倒置荧光显微镜操作说明
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)1、明场观察方法步骤步骤 涉及部件主开关拨到“I ”准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑步骤 涉及部件I ” 载物台、标本夹3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤 涉及部件主开关拨到“I ” CD+或CD-钮主开关拨到“I ”ND 片插槽 /孔径光阑准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
，待弧载物台荧光激发块选择按钮载物台控制手柄 物镜选择钮 手动调焦调节瞳间距 观察筒 调节屈光度 屈光度调节环物镜转盘视场光阑杆使两斑点最清晰 汞灯透镜聚焦调节旋钮 使两斑点重合（先水平后重合） 汞灯中心调节旋钮物镜选择按钮视场光阑杆调节视场亮度均匀一致 集光透镜聚焦旋钮（亮度最大）视场光阑拉出至最小调整正多边形至视野中央 视场光阑中心调节钮第二部分 使用IPP 拍摄图像流程1. 在桌面点击以下图标打开IPP 。
2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/DigitalCapture ，或点击工具栏中，即出现控制CCD 拍照的对话框。
Leica全自动倒置荧光显微镜DMI6000B操作说明
① ② ③ ④ 明场观察：在BF下，将样品放入载物台上， 选择所需目镜，控制smartmove来调节样品 位置和焦距。
⑤
CTR6000 显微镜控制箱
Ebq 100 荧光控制器 7.荧光光源激发开关 8.“LAMP”灯泡指示灯 9.灯泡使用时间显示
显微镜 电源开关
5 1 2 4 3
1.INT照明强度调节 2. AP孔径光圈大小调节 3.FD市场光圈大小调节 4.TL/IL切换 明场/荧光视野 5.明场/相差 (PH)的切换
Leica全自动倒置荧光显微镜DMI6000B操作说明
旋转控制元件 SmartMove，用来调节焦 距，X,Y轴 1.用以来切换目镜镜头 2.X轴调节,载物台左右移动 3.Y轴调节,载物台前后移动 4.Z轴调节，焦距调节 5/6 粗调焦、细调焦切换
4
2 1 5 3 6
8 7
9
荧光观察：打开ebq100，选 择所需荧光滤光块，打开荧 光挡板，通过smartmove调 节聚焦图像
6.Z轴上下快速调节 6பைடு நூலகம்
1
2 4
3 5 5 5 5
5
5
1.切回镜下视野 2.切回CCD视野 3.切换至另一通道 4.荧光挡板 5.荧光模块或明场 选择 1.表示显微镜属于 明场普通光下 2.目镜镜头显示 3.INT为光照强度， AP孔径光圈，FD市 场光圈 D视野和镜下 视野 5.显示Z轴位置
倒置荧光相差显微镜简明操作规程
倒置荧光相差显微镜简明操作规程
1. 左侧面的固定功能按钮
①TL/IL 反复切换明视场/荧光
②AP孔径光圈（BF模式下的图像反差）
③INT照明强度（明视场/荧光的亮度）
④FD 视野光圈
2. 初始化后的前方显示屏上的图形功能按钮
①显微镜观察方法的状态
②当前使用的物镜倍数
③Σ显微镜总放大倍数
④光线强度 / INT ；AP 孔径光圈 FD 视野光圈
⑤视频/目镜
3. 前方按钮功能
荧光虑块 A 颜色表达蓝
荧光虑块 I3 颜色表达绿
荧光虑块 N21 颜色表达红
SHUTTER 荧光挡板(阻挡或释放荧光)
其它固定功能按键为空
4. 开机
位于显微镜左侧，①为显微镜开关：只使用明场观察时，只打
开此开关即可；②为荧光汞灯开关，需要荧光观察时，两个开关均
需开启。
另需拍照时，请打开电脑。
5. 根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片；
6. 放好样品，找到合适的视野进行观察；
7. 双击开启软件
8. 如需拍照点击采图键，
注意：拍照时应将CCD下方的拉杆拉出方可在屏幕上
显示图像
9. 拍照过程中如需白平衡，在空白处，按住鼠标左键画
一个框，即可显示相关信息；
10. 拍照完毕，及时关闭电脑、汞灯及电源，清理试验台；
11. 如需将数据带走，请到办公室取专用U盘拷取，严禁私自用自己的盘拷贝资料。
ZEISS 倒置荧光显微镜操作手册-Axio Observer D1——【蔡司安装】
ZEISS 倒置荧光显微镜操作手册
1.开机：打开机身上的开关；
若使用荧光，开启HBO100开关（见图1 A）；
若使用ApoTome，开启ApoTome开关（见图1 B）。
B
A
2．使用透射光观察：
（1）打开透射光开关（TL），关闭反射光开关（RL）（见图2 A）；
（2）荧光滤块位置选择空位（见图2 B）；
（3）选择适当的观察模式（见图2 C）；（H-明场；Ph-相差；DIC-微分干涉）（4）选择适当的光强（见图2 D）；
（5）选择适当的物镜（见图2 E）；
（6）调节焦距（见图2 F）
3. 使用反射光观察：
（1）打开反射光开关（RL）；关闭透射光开关（TL）（见图2 A）；
（2）根据染料选择适当的荧光滤块（见图2 B）；
（3）选择适当的物镜（见图2 E）；
（4）调节焦距（见图2 F）
4. 利用相机获取图像：
（1）手动调节显微镜光路至相机（见图3 A ）
（2）利用Axio Vision 软件进行拍摄（具体应用参加Axio Vision 操作手册）
D A
