 kD和30.749 kD,最适温度和pH分别为60℃和8.0,Km值为4.22 mg/mL,能被L一色氨酸、DEPC、DTT、DTNB、DTP、L.半胱氨酸、B-巯基乙醇激活,却被NBS、Fe“、Cu“、Zn“、Mn“、A1“、Ca“抑制,其N端氨基酸序列分别与来自Bacilluslicheniformis和Xanthomonas campestris的果胶盐裂解酶有66和68%的相似性。
Lei等研究发现固定化果胶酶和未固定化酶的最适温度和pH相同,分别均为65℃和6.0。
7 展望随着经济的发展,人们生活水平的提高,健康、环境、资源和能源越来越受到人们的重视,现代分子生物学和酶工程在现代生活中的作用越来越突出。