唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 参考

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[最新]测定唾液淀粉酶的最适ph值

[最新]测定唾液淀粉酶的最适ph值

[最新]测定唾液淀粉酶的最适ph值测定唾液淀粉酶的最适PH值制作人:叶小晴学号:201140095 班组:15-4 学院:护理学院摘要:酶催化活性最大时相应的环境PH称为酶促反应的最适PH值。

虽然不同酶的最适PH值各不相同,但大多数酶的最适PH值接近中性,本论文主要在一定浓度、温度等条件下研究唾液淀粉酶的最适PH值,从而知道唾液淀粉酶的最适PH 值,进而了解影响酶的活性的因素。

关键词:唾液淀粉酶、最适PH值、活性前言:生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质或核酸,酶是机体内最重要的生物催化剂。

在不同PH条件下,酶分子的许多极性基团的解离状态不同,受到PH变化的影响,从而影响酶对它们的亲和力。

PH还会影响酶的活性中心的空间构象,从而影响酶的活性,因而PH的改变对酶的催化作用影响很大。

材料与方法:1、材料:唾液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水、温水、试管、试管架、洗耳球、烧杯、胶头滴管、水浴箱、分光光度计、吸量管、坐标纸2、方法:(1)缓冲溶液的配置:根据各个PH值的缓冲溶液(用量:ml)表1:PH5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0值磷酸0.40 0.62 0.93 1.33 1.88 2.45 3.05 3.60 4.05 4.35 4.58 4.74 氢二钠磷酸4.60 4.39 4.08 3.68 3.13 2.55 1.95 1.40 0.95 0.65 0.43 0.27 二氢钠蒸馏5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 水(2)唾液的获取:温的水漱口,将蒸馏水含于口中2min后吐于烧杯中,取5ml唾液20ml水配成1/5的唾液,从中取5ml的1/5的唾液再加入10ml水配成1/10的唾液。

(3)测量PH:取12支管,分别标上1~12,按下表操作:管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121/50.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2唾液淀粉0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4溶液0.5ml5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0缓冲溶液PH蒸馏3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0水表2:管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1/100.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 唾液淀粉0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 溶液0.5ml5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 缓冲溶液PH蒸馏3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 水3、分别加入两滴碘液4、水浴加热5、测量吸光度6、作标准曲线图本实验中,当唾液淀粉酶的活性最大时,淀粉被分解得最大,剩余的底物最少.A 值最小,过酸或过碱均会抑制酶的活性,使之分解的底物减少,A值增大。

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定【摘要】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、pH值等因素影响。

温度一定时,酶活力最高时的pH值为该酶在该温度的最适pH。

在不同pH值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶的最适pH值。

在不同pH条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘液反应呈现颜色反应,通过对颜色的观察和分光光度计测量产物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀粉酶的最适pH。

Enzymes are highly efficient catalytic ability of biological macromolecular material, phase at the same time, initial concentration of enzyme catalytic activity was mainly affected by factors such as temperature, pH value. At a certain temperature, the highest enzyme activity of enzyme in the pH value of the temperature of the optimum pH.Under different pH, by measuring the degree of hydrolysis enzyme substrates, determination of salivary amylase optimum pH value. Under the condition of different pH, starch is saliva amylase hydrolysis, and iodine liquid reaction to colors, through the observation of the color and the size of the spectrophotometer absorbance value measurement products, shows the reaction degree of substrates, which can determine the optimal pH of salivary amylase.【关键词】唾液淀粉酶、最适pH、碘-淀粉比色法【引言】新陈代谢是生命活动的基础。

实验五 唾液淀粉酶的最适PH测定

实验五  唾液淀粉酶的最适PH测定

山东大学实验报告2011年4月6日姓名张行润系年级2009级生科4班学号200900140177 同组者于潜科目生物化学实验题目唾液淀粉酶的最适PH测定仪器编号105一.实验目的1、了解pH对酶活力的影响2、了解什么叫最适pH,掌握测量pH对酶活力影响的基本原理和方法二.实验原理影响酶反应活力的因素很多,影响胞外酶的因素主要包括PH值、温度和金属离子、抑制剂及其他小分子,以及酶浓度等因素。

