细菌的生长曲线

合集下载

细菌生长曲线的测定的实验步骤

细菌生长曲线的测定的实验步骤

细菌生长曲线的测定的实验步骤一、实验目的1. 了解细菌生长曲线特征,测定细菌繁殖的代时;2. 学习液体培养基的配制以及接种方法;3. 反复练习无菌操作技术;4. 了解不同细菌,不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同;5. 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法二、 实验原理将一定量的细菌接种在液体培养基内,在一定条件下培养,可观察到细菌的生长繁殖有一定的规律性,如以细菌的活菌数的对数作纵坐标,以培养时间作横坐标,可绘成一条曲线,成为生长曲线(如图一)。

图一 微生物生长曲线示意图单细胞微生物的发酵具有四个阶段,即Ⅰ调整期(延滞期)、Ⅱ对数期(生长旺盛期)、Ⅲ平衡期(稳定期)、Ⅳ死亡期(衰亡期)。

生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。

不同的微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。

因此,测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。

测定微生物生长曲线的方法很多,有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。

本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。

将所测得的光密度值(OD600)与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。

注意,由于光密度表示的是培养液中的总菌数,包括活菌与死菌,因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。

从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间,即代时,以G 表示。

其计算公式为:2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=式中t1和t2为所取对数期两点的时间;W1和W2分别为相应时间测得的细胞含量(g/L )或OD 。

三、 实验仪器、材料和用具1.实验材料:大肠杆菌,枯草杆菌菌液及平板;2.培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基3.实验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培养箱, 摇床,722s分光光度计;4.实验用具:无菌1000ul吸头80个;无菌5000ul吸头2个;比色皿9个+共用参比杯一个.四、实验步骤1.准备菌种:将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中,37℃振荡培养18h,另外准备单菌落平板各1块2.分为三个小组:第(1)小组取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基, 37 ℃ 200rpm取3.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃ 200rpm取5.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃ 200rpm第(2)小组取一个大肠杆菌菌落接种到100ml培养基, 37 ℃ 200rpm取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃ 110rpm取1.0ml大肠杆菌接种到100ml培养基, 30 ℃ 200rpm第(3)小组取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基, 37 ℃ 200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基, 30 ℃ 200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基, 37 ℃ 110rpm每培养一小时取样一次(2.5h,3.5h加测1次). 对照组测量起始pH,所有瓶子测量发酵9h结束测pH.3.测量:选用600nm波长,以蒸馏水作为参比,开始培养前测定每组培养液的OD值作为起始点。

第六章 微生物的生长 一、名词解释 01. 细菌生长曲线(growth curve

第六章 微生物的生长 一、名词解释 01. 细菌生长曲线(growth curve

第六章微生物的生长一、名词解释01.细菌生长曲线(growth curve):当细菌在适宜的环境条件下培养时,如果以培养的时间为横座标,以细菌数量变化为纵坐标,根据细菌数量变化与相应时间变化之间的关系,作出一条反应细菌在培养期间菌数变化规律的曲线,这种曲线称为生长曲线。

02.菌落形成单位(colony forming unit, cfu):通过浇注或涂布等方法使菌样的微生物单细胞分散在平板上(内),待培养后,每一个活细胞就形成一个单菌落,即为菌落形成单位。

03.比生长速率(specific growth rate):单位数量的细菌或物质在单位时间(h)内的增加量。

04.同步培养(synchronous culture):是一种培养方法,它能使群体中的所有细胞变成处于同时进行生长和分裂的群体细胞。

05.连续培养(continuous culture):是在微生物的整个培养时间内,通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续下去的一种培养方式。

06.连续发酵(continuous fermentation):连续培养如果应用于生产实践上,就称为连续发酵。

07.分批培养:将微生物置于一定容积的培养基中,经过培养生长,最后一次收获,此称为分批培养。

08.二元培养:是纯培养的一种特殊形式。

根据寄生微生物的生活特点,必须将寄生微生物和寄主微生物培养在一起,同时排除其它杂菌。

例如培养苏云金杆菌及其噬菌体,需先在平板培养基上培养细菌,然后在菌苔上接种其噬菌体,经培养后,出现噬菌体感染的透明空斑,这种培养方法称为二元培养。

09.高密度培养(high cell-density culture, HCDC):有时也称高密度发酵,一般指微生物在液体培养中细胞群体密度超过了常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术。

