环境因素对微生物的影响

本次实验课结束时
请确保实验台收拾干净，并清洗 培养皿、试管、三角瓶、吸管！
下周实验请预习： 微生物计数与大小测量
芽孢和荚膜染色
微生物学实验 环境因素对微生物的影响
来自百度文库
一、实验目的
了解各种物理、化学和生物因素对微生 物生长的抑制作用
观察各因素对微生物生长抑制的强弱
二、实验原理
环境因素包括物理因素、化学因素和生物因素。不 良的环境条件使微生物的生长受到抑制，甚至导致 菌体的死亡。但是某些微生物产生的芽孢，对恶劣 的环境条件有较强的抵抗能力。我们可以通过控制 环境条件，使有害微生物的生长繁殖受到抑制，甚 至被杀死；而对有益微生物，通过调节理化因素， 使其得到良好的生长繁殖或产生有经济价值的代谢 产物。
（一）物理因素
温度是影响微生物生长的重要因素之一。根据 微生物生长的最适温度范围，可分为高温菌、 中温菌和低温菌，自然界中绝大部分微生物属 于中温菌。
紫外线主要作用于细胞内的DNA，轻则使微生 物发生突变，重则造成微生物死亡。紫外线照 射的剂量与所用紫外光灯的功率(瓦数)、照射 距离和照射时间有关。紫外线透过物质的能力 弱，一层厚纸足以挡住紫外线的通过。
（一）物理因素
氧气 根据微生物对氧气的需求，可把微生物 分为好氧菌、厌氧菌和兼性好氧菌。在鉴定细 菌时，常以它们的好氧性作为指标。
紫外线主要作用于细胞内的DNA，轻则使微生 物发生突变，重则造成微生物死亡。紫外线照 射的剂量与所用紫外光灯的功率(瓦数)、照射 距离和照射时间有关。紫外线透过物质的能力 弱，一层厚纸足以挡住紫外线的通过。
五、实验结果
测定各种化学物质形成的抑菌圈的大小， 比较不同化学试剂的抑菌能力？
观察紫外线对微生物生长的影响。 比较青霉素对不同微生物生长的影响
（记录细菌生长相对长短）。
六、问题与讨论
请列举5种化学因素和两种物理因 素对微生物生长的抑制作用及其 机理。
你如何确定某一种理化因素是抑 菌，杀菌或是溶菌？
三、实验器材
菌种 大肠杆菌、金黄葡、枯草杆菌、产黄青霉
培养基 牛肉膏蛋白胨培养基、豆芽汁培养基
器材 平皿、吸管、酒精灯、牛皮纸、滤纸片
试剂 10%苯酚、5%来苏尔、1:20 新洁尔灭溶
液、无菌水
仪器 水浴锅、紫外灯
四、实验步骤
化学因素
1、取0.1ml金黄色葡萄球菌菌液于无菌空皿中， 注入融化的牛肉膏蛋白胨培养基，摇匀待凝。 作2板重复。
pH值的变化也对微生物生长有很大影响。
（三）生物因素
青霉菌、放线菌和某些细菌产生的抗生素（如 青霉素、链霉素等）对微生物存在抑制和致死 作用。抗生素抑菌、杀菌机制各有不同，如青 霉素类能阻碍细胞壁合成，链霉素通过与核糖 体30S小亚基结合抑制蛋白质合成，放线菌素 D阻断RNA的合成。不同种类微生物对抗生素 的耐受性存在差异。
3、倒置于37℃培养箱培养24小时
产黄青霉
大肠杆菌 枯草杆菌 金葡菌
测试菌
物理因素 紫外线
1、制板：取0.1ml金黄色葡萄球菌菌液于无菌空皿中， 注入融化的牛肉膏蛋白胨培养基，摇匀待凝。作2板 重复。 2、紫外线处理 ：打开培养皿盖，用无菌的三角形牛 皮纸遮盖部分平板。在无菌操作台上用紫外灯照射 20 min，取去黑纸，盖上皿盖。 3、培养 ：在37℃培养箱中倒置培养24小时
2、用记号笔在皿底划出四等分区块，每个区 块内分别放上浸有10%苯酚、 5%来苏尔、 1:20 新洁尔灭溶液及无菌水的小滤纸片，作上 标记。
3、倒置于37℃培养箱培养24小时
抑菌透明圈
生物因素 1、制豆芽汁平板1块
2、从斜面分别挑取青霉、大肠杆菌、枯 草杆菌和金葡在平板表面划线，方法如 图。
（二）化学因素
抑制或杀死微生物的化学因素种类很多，用途 广泛，性质各异。其中表面消毒剂和化学药剂 最为常见。表面消毒剂在极低浓度时，常常表 现为对微生物细胞的刺激作用，随着浓度的逐 渐增加，就相继出现抑菌和杀菌作用，对一切 活细胞都表现活性。化学药剂主要包括一些抗 代谢物，例如抗生素、蛋白变性剂等。