大肠菌群检验
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（ISO：INTERNATIONAL STARDIZATION ISO： ORGANIZATION国际标准化组织） ORGANIZATION国际标准化组织）
大肠菌群是革兰氏阴性、无芽孢、氧 化酶阴性的杆状细菌，可需氧或兼性厌 氧地生长在含胆盐（或其他具有同样抑 制生长性能的表面活性剂）的培养基上， 当在36 当在36 ±2℃培养时，通常能于48hr内发 培养时，通常能于48hr内发 酵乳糖产酸和醛。它们还具有ß 酵乳糖产酸和醛。它们还具有ß-半乳糖 苷酶。
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茜素茜素-β-D-半乳糖苷琼脂 （Alig-gal琼脂）： Alig-gal琼脂）： 琼脂 AlizAliz-gal 50mg 50mg 蛋白胨20g 蛋白胨20g 无水磷酸氢二钾2.75g 无水磷酸氢二钾2.75g 无水磷酸二氢钾2.75g 无水磷酸二氢钾2.75g 氯化钠5 氯化钠5g 月桂基硫酸钠0.1g 月桂基硫酸钠0.1g 异丙基硫代半乳糖苷0.03g 异丙基硫代半乳糖苷0.03g 硫酸铝钾0.5g 硫酸铝钾0.5g 柠檬酸铁铵0.5g 柠檬酸铁铵0.5g 琼脂15g 琼脂15g 蒸馏水1000mL。 蒸馏水1000mL。 调Ph7.4
四、应用茜素-β-D-半乳糖苷快速检验食品中的大肠菌群 应用茜素1、检测步骤 0.1g×2 样品 0.01g × 2 0.001g × 2
Aliz-gal琼脂37 ℃ 24hr 计数紫色和红色菌落，乘以稀释倍数报告
大肠菌群β-D-半乳糖苷酶 半乳糖苷酶 大肠菌群 茜素-β-D-半乳糖苷 茜素 半乳糖苷 茜素—Fe.NH4.Al.K（ 茜素—Fe.NH4.Al.K（紫色和红色） ）
肉汤阳性管中的可疑菌株进行触酶、 将MUGal肉汤阳性管中的可疑菌株进行触酶、 肉汤阳性管中的可疑菌株进行触酶 氧化酶和硝酸盐还原试验，并任选其中18株用 氧化酶和硝酸盐还原试验，并任选其中 株用 API 20E鉴定。证明 鉴定。 鉴定 证明95.1%的MUGal肉汤阳性 的 肉汤阳性 管中含有大肠菌群。 管中含有大肠菌群。 综上所述，自制MUGal肉汤检测大肠菌群灵 综上所述，自制 肉汤检测大肠菌群灵 快速、准确，无需验证，可一次完成。 敏、快速、准确，无需验证，可一次完成。自 性质稳定， 制MUGal性质稳定，无游离荧光，可替代昂贵 性质稳定 无游离荧光， 的进口产品使用。鉴于以MUGal检测大肠菌群 的进口产品使用。鉴于以 检测大肠菌群 的方法早在1995年即为美国国家环境保护署采 的方法早在 年即为美国国家环境保护署采 纳 ，有关大肠菌群具有ß-半乳糖苷酶的特性， 有关大肠菌群具有 半乳糖苷酶的特性， 半乳糖苷酶的特性 也在ISO 9308-1:2000给予了明确的定义。因此， 给予了明确的定义。 也在 给予了明确的定义 因此， 经过本次试验我们认为， 经过本次试验我们认为，以MUGal肉汤快速检 肉汤快速检 测食品中大肠菌群作为一种推荐的标准方法加 以应用是可行的。 以应用是可行的。
4、依据ß-半乳糖苷酶快速测定大肠菌群的原理 、依据ß
