免疫磁珠法纯化人外周血CD4^+T细胞
NDV7793促进人CD4+T细胞表达TRAIL的实验研究
NDV7793促进人CD4+T细胞表达TRAIL的实验研究目的：研究新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）弱毒株NDV7793能否促进人CD4+ T细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡因子诱导配体（TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL）。
方法：首先用免疫磁珠分选法（magnetic activated cell sorting，MACS）分选外周血静止CD4+ T细胞，然后加抗CD3抗体、抗CD28抗体和白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）使之成为能被NDV激活的CD4+ T细胞。
用流式细胞技术（flow cytometry，FCM）检测NDV刺激的CD4+ T细胞的TRAIL的表达水平。
结果：MACS法分选外周血得到的CD4+ T 细胞纯度达到（97.38±0.28）%；能被NDV激活的CD4+ T细胞表面分子CD25和CD69双阳性表达率可达（29.30±1.08）%，与PBS阴性对照组（2.40±1.30）%相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；FCM检测结果显示，与对照组比较，NDV7793刺激的CD4+ T细胞TRAIL表达水平均有显著升高，且在NDV7793效价为25 HU时达到最大值。
结论：NDV7793可刺激CD3抗体、CD28抗体和IL-2预先活化的CD4+ T细胞表达TRAIL。
标签：新城疫病毒；CD4+ T细胞；TNF相关凋亡诱导配体NDV是经过临床评估后可以作为载体用于溶瘤治疗、基因治疗和免疫激活的五种病毒之一[1-3]。
全身治疗时，只有少部分NDV能到达肿瘤组织，其发挥直接的溶瘤作用十分有限[4]。
然而NDV在抗肿瘤中却仍能发挥重要作用，这与NDV刺激免疫细胞而发挥抗肿瘤效应有关，这些细胞包括NK细胞、巨噬细胞、树突状细胞以及T细胞等[5-8]。
已有实验证明，NDV可刺激NK细胞和巨噬细胞诱导TRAIL的产生而杀伤肿瘤[5-6]。
免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞的方法探讨
免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞的方法探讨赵品楠;李云【摘要】目的:探索一种用免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞更高效的方法.方法:用Ficoll密度梯度离心法先分离出人单核细胞(PBMC),选用EasySep 正选人CD3试剂盒,用两种不同的操作方法分离T淋巴细胞并进行比较.结果:两种方法有显著差异.结论:用免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞的方法值得推广.【期刊名称】《现代临床医学》【年(卷),期】2010(036)001【总页数】2页(P16-17)【关键词】人外周血;T淋巴细胞;免疫磁珠分选法【作者】赵品楠;李云【作者单位】四川大学公共卫生学院,四川,成都,610041;四川大学公共卫生学院,四川,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】R446.63近年来，对人外周血中的免疫细胞T淋巴细胞的研究已经越来越多，尤其是在免疫学和肿瘤学领域，已成为研究的热点。
特别是对于T淋巴细胞的体外培养技术，也在不断的完善和改进当中。
但是如何大量得到纯化的T淋巴细胞则是还需要深入研究的问题。
本次实验选用了EasySep®人CD3阳性细胞正选抗体混合物和EasySep® 纳米磁珠用于标记细胞。
该正选试剂盒从新鲜或冻存的外周血单个核细胞中正选细胞(表达CD3抗原的细胞)。
1.1 研究对象：健康成年人(主要筛选身体健康，无疾病的志愿献血者)的外周血单核细胞(PBMC)和T淋巴细胞。
1.2 材料：EasySep®正选人CD3试剂盒(Stem Cell公司)，人淋巴细胞分离液(天津灏洋生物制品科技有限责任公司)，RPMI-1640细胞培养基(成都哈里生物)。
1.3 人外周血PBMC的分离培养：人外周血15 mL，肝素抗凝，与D-hank’s溶液等倍稀释，然后用人淋巴细胞分离液分离(分离液与外周血的比例为1∶1)，以2 500 r·min-1离心20 min。
吸取中间白膜层，加适量D-hank’s溶液，1 500 r·min-1离心10 min[1]。
T细胞分离方法的研究进展
T细胞分离方法的研究进展作者：吴红珍张林波来源：《吉林农业·C版》2011年第03期摘要：T细胞是参与机体免疫应答的关键成员，其功能及活化机制等方面的研究一直是免疫学研究的热点。
T细胞分为多个亚类，分别通过不同的作用机制参与机体的免疫应答。
在T 淋巴细胞的表型特征及其功能的研究中，T细胞的分离和纯化显得尤为重要。
目前应用较多的分离方法主要有E玫瑰花环形成分离法、尼龙毛柱分离法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪分离法等，文章就这几个方法做一综述。
关键词：T细胞；E-玫瑰花环；尼龙毛柱；免疫磁珠；流式细胞术中图分类号：Q819 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2011）-03-0062-2T细胞是介导特异性免疫的核心细胞，对其功能及活化机制等方面的研究一直是免疫学研究的热点和前沿，对T细胞的分离纯化可满足深入研究其生物学特性、功能及其表面抗原表位、受体作用的要求。
根据T细胞表面不同的标志（主要是表面抗原和表面受体），目前人们已建立多种分离方法并在实际研究中广泛加以应用。