10.致死时间(thermal death time, TDT):是指在特定的条件和特定的温度下(如60℃),杀死某微生物水悬乳液群体所需要的最短时间。

实验4测定细菌生长曲线

实验4测定细菌生长曲线
精品课件
测定(OD)
每小时吸取200ul培养液到2800ul蒸馏水中摇匀, 以蒸馏水为对照,选420nm波长进行光密度(OD 值)的测定(注意应测定0h的光密度值)。
每台分光光度计固定在1个参比杯,每人只能在同 一台分光光度计上测量(注意波长调好后,不要动 波长旋钮)。
精品课件
六、结果与讨论
1)绘制大肠杆菌和枯草杆菌在两种接种方法下的生长曲线。 (标出生长曲线中四个时期的位置和名称)
2)为什么用比浊法测定的细菌生长只是表示细菌的相对生长状 况?
3)生长曲线中为什么会出现稳定期和衰退期?在生产实践中怎 样缩短延迟期?怎样延长对数期及稳定期?怎样控制衰退期?
4)接种时种子在什么条件下为宜,液体种子比斜面种子为什么 优越?
精品课件
实验4、测定细菌生长曲线
精品课件
一、识微生物在一定条 件下生长繁殖的规律。
2.掌握用细菌悬液的浑浊度间接测定细菌生长的方 法。
3.学习液体培养基的配制及接种方法。
二、 实验内容
测定大肠杆菌、枯草杆菌的生长曲线
精品课件
三、实验原理
将一定量的细菌接种在液体培养基内,一定条件下 培养,细菌的生长繁殖具有一定的规律性。 以细菌活菌数的对数作纵坐标,培养时间作横坐标, 可绘成一条曲线,称为生长曲线。
• 将所测的光密度值(OD)与其对应的培养时间作图, 即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线(注意:由于 光密度表示的是培养液的总数,包括活菌与死菌所测 的生长曲线衰亡期不明显)。
精品课件
微生物的典型生长曲线图 Ⅰ.延滞期,Ⅱ.指数期,Ⅲ.稳定期,Ⅳ.衰亡期
精品课件
四、实验仪器、材料和用具
仪器: 摇床、分光光度计、取液器。
细菌的生长曲线分为:迟缓期、对数期、稳定期和 衰退期。其表示细菌从开始生长到死亡全过程的动 态。测定微生物的生长曲线对于了解和把握生物的

[精品]细菌生长曲线的测定

[精品]细菌生长曲线的测定

[精品]细菌生长曲线的测定细菌生长曲线的测定是细菌学中的一项重要实验。

它可以帮助我们了解细菌的生长繁殖规律及其影响因素,为控制细菌繁殖提供理论依据。

本次实验将介绍如何通过外观观察、菌落计数及测定细菌生物量的方法,获得细菌在液体培养基中的生长曲线。

实验步骤:一、准备实验材料和试剂1、选取一种细菌菌株,本次实验选择了大肠杆菌(Escherichia coli);2、配置好液体培养基,一般为普通营养琼脂培养基、肉汤培养基等;3、消毒好实验室的工作台面及实验仪器;4、准备好移液管、试管、比色管和加热消毒的线圈镊子等实验用具。

二、制备不同浓度的菌液1、挑选一根菌棒,从培养基上接入一些带有细菌的菌落,将菌落均匀涂抹于培养基表面;2、将含有细菌的培养基放置在恒温摇床中,在适宜的温度下进行培养;3、当细菌生长至一定程度(一般在对数生长期)时,用无菌的移液管,在培养基中取出一定量的菌液;4、分别将不同体积的菌液加入到含有培养基的试管中,制备成不同浓度的菌液。

三、测定不同浓度菌液对应的OD600值1、将制备好的不同浓度菌液放入洗涤过的比色管中;2、由于细菌太小,肉眼观察不能得出其数量的增多或减少,因此需要使用分光光度计在600nm处测量各个浓度的菌液的吸光度(OD)值;3、重复测量3次,取平均值计算OD600;4、根据OD600值和菌液中细胞数量的线性关系,可通过OD600值推算出细胞数。

2、每隔2-3个小时,取出一定量的菌液,测量其OD600值,记录下菌液对应时间的值;3、采用计数培养法,每隔一定时间取出一定体积的菌液,进行菌落数的计数;4、利用OD600值曲线和菌落数曲线绘制出细菌生长曲线。

实验注意事项:1、实验期间需在无菌条件下操作,防止细菌的外界感染对实验结果的影响;2、实验者需佩戴适当的防护手套及实验服,以免对人体造成伤害;3、制备好菌液后需要及时放置在摇床中,防止菌落外的细菌感染进去;4、测量OD600值时比色管必须清洗干净,用甲醇或无菌去离子水。