大肠菌群产生的ß 半乳糖苷酶可分解培养基中的酶底物（ 大肠菌群产生的ß-半乳糖苷酶可分解培养基中的酶底物（即色 基与ß 半乳糖的结合物），使带色基团游离而显色或发荧光。 ），使带色基团游离而显色或发荧光 基与ß-半乳糖的结合物），使带色基团游离而显色或发荧光。该 反应灵敏快速。 反应灵敏快速。 测定ß 半乳糖酶常用的底物有4 甲基伞形酮测定ß-半乳糖酶常用的底物有4-甲基伞形酮-ß-D半乳糖苷 MUGal）、 ）、5 吲哚半乳糖苷（ gal）、 ）、3 （MUGal）、5-溴-4氯-3-吲哚-ß-D-半乳糖苷（X-gal）、3，4-环 已酮半乳糖苷和8 羟基喹啉半乳糖苷等。 已酮-ß-D-半乳糖苷和8-羟基喹啉-ß-D-半乳糖苷等。 1993年Brenner等人用加 甲基伞形酮1993年Brenner等人用加4-甲基伞形酮-ß-D-半乳糖苷（MUGal） 等人用加4 半乳糖苷（MUGal） 和吲哚氧基和吲哚氧基-ß-D-葡糖醛酸苷的培养基检测大肠菌群和大肠杆菌 [3]，取得满意结果。1995年该方法被美国国家环境保护署采纳 [3]，取得满意结果。1995年该方法被美国国家环境保护署采纳 （Code of Federal Regulation 40,141.21 Protection Of Environment）。美国SIGMA公司有商品化试剂 但价格昂贵。 Environment）。美国SIGMA公司有商品化试剂，但价格昂贵。 ）。美国 公司有商品化试剂， 2000年James等独家报导了一种新的检测大肠菌群的酶底物 2000年James等独家报导了一种新的检测大肠菌群的酶底物—— 等独家报导了一种新的检测大肠菌群的酶底物—— 茜素半乳糖苷（Aliz-gal） 茜素-β-D-半乳糖苷（Aliz-gal）。该试剂具有比同类酶底物更灵 敏的性能，在固体培养基中可使大肠菌群呈现带色菌落， 敏的性能，在固体培养基中可使大肠菌群呈现带色菌落，色素为 脂溶性不扩散，易与辨别，另还可以和不同的阳离子 Fe、Al、 可以和不同的阳离子（ 脂溶性不扩散，易与辨别，另还可以和不同的阳离子（Fe、Al、 NH4）形成带色的螯合物，这样就便于和其他的显色剂合用， K、NH4）形成带色的螯合物，这样就便于和其他的显色剂合用， 组成具有多种性能的鉴别培养基，以提高检测的灵敏度。目前， 组成具有多种性能的鉴别培养基，以提高检测的灵敏度。目前， 国内外均无商品化试剂出售。 国内外均无商品化试剂出售。
MUGal肉汤 MUGal肉汤： 肉汤： 胰蛋白胨20g 胰蛋白胨20g 氯化钠5 氯化钠5g 无水磷酸氢二钾2.75g 无水磷酸氢二钾2.75g 无水磷酸二氢钾2.75g 无水磷酸二氢钾2.75g 月桂基硫酸钠0.1g 月桂基硫酸钠0.1g MUGal0.08g MUGal0.08g 1000ml 水1000ml 加热使溶化， Ph7.4， 加热使溶化，调Ph7.4， 分装试管，每管10ml， 分装试管，每管10ml， 116℃高压灭菌10min。 116℃高压灭菌10min。待 培养基冷却后， 培养基冷却后，以无菌手 续在每管培养液内加入 0.1mL经过滤除菌的 0.1mL经过滤除菌的 500ug/mL头孢磺啶 500ug/mL头孢磺啶稀释 头孢磺啶稀释 液。
三、应用4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷快速检验食 应用4 甲基伞形酮品中的大肠菌群 1、检测步骤 样品 、
0.1g×3 0.01g × 3 0.001g × 3
MUGal肉汤 37 ℃ 24hr
在紫外光下观察产荧光管数，查MPN表得MPN值
大肠菌群β-D-半乳糖苷酶 半乳糖苷酶 大肠菌群 4-甲基伞形酮 甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷 甲基伞形酮 半乳糖苷 4-甲基伞形酮（兰色荧光） 甲基伞形酮（兰色荧光） 甲基伞形酮
（2）平板直接计数法（SN0169-92） ）平板直接计数法（SN0169-92）
样品 0.1g×2 0.01g × 2 0.001g × 2
结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）37 ℃ 24hr
ห้องสมุดไป่ตู้
计数紫红色菌落，乘以稀释倍数报告