1 E-玫瑰花环形成分离法玫瑰花环试验是体外检测人和动物细胞免疫功能的一种试验方法。
玫瑰花结是1970年Coombs等人在研究淋巴细胞表面抗原或抗原抗体复合物的受体时发现的，他们观察到在自然情况下，人体淋巴细胞能与绵羊红细胞粘附而形成玫瑰花样细胞，因涂片瑞氏染色后，淋巴细胞被染成蓝紫色犹如花芯，而粘附于淋巴细胞周围的绵羊红细胞被染成红色类似花瓣，整个形状如上衣上的装饰品——玫瑰花别针，故称此种细胞为玫瑰花结。
1973年国际免疫学会已公认这是T细胞的特征标志之一。
原理是动物外周血液中有T细胞和B细胞。
T细胞表面具有红细胞受体，同种或异种动物红细胞与之相遇后、结合，并围绕于T细胞周围排列成为玫瑰花环状。
B细胞表面没有红细胞受体，则不能形成玫瑰花环。
E-玫瑰花环在免疫学上的意义及影响、形成的各种因素等等越来越受到学者们的重视。
CD40信号介导同种反应中CD4+T细胞生物学功能的研究
CD40信号介导同种反应中CD4+T细胞生物学功能的研究柴志军;樊一笋;杨炳华;朱华亭;顾国浩;张学光【期刊名称】《苏州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2007(27)5【摘要】目的探讨CD40信号在血管内皮细胞(ECV)与人外周血CD4+T细胞体外共培养的同种反应中的生物学功能.方法采用免疫磁珠阴性选择法分离获得人外周血CD4+T细胞,将纯化的CD4+T细胞与高表达CD40分子的ECV体外共培养,同时应用功能型CD154单克隆抗体阻断CD40信号,通过检测不同时间点的共培养上清IL-2、IFN-γ水平及CD4+T细胞的增殖来评价CD40信号在同种反应中的生物学效应.结果 CD4+T细胞与ECV共培养组上清中的IL-2和IFN-γ水平高于含有CD154单克隆抗体的阻断效应组,差异有统计学意义(P＜0.05);此外,CD154单克隆抗体通过阻断CD40共信号,能有效地抑制CD4+T细胞活化,并使之对同种抗原的刺激,维持在较低的应答水平,在共培养的第6天差异最为显著(P＜0.05).结论CD40信号参与ECV介导的CD4+T细胞分泌IL-2和IFN-γ,并介导CD4+T细胞对同种抗原的免疫反应;CD154单克隆抗体等多种干预CD40信号的生物制剂可能在移植排斥的免疫负性调节中具有潜在的应用价值.【总页数】4页(P694-696,703)【作者】柴志军;樊一笋;杨炳华;朱华亭;顾国浩;张学光【作者单位】苏州大学附属第一医院,检验科,江苏苏州,215006;苏州大学附属第一医院,检验科,江苏苏州,215006;苏州大学附属第一医院,检验科,江苏苏州,215006;苏州大学生物技术研究所,江苏苏州,215007;苏州大学附属第一医院,检验科,江苏苏州,215006;苏州大学生物技术研究所,江苏苏州,215007【正文语种】中文【中图分类】R392.11【相关文献】1.ICOS信号介导的免疫反应在SHR大鼠肾纤维化中作用的实验研究 [J], 钱小宝;王瑜;梅仁彪;张文杰;马婕;王晓瑜2.p38MAPK信号通路介导sCD40L及防御素-7变化在急性重症胰腺炎中的作用研究 [J], 陈思羽;平倩;陈玉;雷力民;张涛3.CD40-CD40L和CD28-B7共刺激信号在同种异体角膜移植免疫排斥反应中的研究进展 [J], 孙璐4.超声介导血管舒张反应在评价血管内皮功能价值中的研究 [J], 王中阳;徐瑞娟5.BDNF/TrkB介导的PI3K/Akt信号级联反应在肿瘤中作用机制的研究进展 [J], 崔文; 丁子麟; 甄珊珊; 王婷; 曹文波; 杨胜利; 莫赛军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
CD4+T细胞分离、纯化及鉴定技术
CD4+T细胞分离、纯化及鉴定技术.doc
CD4+T细胞分离、纯化及鉴定
1. 主要实验材料：MRL/lpr狼疮小鼠；免疫磁珠；CD3-CY5抗体；CD4-FITC 抗体
2. 实验设置：
（一） CD4+T细胞分离
取MRL/lpr狼疮小鼠（18周龄），颈椎脱臼处死，小心剪开小鼠的腹部外皮，再打开腹腔，无菌条件下取出脾脏，在培养皿中加人EZ-SepTM Mouse 1X淋巴细胞分离液，用镊子把尼龙网固定在皿上，然后用注射器活塞轻轻研磨小鼠脾脏，使得分散的单细胞透过尼龙网进入淋巴细胞分离液中，把悬有脾脏细胞的分离液转移到离心管中，800×g离心30min ，离心结束后，淋巴细胞漂浮，吸出淋巴细胞层，250g离心10min，弃上清，0.5mlPBS重悬细胞，加入CD4+标记磁珠，每1×107个细胞加入10ul，4℃避光孵育15min后，300×g离心10min，弃上清，加入0.5ml缓冲液重悬细胞，置LS分离柱于Midi MACS分选器中，1ml缓冲液冲洗LS 分离柱，将细胞悬液加入分离柱中，滴干净后洗柱3次，每次3ml缓冲液，将LS分离柱移出磁场，将滞留在LS分离柱中的CD4+T细胞缓慢冲出，加入PBS洗涤，300×g离心10min，弃上清，细胞沉淀冻存于液氮备用。
（二）分离前后CD4+T细胞纯度鉴定
取上述经MACS分离前后的细胞1×105，离心，弃上清，加入80ul PBS、10ul抗CD3 mAb-CY5和10ul抗CD4 mAb-FITC，混匀，室温避光放置30min 后上流式细胞仪检测分析。
分离纯化t细胞的方法
分离纯化t细胞的方法分离纯化T细胞的方法T细胞是免疫系统中的重要组成部分，具有调节和介导免疫反应的作用。
为了研究T细胞的生物学特性和功能，需要对其进行分离纯化。
本文将介绍几种常用的T细胞分离纯化方法。
1. 密度梯度离心法密度梯度离心法是一种常用的T细胞分离方法。
该方法利用不同细胞类型的密度差异，在离心过程中将T细胞分离出来。
具体操作步骤如下：（1）制备密度梯度液：将高分子物质如葡聚糖或Ficoll等加入生理盐水中，制备成不同浓度的密度梯度液。
（2）收集外周血或淋巴组织细胞：将外周血或淋巴组织细胞收集到离心管中。
（3）加入密度梯度液：将密度梯度液缓慢地加入离心管中，避免与细胞混合。
（4）离心分层：将离心管放入离心机中，进行离心分层。