B C
E F A
5. 显示屏各项参数意义：
（1）物镜信息 （见图4A ）：包含放大倍数（如20X ）、数值孔径（如0.3）、物镜属性（如
LD-长工作距离；A Pln-平场；Ph1-相差）
（2）总放大倍数（见图4B ）：如200X
（3）透射光开关（见图4C ）：如ON 或OFF
（4）反射光开关（见图4D ）：如○或●
（5）荧光滤块位置（见图4E ）：如05 AF 430
E D C B A。
倒置荧光显微镜操作说明
倒置荧光显微镜操作说明以下是倒置荧光显微镜的操作说明：1.准备工作a.将显微镜放置在稳定的工作平台上，并确保其连接到电源。
b.将调焦机构移到最低位，打开镜头盖，并确保样品平台和镜片表面是干净的。
2.安装蓝绿滤光片a.打开荧光灯源的盖子。
b.将滤光片插入滤光片滑口，确保正确对齐。
3.安装和调整物镜a.选择适当的物镜（数值孔径越高，图像越清晰），将其插入物镜孔。
b.通过转动调节环，调整物镜到焦点位置。
用目镜观察，确保样品位于焦平面。
4.调整亮度和对比度a.打开透镜底部的开关，逐渐调节亮度和对比度控制旋钮，直到获得所需的图像亮度和对比度。
b.进一步调整对比度，使用显微镜底部的光量程控制旋钮。
5.观察样品a.将待观察的样品放置在样品台上，用调节手轮和手柄移动样品十字线，使样品位于视野的中心。
b.调节聚焦手轮，使样品得到清晰的对焦。
可以通过调节显微镜的升降装置来移动样品的焦平面。
c.使用调节手轮和样品台调节样品的位置，以便获得不同区域的图像。
6.切换和调节荧光滤光片a.获取亮场图像后，切换到荧光成像模式。
b.选择合适的荧光滤光片，插入滤光门插槽，并确保滤光片正确对齐。
c.通过调整显微镜下部的滤光片钮，选择相应的荧光滤光片。
d.调整透镜旁边的荧光灯源亮度，直到获得最佳荧光图像。
7.换孔a.当需要观察不同的孔时，使用显微镜底部的转动旋钮进行换孔。
b.确保在换孔之前调整对焦和荧光滤光片，以避免重新调整。
8.拍摄图像a.连接相机或记录设备，将其与显微镜连接。
b.调整和对焦样品，直到获得所需的图像质量。
c.操作相机或记录设备进行图像拍摄和记录。
9.关机和清洁a.关闭电源开关，拔下电源插头。
b.使用清洁布轻轻擦拭显微镜的外表面，确保无灰尘和污迹。
c.收起倒置荧光显微镜，放入合适的盒子或保护套中，以防止损坏和灰尘积累。
以上是针对倒置荧光显微镜的基本操作说明，根据不同的显微镜型号和特定需求，操作步骤可能会有所不同。
参考用户手册以获取更具体的操作指导和相关注意事项。
倒置荧光显微镜使用方法(一)
倒置荧光显微镜使用方法(一)倒置荧光显微镜使用方法简介倒置荧光显微镜是一种常用于细胞、组织等生物样品观察的显微镜。
其特点是将物镜和光源的位置倒置，使得观察样品更加方便。
下面将介绍几种常见的倒置荧光显微镜使用方法。
方法一：样品准备1.在无菌条件下，将生物样品移植到培养皿或载玻片中。
2.样品可以是活细胞，也可以是固定的组织切片等。
3.如果需要染色，可以根据实验需求选择适当的荧光染料。
方法二：显微镜设置1.将倒置显微镜放在实验台上，并确保显微镜的稳定性。
2.打开显微镜电源，待显微镜系统启动后进行下一步操作。
3.调整光源，使得荧光光源均匀而明亮。
4.根据实验需求选择适当的滤光片，用于选择荧光发射波长。
方法三：样品装载1.将培养皿或载玻片放置在显微镜的样品台上。
2.使用目镜观察样品并调整焦距，确保样品清晰可见。
3.根据样品大小和形状进行显微镜调焦，以获得最佳的观察效果。
4.确保样品和显微镜的镜头之间没有空气或污染物，以避免影响观察结果。
方法四：荧光观察1.使用目镜观察样品后，可以使用显微镜的荧光通道进行观察。
2.打开荧光激发光源，调整光强度适当，避免过度曝光或低信号。
3.使用适当的荧光滤光片，选择要观察的荧光波长范围。
4.使用气体扩散器或其他方法降低样品温度，以减少荧光褪色和光损伤。
方法五：图像处理与分析1.使用相机或图像采集系统，记录荧光显微镜观察的图像。
2.可以使用图像处理软件进行曝光、对比度、亮度等调整，以优化图像质量。
3.利用图像分析软件进行细胞大小、数量、定量荧光信号等参数的测量和分析。
方法六：清洁与维护1.每次使用完成后，及时关闭荧光光源和显微镜电源。
2.用干净的纸巾或棉签轻轻擦拭显微镜的镜头和其他表面。
3.定期检查显微镜的各个部件，如镜头、滤光片、光源等，若有问题及时修理或更换。
以上是倒置荧光显微镜的使用方法，希望对您的实验有所帮助。
请根据实际需求进行调整和适配，并注意实验的安全性和准确性。
IX71倒置荧光显微镜操作规程
IX71倒置荧光显微镜操作规程
一、普通光源观察
1. 接通电源线，打开电源开关，同时按下显微镜前面的按钮（有灯泡）。
2．用光路选择杆选择“观察”光路（有眼睛图形），选择所需放大倍数的物镜，并将选择环置于相应的位置（1－PHL：4X；2－PHC：10X和20X；3－PH2：40X，4为明场），荧光选择钮置于BF，使用光调节旋钮和滤光片，调节至适当亮度。
3．将标本放在载物台上，转动粗微调调节视野内图象清晰。
4．调节目镜使观察舒适。
5．如需拍照，则打开电脑，选择所需软件，将光路杆调至“旁路光口”（有相机图形），即可拍摄并保存。
6．使用完毕后，关闭主开关（至O），取下电源插头。
等到灯室完全冷却后，把防尘罩盖上。
二、荧光观察
1．如使用荧光，要接通荧光光源的电源。
2．选择所需波段的荧光，并用荧光调节杆调节亮度。
3．不观察时，要及时使用光栅切断荧光（●－关，○－开），避免样品荧光衰减。
