弧菌及厌氧菌

（三）抗原构造与分型
O抗原
H抗原
特异性高，分 200多个血清群
无特异性，弧菌属所共有
耐热
不耐热
根据O抗原不同，现已有139个血清群， 其中O1群、O139群引起霍乱。 根据表型差异，O1群霍乱弧菌可分为两 个生物型：古典生物型和El Tor生物型。
古典生物型 Classical biotype
6次霍乱大流行
第13章
厌氧性细菌 Anaerobic bacteria 缺乏完整呼吸酶系统，分子氧对其生长不 利，在低氧化还原电位条件下生长的细菌
概
述
必须在无氧环境下才能生长繁殖。 根据能否形成芽胞，可分为： 1.厌氧芽胞梭菌属—外源性 2.无芽胞厌氧菌—内源性
第一节 厌氧芽胞梭菌属
（Clostridium）
3.膜的转位 通过重链N端的介导产生膜 的转位，使轻链进入胞质溶 胶。 4.胞质溶胶中作用 轻链发挥毒性作用，阻止抑制性 神经介质γ-氨基丁酸的释放，使 肌肉活动的兴奋与抑制失调，造 成强直性痉挛（受刺激时伸肌与 屈肌同时强烈收缩，肌肉强直痉 挛） 。
（三）所致疾病
破伤风 潜伏期：几天～几周 典型的症状： 苦笑面容 角弓反张 其它
破伤风免疫属外毒素免疫，主要是 抗毒素发挥中和作用。 一般病后不会获得牢固免疫力。 获得有效抗毒素的途径是人工免疫 通过类毒素的预防注射或直接注射抗毒素
三、微生物学检查法
一般不进行涂片、镜检和分离培养。 典型的症状和病史即可作出诊断。
四、防治原则
1.正确处理创口及清创、扩创。非特异性防治 2.注射白百破三联疫苗。人工主动免疫。 3.对可疑病人可立即注射破伤风抗毒素（tetanus antitoxin, TAT）进行紧急预防。人工被动免疫 4.发病早期可足量使用抗毒素进行特异性治疗。
二、产气荚膜梭菌
(C．perfringens )
一、生物学性状
（一）形态与染色 两端几乎平切 的G＋粗大杆菌， 芽胞位于次极端， 呈椭圆形，不大于 菌体。 在体内有明显的 荚膜 无鞭毛 。
（二）培养特性
厌氧，繁殖周期为8分钟。 血琼脂平板上，双层溶血环；蛋黄琼脂平 板上，有Nagler反应； 代谢活跃，分解多种糖类，产酸产气。在 牛奶培养基中分解乳糖，大量产气，出现汹 涌发酵现象（stormy fermentation）。
破伤风痉挛毒素作用机制 1.与神经系统的结合：
毒素对脑干神经和脊髓前角 神经细胞有高度亲和力，结合 非常牢固，一旦结合，抗毒素 便不能中和毒素。 毒素重链识别神经肌肉 结点处运动神经元上的受体并 与之结合，促使毒素进入细胞 内形成小泡。
2.内在化作用
小泡从外周神经末稍沿神经 轴突逆行向上，到达运动神经 元胞体，进入传入神经末稍， 最终进入中枢神经系统。
概述
共同特征： ☞分布广，土壤、人和动物肠道 ☞ 大多为严格厌氧菌，G＋杆状，有芽胞。 ☞ 芽胞直径比菌体粗，使菌体膨大呈梭状。形成芽胞后有强 大的抵抗力。 ☞侵袭力不强，产生强烈的外毒素，引起特定的症状 ☞ 除产气荚膜梭菌等极少数例外，均有周鞭毛，无荚膜。
• • • •
破伤风梭菌 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 艰难梭菌
一、生物学性状
（一）形态与染色
G－，弧型或逗点状，单端有一 根鞭毛；液体中，运动非常活泼。 悬滴观察呈穿梭样运动；直接染色 镜检，排列整齐，呈鱼群状
扫描电镜下的霍乱弧菌
生物学性状
（二）培养特性
耐碱不耐酸；在pH8.8～9.0的碱性蛋白胨水、碱 性琼脂平板上生长良好。——选择培养基 兼性厌氧,营养要求不高
四、防治原则
（一）预防 及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境。 预防性的使用抗生素。 （二）治疗 局部扩创，清创 抗生素 α抗毒素 高压氧舱法
• O139群致病物质
– 荚膜多糖 – 特殊LPS毒性决定簇
（二）所致疾病
霍乱：烈性肠道传染病，为我国的甲类法定传 染病。人是霍乱弧菌的唯一易感者 传染源：患者及无症状感染者 传播途径：粪-口途径，通过污染的水源或食物 临床表现：突然发病,首先剧烈腹泻,继以呕吐,可 有米泔水样便，大量水分和电解质丧失，引起低容 量性休克和肾衰竭（不治疗死亡率高达60％）。
人类疾病
霍乱，可造成大流行甚至世界性大流行
胃肠炎
副溶血性弧菌