离心后，T 细胞会沉淀在密度梯度液的某一层中。
（5）收集T细胞：用吸管或移液器将T细胞层收集到新的离心管中。
2. 免疫磁珠分离法免疫磁珠分离法是一种高效、快速、特异性强的T细胞分离方法。
该方法利用磁珠表面的抗体与T细胞表面的特异性抗原结合，将T细胞分离出来。
具体操作步骤如下：（1）制备磁珠：将抗体固定在磁珠表面。
（2）收集外周血或淋巴组织细胞：将外周血或淋巴组织细胞收集到离心管中。
（3）加入磁珠：将制备好的磁珠加入离心管中，与细胞混合。
（4）磁珠分离：将离心管放入磁珠分离器中，磁珠会吸附在离心管壁上，将未结合的细胞去除，留下与磁珠结合的T细胞。
（5）去除磁珠：用离心管中的磁珠去除器将磁珠去除，留下纯化的T细胞。
3. 细胞表面标记法细胞表面标记法是一种常用的T细胞分离方法。
该方法利用T细胞表面特异性抗原的抗体与荧光染料结合，将T细胞标记出来，然后通过流式细胞术进行分离。
具体操作步骤如下：（1）制备标记抗体：将特异性抗原的抗体与荧光染料结合。
（2）收集外周血或淋巴组织细胞：将外周血或淋巴组织细胞收集到离心管中。
（3）加入标记抗体：将制备好的标记抗体加入离心管中，与细胞混合。
γ-干扰素诱导人外周血CD4 +CD25 -T细胞转化为CD4 +CD25 +调节性T细胞的可行性研究
可诱 导 Ｃ ４ Ｄ２ 一Ｔ 细 胞 转 化 为 Ｃ ４ Ｄ ５ Ｔ 细胞 ， Ｉ Ｎ一 平 为 ４ ｇ ｍＬ 时诱 导 率 最 高 且 诱 导 生 成 Ｄ Ｃ ５ Ｄ Ｃ ２ 当 Ｆ ７水 ０ｎ ／ 的 Ｃ ４ Ｄ ５ Ｔ 细 胞 表 型 和 功 能 与 Ｃ ４ Ｄ ５ Ｔ ｅｓ 当 。 Ｄ Ｃ ２ Ｄ Ｃ ２ ｒｇ 相 关 键 词 ： － 扰 素 ；Ｃ ４ Ｄ ５ Ｔ 细 胞 ；Ｃ ４ Ｄ ５ ｙ干 Ｄ Ｃ ２ Ｄ Ｃ ２ 调 节 性 Ｔ细 胞 中 图 分 类 号 ： ４ ． 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１ ０ — ９ ３（ ０ ０ ０ — ２ ５ ０ Ｒ７ ３ ３ ０ ６２ ６ ２ １ ） ４ ０ ６ — ４
Ｃｏｒ ｅ ｐ ｄｉ ｔ ｒ ｓ ｏｎ ｎｇ ａｕ ｈｏｒ ：Ｗ Ａ ＮＧ ｅｉｚ ｉ Ｗ — ｈ ，Ｅ— ａ１ ｗ ｗｚ ｍ ｉ：
—
ｈ ｏ ８ ｙ ｈ ｏ ｃ ｒ． ｎ ２ ｏ ＠ ａ ｏ ．ｏ ｃ ｎ
ＡＢ ＴＲＡＣ Ｏｂｅｔｖ Ｔｏ ｉｖ ｓｉａ ｅ ｔｅ ｆａ ｉｉｔ ｎ ｉｄ ｃｎ Ｓ Ｔ： ｊｅｉｅ ｎ ｅ ｔ ｔ ｈ ｅ ｓｂｌ ｙ ｏ ｎ ｕ ｉｇ ＣＤ４ ＣＤ２ 一 Ｔ ｅｌ ｏ Ｃ ＣＤ２ ｇ ｉ ５ ｃ ｌ ｔ Ｄ４ ｓ ５
Ｃ ４ Ｄ２ Ｔ 细 胞 与 自体 Ｃ ４ Ｄ ５ Ｄ Ｃ ５ Ｄ Ｃ ２ 一Ｔ 细 胞 共 培 养检 测诱 导 生 成 的 Ｃ ４ Ｄ ５ Ｔ 细 胞 抑 制 Ｃ ４ Ｄ ５ Ｄ Ｃ ２ Ｄ Ｃ ２ 一
Ｔ细 胞 增 殖 的 能力 。结 果 Ｉ Ｎ一 激 后 Ｃ Ｃ ２ Ｔ 细 胞 比例 上 调 且 其 Ｆ ｘ ３表 达 较 诱 导 前 明 显 增 高 ， Ｆ 刺 Ｄ４ Ｄ ５ ｏＰ 当
免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞的方法探讨
出人 单核 细胞（ Ｂ ） 选用 Ｅ ｓＳｐ 正选人 Ｃ ， Ｐ ＭＣ ， ａｙｅ ￣ Ｄ 试剂盒 ， 用两种不 同的操作 方法分离 Ｔ淋 巴细胞并进行 比较 。结果 ： 两
种方法有显著差异。结论 ： 用免疫磁珠分选人 外周血 Ｔ淋巴细胞 的方法值得推广。 ［ 关键词 ］ 外周血 ； 人 Ｔ淋巴细胞 ； 免疫磁珠分选法
ｈ ｍａ ｅ ｉｈ ｒ ｌ ｂ ｏ ｄ Ｍ ｅ ｈ ｄ ： Ｂ ｕ ｎ ｐ ｒ ｅａ ｌｏ ． ｐ ｔ ｏ ｓ Ｐ ＭＣ ｗ ｒ ｅ ａ ａｅ ｒ ｍ ｕ ｎ ｐ ｒ ｈ ｒ ｌ ｂ ｏ ｄ ｙ Ｆ ｃ ｌ ｉ ｌ ｔ ｎ ｍｅｈ ｄ Ａｎ ｗｏ ｅ ｅ ｓ ｐ ｒｔ ｄ ｆｏ ｈ ｍａ ｅｉ ｅ ａ ｌ ｏ ｂ ｉ ｏｌ ｓ ａｉ ｔ ｏ ． ｐ ｏ ｏ ｄｔ ｄｆ ｒｎ ｓ ｌｔ ｎ ｍｅｈ ｄ ｆ Ｔ — Ｌ ｍｐ ｏ ｙｅ ｅ ｅ ｕ ｅ ｙ Ｅ ｓ Ｓ ｐ ｈ ｍａ ３ ｏ ｉ ｖ ｅｅｉ ｎ ｋｔ ｉ ｅ ｅ ｔ ｏａ ｉ ｔ ｏ ｓ ｏ ｆ ｉ ｏ ｙ ｈ ｃ ｔｓ ｗ ｒ ｓ ｄ ｂ ａ ｙ ｅ ｕ ｎ ＣＤ ｐ ｓ ｉｅ ｓ ｌｔ ｉ ｔ ｏ ．Ｒｅ ｕ ｔ ： ｈ ｒ ｒ ｓ ｌ Ｔ ｅ ｅ ｗｅｅ ｓ ｓ ｎ ｆ ａ ｔ ｉ ｅ ｅ ｃ ｓｉ ｈ ｏ ｍｅ ｈ ｄ ． ｎ ｌ ｓｏ Ｔ ｅｉｏａ ｉｎ ａ ｄ ｐ ｒ ｃ ｔ ｎ ｏ ｕ ｎ ｐ ｒ ｈ ｒ ｌ ｌｏ ｉ ｉ ｃ ｎ ｆ ｒ ｎ ｅ ｎｔ ｅ ｔ ｔ ｏ ｓ Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ： ｈ ｓ ｌｔ ｎ ｕ ｉ ａｉ ｆ ｍａ ｅ ｉ ｅ ａ ｏ ｄ Ｔ～Ｌ ｍｐ ｏ ｙｅ ｙ ｇ ｉ ｄ ｗ ｏ ｉ ｆ ｏ ｈ ｐ ｂ ｙ ｈ ｃ ｔｓｂ
ＺＨＡＯ ｎ —Ｎａ ＬＩＹｕ Ｐｉ ｎ， ｎ
（ ｃｏｌ ｆ ｕ ｌ ｅｌ ，ｉｈａ ｎｖｒｔ，ｉ ｕｎＣ ｅｇｕ ６ ０ ４ ，ｈｎ ） Ｓｈｏ ｏ Ｐ ｂｉ Ｈ ａｈ ＳｃｕｎＵ ｉ ｓｙＳｃ ａ ｈｎｄ １０ １Ｃ ｉ ｃ ｔ ｅｉ ｈ ａ
免疫磁珠法纯化人外周血CD4+T细胞
免疫磁珠法纯化人外周血CD4+T细胞
周晓荣;丁润生;孙晓雷
【期刊名称】《交通医学》
【年(卷),期】2003(017)006
【摘要】目的:采用Dynal免疫磁珠法从人外周血单个核细胞(MNC)中分离和纯化CD4+T细胞.结果:经过流式细胞仪测定纯度达到(96.4±2.6)%,0.2%台盼兰染色细胞活力为(96.9±3.6)%,增殖试验表明分离后的CD4+T细胞对植物血凝素(PHA)的刺激保持了良好的增殖能力,为进一步纯化CD4+T细胞的生物学特性创造了条件.【总页数】2页(P625-626)
【作者】周晓荣;丁润生;孙晓雷
【作者单位】南通医学院微生物教研室,江苏,226001;南通医学院附属医院血液科;南通医学院微生物教研室,江苏,226001