测定细菌生长曲线

测定细菌生长曲线

实验七 测定细菌生长曲线一、实验目的1. 了解细菌生长曲线特征,测定细菌繁殖的代时;2. 学习液体培养基的配制以及接种方法;3. 反复练习无菌操作技术;4. 了解不同细菌,不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同;5. 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法二、 实验原理将一定量的细菌接种在液体培养基内,在一定条件下培养,可观察到细菌的生长繁殖有一定的规律性,如以细菌的活菌数的对数作纵坐标,以培养时间作横坐标,可绘成一条曲线,成为生长曲线(如图一)。

图一 微生物生长曲线示意图单细胞微生物的发酵具有四个阶段,即Ⅰ调整期(延滞期)、Ⅱ对数期(生长旺盛期)、Ⅲ平衡期(稳定期)、Ⅳ死亡期(衰亡期)。

生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。

不同的微生物有不同的生长曲线,同一种微生物在不同的培养条件下,其生长曲线也不一样。

因此,测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。

测定微生物生长曲线的方法很多,有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。

本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。

将所测得的光密度值(OD600)与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。

注意,由于光密度表示的是培养液中的总菌数,包括活菌与死菌,因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。

从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间,即代时,以G 表示。

其计算公式为:2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=式中t1和t2为所取对数期两点的时间;W1和W2分别为相应时间测得的细胞含量(g/L )或OD 。

三、 实验仪器、材料和用具1. 实验材料:大肠杆菌,枯草杆菌菌液及平板;2. 培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基3.实验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培养箱, 摇床,722s分光光度计;4.实验用具:无菌1000ul吸头80个;无菌5000ul吸头2个;比色皿9个+共用参比杯一个.四、实验步骤1.准备菌种:将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中,37℃振荡培养18h,另外准备单菌落平板各1块2.分为三个小组:第(1)小组取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基, 37 ℃200rpm取3.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃200rpm取5.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃200rpm第(2)小组取一个大肠杆菌菌落接种到100ml培养基,37 ℃200rpm取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基,37 ℃110rpm取1.0ml大肠杆菌接种到100ml培养基,30 ℃200rpm第(3)小组取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基,37 ℃200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基,30 ℃200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基,37 ℃110rpm每培养一小时取样一次(2.5h,3.5h加测1次). 对照组测量起始pH,所有瓶子测量发酵9h结束测pH.3.测量:选用600nm波长,以蒸馏水作为参比,开始培养前测定每组培养液的OD值作为起始点。

简述细菌在液体培养基中生长所表现的生长曲线各个时期的名称

简述细菌在液体培养基中生长所表现的生长曲线各个时期的名称

简述细菌在液体培养基中生长所表现的生长曲线各个时期的名称
细菌的生长繁殖的4个时期:迟缓期,对数期,稳定期,衰亡期。

迟缓期(lag phase):又叫调整期。

细菌接种至培养基后,对新环境有一个短暂适应过程(不适应者可因转种而死亡)。

此期曲线平坦稳定,因为细菌繁殖极少。

迟缓期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异,一般为1~4小时。

此期中细菌体积增大,代谢活跃,为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。

对数期(logarithmic phase):又称指数期。

此期生长曲线上活菌数直线上升。

细菌以稳定的几何级数极快增长,可持续几小时至几天不等(视培养条件及细菌代时而异)。

此期细菌形态、染色、生物活性都很典型,对外界环境因素的作用敏感,因此研究细菌性状以此期细菌最好。

抗生素作用,对该时期的细菌效果最佳。

稳定期(stationary phase):该期的生长菌群总数处于平坦阶段,但细菌群体活力变化较大。

由于培养基中营养物质消耗、毒性产物(有机酸、H2O2等)积累pH下降等不利因素的影响,细菌繁殖速度渐趋下降,相对细菌死亡数开始逐渐增加,此期细菌增殖数与死亡数渐趋平衡。

细菌形态、染色、生物活性可出现改变,并产生相应的代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素、以及芽胞等。

衰亡期(decline phase):随着稳定期发展,细菌繁殖越来越慢,死亡菌数明显增多。

活菌数与培养时间呈反比关系,此期细菌变长肿胀或畸形衰变,甚至菌体自溶,难以辩认其形。

生理代谢活动趋于停滞。

故陈旧培养物上难以鉴别细菌。

细菌生长曲线的测定

细菌生长曲线的测定

实验五细菌生长曲线的测定一、实验目的1、了解细菌生长曲线特点及测定原理2、学习用比浊法测定细菌的生长曲线二、实验原理大多数细菌的繁殖速率很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次。