3、ISO关于大肠菌群的定义（ISO9308-1：2000） ISO关于大肠菌群的定义 ISO9308关于大肠菌群的定义（ 2000）
（1）最近拟数法（MPN）（GB4789.2-1994） ）最近拟数法（MPN）（GB4789.2-1994）
样品
0.1g×3 0.01g × 3 0.001g × 3
乳糖胆盐发酵管 37 ℃ 24hr
产酸产气管
伊红美蓝平板（分离）
37 ℃ 24hr可疑菌落
乳糖发酵管（证实）
37 ℃ 24hr
根据经证实的乳糖胆盐发酵管 阳性管数，查MPN表。
2、试验情况简介
当在MUGal肉汤中生长的大肠菌群数量较少时 肉汤中生长的大肠菌群数量较少时 当在 也可在紫外灯下呈现明显的蓝色荧光， 也可在紫外灯下呈现明显的蓝色荧光，反应较 乳糖产酸显色快速灵敏，结果易读。 乳糖产酸显色快速灵敏，结果易读。 株与肠杆菌科相关的标准菌株验证MUGal 以13株与肠杆菌科相关的标准菌株验证 株与肠杆菌科相关的标准菌株验证 肉汤，其结果与在LST和乳糖胆盐肉汤中的乳 肉汤，其结果与在 和乳糖胆盐肉汤中的乳 糖发酵结果完全一致，符合相关菌株的特性。 糖发酵结果完全一致，符合相关菌株的特性。 将自制MUGal与SIGMA产MUGal比较测试 将自制 与 产 比较测试26 比较测试 份样品，两者阳性符合率为94.6%。 份样品，两者阳性符合率为 。 以自制MUGal肉汤与 肉汤与LST肉汤比较检测 份样 肉汤比较检测66份样 以自制 肉汤与 肉汤比较检测 品中大肠菌群， 阳性检出率是LST肉汤 品中大肠菌群，其24h阳性检出率是 阳性检出率是 肉汤 48h的1.5倍，但延长 肉汤培养时间至96小 的 倍 但延长LST肉汤培养时间至 小 肉汤培养时间至 时后，两者结果逐步接近。表明MUGal多检出 时后，两者结果逐步接近。表明 多检出 的阳性部分多为受伤生长缓慢或迟缓发酵乳糖 的大肠菌群类菌株所致。 的大肠菌群类菌株所致。
2、试验情况简介
• Aliz-gal检测食品中大肠菌群可在 -24h Aliz-gal检测食品中大肠菌群可在18-24h内显示出半 检测食品中大肠菌群可在18 乳糖苷酶反应，在同类性质的酶底物中，Aliz-gal的 乳糖苷酶反应， 在同类性质的酶底物中， Aliz-gal的 用量较低， 用量较低 ， 做倾注培养时在琼脂深层菌落特征较明 显。 由于采用测定β 半乳糖苷酶的方法易于检出迟缓发 由于采用测定 β- 半乳糖苷 酶的方法易于检出迟缓发 酵乳糖的大肠菌群和厌氧大肠杆菌。 所以， 酵乳糖的大肠菌群和厌氧大肠杆菌 。 所以 ， 本试验 甲基伞形酮与 4- 甲基伞形酮 - β-D- 半乳糖苷试验所得阳性结果都 比各自的对比培养基的高。 比各自的对比培养基的高。 试验证明用Aliz-gal作 试验证明用Aliz-gal作β-半乳糖苷酶底物以平板直接 计数检测食品中的大肠菌群， 具有特异性强、 计数检测食品中的大肠菌群 ， 具有特异性强 、 速度 准确率高、 结果稳定的特点， 快 、 准确率高 、 结果稳定的特点 ， 可作为标准方法 加以应用。 加以应用。
一、大肠菌群的食品卫生学意义
1、作为粪便污染食品的指标菌 有来源特异性，即仅来自肠道。 在肠道中的数量较多，易于检出。 在外环境中有足够的抵抗力，能生存一 定期间。 食品细菌学检验方法敏感、特异。 2、作为肠道致病菌污染食品的指标菌。
二、大肠菌群的定义及检测方法
1、大肠菌群的传统定义 大肠菌群（Coliform group） 大肠菌群（Coliform group）系指一群需氧 及兼性厌氧，在37 24小时能 及兼性厌氧，在37 ℃24小时能发酵乳糖产酸产 小时能发酵乳糖产酸产 气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 包括肠杆菌科的艾希氏菌属、柠檬酸杆菌 属、肠杆菌属和克雷伯菌属。其中以艾希氏菌 属为主，称为典型大肠杆菌，其它三属习惯上 称为典型大肠杆菌。 2、大肠菌群检验的标准方法