【正文语种】中文
【中图分类】R392-33
【相关文献】
1.免疫磁珠法分离纯化骨髓间充质干细胞及向成软骨细胞分化 [J], 徐鹏;赵子义;高鹏;秦大明
2.Percoll分离法结合免疫磁珠法分离提纯人外周血中性粒细胞方法的建立 [J], 郑小莉;罗波;梅志强;李申;刘佳佳
3.免疫磁珠法分离纯化骨髓间充质干细胞及向神经细胞定向分化 [J], 徐鹏;舒畅;赵子义;张伟
4.免疫磁珠法分离人外周血T淋巴细胞 [J], 牟贤龙;郑茂荣;方跃明
5.免疫磁珠法分离人外周血CD4^+ CD25^+调节性T细胞 [J], 牛微;杨曌;尚小云;傅晓岚;唐艳;黎万玲;姜曼;王莉;吴玉章
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
免疫磁珠法纯化自体外周血CD34 +造血干细胞移植治疗重症肌无力2例(附文献复习)
维普资讯
３０ ８
Ｉｉｎ ｒｃ ｃｌ ｄｃ ｅＡ ｇ ｓ，０７ ￣ ｉ１， ． ｅａ ｇＰａｔ ａ Ｍｅｉｎ ｕ ｕｔ２０ ， ｏ．２Ｎｏ４ ｊ ｉ ｉ
力 收入 病 房 。人 院后 第 ｌ 出 现 吞 咽 及 呼 吸 困 ０天 难， 予血 浆置换 治疗 。肌无 力 危 象 纠正 后 转 胸外 科 水化 碱化 ， Ｇ—ＣＦ５～１ｐ／ ｋ・ ）从 白细 胞 跌 至 Ｓ ０ｇ （ｇ ｄ ，
行胸腺切除术， 术后病理报告 ：胸腔） （ 胸腺瘤 （ 巴 淋 细胞 为 主型 ） 。之后 ７年 中因 肌无 力 危 象 ６次 住 院 抢救 ， 每次均使用激素、 丙种球蛋 白、 免疫抑制剂及 血浆置换 等方法 治疗。缓解期在 中药 、 尼松 、 泼 环
孢 菌素 、 吡斯 的 明等 药 物 的维 持 下 能 自理 生 活 。 溴
肉接 头 （ Ｍ ） Ｎ Ｊ 传递 功 能 障碍 的 自身 免 疫性 疾 病 ２０ 年 ２月 因感 冒后肌无力 危象再发 ， 常规治 ０５ 经 （ Ｉ） Ｍ 突触后膜上 乙酰胆碱受体（ ｃＲ 自身 疗 ， ＡＤ 。Ｎ Ｊ Ａｈ ） 呼吸及 吞 咽 困难 不 能 完 全 缓解 ， 本 院血 液 科 人 致敏 ， 引起 乙酰胆碱受体抗体 （ Ｃ Ｒ—Ａ ） 导 的 Ａｈ ｂ介 行 自体外周血干细胞移植治疗 。 体液免疫反应和 Ｔ 细胞介导的细胞 免疫反应 ， 破坏 例 ２ 女性 ，７ ， １８ 年前怀孕时 出现颈部 ， ４ 岁 于 ９３ 突触后 膜上 的 Ａ ｈ Ｃ Ｒ为其 主要发病 机 制 。 目前 治疗 肌 肉无 力 ， 累后 头部 下垂 ， 半 年后 出 现 吞 咽 困 劳 约 多采用胆碱酯酶抑制剂、 肾上 腺糖皮质激素、 胸腺 难 ， 渐 出现 四肢 乏力 ， 轻 暮重 ， 累后 加 重 ， 并 晨 劳 确 切 除或放疗 、 疫抑 制剂 、 免 血浆 置换 、 剂量 免 疫球 诊为 “ 症肌 无力 ”予 以溴 吡斯 的明 ， 的松 治疗 。 大 重 ， 强 蛋 白等方法 ， 但对 一些 难 治 性患 者 疗 效欠 佳 。作 者 ８ ７年行胸 腺瘤 切 除术 ， 术后 出现呼 吸 困难 而行 气 管 采用免疫磁珠法纯化 的 自体外周血 Ｃ ３ Ｄ ４ 造血干 切开术。当时曾封管 ， 年后再次因呼吸困难气 管 １ 一 ｒ／ ｎ 细胞 移植 治疗 难 治 性 Ｍ 在 治 疗 上 开 辟 了一 条 新 切开 ， 直未 封管 。近几 年来 一直服 用强 的松 ｌ ｇ Ｇ， ｋ 及较 大剂 量溴 吡斯 的明 ， ｇ 四肢 乏力 及 呼 吸困难 频 途径 ， 现报道 如下 。 繁发作。２０ 年 ｌ ０５ ０月进一步治疗就诊本院 ， 体检 １ 临床 资料 疲 劳试验 （ ， Ｃ Ｒ—Ａ （ ，Ａ ＋） Ａ ｈ ｂ 一） Ｃ Ｅ—Ａ （ ， ｂ 一） 四肢 １ １ 病 例介绍 ． 肌力 Ⅲ级 ， 张力 正 常 ， 反 射 两侧 对 称 、 跃 ， 肌 腱 活 人 例 １患者 １女性 ，２ ， １９ ， ， ４ 岁 于 ９８年 ５月无 明显 血液科行 自体外周血干细胞移植治疗。 ． Ｃ Ｘ） 诱因出现视物成双， 就诊本院， 查体见右眼睑下垂 ， １２ 干 细胞 的动 员 和采 集 采 用 环磷 酰胺 （ Ｔ 和粒细胞集落刺激因子 （ Ｇ—Ｃ Ｆ 进行 动员。ｃ ｘ Ｓ） ＇ ｒ 新 斯 的 明 试 验 （ ， 疲 劳 试 验 （ ， Ｃ Ｒ—Ａ ＋） 肌 ＋） Ａ ｈ ｂ ～ ｇｍ ， 同时解毒止吐并注意 （ ， ＋）胸腺瘤相关抗体（ Ａ — ｂ （ ， Ｃ Ｅ Ａ ） ＋） 以重症肌无 总剂量 ３ ４／ ２分 ２天用 ，
磁珠分选t细胞
磁珠分选t细胞1. 磁珠分选t细胞的原理和方法磁珠分选是一种常见的细胞分选技术，通过利用磁性的珠子特异性地结合到特定的细胞表面标记物上，然后通过磁力的作用将目标细胞分离出来。
在T细胞分选中，可以利用特殊的抗体来标记T细胞表面上的CD3、CD4、CD8等抗原，然后再使用特定的磁珠将标记物和目标细胞结合。
最后，利用磁力分离，就可以获得高纯度的T细胞。
2. T细胞分选的研究进展随着近年来免疫治疗和细胞治疗的兴起，T细胞分选技术也得到了广泛应用。
特别是在肿瘤免疫治疗中，利用CAR-T细胞和TCR-T细胞等细胞治疗手段，可以得到很好的临床疗效。
因此，T细胞分选技术的研究也变得越来越重要。
目前，针对T细胞的分选技术已经有了很多进展，如流式细胞仪、磁珠分选、微流控芯片、光学分选等。
其中，磁珠分选技术在T细胞体外扩增和临床治疗等领域得到了广泛应用。
3. 磁珠分选在T细胞治疗中的应用磁珠分选技术在T细胞治疗中的应用主要包括两个方面：一是体外扩增中的分选，二是治疗细胞产品的分选。
体外扩增中的分选：在体外扩增T细胞时，需要从淋巴细胞中选择和分离出T细胞，同时排除其他免疫细胞。
磁珠分选技术可以帮助实现高效分选，并获得高纯度的T细胞，从而提高体外扩增的效率和规模。
治疗细胞产品的分选：在CAR-T细胞和TCR-T细胞等治疗细胞产品中，需要分离出目标T细胞并通过磁珠分选获得高纯度的治疗细胞。
此外，治疗细胞产品的分选也可以用于排除其他污染物，如病毒、细菌等。