4．如荧光较暗，将周围光亮度减至最低（关灯，拉上窗帘）。
5．拍摄步骤同前。
注意事项：
1．保持显微镜清洁，及时清理污渍。
如光学元件上附有灰尘，则应用吹风球吹去，对于有脏污的地方，用7：3的乙醚无水酒精清洁液粘在镜头纸上，从透镜内到外进行圆圈式轻拭，严禁用手指或其它物体直接接触镜头。
2．打开荧光光源后，至少要15分钟后才能关闭，关闭后至少要5分钟才能再次开启。
不需要使用荧光时禁止打开其电源开关。
3．不了解的调节装置要阅读使用说明书，弄懂后方可使用，不要随意乱动。
倒置荧光显微镜操作规程
LEICA DMIRB 倒置荧光显微镜操作规程
一、明场观察
1．把要观察的载玻片固定在载物台上。
2．打开显微镜左侧的电源开关，挡光片往下打。
3．调节聚光镜座至BF位置，荧光转盘调至4位置，物镜棱镜调制BF位置。
4．先用低倍镜进行观察，然后转至高倍镜。
5．观察完毕，取下载玻片，把物镜调至空档处，盖好物镜和目镜防尘盖。
关上电源，盖上显微镜防尘罩。
6．做好使用记录。
二、荧光观察
1．打开荧光观察专用的汞灯光源，预热2～3分钟。
2．先在普通光下观察，对焦，然后将挡光板往上打，将普通光路挡住，转至汞灯光路上。
3．将荧光滑片拉出，调节荧光转盘至所需荧光相应位置。
（1—紫外激发340～380nm；
2—蓝光激发450～490nm；3—绿光激发510～560nm；4—明场）4．观察完毕，关闭汞灯光源。
5．同上。
6．同上。
三、微分干涉（DIC）观察
1．将起偏器（PDL）右移。
2．检查检偏器是否已到位。
3．调节聚光镜座，与物镜倍数相对应。
4．调节物镜棱镜转盘。
A与5×，10×物镜相对应；C与20×，40×物镜相对应。
5．同上。
6．同上。
2005年9月
负责人：林丽贞。
正置倒置荧光显微镜原理及操作步骤
正置倒置荧光显微镜原理及操作步骤
荧光显微镜是一种特殊的显微镜，它利用荧光现象来观察样品。
它的原理和操作步骤如下：
原理：
1. 荧光显微镜使用紫外光激发样品中的荧光物质，使其发射可见光。
2. 样品中的荧光物质吸收紫外光后，其中的电子被激发到高能级，随后返回基态时会放出能量，即发射荧光。
3. 荧光显微镜通过滤光片选择性地过滤激发光和荧光，从而增强对荧光信号的观察。
操作步骤：
1. 准备样品：确保样品中含有发射荧光的物质。
如果需要观察细胞或组织样品，可以使用荧光染料或标记物来标记目标结构或生物分子。
2. 打开荧光显微镜：打开显微镜电源，并将荧光灯打开。
调节荧光灯的亮度适合观察。
3. 安装样品：将样品放置在显微镜的载物台上，并用固定装置固定样品。
确保样品与目标物镜的工作距离适当。
4. 调节目标物镜：使用低倍或中倍物镜来定位样品，然后切换到高倍或油浸物镜以获得更高的放大倍率。
调节焦距和聚焦，使样品清晰可见。
5. 选择滤光片：根据所使用的荧光染料或标记物的特性，选
择合适的滤光片来过滤激发光和荧光信号。
这可以增强观察的对比度和清晰度。
6. 观察和记录：通过目镜或连接电脑的摄像头观察样品。
可以使用不同的荧光通道来观察多个标记物质。
记录所观察到的图像或视频。
需要注意的是，操作荧光显微镜需要具备一定的实验室技巧和基础知识，以确保正确的操作和解释观察到的结果。
尼康倒置荧光显微镜操作程序
尼康倒置荧光显微镜操作程序
说明：本仪器为10万元以上高档进口仪器，不允许任何本科生单独操作，实验必须在指导老师的带领下进行。
1. 打开显微镜电源开关、荧光发生器电源开关、HUB开关。
2. 预热15分钟。
3. 把细胞板放在平台上，把右侧的光路转换盘转到“eye”一侧。
4. 打开左侧透射照明器开关，调节亮度调节转盘调节光线亮度。
5. 选择相应的物镜观察细胞。
6. 把亮度调节到最小，转动物镜下方的荧光转盘，调节所需要的荧光观察细胞。
7. 如需照相，打开电脑和程序，把光路转换盘转到“side”一侧，即可进行照相。
8. 操作结束（请确保开机在30分钟以上），调节亮度调节转盘至最小，先关闭透射照明器开关，再关闭显微镜电源开关、荧光发生器电源开关、HUB开关。
9. 等冷却后再盖好显微镜罩。
10. 登记使用情况、使用时间、使用人。
倒置荧光显微镜使用方法
倒置荧光显微镜使用方法1. 简介倒置荧光显微镜是一种特殊的显微镜，与传统显微镜不同的是，它将物镜和光源进行了倒置。
这种设计使得倒置荧光显微镜非常适合观察生物样品、细胞培养和活体成像等应用。
在本文中，我们将全面介绍倒置荧光显微镜的使用方法，包括准备工作、样品处理、操作步骤以及注意事项。
希望能够帮助读者更好地理解和运用倒置荧光显微镜。
2. 准备工作在开始使用倒置荧光显微镜之前，需要进行一些准备工作。
2.1 检查设备首先要确保倒置荧光显微镜的各个部件都处于正常工作状态。
检查目标物镜、滤光片、滤波器和荧光探针等配件是否齐全，并检查是否有任何损坏或污染。
2.2 清洁工作台清洁工作台是进行样品处理和操作的地方，必须保持干净整洁。
使用无菌纸巾和适当的清洁剂擦拭工作台面，确保没有灰尘或杂质。
2.3 准备试样根据实验需求，准备好需要观察的生物样品。
根据不同的实验目的，可以是细胞培养物、组织切片或者荧光标记的分子。
3. 样品处理在观察样品之前，可能需要进行一些样品处理步骤。
3.1 固定和染色对于细胞培养物或组织切片，通常需要先进行固定和染色。
固定可以保持样品的形态结构，染色可以使特定结构或分子可见。
选择合适的固定剂（如甲醛）将样品固定，并根据实验要求选择合适的荧光染料进行染色。