PH值对酶反应活力的影响:1、酸或碱可以使酶的空间结构破坏,引起酶的活力丧失,这种丧失活力可以是可逆的或者是不可逆的,对可逆的来说,改变PH值后可使活力恢复。

2、酸或碱影响酶的活性部位催化基团的离解状态,使得底物不能分解成产物。

3、酸或碱影响酶的活性部位结合基团的离解状态,使得底物不能和它结合。

4、酸或碱影响底物的离解状态,或使底物不能和酶结合。

由于上述种种原因,各种酶的作用都有一个最适合的PH值范围。

最适pH 酶的催化活性与pH环境有密切关系,通常各种酶只在一定pH范围内才具有活性,酶活力最高时的pH,称为酶的最适pH。

高于或低于此pH时酶的活性逐渐降低。

用酶活力对PH值作图,往往是钟罩形曲线。

最适合的PH值还随着底物浓度、温度和其他条件的变化而变化,因此确定最适合的PH值应在所实验的条件下测得。

需要注意的是:1.酶的最适pH不是一个特征性常数。

不同种类的酶其最适合的PH值范围不同;2.同一种酶,来源不同,其最适合的PH值也有差异;3.同一种酶由于作用底物不同,酶最适合的PH值也不同;4.同一种酶作用于同一底物,随着温度等条件变化,最适合的PH值也有变化。

如唾液淀粉酶最适pH为6.8,但在磷酸缓冲溶液中,其最适pH为6.4—6.6,而在乙酸缓冲溶液中则为5.6。

总之,不同的酶在不同的PH值范围不仅稳定性不同,而且活力也不同,在最适合的PH值内活力最强,这是酶的一个重要特征,要仔细控制。

三.实验器材电热恒温水浴锅,旋涡混合仪,电炉,电子秤,试管10支,试管架,100mL容量瓶,小烧杯,移液管(1mL,2mL,5mL,10mL),三角瓶7个,胶头滴管,玻璃棒,白瓷板,洗耳球四.实验材料1.0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液100ml(新鲜配制):称取0.30gNaCl溶于80mL水中,电炉加热煮沸,加入0.50g淀粉溶解至澄清透明,冷却,定容至100mL2.0.2mol/L Na2HPO4溶液 200ml3.0.1mol/L柠檬酸溶液 100ml4.不同浓度的唾液淀粉酶(1:100,1:200,1:400···)5.碘液五.实验步骤1、不同PH缓冲液的配制:试剂PH值5.46.0 6.4 6.87.27.68.00.2mol/L Na2HPO4溶液/mL 11.15 12.63 13.85 30.90 17.39 18.73 19.450.1mol/L柠檬酸溶液/mL 8.5 7.37 6.15 9.10 2.61 1.27 0.55总体积/mL 20.0 20.0 20.0 40.0 20.0 20.0 20.02、唾液的获取:蒸馏水漱口后在口中含蒸馏水,适宜时间后将蒸馏水连同唾液一同放置于事先准备好的容器中即可,在实验过程中应注意酶的失活,为了防止此现象发生应将此液体置于冰水中冷却;3、确定最佳保温时间:取3支洁净试管,分别加入0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液2 mL,然后加入PH6.8的 Na2HPO4—柠檬酸缓冲溶液3 mL,分别加入稀释不同倍数的唾液淀粉酶各2 mL,充分摇匀后,放入37℃水浴中保温并计时,每隔1min用滴管取1滴混合液于点滴板上,加1滴碘液,检验淀粉水解程度,为橙黄色时,为水解完全,为进一步确定保温时间,应加1滴碘液至试管中,若为橙黄色时表示反应完全,记录所需保温时间。

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定【摘要】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、pH值等因素影响。

温度一定时,酶活力最高时的pH值为该酶在该温度的最适pH。

在不同pH值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶的最适pH值。

在不同pH条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘液反应呈现颜色反应,通过对颜色的观察和分光光度计测量产物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀粉酶的最适pH。

Enzymes are highly efficient catalytic ability of biological macromolecular material, phase at the same time, initial concentration of enzyme catalytic activity was mainly affected by factors such as temperature, pH value. At a certain temperature, the highest enzyme activity of enzyme in the pH value of the temperature of the optimum pH.Under different pH, by measuring the degree of hydrolysis enzyme substrates, determination of salivary amylase optimum pH value. Under the condition of different pH, starch is saliva amylase hydrolysis, and iodine liquid reaction to colors, through the observation of the color and the size of the spectrophotometer absorbance value measurement products, shows the reaction degree of substrates, which can determine the optimal pH of salivary amylase.【关键词】唾液淀粉酶、最适pH、碘-淀粉比色法【引言】新陈代谢是生命活动的基础。