4. 磁珠分选T细胞的优缺点优点：1.高效、快速：磁珠分选技术可以非常迅速地获得纯度较高的目标细胞，从而节省时间和成本。
2.高纯度：使用磁珠分选技术可以获得高度纯化的细胞，从而提高了治疗效果和安全性。
3.对细胞活性无影响：分选过程中不需要进行细胞培养等处理，从而保证了目标细胞的活性和功能。
缺点：1.标记物有限：目前可以使用的标记物数量有限，不能针对所有细胞进行磁珠分选。
2.影响细胞表面：磁珠分选的过程可能会对细胞表面结构产生不良影响，从而影响细胞的功能。
免疫磁珠法分离人外周血CD4 + CD25 +调节性T细胞
采用免 疫磁性细 胞分离技术 能够 高效 、 速 快
地得 到一群纯度 高并且 细胞 活力好的 Ｃ ４ Ｄ ５ Ｔｅ ， Ｄ Ｃ ２ ｒｇ为进一步研究其功能提供 了方便 。
Ｉｏ ａ ｉ ｒ ｌ ｂ ｏ ｄ ｎ ｎ ｃｅ ｒ ｃ ｌ ｙ ｓ ｌｔｏ ｆ ＣＴ４ ５ ｅ ｕ ａ ｏ ｙ Ｔ ｅｌ ｒ ｍ ｕ ｎ ｐ ｒｐ ｅ ａ ｌ ｏ ｍｏ ｏ ｕ ｌａ ｅｌ ｂ ｓ
ｍ ａ ｎ ｔｃ ｃ ｌ ｓ ｒｉｉ ｙ ｔｍ ｇ ｅ ｉ ｅｌ ｏ ｌ ｇ ｓ ｓｅ ｌ Ｎ Ｕ ｅ ，Ｙ ＮＧ ｈ ｏ ＨＡ ｉｏＹｕ Ｕ Ｘ ａ － ｎ Ａ ａ ，Ｌ ｎｌ ｇ Ｉ ＮＧ Ｍａ ，ＷＡ Ｇ ｉ Ｉ Ｗ ｉ Ａ Ｚ ａ ，Ｓ ＮＧ Ｘ ａ－ ，Ｆ ｉｏｌ ，Ｔ ＮＧ Ｙ ｎ ＩＷａ — ｎ ，ＪＡ ｎ ａ ｉ Ｎ Ｌ ，ＷＵ ｕ Ｙ—
３３ ％ｏＨ ＴＲ掺入 法检 测其 对 Ｃ ４ Ｉ ５ Ｔ细胞具 有明显的抑制作用 。结论 ．） ３ －ｄ Ｄ ＣＹ 一 ２
［ 键 词 ］ 磁 性 细 胞 分 离 ； Ｄ Ｃ ２ 调节 性 Ｔ细 胞 ；Ｏ Ｐ 达 关 Ｃ ４ Ｄ５ Ｆ Ｘ ３表 ［ 中图 分 类 号 ］ Ｒ ９ ３２ ［ 献标识码 ］ Ａ 文
ｈ ｍ ｎＰ Ｍ ｗ ｔ ｓｂ ａ ｎｔ ｅ ｒｎ （ Ａ Ｓ ｙｔ ｕ ａ Ｂ Ｃ ｉ ｔ ｏｓ ｐ ｙ ｍ ｇ ｅ ｃｃ ｌ ｓ ｔ ｎ ｅ ｉ ｏ ｉ Ｍ Ｃ ）ｓｓ ｍ．Ｃ ４ Ｔ ｃｌ ｅ ｅａ ｖｌ ｓｒ ｙｂｏ ｎａ ｔ ｏ ｙ ｃ ｃｔ ｌ ｄ ｇ ｅ Ｄ ｅ ｓｗ ｒ ｎ ｇｔ ｅ ｔ ｂ ｉ －ｎ ｂ ｄ ｏｋ ｉ ａ ｌ ｅ ｉ ｙｏ ｅ ｄ ｉ ｔ ｉ ａ ｎ
免 疫磁 珠 法 分 离 人 外 周 血 Ｃ ＋ Ｄ２ ＋ 节性 Ｔ细 胞 Ｄ４ Ｃ ５ 调
体外扩增CD4CD25Treg细胞的效果比较及体外免疫抑制功能鉴定[1]
![体外扩增CD4CD25Treg细胞的效果比较及体外免疫抑制功能鉴定[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/77a01f47c850ad02de80410b.png)
ｔｈｅ Ｔｒｅｇ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ
ａｌｌ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ
ｒａｔｅ
ｅｘｐａｎｄｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ ｆｏｒ ２ ｗｅｅｋｓ．Ｉｎ ｔｈｅ ＣＤ４＋Ｔ ｃｅｌｌｓ ｇｒｏｕｐ．ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｆｏｌｄｓ ｗｉｔｈ
ａ
ｗａｓ（７７．８±５．３２）
ｄｅｃｒｅａｓｅｄ
ｆｒｏｍ（７６．９２±１．７２）％ｔｏ（７５．３３±２．１１）％ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅｒｅ
ｗｅｒｅ ｎｏｔ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｐｕｒｉｔｙ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘｐａｎｄｅｄ ＣＩＭ＋ ｃｅｌｌ ｄｏｓｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ．Ｉｔ ｉｓ
（ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
Ｔ
好的细胞悬液进入磁珠自动分选仪的磁场，阴性选 择出ＣＩＭ＋Ｔ细胞；将收集的ＣＤ４＋Ｔ细胞（ＣＤ２５＋Ｔ 标有ＰＥ）加入抗ＰＥ的磁珠，所有ＣＤ２５＋Ｔ细胞都 标记有磁珠，细胞悬液经过磁珠自动分选仪的磁场 阳性选择ＣＩＭ＋ＣＤ２５＋Ｔｍｇ细胞，阴性选择ＣＤ４＋ ＣＤ２５一Ｔ细胞。具体按ＣＤ４ｌ＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ细胞的分 选试剂盒说明书进行操作。０．４％台盼蓝染色后检 测细胞活性，流式细胞术检测细胞纯度及表型标记
Ｙａｔ－Ｓｅｎ １Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
ｏ
ｏ，ＦＡＮＧ Ｊｉａｎ．Ｐｅｉ．ＸＵ Ｌｇｔ—Ｈｏｎｇ
Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｕｎ Ｙａｔ－Ｓｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０１２０，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ；
Ｈｏｓｐｉｔａｌ
ｏｆＰｅｄｉａｔｒｉｃｓ，砌Ｐ豫ｆ坩Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ
免疫磁珠法在分离纯化外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群中的应用