注意避免使用与荧光显微镜滤波器不匹配的染料。
3.2 荧光标记如果需要观察特定分子或结构，可以使用荧光探针对其进行标记。
选择合适的探针并按照说明书进行标记步骤。
4. 操作步骤在准备好样品后，可以开始使用倒置荧光显微镜进行观察。
4.1 打开显微镜将倒置荧光显微镜放置在稳定的台面上，并插入电源线。
打开电源开关，等待一段时间，直到显微镜完全启动。
4.2 调整镜头调整目标物镜和眼镜的位置，使其与视野对齐。
使用焦距调节旋钮或者移动台面，使样品处于焦点位置。
4.3 切换光源和滤光片根据实验需要，选择合适的光源和滤光片。
通常情况下，荧光显微镜使用紫外线或蓝绿光作为激发光源，并通过滤光片选择特定波长的荧光发射信号。
倒置荧光显微镜使用指南
倒置荧光显微镜使用指南1．按下接线板电源，打开计算机屏幕电源和主机箱电源，双击桌面上Leica Application Suite 图标进入程序。
2．打开显微镜光源，如需使用汞灯，打开汞灯，在记录本上记录下汞灯上显示的已用小时数。
3．显微镜物镜放大倍数有5倍，10倍，20倍，40倍，旋转物镜下转盘改变放大倍数。
4．明场使用方法：将透射光装置的聚光镜转盘旋转至BF档。
选择合适的物镜，调节焦距，用明视光源强度旋转及透射光装置上的光圈调节光源强度。
将滤色块放在第4或5档。
5．相差使用方法：将透射光装置的聚光镜转盘转至PH1档〔物镜为10x,20x时〕或PH2档〔物镜为40x时〕。
用明视光源强度旋转及透射光装置上的光圈调节光源强度。
将滤色块放在第4或5档。
6．荧光使用方法：放下明场遮拦，拉开荧光遮拦棒，旋转滤色块转盘，选择合适的激发波长。
用荧光光源视野调节旋钮和荧光光源光圈调节旋钮调节荧光的范围和强度。
7．图像处理：在“摄取”菜单栏Mic1卡片下根据所选的物镜倍数选择放大倍数。
拉开摄像头操纵杆，单击鼠标左键选择一块白色区域，单击鼠标右键，进行白平衡。
可以通过改变摄取菜单栏摄像头卡片下曝光，饱和，伽马和增益改变显示图像的效果。
明场或者相差模式，建议将增益放在零。
单击拍摄，新建自己的文件夹，保存图片。
8．荧光拍摄完毕，推进荧光遮拦棒，看一下门口的显微镜使用登记表。
（1）如果下一个使用登记时间小于或等于1个小时，不需要关闭汞灯，记录下汞灯使用时间。
将明场电源旋至最低。
将物镜旋至空档。
关闭应用程序。
填写完整仪器使用本。
（2）否则，使用完毕荧光，及时关闭汞灯，注意需长于半个小时，记录下汞灯使用时间。
将明场电源旋至最低，关闭明场电源。
将物镜旋至空档。
关闭应用程序。
关闭电脑。
填写完整仪器使用本。
倒置荧光显微镜使用注意事项1．使用显微镜前，请和Med-X研究院神经组科研秘书沈老师（138********）联系，由其输入密码后，开机。
倒置荧光显微镜简具体操作及说明
DMi 8倒置荧光显微镜具体操作及说明第一部分，显微镜机身按钮说明A，机身右侧1，荧光减光片：（用于降低荧光激发的照射强度。
完全推进去最亮，完全拉出来最弱）2，荧光光圈：(用于调整荧光光斑照射大小，推进去最小，拉出来最大)3，荧光挡光板：（用于开/关荧光光路，当只观察透射光明场时需要把此推进遮挡住荧光照射，同时荧光滤块转盘转至无滤块，观察荧光时需要把此杆拉出来，让荧光照射进光路）4，目镜/照相机光路切换拉杆：（推进去只能目镜观察，拉出来照相机观察）5，荧光滤块转盘：（当进行荧光观察是转动此转盘切换荧光通道，根据照射出的色彩来判断具体光路，紫色照射激发蓝光染料，相应的蓝色激发绿色，绿色激发红色，橙色激发红色波段）B，机身左侧1, 透射光强调节旋钮：用于调节透射照射强度。
2，调焦旋钮：用于调节焦距高低，左右各一个3，荧光滤块转盘：用于调节荧光滤块通道，左右各一个C，透射光柱顶部，STOP：用于遮挡透射光路的通和断，当进行荧光观察时需要推上STOP遮挡住光路，避免干扰荧光观察。
D,聚光镜部分1，孔径光阑：用于透射光光圈调整，白光观察是调节到1-8之间的位置，可以得到亮度不同，景深分辨率也不同的白光视野，具体需要根据不同物镜和样本厚度而定。
当进行相差观察是需要调节转盘1至PH位置，然后再转动转盘2，选择相应的相差环。
2，相差环转盘：用于相差环转换，PH0对应5倍，PHI对应10倍、20倍物镜，PH2对应40倍和63倍物镜。
当白光观察时，需要转至非PH0\1\2的任意位置。
第二部分，软件操作说明1，打开桌面操作程序→界面进入,选择确定2，进入主页面：一，明场(白光)的拍摄方法A，拍摄图片：首先调节显微镜亮度和焦距，使视野中得到清晰的相差或白光的图像→拉出机身右侧的光路切换拉杆,让光路由目镜切换到摄像头上。
→点击软件最上一栏，可得到上图的界面→点击左下角动态图像→调节得到亮度和色彩最佳的图像→点击下方拍图完毕。
倒置荧光显微镜使用流程及注意事项
倒置荧光显微镜使用流程及注意事项倒置荧光显微镜是一种用于研究生物细胞和组织的高级显微镜。
下面是关于倒置荧光显微镜使用流程及注意事项的10条详细描述：1. 准备样本：在使用倒置荧光显微镜之前，您需要准备好待观察的生物样本。
根据您的研究目的，将样本固定、染色、清洁并转移到易于观察的载物上。
2. 打开显微镜：将倒置荧光显微镜放在平稳的工作台上，并插上电源线。
打开电源开关，同时打开镜头底部的白光源开关。
3. 调整照明：使用镜头底部的可调节照明装置，调整荧光显微镜的照明强度。
确保照明充足，但不会损害样本。
4. 安装镜头：根据您的研究需求，选择合适的镜头并安装到镜头握架上。
确保镜头固定在正确的位置，并确保调节环顺利工作。