将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期,对数期,稳定期和衰亡期四个阶段。

以培养时间为横坐标,以细菌数目的对数或生长速率为纵坐标作图所绘制的曲线称为该细菌的生长曲线。

不同的细菌在相同的培养条件下其生长曲线不同,同样的细菌在不同的培养条件下所绘制的生长曲线也不相同。

测定微生物的数量有多种不同的方法,可根据要求和实验室条件选用。

本实验采用比浊法测定,由于在一定的范围内,微生物细胞浓度与透光度成反比,与光密度(OD值)成正比,因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度,并将所测的OD值与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线,此法快捷、简便。

三、实验材料1、菌种:大肠杆菌2、培养基: LB液体培养基/牛肉膏蛋白胨液体培养基3、仪器和器具:721分光光度计,比色杯(1cm),恒温摇床,无菌吸管(5mL),大试管,三角瓶(250mL)。

四、实验流程标记→接种→培养→测定五、操作步骤1、标记:取11支无菌大试管,用记号笔分别标明培养时间,即0,1.5,3,4,6,8,10,12,14,16和20h。

2、接种:分别用5mL无菌吸管吸取2.5mL大肠杆菌过夜培养液(培养10~12h)转入盛有60mL 液体培养基的三角瓶内,混合均匀后分别取5mL混合液加至上述标记的11支无菌大试管中。

3、培养:将已接种的试管置摇床37℃振荡培养(振荡频率200~250r/min),分别培养0,1.5,3,4,6,8,10,12,14,16和20h,将标有相应时间的试管取出,立即放4℃贮存,最后一同比浊测定其光密度值。

4、比浊测定:用未接种的液体培养基作空白对照,选用600nm波长进行光电比浊测定。

细菌生长曲线

细菌生长曲线

2.细胞内开始积累储藏物,如肝糖、异染颗粒、脂肪 粒等。
3.大量积累代谢产物,如放线菌发酵形成大量抗生素。 在生产上可通过补料,调节pH与温度等措施,延长稳 定期,以积累更多的代谢产物。 4.大多数芽孢细菌在此阶段形成芽孢。
四、衰亡期(decline phase) 细菌死亡率逐渐增加,以致死亡数大大超过新生数, 群体中活细菌的数目急剧下降,出现“负生长”,此阶 段叫衰亡期,又称死亡期。
同步生长能否无限的维持下去?
由于同步群体内细胞个体之间的差异,同步生长 不能无限的维持,往往会逐渐破坏,最多能维持 2~3 个世代后,群体内的各个细胞个体就会因为生长周期 的代时差异而处于不同的生长阶段,出现非同步生长。
细菌的同步生长与非同步生长
第四节 环境因素对微生物生长的影响
微生物的生长受到它们所处环境理化因素的极大影 响。了解环境因素对微生物生长的影响,有助于说明微 生物在自然界的分布,还可帮助我们采用相应的方法控 制微生物的活动。
特点: 1.死亡期中有一段时间, 活菌数按几何级数下降, 称 为“对数死亡阶段”。
2.菌体细胞产生或释放出一些产物。如氨基酸、转化 酶、抗生素等。 3.菌体细胞有的开始自溶,有的呈现多种形态,有的 产生畸形,细胞大小悬殊,有的细胞内多液泡,有的 细胞革兰氏反应阳性变成阴性反应等。
第二节 连续培养
温 度
温度是影响微生物生长的一个重要因子。 每种微生物都有3种基本温度。 最低生长温度:低于这个温度以下不再生长。 最适生长温度:在此温度时生长速度最快。 最高生长温度:在此温度以上不可能生长。
微生物按其生长温度范围可分为三类: 低温微生物、中温微生物、高温微生物。
微生物的三种类型(温度)
低温的应用?
干 燥