大肠菌群是革兰氏阴性、无芽孢、氧 化酶阴性的杆状细菌，可需氧或兼性厌 氧地生长在含胆盐（或其他具有同样抑 制生长性能的表面活性剂）的培养基上， 当在36 当在36 ±2℃培养时，通常能于48hr内发 培养时，通常能于48hr内发 酵乳糖产酸和醛。它们还具有ß 酵乳糖产酸和醛。它们还具有ß-半乳糖 苷酶。
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茜素茜素-β-D-半乳糖苷琼脂 （Alig-gal琼脂）： Alig-gal琼脂）： 琼脂 AlizAliz-gal 50mg 50mg 蛋白胨20g 蛋白胨20g 无水磷酸氢二钾2.75g 无水磷酸氢二钾2.75g 无水磷酸二氢钾2.75g 无水磷酸二氢钾2.75g 氯化钠5 氯化钠5g 月桂基硫酸钠0.1g 月桂基硫酸钠0.1g 异丙基硫代半乳糖苷0.03g 异丙基硫代半乳糖苷0.03g 硫酸铝钾0.5g 硫酸铝钾0.5g 柠檬酸铁铵0.5g 柠檬酸铁铵0.5g 琼脂15g 琼脂15g 蒸馏水1000mL。 蒸馏水1000mL。 调Ph7.4
四、应用茜素-β-D-半乳糖苷快速检验食品中的大肠菌群 应用茜素1、检测步骤 0.1g×2 样品 0.01g × 2 0.001g × 2
Aliz-gal琼脂37 ℃ 24hr 计数紫色和红色菌落，乘以稀释倍数报告
大肠菌群β-D-半乳糖苷酶 半乳糖苷酶 大肠菌群 茜素-β-D-半乳糖苷 茜素 半乳糖苷 茜素—Fe.NH4.Al.K（ 茜素—Fe.NH4.Al.K（紫色和红色） ）
肉汤阳性管中的可疑菌株进行触酶、 将MUGal肉汤阳性管中的可疑菌株进行触酶、 肉汤阳性管中的可疑菌株进行触酶 氧化酶和硝酸盐还原试验，并任选其中18株用 氧化酶和硝酸盐还原试验，并任选其中 株用 API 20E鉴定。证明 鉴定。 鉴定 证明95.1%的MUGal肉汤阳性 的 肉汤阳性 管中含有大肠菌群。 管中含有大肠菌群。 综上所述，自制MUGal肉汤检测大肠菌群灵 综上所述，自制 肉汤检测大肠菌群灵 快速、准确，无需验证，可一次完成。 敏、快速、准确，无需验证，可一次完成。自 性质稳定， 制MUGal性质稳定，无游离荧光，可替代昂贵 性质稳定 无游离荧光， 的进口产品使用。鉴于以MUGal检测大肠菌群 的进口产品使用。鉴于以 检测大肠菌群 的方法早在1995年即为美国国家环境保护署采 的方法早在 年即为美国国家环境保护署采 纳 ，有关大肠菌群具有ß-半乳糖苷酶的特性， 有关大肠菌群具有 半乳糖苷酶的特性， 半乳糖苷酶的特性 也在ISO 9308-1:2000给予了明确的定义。因此， 给予了明确的定义。 也在 给予了明确的定义 因此， 经过本次试验我们认为， 经过本次试验我们认为，以MUGal肉汤快速检 肉汤快速检 测食品中大肠菌群作为一种推荐的标准方法加 以应用是可行的。 以应用是可行的。
4、依据ß-半乳糖苷酶快速测定大肠菌群的原理 、依据ß
大肠菌群产生的ß 半乳糖苷酶可分解培养基中的酶底物（ 大肠菌群产生的ß-半乳糖苷酶可分解培养基中的酶底物（即色 基与ß 半乳糖的结合物），使带色基团游离而显色或发荧光。 ），使带色基团游离而显色或发荧光 基与ß-半乳糖的结合物），使带色基团游离而显色或发荧光。该 反应灵敏快速。 反应灵敏快速。 测定ß 半乳糖酶常用的底物有4 甲基伞形酮测定ß-半乳糖酶常用的底物有4-甲基伞形酮-ß-D半乳糖苷 MUGal）、 ）、5 吲哚半乳糖苷（ gal）、 ）、3 （MUGal）、5-溴-4氯-3-吲哚-ß-D-半乳糖苷（X-gal）、3，4-环 已酮半乳糖苷和8 羟基喹啉半乳糖苷等。 