5. 校准照明通道：根据您使用的荧光染料的光谱特性，选择正确的滤光片或激发光源，并将其安装在照明通道中。
这将有助于仅激活您感兴趣的染料。
6. 调整焦点：使用荧光显微镜底部的焦点旋钮调整样本的焦距。
将样本调整到最清晰的观察状态。
7. 调节荧光强度：使用显微镜上的荧光滤光片或光强调节装置，调节荧光显微镜的荧光强度。
确保光强足够以激发和检测荧光信号，但不能过强以导致样本破坏。
8. 观察与记录：通过荧光显微镜的目镜观察样本，确保样本在荧光显微镜的视野范围内。
您可以使用相机或软件记录您感兴趣的图像，以备日后分析和报告使用。
9. 清理和保养：在使用完荧光显微镜之后，关闭电源开关，并将滤光片和激发光源取下。
用干净的柔软布轻轻擦拭荧光显微镜的各个部件，保持其清洁和良好状态。
10. 注意事项：在使用倒置荧光显微镜时，您应注意以下事项：避免长时间持续使用荧光显微镜，以避免样本受损。
避免直接触摸显微镜的物体表面，以防指纹污染样本。
谨慎处理染料，以免接触到皮肤或被误吞食。
在工作台上放置显微镜时，确保表面平稳和牢固。
定期对荧光显微镜进行维护和保养，以确保其正常工作和延长使用寿命。
这些关于倒置荧光显微镜使用流程及注意事项的详细描述将帮助您正确地操作和保养这种高级显微镜装置，以获得准确和清晰的观察结果。
倒置荧光显微镜使用方法
倒置荧光显微镜使用方法简介倒置荧光显微镜是一种特殊的显微镜，常用于生物学、细胞学和医学研究中。
与传统的直立显微镜不同，倒置荧光显微镜的物镜和光源被颠倒放置，使得观察样本更加方便。
本文将详细介绍倒置荧光显微镜的使用方法。
准备工作在开始使用倒置荧光显微镜之前，需要进行一些准备工作：1.清洁工作台：确保工作台干净整洁，避免灰尘和杂物对实验结果的影响。
2.样本制备：根据实验需求制备好待观察的样本。
可以是细胞培养物、组织切片等。
3.荧光染料：根据实验需求选择合适的荧光染料，用于标记待观察的结构或分子。
步骤1. 打开显微镜将倒置荧光显微镜放在清洁的工作台上，并轻轻打开仪器。
确保所有部件都处于正常工作状态。
2. 样本安装将样本安装到显微镜的载物台上。
使用载玻片夹固定样本，确保样本稳定且不会移动。
3. 调节荧光滤光片倒置荧光显微镜使用荧光染料来标记待观察的结构或分子。
在观察之前，需要根据使用的荧光染料调节滤光片。
1.选择正确的激发滤光片：根据荧光染料的激发波长选择对应的滤光片。
通常，显微镜附带了一组滤光片，可以根据需要更换。
2.安装激发滤光片：将激发滤光片安装到显微镜中。
确保滤光片正确对齐，并紧固固定螺丝。
3.调节透射镜筒：通过旋转透射镜筒，调节透射光的强度。
确保透射光与荧光染料激发波长相匹配。
4. 调节目镜和物镜1.调节目镜：通过调节目镜的高度和焦距，使得样本的图像清晰可见。
可以使用显微镜上的焦距调节轮来实现。
2.选择合适的物镜：根据对样本的放大需求，选择合适倍数的物镜。
倒置荧光显微镜通常配备多个物镜，可以根据需要进行更换。
5. 调节荧光滤光器在观察荧光信号之前，需要正确调节荧光滤光器。
1.选择正确的发射滤光片：根据荧光染料的发射波长选择对应的滤光片。
通常，显微镜附带了一组滤光片，可以根据需要更换。
2.安装发射滤光片：将发射滤光片安装到显微镜中。
确保滤光片正确对齐，并紧固固定螺丝。
6. 观察样本通过目镜观察样本是否清晰，如果不清晰可以通过调节目镜或物镜来改善。
倒置荧光显微镜的使用流程
倒置荧光显微镜的使用流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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倒置荧光显微镜的使用流程
倒置荧光显微镜的使用流程1. 准备工作在使用倒置荧光显微镜之前，需要进行一些准备工作。
首先，确保工作环境干净整洁，避免进入灰尘和杂质。
其次，检查显微镜是否处于正常工作状态，包括检查电源是否连接正常，灯光是否亮起等等。
最后，准备所需的标本和试剂。
2. 调整显微镜参数使用前需要调整显微镜的参数，以确保观察到清晰的图像。
以下是需要调整的参数：•聚焦调整：确保目标位于聚焦平面上，使用油轮调节聚焦，图像应该在聚焦镜片上清晰可见。
•光源调节：调节荧光灯的亮度，确保足够的光照，但避免过度曝光。
•滤光片选择：根据标本的荧光颜色，选择合适的滤光片。
3. 放置标本将标本放置在显微镜的标本台上。
使用合适的载玻片或培养皿将标本固定在上面，并确保标本平整。
建议在放置之前使用荧光标记的探针进行特定结构或细胞的标记。
4. 调整目镜通过调整目镜，使得观察到的图像清晰可见。
首先，调整眼杯的位置，使得观察者的眼睛与目镜的焦距相适应。
然后，通过调整瞳孔宽度和调焦旋钮，以获得最佳的观察效果。
5. 切换到荧光模式切换到荧光模式，关闭透射光源，打开荧光灯光源。
确保选用的荧光滤光片与频带一致，并调整荧光灯的亮度适合观察。
6. 观察和记录通过调整聚焦和移动载物台，找到感兴趣的结构或细胞，然后进行观察。
在观察过程中，可以使用不同的滤光片来观察不同的荧光标记。
记录下重要的观察结果。
7. 做出调整根据观察结果，可以根据需要对显微镜参数进行微调，以获得更好的观察效果。
调整参数可能包括聚焦、光源亮度等。
8. 关闭显微镜使用完毕后，关闭荧光灯光源，切换回透射模式。
然后关闭显微镜，并进行清洁工作。
确保将荧光滤光片存放在干燥无尘的地方，以免受到损坏。
结论倒置荧光显微镜的使用流程大致包括准备工作、调整显微镜参数、放置标本、调整目镜、切换到荧光模式、观察和记录、做出调整以及关闭显微镜。