微生物的生长曲线名词解释

微生物的生长曲线名词解释

微生物的生长曲线
微生物生长曲线是以微生物数量(活细菌个数或细菌重量)为纵坐标,培养时间为横坐标画得的曲线。

一般说,微生物(细菌)重量的变化比个数的变化更能在本质上反应出生长的过程。

微生物生长曲线可分为三个阶段即生长率上升阶段(对数生长阶段)、生长率下降阶段及内源呼吸阶段。

微生物在适宜的环境条件下,不断地吸收营养物质,并按照自己的代谢方式进行代谢活动,如果同化作用大于异化作用,则细胞质的量不断增加,体积得以加大,于是表现为生长。

简单地说,生长就是有机体的细胞组分与结构在量方面的增加。

微生物的生长曲线是微生物生态学和生物工程学等领域中非常重要的研究内容之一。

通过观察和分析微生物的生长曲线,可以了解微生物的生长特性、适应能力以及它们在不同生长条件下的表现。

这些信息对于研究和应用微生物具有重要的意义。

细菌生长曲线的题发酵工程

细菌生长曲线的题发酵工程

细菌生长曲线的题发酵工程细菌生长曲线是描述细菌在培养基中生长数量随时间变化的曲线。

这个曲线通常分为四个阶段:潜伏期、指数期、平稳期和衰退期。

在发酵工程中,对细菌生长曲线的研究非常重要,因为它可以帮助我们了解细菌在不同条件下的生长特性,进而优化发酵过程,提高产量和质量。

一、潜伏期潜伏期是指细菌接种到培养基中后,在适应环境和准备繁殖阶段所经历的时间。

在这个阶段,细菌数量几乎没有增加,因为它们需要适应新的环境条件,并合成必要的酶和蛋白质来支持繁殖。

二、指数期指数期是细菌生长速度最快的阶段。

在这个阶段,细菌开始迅速繁殖,并且数量呈指数增加。

这是由于细菌处于最有利于生长的环境条件下,并且它们能够利用培养基中的营养物质进行代谢活动和复制DNA。

三、平稳期平稳期是指细菌数量保持相对稳定的阶段。

在这个阶段,细菌的繁殖速度减缓,因为培养基中的营养物质开始减少,产生的代谢产物也会积累。

此时,细菌的新陈代谢和死亡率达到平衡状态。

四、衰退期衰退期是指细菌数量开始下降的阶段。

在这个阶段,培养基中的营养物质已经耗尽,而代谢产物积累到了毒性浓度。

细菌开始死亡,并且数量逐渐减少。

发酵工程中,我们可以利用细菌生长曲线来优化发酵过程。

通过观察和测量细菌生长曲线,我们可以确定最适合生长的条件,例如温度、pH值和氧气供应等。

调整这些条件可以提高细菌繁殖速度和产量。

在发酵过程中,我们可以根据细菌生长曲线来控制营养物质的添加和代谢产物的去除。

在指数期,细菌对营养物质需求较大,因此及时添加适量的营养物质可以促进细菌繁殖。

而在平稳期,代谢产物积累可能会抑制细菌生长,因此需要及时去除或稀释代谢产物,以维持良好的发酵环境。

细菌生长曲线还可以用于监测和预测发酵过程中的细菌数量和活性。

通过定期取样并测量细菌数量,我们可以了解到细菌繁殖的速率和状态。

这有助于我们及时调整发酵条件,并预测发酵结束时间。

细菌生长曲线在发酵工程中具有重要的应用价值。

通过研究和理解细菌在不同阶段的生长特性,我们可以优化发酵过程,提高产量和质量。

细菌生长曲线测定实验方法的研究

细菌生长曲线测定实验方法的研究

细菌生长曲线测定实验方法的研究一、本文概述细菌生长曲线测定实验方法的研究对于深入了解细菌的生长规律、生长环境、生长条件以及生长过程中的代谢变化等方面具有重要意义。