免疫磁珠法在分离纯化外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群中的应用莫雪安;周礼圆;秦超;张德敏;赵伟金【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2012(29)5【摘要】目的:探讨免疫磁珠法(MiniMACS)在分离纯化外周血CD4+和CD8+T 淋巴细胞亚群中的应用.方法:应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononucleate cells,PBMC),采用MiniMACS分别分离和纯化39例标本外周血PBMC中的CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞,并经流式细胞仪分析细胞纯度和台盼蓝染色的方法对细胞活力进行评估.结果:MiniMACS分离外周血CD4+T淋巴细胞前、后细胞纯度分别为(37.38±5.74)%、(97.75±1.03)%(P＜0.001),CD8+T淋巴细胞分离纯化前后细胞纯度分别为(20.11±6.83)%、(96.85±1.86)%(P＜0.001);外周血分离前PBMC细胞活力为(97.66±2.73)%,纯化为CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞后细胞活力分别为(97.44±3.08)%、(98.05±2.92)%(P＞0.05).结论:MiniMACS可以高度富集CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞且不改变细胞的活力.%To evaluate the separation and purification of T lymphocyte subsets by immunomag-netic beads. Methods: Peripheral blood mononucleate cells (PBMC) were isolated using lymphocytes separation medium and desity gradient centrifugal action. CD4+T and CD8+T lymphocytes were isolated and purified from PBMC by magnetic activated cell sorting (MiniMACS). The purity and activity of CD4+T and CD8+T cells were measured using flowcytometry, trypan-blue dye exclusion test, etc. Results: The results showed that the percentage of CD4+T cells before and after the purification was (37. 38 + 5. 74)% and (97. 75 + 1. 03)% ( P <0. 001) ; the percentage ofCD8+T cells before and after the purification was (20. 11 + 6. 83) % and (96. 85 + 1. 86) % ( P <0. 001) , resprectively; and the cell ability was not affected by purification procedure ( P <0. 05). Conclusion: MiniMACS can sort out effectively CD4 + T and CD8+ T cell subpopulations of peripheral blood and does not affect the cell vitality.【总页数】3页(P679-681)【作者】莫雪安;周礼圆;秦超;张德敏;赵伟金【作者单位】广西医科大学神经病学研究所,南宁,530021;广西壮族自治区人民医院神经内科,南宁,530021;广西医科大学神经病学研究所,南宁,530021;广西壮族自治区人民医院神经内科,南宁,530021;辽宁省沈阳市第一人民医院神经内科,沈阳,110041【正文语种】中文【中图分类】R392.12【相关文献】1.蒲公英多糖对雏鸡外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的影响 [J], 陈文英;郝艳霜;何欣;陈福星;赵兴华;魏军2.CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群在肿瘤患者外周血中检测的临床意义 [J], 严健;原永明;张舒;彭贤聪3.米糠多糖对不同免疫状态雏鸡外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的影响 [J],李淑芳;李英;张继东;雍艳红;蔡康荣;谢为天4.CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群在HIV感染者外周血中检测的临床意义[J], 王爱莉5.CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群在布鲁菌病患者外周血中检测的临床意义[J], 庄金田;柴艳峰;孟良;高明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
免疫磁珠纯化_T淋巴细胞的方法
王兆源陈松华刘伟葛锡锐中国科学院上海细胞生物学研究所上海200031摘要γδT 淋巴细胞在人外周血单个核细胞中的含量不超过10 % , 而研究γδT 淋巴细胞的功能需要大量的γδT 淋巴细胞。
为此, 采用磁珠(magnetic micr obeads ) 阳性选择(positive selection ) 法分离和纯化γδT 淋巴细胞, 纯化可达99 %左右; 同时对富集的γδT 淋巴细胞在体外的增殖和细胞毒效应进行观察, 此法快速、有效、纯度高, 对γδT 淋巴细胞功能影响较小。