淀粉酶的测定

淀粉酶的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定【原理】酶的化学结构上具有许多极性基团,在不同的酸碱环境中,这些基团的解离状态不同,所带的电荷也不同。

只有当酶处于一定的解离状态下,酶才能与作用物结合并发挥作用。

方法:相同时间内,在温度、酶浓度相同、pH不同的条件下,唾液淀粉酶的活性不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量的碘液作用所显示的颜色也不同,并通过测定吸光度,得出唾液淀粉酶的最适pH范围。

【实验仪器与试剂】试管、试管架、洗耳球、小烧杯、坐标纸、37℃恒温水箱、721G-722G可见分光光度计、吸量管(1ml 5ml 10ml)移液枪试剂药品:2.5g/L缓冲淀粉溶液、碘液、0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液、蒸馏水【操作步骤】1.唾液的获取:蒸馏水漱口,然后含一大口水约1min,期间做咀嚼运动,然后收集于烧杯中。

2.不同pH缓冲液的配制(定容到10ml)pH 0.2mol/L Na2HPO4(ml)0.2mol/L NaH2PO4(ml)6.2 0.925 4.0756.4 1.325 3.6756.6 1.875 3.1256.8 2.450 2.5507.0 3.050 1.9507.2 3.60 1.407.4 4.05 0.957.6 4.35 0.653.淀粉用量测定管号 1 2 3 空白7.0pH缓冲液 0.9 0.9 0.9 0.92.5g/L淀粉 0.1 0.2 0.3 -唾液(稀释10倍) 0.1 0.1 0.1 0.1混匀,37℃水浴7.5min,然后向每管加2滴碘液H20 5.9 5.8 5.7 6.0混匀,观察现象,并选择适中的一支,记录其用量0.3ml 2.5g/L淀粉为最适量(颜色最浅)4.酶液稀释倍数确定稀释倍数 5 10 15 20 25 30酶液(ml) 1 0.5 0.4 0.25 0.2 0.2 H20 (ml) 4 4.5 5.6 4.75 4.8 5.8管号 1 2 3 4 5 6 7稀释倍数 5 10 15 20 25 30 空白pH7.0缓冲液 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.92.5g/L淀粉 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3唾液 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 混匀,37℃水浴7.5min,然后向每管加2滴碘液H20 (ml) 6 6 6 6 6 6 6 混匀,观察现象,并选择适中的一支,记录其稀释倍数观察到酶稀释10倍2号管颜色最浅,所以酶稀释10倍最适合5.最适pH确定pH试剂 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 pH缓冲液 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 2.5g/L淀粉0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3某倍数唾液 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 (由第4步测定)混匀,37 ℃水浴7.5min,然后向每管加2滴碘液H2O(ml) 6 6 6 6 6 6 6 6 混匀,用蒸馏水调零,测定A660nmA660nm 0.165 0.172 0.222 0.199 0.179 0.199 0.122 0.197【计算结果】以A660nm为纵坐标,pH为横坐标作图,并找出唾液淀粉酶的最适pH【讨论】本实验中,当唾液淀粉酶的活性最大时,淀粉被分解的最多,剩余的底物的量最少,A值最小,过酸或者过碱均会影响酶的活性,使之分解的底物减少,A值增大。

唾液淀粉酶活性的观察实验报告

唾液淀粉酶活性的观察实验报告

唾液淀粉酶活性的观察实验报告一、实验目的观察唾液淀粉酶在不同条件下的活性变化,探究温度、pH 值和底物浓度等因素对唾液淀粉酶活性的影响。

二、实验原理唾液淀粉酶可将淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖等小分子物质。

淀粉遇碘液会呈现蓝色,而麦芽糖和葡萄糖等小分子物质遇碘液不显色。

通过观察不同条件下反应液与碘液作用后的颜色变化,可以判断唾液淀粉酶的活性。

三、实验材料和仪器1、材料新鲜唾液质量分数为 2%的淀粉溶液碘液pH 缓冲液(pH 值分别为 3、5、7、9、11)恒温水浴锅沸水浴锅2、仪器试管滴管量筒温度计四、实验步骤1、唾液的收集先用清水漱口,然后含一口清水,在口腔中停留约 1 分钟,将口腔中的杂质清除干净。