本文旨在探讨细菌生长曲线测定的实验方法,包括实验原理、实验步骤、实验条件的选择与优化等方面,以期为提高细菌生长曲线测定的准确性和可靠性提供理论支持和实践指导。

本文将介绍细菌生长曲线测定的基本原理,包括细菌生长曲线的定义、特点以及影响因素等。

在此基础上,本文将详细阐述细菌生长曲线测定的实验步骤,包括实验材料的准备、实验条件的设置、实验过程的操作以及实验结果的记录与分析等。

本文将重点讨论实验条件的选择与优化。

实验条件是影响细菌生长曲线测定结果的关键因素,包括培养基的成分、温度、pH值、接种量等。

本文将通过对比实验和数据分析,探讨不同实验条件对细菌生长曲线的影响,从而确定最佳的实验条件组合。

本文将总结细菌生长曲线测定实验方法的优缺点,并提出改进意见和建议。

通过本文的研究,将为细菌生长曲线测定的实验方法提供更为准确、可靠的理论支持和实践指导,有助于推动细菌学研究的深入发展。

二、细菌生长曲线的理论基础细菌生长曲线测定实验方法的理论基础主要源自微生物生长动力学。

微生物生长动力学描述了微生物在特定环境下的生长规律,其中包括细菌生长曲线的形成机制。

细菌生长曲线是反映细菌群体生长状态的重要指标,通过对细菌生长曲线的分析,可以了解细菌生长的不同阶段,以及影响细菌生长的各种因素。

细菌生长曲线通常可分为四个主要阶段:延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期。

在延迟期,细菌适应新的生长环境,进行必要的代谢准备,此阶段细菌数量增长缓慢。

进入对数生长期后,细菌以指数方式迅速增长,这是细菌生长最为旺盛的阶段。

稳定期时,由于营养物质的消耗和代谢产物的积累,细菌增长速率逐渐减缓,细菌数量趋于稳定。

进入衰亡期,细菌由于营养物质的耗尽和代谢产物的毒性作用,生长速率急剧下降,细菌大量死亡。

细菌的典型生长曲线

细菌的典型生长曲线

细菌的典型生长曲线1. 引言细菌是一类微生物,其数量庞大且广泛分布于地球上的各个环境中。

细菌的生长对于人类和环境具有重要影响,因此了解细菌的典型生长曲线对于研究微生物学和应用领域具有重要意义。

本文将介绍细菌的典型生长曲线,包括不同阶段的特征、影响因素以及应用。

2. 细菌的典型生长曲线概述细菌的典型生长曲线通常可以分为四个阶段:潜伏期、指数期、平台期和死亡期。

这些阶段反映了细菌在特定条件下的数量变化。

2.1 潜伏期在潜伏期,细菌适应新环境并准备进行繁殖。

在这个阶段,细菌数量相对稳定,并且没有明显增加或减少。

这是由于细胞进行代谢调整和适应新环境所需时间。

2.2 指数期指数期是细菌最快速增殖的阶段。

在这个阶段,细菌数量呈指数增长,也被称为对数增长。

细菌在此期间以最快的速度进行分裂和繁殖,每个细菌细胞通过二分裂产生两个新的细胞。

2.3 平台期平台期是指当细菌数量达到一定水平后,其增殖速率减缓并趋于稳定的阶段。

在这个阶段,细菌数量保持相对稳定,并且新生细菌数量与死亡细菌数量之间达到平衡。

2.4 死亡期死亡期是指当环境条件恶化或资源耗尽时,细菌数量开始减少的阶段。

在这个阶段,死亡速率超过了新生产生的速率,导致总体上细菌数量下降。

3. 影响细菌生长曲线的因素3.1 温度温度是影响细菌生长曲线的主要因素之一。

不同类型的细菌对于温度有着不同的适应范围和最适生长温度。

通常来说,较低温度下会延缓细菌繁殖速率,而较高温度下会加速细菌繁殖速率。

3.2 pH值pH值是指环境的酸碱度,也是影响细菌生长曲线的重要因素。

不同类型的细菌对于pH值有着不同的适应范围和最适生长pH值。

极端酸性或碱性条件下会抑制细菌生长。

3.3 营养物质营养物质是细菌繁殖所需的重要资源。

不同类型的细菌对于营养物质有着不同的需求。

营养物质的浓度和可用性会直接影响细菌生长曲线。

3.4 氧气浓度氧气浓度对于许多细菌而言也是一个重要因素。

有些细菌需要氧气进行呼吸作用,被称为需氧菌;而另一些则不能在氧气存在下进行繁殖,被称为厌氧菌。

实验八细菌生长曲线的测定及

实验八细菌生长曲线的测定及

实验八细菌生长曲线的测定及血球计数板测定微生物生长一、细菌生长曲线的测定及★细菌的生长曲线就是把一定量的菌体细胞接种到恒容积的液体培养基中,在适宜的条件下进行培养,在此过程中,其细胞数目将随培养时间的延续而发生规律性的变化,如以细胞数目的对数值(或O.D.值)为纵坐标,以培养时间为横坐标作一条曲线,即为细菌的生长曲线,它反映了细菌的群体生长规律。

★大多数细菌的繁殖速率很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次。

★依据其生长速率的不同,可把细菌的生长曲线划分为延滞期,对数期,稳定期和衰亡期等四个时期。

★微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标,OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度。

通常400~700nm 都是微生物测定的范围,505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。

★本实验测定细菌生长曲线的方法是,将待测菌种接入一只大试管的培养液中,在适宜的培养温度和良好的通气状态下,定时取出此试管,在600纳米波长处测定菌液浓度(O.D.值),在一定的范围内,菌液浓度与光密度值成线性关系。

因此,根据菌液的O.D.值可以推知细菌生长繁殖的进程。

将所测得的一组O.D.值与其相应的培养时间作图,即可绘制出该菌的生长曲线。

☆实验操作1、菌种培养:取大肠杆菌斜面菌种1支,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏蛋白胨培养液(LB)中,静止培养12--14h,备用。

2、制备LB培养基100ml置于200ml三角瓶内,备用。

3、标记:取11支无菌大试管,用记号笔分别标明培养时间,即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h。