为γδT 淋巴细胞的研究和应用提供了便利。
关键词γδT 淋巴细胞; 磁珠; 阳性选择; 细胞毒效应γδT 细胞是免疫系统的成分之一, 它参与机体抵抗外来病原体的感染1 ,2 。
含量一般不超过外周血淋巴细胞的10 %3 。
γδT 淋巴细胞能够介导MHC 非限制性的细胞毒性, 在体外培养中, 能够识别非肽抗原, 并引起自身增殖2 ,4 。
实验表明, 体外培养的γδT 淋巴细胞能够产生I L22 、I L24 、TNF2γ等细胞因子, 并对肿瘤细胞起自发的杀伤效应5 ,6 , 因此, 作为一种肿瘤治疗效应细胞, 其应用前景乐观。
我们实验室利用外周血单个核细胞进行体外培养γδT 淋巴细胞已经获得成功, 含量可达60 %～80 %6 。
但体外培养的外周血淋巴细胞中, 还含有αβT 细胞, NK 细胞等, 干扰对其功能进一步的分析, 为此, 我们籍助一种磁珠阳性选择法纯化γδT 淋巴细胞。
现将其结果报道如下。
新鲜外周血单个核细胞, 用I L22 与MEP 共刺激, 静止培养9d 。
方法参阅文献6 。
11212 F ACS 检测: 将经培养的细胞在分离前后分别进行FAC S 检测, 方法参阅文献8 。
取细胞( 3～5 ) ×105 个, 用1 % PBS 洗细胞1～2 次, 然后, 加入anti2TCRγδ抗体( PE 染色) 约20μl , 冰浴30min 。
利用磁珠分离人外周血中CD4和CD25淋巴细胞的方法[发明专利]
![利用磁珠分离人外周血中CD4和CD25淋巴细胞的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/c807d404f011f18583d049649b6648d7c1c708a3.png)
(10)申请公布号 (43)申请公布日 2013.09.18C N 103305463 A (21)申请号 201310219433.1(22)申请日 2013.06.05C12N 5/0783(2010.01)(71)申请人南昌大学地址330031 江西省南昌市红谷滩新区学府大道999号(72)发明人许恒毅 魏华 熊勇华 赖卫华(74)专利代理机构南昌新天下专利商标代理有限公司 36115代理人施秀瑾(54)发明名称利用磁珠分离人外周血中CD4+和CD25+淋巴细胞的方法(57)摘要本发明公开了分离富集外周血中CD4+和CD25+调节性淋巴细胞的方法，更好地为CD4+和CD25+调节性淋巴细胞进行后续研究提供基础，涉及生物医学领域。
方法包括多臂井星聚合物与鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体共价偶联、鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体修饰的多臂井星聚合物再包被长链生物素分子、鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体和长链生物素共修饰的多臂井星聚合物捕获外周血样品中的CD4+和CD25+淋巴细胞、链霉亲和素修饰的纳米磁珠识别并偶联外周血中长链生物素化多臂井星聚合物、被捕获CD4+和CD25+淋巴细胞的分离及重悬等步骤。
重悬液可以直接进行后续分析，与传统的细胞分离方法相比，该方法更适用于在复杂外周血样品中对CD4+和CD25+淋巴细胞进行磁分离，提高了外周血样品中CD4+和CD25+淋巴细胞分离效率。
(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书7页 附图1页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书7页 附图1页(10)申请公布号CN 103305463 A*CN103305463A*1/1页1.利用磁珠分离人外周血中CD4+和CD25+淋巴细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）每取1.0 mg 多臂井星聚合物溶解于2 mL ，0.02 M ，pH 6.5 PBS ，加入0.6 mg NHSS ，0.4 mg EDC ，室温置于混匀仪上搅拌，活化15 min ；取2.1 mg 鼠抗人CD4+抗体加入上述反应液中，室温置于混匀仪上搅拌30 min ；将上述溶液减压旋干溶剂，去离子水溶解，在PBS 和去离子水中透析1 d ；透析结束将得到的溶液冷冻干燥得多臂井星聚合物-鼠抗人CD4+抗体复合物；（2）每取1.0 mg 多臂井星聚合物溶解于2 mL ，0.02 M ，pH 6.5 PBS ，加入0.6 mg NHSS ，0.4 mg EDC ，室温置于混匀仪上搅拌，活化15 min ；取2.1 mg 鼠抗人CD25+抗体加入上述反应液中，室温置于混匀仪上搅拌30 min ；将上述溶液减压旋干溶剂，去离子水溶解，在PBS 和去离子水中透析1 d ；透析结束将得到的溶液冷冻干燥得多臂井星聚合物-鼠抗人CD25+抗体复合物；（3）每取15 mg 长链生物素，5.4 mg NHSS ，3.6 mg EDC 溶解于3 mL 0.02 M pH 6.5 PBS 缓冲液中；将0.1 mg 多臂井星聚合物-鼠抗人CD4+或CD25+抗体复合物加入到上述溶液中，室温置于混匀仪上搅拌30 min ；将上述溶液减压旋干溶剂，去离子水溶解，在PBS 和去离子水中透析1 d ；透析结束将得到的溶液冷冻干燥长链生物素-多臂井星聚合物-抗体复合物；（4）富集捕获：取待测样品溶液1mL ，加入0.1 mg 长链生物素-多臂井星聚合物-CD4+抗体复合物，置于混匀仪上，以30 rpm 的转速室温孵育15 min 形成长链生物素-多臂井星聚合物-抗体-CD4+细胞抗原复合物；加入0.1 mg 修饰有链霉亲和素的纳米磁珠，置于混匀仪上，以30 rpm 的转速再室温孵育15 min ，将离心管插入常规磁力架充分分离；磁分离后，用等体积的PBS 溶液重悬细胞，即为CD4+细胞；将分离后的上清液用等体积的PBS 溶液洗涤，离心300rpm/min ，20℃ 10 min ，弃去上清，用等体积的PBS 溶液重悬细胞；加入0.1 mg 长链生物素-多臂井星聚合物-CD25+抗体复合物，置于混匀仪上，以30 rpm 的转速室温孵育15 min 形成长链生物素-多臂井星聚合物-抗体-CD25+细胞抗原复合物；加入0.1 mg 修饰有链霉亲和素的纳米磁珠，置于混匀仪上，以30 rpm 的转速再室温孵育15 min ，将离心管插入常规磁力架充分分离；磁分离后，用等体积的PBS 溶液重悬细胞，即为CD25+细胞；（5）去离子水轻轻清洗后，用PBS 缓冲液混重悬即得富集有CD4+或CD25+细胞的复合物即纳米磁珠-链霉亲和素-生物素-多臂井星聚合物-抗体-CD4+CD25+细胞。
