药物的镇痛作用(实验2)

药物的镇痛作用

目的与要求

1. 学习常用的三种疼痛实验模型的制作。

2. 观察哌替啶的镇痛作用。

实验原理

疼痛是临床的常见症状，疼痛除了由于伤害性刺激所引起的情绪反应外，往往还表现出自主神经反应、躯体防御反应和心理情感及行为反应等。痛觉不仅具有较大的个体差异，而且同一个体在不同条件下的痛觉也不同。痛觉的观察指标容易受主观因素的影响，目前常用一种衡量痛觉敏感性的指标即痛觉阈值（简称痛阈值）客观地对痛觉做出描述。

解热镇痛药、镇痛药及麻醉药等是目前临床上常用的具有镇痛作用的药物，可通过提高痛觉阈值达到镇痛的目的。

疼痛实验模型的制作，常用的方法有：热刺激、化学刺激、机械刺激及电刺激等

一、 热板法

实验材料

一. 实验动物

雌性小鼠（18～22 g ）6～7只。

二．器材与药品

Woolfe 热板、天平、鼠笼、注射器（1ml ）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。

实验方法

1. 筛选实验动物 将热板温度调节至（55±0.5）℃，置小鼠与热板上，测定各

小鼠的正常痛反应（舔后足或抬后足并回头）时间，共2次，每次间隔5min ，

该时间即为小鼠的痛阈值，以平均值不超过30s 为合格，共选出6只小鼠供

实验用。

2. 动物分组及给药 取选出的6只小鼠，随机分为3组，即实验组1、实验组

2和对照组（每组2只），称重编号。按上述方法分别测定小鼠给药前的痛阈

值。实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg/10g （0.1ml/10g ），实验组2

小鼠腹腔注视3%安乃近300mg/10g （0.1ml/10g ），对照组腹腔注射等容量生

理盐水。于注射后15min 、30min 、45min 分别再次测定实验组和对照组各小

鼠痛阈值。对60s 不舔后足、不抬后足并回头的小鼠，痛阈值按60s 计算。

3. 结果计算 收集整个实验室结果，按下列公式计算不同时间的痛阈改变百分

率。

痛阈改变百分率=%100- 用药前平均痛阈值

用药前平均痛阈值用药后平均痛阈值 4. 将小鼠给药前、后的痛阈值记入表13-4。并计算各时间点的痛阈改变百分率。

以时间为横坐标、痛阈改变百分率为纵坐标，绘出用药后15min、30min、45min 小鼠的痛阈改变百分率时效曲线（图13-2）。

表13-4 盐酸哌替啶、安乃近对小鼠痛阈值的影响

动物数给药前痛阈值（s）

给药后痛阈值（s）

15min 30min 45min

实验组1

实验组2

对照组

图13-2 痛阈改变百分率时效曲线

注意事项

1.热板法要求必须用雌性小鼠。因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易于热板接触而影响实验结

果。

2.热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。以痛阈值在30s以内为敏感鼠，供实验用。

3.用药后小鼠痛阈值超过60d者应立即取出，以防烫伤足部而影响实验结果，其痛阈值按

60s计算。

二、化学刺激法

实验材料

一、实验动物

雌性小鼠（18～22 g）6～7只。

二、器材与药品

天平、鼠笼、注射器（1ml ）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、0.6%醋酸溶液或1%酒石酸锑钾溶液、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。

实验方法

1. 取体重相近的小鼠6只，随机分为3组，即实验组1、实验组2和对照组（每

组2只），称重，并观察各组小鼠的活动情况。

2. 实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg/10g （0.1ml/10g ），实验组2小鼠

腹腔注射3%安乃近300mg/10g （0.1ml/10g ），对照组腹腔注射等容量生理盐

水。

3. 给药后20min ，各鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g （或1%酒石酸锑钾溶

液0.1ml/10g ），观察15min 内各组出现扭体反应（腹部收缩内凹、躯干后肢

伸张、臀部高起）的动物数。

4. 结果计算 收集整个实验室结果，将各组发生扭体反应和未发生扭体反应的

小鼠记入下表，并计算药物镇痛百分率。

药物镇痛百分率=%100- 对照组扭体反应动物数

数对照组无扭体反应动物数实验组无扭体反应动物 表13-5 盐酸哌替啶、安乃近对小鼠化学刺激致扭体反应的影响

动物数 扭体反应数 无扭体反应数 实验组1

实验组2

对照组

注意事项

1. 酒石酸锑钾或醋酸需临用时配置。存放过久，将导致作用明显减弱。

2. 哌替啶给药剂量要准确。剂量过大抑制呼吸，剂量过小不发挥作用，均会影响实验结果。

三、甩尾法

实验材料

一、实验动物

雌性小鼠（18～22 g ）6～7只。

二、器材与药品

热辐射刺激仪、天平、鼠笼、小鼠固定器、注射器（1ml ）2支、注射针头、秒表；0.4%盐酸哌替啶溶液、3%安乃近、0.6%醋酸溶液或1%酒石酸锑钾溶液、生理盐水、0.5%苦味酸溶液。

实验方法

1、筛选实验动物 将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，打开灯光，光束直射于鼠尾1/3处，观察小鼠甩尾动作，记录出现甩尾动作的时间作为小鼠痛阈值。选出6只在6s 内出现甩尾动作的小鼠供实验用。超出6s 的小鼠应弃除。

2.动物分组及给药 取选出的6只小鼠，随机分为3组即实验组1、实验组2和对照组（每组2只），称重编号。将小鼠装入笼中，暴露并抓住鼠尾，按上述方法测定小鼠给药前的痛阈值。

实验组1小鼠腹腔注射1%盐酸哌替啶40mg/10g （0.1ml/10g ），实验组2小鼠腹腔注射3%安乃近300mg/10g （0.1ml/10g ），对照组腹腔注射等容量生理盐水。并于注射后15min 、30民、45min 分别再次测定小鼠痛阈值。其中，对于60s 不甩尾的小鼠，痛阈按60s 计算。

3、结果计算 收集整个实验室结果，按下列公式计算不同时间的痛阈改变百分率。 痛阈改变百分率=%100- 用药前平均痛阈值

用药前平均痛阈值用药后平均痛阈值 4、将给药前、后小白鼠痛阈值记入表13-6。并计算各时间点的痛阈改变百分率。以时间为横坐标、痛阈改变百分率为纵坐标，绘出用药后15min 、30min 、45min 小鼠的痛阈改变百分率时效曲线。

表13-6 盐酸哌替啶、安乃近对小鼠痛阈值的影响

动物数 给药前痛阈值（s ） 给药后痛阈值（s ） 15min 30min 45min 实验组1

实验组2

对照组

思考题

1.哌替啶和安乃近各属于哪一类镇痛药？镇痛作用机制有何不同？

2.哌替啶在药理作用和临床用途方面与吗啡比较有何特点？

3.解热镇痛抗炎药的镇痛作用机制是什么？相应的临床应用有哪些？