稠环芳烃的高效液相色谱法分析

西安石油大学

实验报告

课程名称：分析化学实验实验名称：稠环芳烃的高效液相色谱法分析

姓名：学号：

专业班级：应化1102 实验日期：2012.10.13

（1）实验目的（2）实验原理（3）实验仪器与设备

（4）实验内容与步骤（5）数据记录与处理（6）注意事项

一、实验目地

1.学习高效液相色谱仪的基本使用方法。

2.理解和掌握普定量校正因子的意义和测定方法。

3.学会用外标法（或校正归一化法）色谱定量方法。

二、基本原理

采用非极性的十八烷基键合相（ODS）为固定相和极性的甲醇－水溶液为流动相的反相色谱分离模式特别适合于同系物如苯系物等的分离。苯系物和稠环芳烃具有共轭双轭双键，但因共轭体系的大小和极性不同，在固定相和流动相之间的分配系数不同，在柱内的移动速率不同而先后流出柱子。苯系物和稠环芳烃在紫外区有明显的吸收，可以利用紫外检测器进行检测。在相同的实验条件下，可以将测得的未知物的保留时间与已知纯物质作对照而进行定性分析。由于各组分在检测波长的摩尔吸收系数不同，同样浓度组分的峰面积不相等，因而，在以峰面积或峰高为依据进行归一化定量分析时，需经校正因子校正后方可达到准确定量的要求。但在以外标法进行定量分析时，由于是在相同实验条件下对同一组分进行检测，因而不需要考虑校正因子，可根据试样和标样中组分的色谱峰面积（或峰高）Ai和As及标样中

的质量分数w。直接计算出试样中组分的质量分数wi：

三仪器与试剂

1.高效液相色谱仪（配紫外检测器，检测波长254nm）,以色谱工作站联机控制仪器、处理实验数据。

2.超声波清洗机（流动相脱气用）。

3.25ul平头微量注射器。

4.苯、甲苯、萘、联苯（均为AR级），甲醇为HPLC级，水为二次重蒸水。

5.标准样品：分别配制苯、甲苯、萘、联苯单组分及四组份混合样品各一份，组分的浓度约为0.05%，用流动相配成。

6.流动相的体积配比为甲醇：水=85：15.

7.试样。

四、实验步骤

1.按仪器的要求打开计算机和液相色谱主机，调整好流动相的流量、检测波长的参数，用流动相冲洗色谱柱，直至工作站上色谱流出曲线为一平直的基线.

2.分别取苯、甲苯、萘、联苯标准样品10μL进样分析，记录色谱峰的保留时间。

3.去混合物标准溶液10μL进样分析，测的标样中四组分的峰面积。

4.取未知式样10μL进样，由色谱峰的保留时间进行定性分析，以色谱峰的面积进行外标法

定量。

5.完成试验后按开关机的逆次序关机。

五、数据记录及处理

标样样品号: 1-4, 检测波长：254 nm

组分名称组分含量保留时间峰面积苯 2.00% 4.29 10320383

甲苯 2.00% 4.63 16568381

萘0.05% 4.91 8071731

联苯0.05% 5.19 32706923

样品号：5-6 ，检测波长: 254 nm

混合样

组分名称峰面积保留时间

苯10183956 4.30

甲苯18292504 4.63

萘11504606 4.92

联苯35927487 5.19

未知样

组分名称保留时间峰面积

苯 4.32 4058530

甲苯 4.65 6850144

萘 4.93 3849576

联苯 5.52 11765261

标准溶液：

苯的质量分数=2%*10183956/10320383=1.97%

甲苯质量分数=2%*18292504/16568313=2.21%

萘的质量分数=0.05%*11504606/8071731=0.07%

联苯质量分数=0.05%*35927487/32706923=0.05%

未知样：

苯的质量分数=2%*4058530/1032083=0.79

甲苯质量分数=2%*6850144/16568381=0.83%

萘的质量分数=0.05%*3849576/8071731=0.02%

联苯质量分数=0.05%*11765261/32706923=0.02%

六、注意事项

1.每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。

2.柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动；当柱子和色谱仪连接时，阀件或管路一定要清洗干净。

3.进样样品要提纯，严格控制进样量。

组分名称保留时间峰面积