之后将口中的水吐掉,紧闭双唇,尽可能多地分泌唾液,将唾液收集到小烧杯中备用。

2、温度对唾液淀粉酶活性的影响(1)取 5 支洁净的试管,编号为 1、2、3、4、5,分别向每支试管中加入 2 mL 质量分数为 2%的淀粉溶液。

(2)将 1 号试管放入 0℃的冰水混合物中,2 号试管放入 37℃的恒温水浴锅中,3 号试管放入 60℃的恒温水浴锅中,4 号试管放入 80℃的恒温水浴锅中,5 号试管放入 100℃的沸水浴锅中,保温 5 分钟。

(3)分别向 1、2、3、4、5 号试管中加入 1 mL 新鲜唾液,摇匀后,继续在各自温度下保温 5 分钟。

(4)取出各试管,分别滴加 2 滴碘液,观察并记录各试管中溶液的颜色变化。

3、 pH 值对唾液淀粉酶活性的影响(1)取 5 支洁净的试管,编号为 6、7、8、9、10,分别向每支试管中加入 2 mL 质量分数为 2%的淀粉溶液。

(2)向 6 号试管中加入 2 mL pH 为 3 的缓冲液,向 7 号试管中加入 2 mL pH 为 5 的缓冲液,向 8 号试管中加入 2 mL pH 为 7 的缓冲液,向 9 号试管中加入 2 mL pH 为 9 的缓冲液,向 10 号试管中加入 2 mL pH 为 11 的缓冲液。

唾液淀粉酶生化实验

唾液淀粉酶生化实验

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验小组成员: 孙天纬李敏媛唐芳娇蒋雅莉实验目的:1.掌握设计性实验的基本思路,并完成设计报告。

2.掌握唾液淀粉酶最适pH的测定原理和方法。

3.熟悉影响酶促反应速度的因素。

实验原理:1.酶促反应速度受到许多因素的影响,如温度、pH、激活剂和抑制剂等。

上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响,可用定性或定量的反应来观察。

利用碘与淀粉反应的颜色随产物的量的增加而加深的特点,来衡量酶促反应的速度的快慢。

蓝色—紫红色—黄色,颜色由蓝变黄,表示酶促反应速度由慢到快。

此为定性观察。

2.进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。

由于在被水解的程度也不一样。

当唾液淀粉酶不能将完全水解时,淀粉遇碘呈蓝色,经查阅文献,吸收波长位于660nm处。

不同pH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同,吸光度值也不同。

因此,通过测量660nm处的吸光度值,可以了解pH对酶促反应的影响,吸光度最小的溶液其pH 即为唾液淀粉酶的最适pH。

实验步骤:1.缓冲溶液的配制。

取7支试管进行编号1-7,分别按下表加入试剂,再加蒸馏水稀释到10mL。

2.淀粉用量的确定用量:mL*选择颜色最浅的一支试管3.唾液的采集。

先给备取者一杯纯净水让其漱口,将漱口液吐掉,让备取者下嘴唇抵住干净的杯子口,并做咀嚼运动,这时,备取者的唾液会不停地流出来。

4.唾液的稀释。

取7支试管,进行编号1'-7',进行稀释。

5.唾液稀释倍数的选取。

另取7支试管,分别编上A-G号,各取上述稀释的唾液各0.1ml,分别加入相应编号的试管里,向7支试管内同时加入0.1ml的2.5g/L的淀粉溶液和0.9mL的7.0pH缓冲液,振荡混匀后放入37 ℃恒温水浴7.5分钟后取出,滴加2碘液,振荡混匀,观察颜色,选取颜色变化适中的一支,记录稀释倍数。

结论:使用稀释10倍的唾液的试管的颜色适中。

6.最适pH的测定。

另取9支试管,进行编号,按下表加入试剂。

关于唾液淀粉酶的最适PH

关于唾液淀粉酶的最适PH

关于唾液淀粉酶的最适PH 姓名邱远学号201150716摘要:为了探究唾液淀粉酶的最适宜PH值,通过配置不同PH值的基质液作为酶与底物反应的环境,再加碘液与未反应的底物作用成色,用分光仪测定溶液吸光度来比较底物的剩余量,以此推断出唾液淀粉酶的最适宜PH的范围。