其他：拟态弧菌、创伤弧菌、 霍利斯弧菌、河弧菌
胃肠炎，肠道外感染
食物中毒，创伤感染和败血症
第一节
霍乱弧菌
Vibrio cholerae
流行病学概况
19世纪初至今已引起7次世界性大流行。 1817～1923年的百余年间，在亚、非、欧、美、 澳等发生的六次世界性霍乱大流行——皆由古典生 物型引起。 1961年开始的第七次世界性霍乱大流行至今已波 及五大洲140个以上的国家和地区，报告病例数在 400万以上，目前尚无停息的迹象。它们由埃尔托生 物型引起。
一、破伤风梭菌
（C. tetani）
破伤风（tetanus）的病原菌。
发病后机体呈强直性痉挛、抽搐，可 因窒息或呼吸衰竭死亡。
一、生物学性状
（一）形态与染色 菌体细长，周身鞭毛、 无荚膜。形成芽胞后，使细 菌呈鼓槌状。 G＋。 （二）培养特性和生化反应 严格厌氧 血平板上，有β溶血
生化反应不活泼 不发酵糖类，不分解蛋白质
三、微生物学检查法
标本：采患者粪便、肛拭或剩余食物。
分离培养：SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板。
血清学鉴定
四、防治原则
治疗可用抗生素。
思考题
1.霍乱是如何传播的？其临床表现和预后如何？ 2.霍乱弧菌的主要致病物质是什么？简述其作用机 理。 3.简述霍乱弧菌的抗原结构，分型及与致病的关系。 4.如何预防副溶血性弧菌所致的食物中毒？
治疗关键：及时补充液体和电解质，预防大量失
治
水导致的低血容量性休克和酸中毒。抗菌药物治 疗
第二节
副溶血性弧菌
V. parahemolyticus
副溶血性弧菌广泛生存近岸海水和鱼贝类等 食物中，温、热地带较多。我国华东沿海 该菌的检出率为57.4～66.5％，尤以夏秋 季较高。海产鱼虾的带菌率平均为45～48 ％，夏季可高达90％。腌制的鱼贝类带菌 率也可达42.4％。
第 11 章
弧 菌 属
Vibrio
弧菌属（Vibrio）
细菌是一大群菌体短小，弯曲成弧形的革 兰阴性菌。 广泛分布于自然界，水中最多。 已确定有36个种，12个种与人类感染有关。 对人致病的主要有霍乱弧菌，副溶血弧菌。
与人类感染有关的主要弧菌
弧菌
霍乱弧菌O1和O139血清群
非O1和非O139霍乱弧菌血清群
1.标本 污染的水样、食物和粪便，病人肛试子 2.直接镜检 悬滴法观察细菌呈穿梭样运动；涂片可见G－弧菌， 鱼群状排列。 3.分离培养 碱性蛋白胨水或选择培养基（thio-sulfate-citrate-bilesucrose, TCBS）增菌。 4.血清学鉴定 玻片凝集反应。
五、防治原则
防
控制传染源 切断传播途径：改善社区环境，加强水源管理， 提高易感者免疫力：疫苗预防接种
1.霍乱肠毒素强烈的致泻作用。为聚合蛋白，由 1个A亚单位和5
个B亚单位以共价键结合，A1为毒性部分,A2为连接部分，B是结合 部分，与小肠粘膜上皮细胞膜受体（神经节苷脂GMI）结合
霍 乱 肠 毒 素
A亚单位
腺苷酸环化酶活性增高，使细胞 内cAMP水平升高，主动分泌Na+、 K+、HCO3－和水，导致严重的腹 泻与呕吐。 与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节 苷脂受体结合，介导A亚单位进 入细胞。
神经氨酸酶
+ 大 多 菌 株 产 生 ； ± 某 些 菌 株 产 生 ； -不 产 生 ； nt 未 研 究
1.α毒素
以A型产生量最大。 分解细胞膜上磷脂和蛋白形成的复
合物，造成细胞溶解，引起血管通透性
增加伴大量溶血、组织坏死、肝脏、心
功能受损。
2.肠毒素 不耐热的蛋白质，100℃瞬时即被 破坏；整段肽链嵌入细胞膜，破坏膜 离子运输功能。
霍乱弧菌
小肠粘膜表面
增殖
产生肠毒素
粘膜细胞分泌亢进、Na+、Cl-吸收抑制
剧烈腹泻、呕吐
血容量下降 循环衰竭 电解质紊乱 代谢性酸中毒
肾功能衰竭、休克、死亡
（三）免疫性
感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力。 胃酸杀菌作用 小肠粘膜分泌型IgA
血清中抗毒素抗体,抗菌抗体
SIgA起主要作用。
四、微生物学检查法
• 嗜盐弧菌
• 由海产品和盐腌制品传播 • 致病物质：溶血素 • 所致疾病： ①食物中毒（胃肠炎） ②浅表创伤感染和败血症