已酮-ß-D-半乳糖苷和8-羟基喹啉-ß-D-半乳糖苷等。 1993年Brenner等人用加 甲基伞形酮1993年Brenner等人用加4-甲基伞形酮-ß-D-半乳糖苷（MUGal） 等人用加4 半乳糖苷（MUGal） 和吲哚氧基和吲哚氧基-ß-D-葡糖醛酸苷的培养基检测大肠菌群和大肠杆菌 [3]，取得满意结果。1995年该方法被美国国家环境保护署采纳 [3]，取得满意结果。1995年该方法被美国国家环境保护署采纳 （Code of Federal Regulation 40,141.21 Protection Of Environment）。美国SIGMA公司有商品化试剂 但价格昂贵。 Environment）。美国SIGMA公司有商品化试剂，但价格昂贵。 ）。美国 公司有商品化试剂， 2000年James等独家报导了一种新的检测大肠菌群的酶底物 2000年James等独家报导了一种新的检测大肠菌群的酶底物—— 等独家报导了一种新的检测大肠菌群的酶底物—— 茜素半乳糖苷（Aliz-gal） 茜素-β-D-半乳糖苷（Aliz-gal）。该试剂具有比同类酶底物更灵 敏的性能，在固体培养基中可使大肠菌群呈现带色菌落， 敏的性能，在固体培养基中可使大肠菌群呈现带色菌落，色素为 脂溶性不扩散，易与辨别，另还可以和不同的阳离子 Fe、Al、 可以和不同的阳离子（ 脂溶性不扩散，易与辨别，另还可以和不同的阳离子（Fe、Al、 NH4）形成带色的螯合物，这样就便于和其他的显色剂合用， K、NH4）形成带色的螯合物，这样就便于和其他的显色剂合用， 组成具有多种性能的鉴别培养基，以提高检测的灵敏度。目前， 组成具有多种性能的鉴别培养基，以提高检测的灵敏度。目前， 国内外均无商品化试剂出售。 国内外均无商品化试剂出售。
MUGal肉汤 MUGal肉汤： 肉汤： 胰蛋白胨20g 胰蛋白胨20g 氯化钠5 氯化钠5g 无水磷酸氢二钾2.75g 无水磷酸氢二钾2.75g 无水磷酸二氢钾2.75g 无水磷酸二氢钾2.75g 月桂基硫酸钠0.1g 月桂基硫酸钠0.1g MUGal0.08g MUGal0.08g 1000ml 水1000ml 加热使溶化， Ph7.4， 加热使溶化，调Ph7.4， 分装试管，每管10ml， 分装试管，每管10ml， 116℃高压灭菌10min。 116℃高压灭菌10min。待 培养基冷却后， 培养基冷却后，以无菌手 续在每管培养液内加入 0.1mL经过滤除菌的 0.1mL经过滤除菌的 500ug/mL头孢磺啶 500ug/mL头孢磺啶稀释 头孢磺啶稀释 液。
三、应用4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷快速检验食 应用4 甲基伞形酮品中的大肠菌群 1、检测步骤 样品 、
0.1g×3 0.01g × 3 0.001g × 3
MUGal肉汤 37 ℃ 24hr
在紫外光下观察产荧光管数，查MPN表得MPN值
大肠菌群β-D-半乳糖苷酶 半乳糖苷酶 大肠菌群 4-甲基伞形酮 甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷 甲基伞形酮 半乳糖苷 4-甲基伞形酮（兰色荧光） 甲基伞形酮（兰色荧光） 甲基伞形酮
（2）平板直接计数法（SN0169-92） ）平板直接计数法（SN0169-92）
样品 0.1g×2 0.01g × 2 0.001g × 2
结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）37 ℃ 24hr
ห้องสมุดไป่ตู้
计数紫红色菌落，乘以稀释倍数报告
3、ISO关于大肠菌群的定义（ISO9308-1：2000） ISO关于大肠菌群的定义 ISO9308关于大肠菌群的定义（ 2000）
