溶菌酶作用实验
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实验材料与器材
1、人的唾液(含有溶菌酶)、溶菌酶标准品、生理盐水。
2、细球菌(M.Lysodeikticus)。
3、1.0%盐水琼脂管(7-8mL/管)、灭菌的1mL吸管、毛细吸管、
打孔器、平皿、竹签和橡皮乳头等。
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注:①唾液 ②生理盐水(阴性对照) ③溶菌酶(阳性对照)
实验步骤:
1、取灭菌的小平皿一个,用灭菌1mL的吸管吸取0.5mL(9亿 /mL)细球菌活菌菌液注入平皿内。 2、取已溶化并冷却至45℃-55℃的生理盐水琼脂管一支,倾
溶菌酶的溶菌作用
实验原理
溶菌酶(lysБайду номын сангаасzyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙
酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是 正常体液与分泌液中所含的一种小分子碱性蛋白质。它能水 解革兰阳性菌细胞壁中的肽聚糖成分(作用于β-1,4糖苷键), 使细胞壁崩解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合, 与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使病毒失活。因此,该 酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。是非特异性免疫中一种 重要的体液物质。
注意事项
在实验中应该注意无菌操作,否则杂菌生长会影响溶 菌环的观察
注于上述平皿内,迅速水平混匀,平放待凝。
3、用打孔器(孔径为6mm)打孔,用竹签挑出孔中琼脂。 4、先用清水漱口,略待片刻将唾液吐于灭菌平皿内,用毛细 吸管吸出(注意不要有气泡,不要溢出),并分别加入生 理盐水和溶菌酶标准品。置37℃,18h后观察结果。
预测实验结果
阳性结果:加在唾液空周围出现一圈很明显的溶菌环。