一、生物学性状
嗜盐（halophilic）：在培养基中以含 3.5％的NaCl最为适宜。 不耐热，不耐酸。 有神奈川（Kanagawa）现象往往是致病菌。
二、致病性与免疫性 食物中毒 该菌经烹饪不当的海产品或盐腌制品 传播。 潜伏期5～72小时，可从自限性腹泻 至中度霍乱样病症。
（二）致病因子
对氧敏感的破伤风溶血毒素（tetanolysin） 质粒编码的破伤风痉挛毒素（tetanospasmin）： 属神经毒，毒性极强（小鼠LD50为0.015 ng， 对人致死量<1 µg）；为蛋白质，不耐热；可被
蛋白酶破坏。
破伤风痉挛毒素 分子量约150 kDa；B链（重链）是与 神经节苷脂结合的单位；A链（轻链）具 有毒性作用。
O1血清群
El Tor生物型 El Torbiotype 西奈半岛 El Tor地区发现 第7次霍乱大流行
O139群： 1992年印度分离，流行于南亚和东南亚
（四）抵抗力
El Tor生物型和其它非01群霍乱弧菌， 在外环境中的生存力较古典型为强，本菌不 耐酸、不耐热。
二、致病性与免疫性
（一）致病物质
（三）分型
根据4种主要毒素（α、β、ε、ι）的产生情况，可
分为5个毒素型。
对人致病的主要为A型。
二、致病性与免疫性
（一）致病物质 产气荚膜梭菌能产生10余种外毒素， 有些外毒素即为胞外酶。
产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型
毒素 生物学作用 A 主要毒素 α (alpha) β ι δ θ κ λ μ ν 其它 肠毒素 肠毒素、细胞毒素 + nt + + t (beta) (iota) (delta) (theta) (kappa) (lambda) (mu) (nu) 卵 磷 脂 酶 ，增 加 血 管 通 透 性 ，溶 血和坏死作用 坏死作用 增加胃肠壁通透性 坏死作用，增加血管通透性 溶血素 溶血素，细胞毒素 胶原酶、明胶酶、坏死作用 蛋白酶 透明质酸酶 DNA 酶 改变神经节苷脂受体 ε (epsilon) 次要毒素 ± + ± ± + ± + + + + + + + + + ± + + + + + ± ± + + + + ± ± + + + + + + + + + + B 毒素分型 C D E
破伤风梭菌的芽胞
（三）抵抗力 芽胞抵抗力很强 75～80℃ 10 min仍保持活力 100℃ 1小时可完全被破坏 在干燥的土壤和尘埃中可存活数年
二、致病性与免疫性
（一）致病条件 该菌无侵袭力，仅在局部繁殖，致 病作用完全有赖于病菌所产生的毒素。 伤口需形成厌氧微环境：伤口窄而 深（如刺伤）、有泥土或异物污染大面 积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织 缺血的同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合 感染的伤口。
1992年10月印度和ຫໍສະໝຸດ Baidu加拉相继发生一种新型霍 乱暴发和较大流行，这型霍乱随后在亚洲传播，至 今已有印度、巴基斯坦、孟加拉、中国、泰国、马 来西亚、缅甸、尼泊尔、新加坡、斯里兰卡、香港 等国家和地区报告发生O139霍乱病例。2003年， WHO报告45个国家111575例病例——O139群霍乱弧 菌引起。
B 亚 单 位
霍乱肠毒素的作用机制
2.鞭毛、菌毛 鞭毛运动有助于细菌穿过肠粘膜表面粘 液层而接近肠壁上皮细胞。 普通菌毛是细菌定居于小肠所必须的因子。
• O1群致病物质
– 霍乱肠毒素（A亚单位 + 5个B亚单位） – 鞭毛、菌毛及其他毒力因子
• 靠鞭毛运动，穿过粘液层 • 粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上
（二）所致疾病
1.气性坏疽 战伤、工伤、车祸。 气性坏疽潜伏期短，发展迅速，病情险恶。 气肿（捻发音）及大面积组织坏死，致毒血症 2.食物中毒
三、微生物学检查法
（一）直接涂片镜检 深部创口取材涂片 G＋大杆菌，大荚膜 白细胞甚少且形态不典型 伴其它杂菌 （二）分离培养及动物实验 血平板，镜检及生化反应 动物实验 本菌引起的食物中毒在发病后1日内，检出大于 105病菌/克食品或106病菌/克粪便，即可确立诊断。