4、接种:分别用5ml无菌吸管吸取5ml大肠杆菌培养液(培养12~14h)转入盛有100ml LB液的三角瓶内,混合均匀后分别取5ml混合液放入上述标记的11支无菌大试管中。

5、培养:将已接种的试管置摇床37℃振荡培养(振荡频率250r/min),分别培养0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h,将标有相应时间的试管取出,立即放冰箱中贮存,最后一同比浊测定其光密度值。

实验八 细菌生长曲线的测定及【内容充实】

实验八  细菌生长曲线的测定及【内容充实】

实验八细菌生长曲线的测定及血球计数板测定微生物生长一、细菌生长曲线的测定及★细菌的生长曲线就是把一定量的菌体细胞接种到恒容积的液体培养基中,在适宜的条件下进行培养,在此过程中,其细胞数目将随培养时间的延续而发生规律性的变化,如以细胞数目的对数值(或O.D.值)为纵坐标,以培养时间为横坐标作一条曲线,即为细菌的生长曲线,它反映了细菌的群体生长规律。

★大多数细菌的繁殖速率很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次。

★依据其生长速率的不同,可把细菌的生长曲线划分为延滞期,对数期,稳定期和衰亡期等四个时期。

★微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标,OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度。

通常400~700nm 都是微生物测定的范围,505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。

★本实验测定细菌生长曲线的方法是,将待测菌种接入一只大试管的培养液中,在适宜的培养温度和良好的通气状态下,定时取出此试管,在600纳米波长处测定菌液浓度(O.D.值),在一定的范围内,菌液浓度与光密度值成线性关系。

因此,根据菌液的O.D.值可以推知细菌生长繁殖的进程。

将所测得的一组O.D.值与其相应的培养时间作图,即可绘制出该菌的生长曲线。

☆实验操作1、菌种培养:取大肠杆菌斜面菌种1支,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏蛋白胨培养液(LB)中,静止培养12--14h,备用。

2、制备LB培养基100ml置于200ml三角瓶内,备用。

3、标记:取11支无菌大试管,用记号笔分别标明培养时间,即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h。

4、接种:分别用5ml无菌吸管吸取5ml大肠杆菌培养液(培养12~14h)转入盛有100ml LB液的三角瓶内,混合均匀后分别取5ml混合液放入上述标记的11支无菌大试管中。

5、培养:将已接种的试管置摇床37℃振荡培养(振荡频率250r/min),分别培养0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h,将标有相应时间的试管取出,立即放冰箱中贮存,最后一同比浊测定其光密度值。

细菌生长曲线的测定

细菌生长曲线的测定

细菌生长曲线的测定1 目的1.1 了解细菌生长曲线特点及测定原理1.2 学习用比浊法测定细菌的生长曲线2 原理将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,绘制的曲线叫生长曲线。

它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。

依据其生长速率的不同,一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。

这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。

因此通过测定微生物的生长曲线,可了解各菌的生长规律,对于科研和生产都具有重要的指导意义。

测定微生物的数量有多种不同的方法,可根据要求和实验室条件选用。

本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与光密度(OD值)成正比,因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度,并将所测的OD值与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线,此法快捷、简便。

3 材料3.1菌种大肠杆菌3.2培养基肉膏蛋白胨培养基3.3 仪器和器具721分光光度计,比色杯,恒温摇床,无菌吸管,试管,三角瓶。

4 流程种子液→标记→接种→培养→测定5 方法5.1种子液制备取大肠杆菌斜面菌种1支,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏蛋白胨培养液中,静止培养18h作种子培养液。

5.2标记编号取盛有50mL无菌肉膏蛋白胨培养液的250mL三角瓶11个,分别编号为0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。

5.3接种培养用2mL无菌吸管分别准确吸取2mL种子液加入已编号的11个三角瓶中,于37℃下振荡培养。

然后分别按对应时间将三角瓶取出,立即放冰箱中贮存,待培养结束时一同测定OD 值。

5.4生长量测定将未接种的肉膏蛋白胨培养基倾倒入比色杯中,选用600nm波长分光光度计上调节零点,作为空白对照,并对不同时间培养液从0h起依次进行测定,对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定,使其OD值在0.10.~0.65以内,经稀释后测得的OD值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的OD值。

细菌生长曲线的测定

细菌生长曲线的测定

细菌生长曲线的测定1 目的1.1 了解细菌生长曲线特点及测定原理1.2 学习用比浊法测定细菌的生长曲线2 原理将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,绘制的曲线叫生长曲线。

它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。

依据其生长速率的不同,一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。

这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。

因此通过测定微生物的生长曲线,可了解各菌的生长规律,对于科研和生产都具有重要的指导意义。

测定微生物的数量有多种不同的方法,可根据要求和实验室条件选用。

本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与光密度(OD值)成正比,因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度,并将所测的OD值与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线,此法快捷、简便。