免疫磁珠法分离鼻咽癌基质的T淋巴细胞
免疫磁珠法分离鼻咽癌基质的T淋巴细胞李虹;韩为农;冯湘玲;周文;张贺军;丁彦青;姚开泰【期刊名称】《生命科学研究》【年(卷),期】2006(10)4【摘要】肿瘤内环境与肿瘤的发生密切相关.肿瘤细胞周围的组织在癌变发生时不会是一个沉默的旁观者,可能在肿瘤的发生和发展中扮演十分重要的角色.本研究分别采用不同的磁珠分选技术分离T淋巴细胞.采用CK+LMP1,CD105和成纤维细胞表面蛋白,结合全血总T细胞试剂盒,间接法分离鼻咽癌基质的T淋巴细胞;采用CD3直接磁分选法分离鼻咽癌基质的T淋巴细胞,然后用免疫组化法鉴定分选的效果和细胞的质量.结果表明,免疫组化显示间接磁分选法分离出来的T淋巴细胞不能完全去除肿瘤细胞,RNA的质量不佳;而直接磁分选分离出来的T淋巴细胞为纯净的T淋巴细胞,而且RNA的质量良好.提示直接磁分选技术是分离鼻咽癌基质T淋巴细胞的首选方法.【总页数】4页(P358-361)【作者】李虹;韩为农;冯湘玲;周文;张贺军;丁彦青;姚开泰【作者单位】中南大学,肿瘤研究所,分子病理研究室,中国湖南,长沙,410078;南方医科大学,病理教研室,中国广东,广州,510515;南方医科大学,病理教研室,中国广东,广州,510515;中南大学,肿瘤研究所,分子病理研究室,中国湖南,长沙,410078;中南大学,肿瘤研究所,分子病理研究室,中国湖南,长沙,410078;中南大学,肿瘤研究所,分子病理研究室,中国湖南,长沙,410078;南方医科大学,病理教研室,中国广东,广州,510515;中南大学,肿瘤研究所,分子病理研究室,中国湖南,长沙,410078;南方医科大学,病理教研室,中国广东,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R730.231【相关文献】1.免疫磁珠法在分离纯化外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群中的应用 [J], 莫雪安;周礼圆;秦超;张德敏;赵伟金2.Percoll分离法结合免疫磁珠法分离提纯人外周血中性粒细胞方法的建立 [J], 郑小莉;罗波;梅志强;李申;刘佳佳3.免疫磁珠法检测系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群及其意义 [J], 游弋;郝飞;邓永键4.显微分离培养与免疫磁珠法分离纯化人毛囊干细胞 [J], 谭挺;胡志奇;周洪军5.免疫磁珠法分离人外周血T淋巴细胞 [J], 牟贤龙;郑茂荣;方跃明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
免疫磁珠法纯化自体外周血CD34+造血干细胞移植治疗重症肌无力2例(附文献复习)
免疫磁珠法纯化自体外周血CD34+造血干细胞移植治疗重症肌无力2例(附文献复习)叶宝东;周郁鸿;陈眉;张宇;沈一平;俞庆宏;张宾辉;虞荣喜【期刊名称】《浙江实用医学》【年(卷),期】2007(012)004【摘要】目的探讨免疫磁珠法纯化自体外周血CD34+造血干细胞移植治疗难治性重症肌无力的临床疗效.方法对难治性重症肌无力2例进行免疫磁珠法纯化的CD34+细胞移植,动员得CD34+细胞分别为1.7×106个/kg,2.4×106个/kg;纯化后CD34+细胞分别为1.02×106个/kg,1.68×106个/kg.纯度和回收率分别为:83.13%、60.04%:92.45%、70.15%.采用氟达拉滨、抗胸腺细胞球蛋白和环磷酰胺组成预处理方案.结果2例患者均造血重建,肌无力症状1例消失,1例明显改善.结论免疫磁珠法纯化的自体外周血CD34+造血干细胞移植可使患者造血功能得到较快重建,临床症状改善,效果显著.【总页数】3页(P307-309)【作者】叶宝东;周郁鸿;陈眉;张宇;沈一平;俞庆宏;张宾辉;虞荣喜【作者单位】浙江省中医院,浙江,杭州,310006;浙江省中医院,浙江,杭州,310006;浙江省中医院,浙江,杭州,310006;浙江省中医院,浙江,杭州,310006;浙江省中医院,浙江,杭州,310006;浙江省中医院,浙江,杭州,310006;浙江省中医院,浙江,杭州,310006;浙江省中医院,浙江,杭州,310006【正文语种】中文【中图分类】R74【相关文献】1.Clini MACS纯化自体外周血CD34+造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤1例 [J], 徐建民;王志梅;王宝珍;刁兰萍2.自体纯化CD34+细胞移植治疗难治性Crohn病伴坏疽性脓皮病1例并文献复习[J], 龚奕;刘红;王庆余;张曦;陈幸华;高蕾;高力;李云龙;刘嘉;彭贤贵;孔佩艳3.自体外周血造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤(1例报告及文献复习) [J], 刘红;陈幸华;孔佩艳;刘林;王庆余;张曦;张怡;高蕾;彭贤贵4.经CD34+纯化的自体外周血干细胞移植治疗小儿难治性自身免疫性疾病的初步观察 [J], 唐湘凤;徐世侠;栾佐;吴南海;黄友章;尹国才5.自体外周血造血干细胞移植治疗实验性自身免疫性重症肌无力模型大鼠 [J], 魏文学;王铁栓;齐宇;赵高峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。