通过严格遵循这些步骤，可以获得清晰且准确的荧光显微图像。
倒置荧光显微镜
Nikon倒置荧光显微镜使用说明明视场（BF）显微术：1．开启电源1)打开透射照明器电源外部开关。
2)按下显微镜左侧的“透射照明器开关”，接通灯泡。
2．调节灯泡保证色彩真实1）把显微镜左侧的“亮度调节盘”设置成<12V 100W>。
2）把“NCB11滤色片”放入光路中。
3）把“ND4滤色片”放入光路中。
3．调节光路1）把10X物镜转到光路中。
2）把显微镜右侧“光路转换盘”转到<1 EYE>位置3）向上推透射照明器上的“视场光阑调节杆”，完全打开视场光阑。
4）通过系统聚光器的“孔径光阑调节杆”打开“孔径光阑”。
5）把聚光器转盘转到<A>位置。
4．调节屈光度及瞳距1) 将显微镜前部的“摄影取景框转盘”逆时针旋转，使摄影取景框进入光路。
2）用左眼对着左侧目镜，转动目镜“屈光率调节环”使取景框中的双十字线清晰成像。
3）对右眼做同样的调节。
4）调节好完屈光率后，顺时针旋转“摄影取景框转盘”，使其退出光路。
5）调节目镜瞳距，将两目镜视场影像重合。
5．调焦1）将样品放置载物台中。
2）转动同轴粗微调旋钮，将样本对好焦。
6．聚光器中心调节已调好，请勿自行调动。
7．观察1）选择要使用的物镜。
2）移动系统聚光器上的“孔径光阑调节杆”，使孔径为物镜数值孔径的70％－80％。
3）调节“视场光阑调节杆”使视场光阑像与视场大致相同。
4）把透射照明器里的“ND减光片”进入或退出光路以调节视场亮度。
◆补充说明如果不需要色温很准确的颜色，可以通过显微镜左侧的亮度调节盘来改变灯泡电压调节亮度。
8．更换样品利用显微镜主体上的“物镜再聚焦定位环”，照明器上的“倾斜装置”，“聚光镜再聚焦指紧螺钉”，可容易更换样品。
9．显微操作结束后1）把显微镜左侧的“亮度调节盘”调至最小。
2）按下显微镜左侧的“透射照明器开关”，断开灯泡。
3）灯室冷却后，显微镜主机用防尘罩盖好。
相差（PH）显微术：1．调节屈光度及瞳距与明视场显微术同。
Leica荧光倒置显微镜使用须知
Leica荧光倒置显微镜使用须知
荧光显微镜操作：
1.提前打开荧光灯光源，预热五分钟，在使用记录本上记下荧
光灯箱上显示时间，以及荧光使用时间（严格登记！）
2.打开荧光光源后，至少要15分钟后才能关闭，关闭后至少要
30分钟才能再次开启。
不需要使用荧光时禁止打开其电源开关。
3.拔出左侧荧光拉杆，放下上方明场遮拦
4.根据使用荧光素的不同选择不同的荧光滤光片（滤色块选择
1,2,3）
5.倒置荧光显微镜荧光发射器强度旋钮，请勿旋转
6.荧光使用完毕，关闭荧光光源，推进荧光拉杆
7. 普通情况下使用完毕，明场电源旋至最低。
将物镜旋至空挡，填写完整仪器使用记录。
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤) (使用IPP第二部分拍摄图像流程相差观察、荧光观察) 明场观察(拍摄图像流程第三部分BX2-BSW使用观察方法步骤第一部分 1、明场观察方法步骤涉及部件步骤”主开关拨到“I打开电源开关三目观察筒选择杆拨至最内选择目镜观察光路聚光镜选择钮聚光镜选择明场（BF）相差移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路开始观调节瞳间观察筒瞳间距调节调节屈光目镜屈光度调节环寻找标载物台控制手柄手动调调节光照亮图像采准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
①聚光镜升高到最高位置聚光镜高度升降旋钮②用10X物镜聚焦至清晰③视场光阑打至最小视场光阑④逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像聚光镜升降旋钮⑤调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心聚光镜中心调节旋钮⑥逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切视场光阑⑦稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可视场光阑2、相差（PH）观察方法步骤步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路选择与物镜匹配的相差环聚光镜选择钮进入光路PH对10物镜PH对20物镜PH对40物开始观调节瞳间观察筒瞳间距调调节屈光目镜屈光度调节寻找标载物台控制手手动调调节光照亮图像采3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择CD+或CD-钮相差环移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路标本定位调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦卤素灯电源调至最暗机身架光强调节按钮打开汞灯电源供电器主开关拨到“I”选择合适的荧光激发块打开光开始观选择合适的物物镜选择按钮选用合适N滤色荧光反射照明器上ND片插槽调节汞灯透镜聚焦旋钮使视场亮度均汞灯透镜聚焦旋钮调节视场光阑和孔径光阑改善反视场光阑/孔径光阑图像采准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