（1）最近拟数法（MPN）（GB4789.2-1994） ）最近拟数法（MPN）（GB4789.2-1994）
样品
0.1g×3 0.01g × 3 0.001g × 3
乳糖胆盐发酵管 37 ℃ 24hr
产酸产气管
伊红美蓝平板（分离）
37 ℃ 24hr可疑菌落
乳糖发酵管（证实）
37 ℃ 24hr
根据经证实的乳糖胆盐发酵管 阳性管数，查MPN表。
2、试验情况简介
当在MUGal肉汤中生长的大肠菌群数量较少时 肉汤中生长的大肠菌群数量较少时 当在 也可在紫外灯下呈现明显的蓝色荧光， 也可在紫外灯下呈现明显的蓝色荧光，反应较 乳糖产酸显色快速灵敏，结果易读。 乳糖产酸显色快速灵敏，结果易读。 株与肠杆菌科相关的标准菌株验证MUGal 以13株与肠杆菌科相关的标准菌株验证 株与肠杆菌科相关的标准菌株验证 肉汤，其结果与在LST和乳糖胆盐肉汤中的乳 肉汤，其结果与在 和乳糖胆盐肉汤中的乳 糖发酵结果完全一致，符合相关菌株的特性。 糖发酵结果完全一致，符合相关菌株的特性。 将自制MUGal与SIGMA产MUGal比较测试 将自制 与 产 比较测试26 比较测试 份样品，两者阳性符合率为94.6%。 份样品，两者阳性符合率为 。 以自制MUGal肉汤与 肉汤与LST肉汤比较检测 份样 肉汤比较检测66份样 以自制 肉汤与 肉汤比较检测 品中大肠菌群， 阳性检出率是LST肉汤 品中大肠菌群，其24h阳性检出率是 阳性检出率是 肉汤 48h的1.5倍，但延长 肉汤培养时间至96小 的 倍 但延长LST肉汤培养时间至 小 肉汤培养时间至 时后，两者结果逐步接近。表明MUGal多检出 时后，两者结果逐步接近。表明 多检出 的阳性部分多为受伤生长缓慢或迟缓发酵乳糖 的大肠菌群类菌株所致。 的大肠菌群类菌株所致。
2、试验情况简介
• Aliz-gal检测食品中大肠菌群可在 -24h Aliz-gal检测食品中大肠菌群可在18-24h内显示出半 检测食品中大肠菌群可在18 乳糖苷酶反应，在同类性质的酶底物中，Aliz-gal的 乳糖苷酶反应， 在同类性质的酶底物中， Aliz-gal的 用量较低， 用量较低 ， 做倾注培养时在琼脂深层菌落特征较明 显。 由于采用测定β 半乳糖苷酶的方法易于检出迟缓发 由于采用测定 β- 半乳糖苷 酶的方法易于检出迟缓发 酵乳糖的大肠菌群和厌氧大肠杆菌。 所以， 酵乳糖的大肠菌群和厌氧大肠杆菌 。 所以 ， 本试验 甲基伞形酮与 4- 甲基伞形酮 - β-D- 半乳糖苷试验所得阳性结果都 比各自的对比培养基的高。 比各自的对比培养基的高。 试验证明用Aliz-gal作 试验证明用Aliz-gal作β-半乳糖苷酶底物以平板直接 计数检测食品中的大肠菌群， 具有特异性强、 计数检测食品中的大肠菌群 ， 具有特异性强 、 速度 准确率高、 结果稳定的特点， 快 、 准确率高 、 结果稳定的特点 ， 可作为标准方法 加以应用。 加以应用。
一、大肠菌群的食品卫生学意义
1、作为粪便污染食品的指标菌 有来源特异性，即仅来自肠道。 在肠道中的数量较多，易于检出。 在外环境中有足够的抵抗力，能生存一 定期间。 食品细菌学检验方法敏感、特异。 2、作为肠道致病菌污染食品的指标菌。
二、大肠菌群的定义及检测方法
1、大肠菌群的传统定义 大肠菌群（Coliform group） 大肠菌群（Coliform group）系指一群需氧 及兼性厌氧，在37 24小时能 及兼性厌氧，在37 ℃24小时能发酵乳糖产酸产 小时能发酵乳糖产酸产 气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 包括肠杆菌科的艾希氏菌属、柠檬酸杆菌 属、肠杆菌属和克雷伯菌属。其中以艾希氏菌 属为主，称为典型大肠杆菌，其它三属习惯上 称为典型大肠杆菌。 2、大肠菌群检验的标准方法