3 材料3.1菌种大肠杆菌3.2培养基肉膏蛋白胨培养基3.3 仪器和器具721分光光度计,比色杯,恒温摇床,无菌吸管,试管,三角瓶。

4 流程种子液→标记→接种→培养→测定5 方法5.1种子液制备取大肠杆菌斜面菌种1支,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏蛋白胨培养液中,静止培养18h作种子培养液。

5.2标记编号取盛有50mL无菌肉膏蛋白胨培养液的250mL三角瓶11个,分别编号为0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。

5.3接种培养用2mL无菌吸管分别准确吸取2mL种子液加入已编号的11个三角瓶中,于37℃下振荡培养。

然后分别按对应时间将三角瓶取出,立即放冰箱中贮存,待培养结束时一同测定OD 值。

5.4生长量测定将未接种的肉膏蛋白胨培养基倾倒入比色杯中,选用600nm波长分光光度计上调节零点,作为空白对照,并对不同时间培养液从0h起依次进行测定,对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定,使其OD值在0.10.~0.65以内,经稀释后测得的OD值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的OD值。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

|
INFO@
|
+12 34 567 890
|
LONG STREET 12345, CITY, COUNTRY
Company name
Company slogan here
5
迟缓期
迟缓期(lag phase):又叫调整 期。细菌接种至培养基后,对新 环境有一个短暂适应过程。此期 曲线平坦稳定,因为细菌繁殖极 少。迟缓期长短因素种、接种菌 量、菌龄以及营养物质等不同而 异,一般为1~4小时。此期中细 菌体积增大,代谢活跃,为细菌 的分裂增殖合成、储备充足的酶、 能量及中间代谢产物。

|
INFO@
|
+12 34 567 890
|
LONG STREET 12345, CITY, COUNTRY
Company name
Company slogan here
8
衰亡期
衰亡期(decline phase):随着稳定期发 展,细菌繁殖越来越慢, 死亡菌数明显增多。活菌 数与培养时间呈反比关系, 此期细菌变长肿胀或畸形 衰变,甚至菌体自溶,难 以辨认其形。生理代谢活 动趋于停滞。故陈旧培养 物上难以鉴别细菌。

|
INFO@
|
+12 34 567 890
|
LONG STREET 12345, CITY, COUNTRY
Company name
Company slogan here
4
细菌生长时期
.
迟缓期
对数期
稳定期
衰亡期

Company slogan here
Company name细菌的生长曲线汇报人:动科1401 袁霞
Company name
Company slogan here
2
细菌生长曲线
细菌生长曲线(Bacterial growth curve)是专指单细 胞微生物的。它是将少量的单细胞微生物接种纯种到一定 容积的液体培养基后,在适宜的条件下培养,定时取样测 定细胞数量。以细胞增长数目的对数做纵坐标,以培养时 间做横坐标,绘制一条如图所示的曲线,我们称这条曲线 为细菌的生长曲线。

|
INFO@
|
+12 34 567 890
|
LONG STREET 12345, CITY, COUNTRY
Company name
Company slogan here
3
时期
以时间为横坐标,以活菌 数的对数为纵坐标,可得 出一条生长曲线,曲线显 示了细菌的生长繁殖的4 个时期:迟缓期,对数期, 稳定期,衰亡期。

|
INFO@
|
+12 34 567 890
|
LONG STREET 12345, CITY, COUNTRY
Company name
Company slogan here
7
稳定期
稳定期(stationary phase): 该期的生长菌群总数处于平坦阶 段,但细菌群体活力变化较大。 由于培养基中营养物质消耗、毒 性产物(有机酸、H2O2等)积 累pH下降等不利因素的影响, 细菌繁殖速度渐趋下降,相对细 菌死亡数开始逐渐增加,此期细 菌增殖数与死亡数渐趋平衡。

|
INFO@
|
+12 34 567 890
|
LONG STREET 12345, CITY, COUNTRY
Company name
Company slogan here
6
对数期
对数期(logarithmic phase): 又称指数期。此期生长曲线上活 菌数直线上升。细菌以稳定的几 何级数极快增长,可持续几小时 至几天不等。此期细菌形态、染 色、生物活性都很典型,对外界 环境因素的作用敏感,因此研究 细菌性状以此期细菌最好。

|
INFO@
|
+12 34 567 890
|
LONG STREET 12345, CITY, COUNTRY
Company slogan here
Company name
THE END
谢谢观看!
相关文档
最新文档