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显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察)第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤步骤涉及部件打开电源开关主开关拨到“I”选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择钮相差移出光路放入标本于载物台载物台、标本夹选择合适物镜进入光路物镜选择钮开始观察调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦调节光照亮度图像采集准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
1 聚光镜升高到最高位置聚光镜高度升降旋钮2 用10X物镜聚焦至清晰3 视场光阑打至最小视场光阑4 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像聚光镜升降旋钮5 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心聚光镜中心调节旋钮6 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切视场光阑7 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可视场光阑2、相差（PH）观察方法步骤步骤涉及部件打开电源开关主开关拨到“I”选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内放入标本于载物台载物台、标本夹选择合适物镜进入光路物镜选择钮选择与物镜匹配的相差环进入光路聚光镜选择钮PH1对应10X物镜、PH1对应20X物镜、PH2对应40X物镜开始观察调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调节调节光照亮度图像采集3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤涉及部件打开电源开关主开关拨到“I”选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择CD+或CD-钮相差环移出光路放入标本于载物台载物台、标本夹选择合适物镜进入光路物镜选择钮标本定位调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦卤素灯电源调至最暗机身架光强调节按钮打开汞灯电源供电器主开关拨到“I”选择合适的荧光激发块打开光闸开始观察选择合适的物镜物镜选择按钮选用合适的ND滤色片荧光反射照明器上ND片插槽调节汞灯透镜聚焦旋钮使视场亮度均一汞灯透镜聚焦旋钮调节视场光阑和孔径光阑改善反差视场光阑/孔径光阑图像采集准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
汞灯供电器开关打到“I”汞灯供电器主开关：拨到“I”，待弧光稳定后进行调节。
选择目镜察光路光路选择杆标本放于载物台中载物台选择蓝色荧光激发块进行调节，打开光闸，光路通过荧光激发块选择按钮载物台控制手柄10X物镜转入光路，标本聚焦清晰物镜选择钮手动调焦调节瞳间距观察筒调节屈光度屈光度调节环取下物镜或使空物镜孔进光路物镜转盘视场光阑拉出至最小，此时对中标本表面出现2个斑点视场光阑杆使两斑点最清晰汞灯透镜聚焦调节旋钮使两斑点重合（先水平后重合）汞灯中心调节旋钮10X物镜转入光路，向对中标本聚焦清晰，视场光阑推进至最大物镜选择按钮视场光阑杆调节视场亮度均匀一致集光透镜聚焦旋钮（亮度最大）对中视场光阑视场光阑拉出至最小调整正多边形至视野中央视场光阑中心调节钮完成高压汞灯对中第二部分使用IPP 拍摄图像流程1. 在桌面点击以下图标打开IPP。
2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/Digital Capture，或点击工具栏中，即出现控制CCD 拍照的对话框。
3. 有两种拍照界面可选，点击图一Basic Dialog 和图二Advance 即可在两种模式下自由转换（以下操作将主要以图二的对话框为主）。
4. 点击图三More/Less 按钮即可在基本对话框和扩展对话框间转换。
5. 相机有两种状态可选：，一种是预览（Preview）模式，用来观察动态图像，一般在聚焦和确定感兴趣区域时使用；另一种是拍摄（Snap）模式，用来获取图像。
6. 点击预览后，如果显示的图像为完全黑色，最大的可能是光路转换器没有切换到CCD，所以请把光路转换器切换到CCD。
7. 点击预览后，一般会有图像太亮或太暗的情况，这是因为曝光时间不适合造成的，如下面两图所示。
8. 自动曝光：自动曝光可以帮我们找到比较适合的曝光时间，即我们关心的样本看到比较清晰。
当出现一个非常暗或者非常亮的图像时，可以通过以下三种方法之一获得自动曝光时间。
A．点击自动曝光按钮。
B．先点击Auto Exp Area（自动测光区域），用鼠标在预览图上选定感光区域（或者点击Reset to Full Frame 恢复全图预览），然后点击Calc Auto Exp，就可以根据设定的区域自动计算曝光时间。
B方式 C方式C．点击Auto Set，此时软件将先自动计算曝光时间，然后提示选取一个区域做自动白平衡（一般选在图像上最亮白的地方，此部分的详细操作请参考下面的“第12步：自动白平衡”）。
9. 预览时图像覆盖着一层透明膜的效果：在预览图片上点击右键，Transparency 选择OFF可以关闭此功能。
10. 预览图像的直方图实时显示：在预览图像上点击右键，选中Live Histogram 即可显示，此功能可以帮助我们判断图像效果，但波峰在直方图中间部分时效果比较好。
11. 如果预览图像中有很多红色的条带或比较多的红色点：这是因为我们选中了“饱和提示Saturation Warning”功能，如下图所示，把“饱和提示”功能关闭即可。
12. 自动白平衡：在预览图像上右击鼠标，可以选择自动白平衡（Auto White Balance）,或者点击以下菜单上的“Auto White Balance”，此时可以在预览图像上选定白色区域，然后点击Calculate 按钮即可实现自动白平衡。
（下图中的选项在图像拍摄界面点击More后即可显示）13. 手动调整曝光时间：当使用了自动曝光以后，可以通过手动调整来更加精确的得到更好的图像效果。
选中“Adjust Exp for Binning”后，可以看到曝光时间会自动调整，此时虽然预览和拍摄曝光时间不同，但是图像效果相同。
14. 预览和拍摄图像条件的锁定：很多状况下，预览和拍摄的图像效果不一致，可以锁定界面中的锁定钮使两种状况一致。
包含以下条件的锁定：A．拍摄区域的锁定：如果要改变区域，点击“SET PVW AREA”的按钮，即可看到以下界面此时，选择Select Area from Live Preview 即可在图像上划定感兴趣的区域；选择Resetarea to full frame 即可重新把感兴趣区域划定为全图。
B．预览和拍摄Binning 锁定:如果标本荧光较弱，可以采用Binning模式增强CCD 敏感度。
C．预览和拍摄Gain，Gamma，Offset 的锁定D．当以上条件均已锁定，但色彩仍然不一致时，请到：Camera Configuration —〉Active Camera Settings，在Color Correction 下面，把Preview 和Acquire 都选中或者都不选中。
15. 拍摄动态图像：如果需要连续拍摄动态多幅图像，把拍摄界面转化到基本模式，并点击Image，如下所示：一般情况下，拍摄单张图像时，选取New Image，拍摄连续动态图像时，一般选取Sequence（如果需要直接存储在硬盘中，选取File…Browse…输入图像名称）。
IPP 提供两种拍摄动态图像的模式，一种是以最快的速度连续拍摄，另一种是图像有间隔时间拍摄，A．需要以最快速度拍摄时，请输入拍摄帧数，并选中“Use Minimum possible Interval”，做了此设定后，在点击拍摄时，就会以最快的速度拍摄一定帧数的图像。
B. 需要以一定间隔时间拍摄时，把“Use Minimum possible Interval”去掉，然后点击Set Time，在弹出的对话框中输入两幅图像的间隔时间，比如：10 秒，点击OK 确定。
此时，界面如下图所示。
在拍摄帧数下就会有两幅图像之间间隔时间的显示。
做了如此设定后，再点击拍摄时，就会以10s 的时间间隔拍摄一定帧数的图像。
警告：当不使用动态拍摄模式时，请务必把Image 选项选中“New Image”，否则，每次点击拍摄，都会得到动态图像。
16. CCD 属性对话框的使用：Camera Configuration：A．当使用单色CCD 时，有时会看到彩色图像，这是因为在相机确认里选择了彩色滤镜，所以，到Camera Configuration 中，把Color Filter 的选项去掉即可。
B．制冷型CCD 要选择制冷模式，使芯片工作在制冷状态下，所以，到Camera Configuration 中，选中Enable Cooling，如下图所示：17. 当以上条件可以满足一定的试验要求时，可以保存所有的参数设置，这样，以后做类似试验时，可以直接调出相关试验条件，从而节省时间，并使试验过程简化。
操作：直接点击Save/Save as，然后输入文件名，选择目录保存即可。
调出时直接点击标有三个黑点的钮，选择要调出的文件即可。
IPP 提供了六个试验条件文件调出的快捷方式，如下图所示：这样调出的文件可以显示在基本模式的简单控制条中，便于试验使用。
第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)打开DP-BSW软件启动DP控制器。
调节显微镜。
（见明场观察部分）显示预览图象。
①设置曝光时间。
②手动③曝光模式？设置曝光时间自动选择测光区域（30%，1%，0.1%）。
④按下手动控制盒自动对焦红色按键，进行自动聚焦。
（打开BX2-BSW软件）手动精细调节曝光时间曝光模式？自动移动曝光区域，校正曝光。
⑤调节白平衡。
⑥记录图象。
⑦⑧进入DP管理器。
添加注释或图释。
⑨储存图象。
⑩③具体的参照图见下页的内容。
DP-BSW软件：测光模式（30％/1%/0.1%）曝光模式预览拍照校正曝光。
⑤调节白平衡。
⑥记录图象。
⑦⑧进入DP管理器。
添加注释或图释。
⑨储存图象。
⑩③具体的参照图见下页的内容。
DP-BSW软件：测光模式（30％/1%/0.1%）曝光模式预览拍照。