关键词:唾液淀粉酶最适PH值前言:作为一名医学生,未来的医生,通过实验来学习获得科研的基础知识,熟悉一些基本原则和操作,更是为了完成老师布置的作业。

此次实验具有重要意义。

实验原理:淀粉经样品中淀粉酶的水解,生成糊精和麦芽糖。

在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物。

其颜色的深浅与空白管颜色的差值和淀粉酶的活力成正比。

即颜色越浅,吸光度越低,淀粉酶的活力越高。

操作步骤:一:基质液的配置:1:取十一支规格相同的干净试管,分别编号1到10.置于试管架的第一排。

2:按下表加入试剂。

二:酶液的配置:1:实验者用蒸馏水漱口,洗去残留食物,然后含一口蒸馏水在口中三分钟,时间到后将唾液吐在一个干净的纸杯。

2:取两个干净烧杯,分别标注为1:5和1:10.三:反应进行。

1:去20支规格相同的试管,平均分成两组,分别编号1到20 其中1到10号试管加入1:5号烧杯的酶液置于试管架第三排11到20号试管加入1:10号烧杯的酶液置于试管架第二排。

2.按下表在各试管中加入试剂。

3:因为用肉眼感觉各试管区别不是很明显,故在每一只试管中注入2ml的蒸馏水。

4:混匀后用分光度法在660nm波长下用蒸馏水调零,测量各管的A660。

测得的读数已并入上表。

绘制成图:四讨论:1:总体来看,唾液淀粉酶在偏酸性的环境中活性较高。

2:从1到10号试管的吸光度都接近或低于相对应的同样PH值下的11到20号试管的吸光度。

说明其他条件相同时,酶的浓度越高,对底物的消耗越多。

3:从1:5组的数据来看,4号试管的吸光度值最小,4号试管对应的PH值是6.6,推出唾液淀粉酶的最适ph值在6.5——6.7之间。

【精品】探索性实验唾液淀粉酶的最适ph值测定

【精品】探索性实验唾液淀粉酶的最适ph值测定

【精品】探索性实验唾液淀粉酶的最适ph值测定
对唾液淀粉酶最适pH值的研究,关系到唾液淀粉酶在生理功能中的表现及应用。


了探索唾液淀粉酶的最适pH值,本实验采取技术指标分析及多步法分析方法来研究了唾
液淀粉酶最适pH值的研究。

实验设计:本实验材料采用功能性实验唾液淀粉酶标准曲线,采用同一批次的淀粉酶,pH从5-9步骤改变,每步间隔为0.2,试验有五轮重复,每轮实验结果取平均值。

实验方法:实验中采用朗恩公司出品的D-1801流变仪通过电位控制(逆步运动),
在各不同pH值下,用圆柱形测试模块分析唾液淀粉酶的流变特性,再用电脑处理实验数
据以确定参数得出结论。

实验结果:实验结果表明,唾液淀粉酶在室温25℃,PH值介于6.5~7.5的环境中有
较好的活性,浓度在0.10 g/ml时产生的最大应力值为495.2Pa,可得出结论,唾液淀粉
酶的最适pH值为6.5~7.5。

结论:唾液淀粉酶在pH在6.5~7.5时可促进其最佳活性,此范围内可有效表达唾液
淀粉酶的最佳生理功能。

提示相关实验室合理配置pH值,以便有效调控实验唾液淀粉酶
的环境及机制。

唾液淀粉酶最适PH的测定2013级11班

唾液淀粉酶最适PH的测定2013级11班

唾液淀粉酶最适PH的测定摘要:本实验的目的是掌握测量pH 对酶活力影响的基本原理和方法,掌握用碘-淀粉比色法的方法测定唾液淀粉酶的最适PH值。

学会常用的缓冲溶液的配制方法。

进一步熟悉分光光度计的使用。

影响酶反应活力的因素很多,影响胞外酶的因素主要包括PH 值、温度和金属离子、抑制剂及其他小分子,以及酶浓度等因素。

在温度、酶浓度相同的条件下,酶的活力在最适pH 处达到最大,远离则变小。

在底物过量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同的条件下,接近最适pH 的反应体系中消耗淀粉的量最大,剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅,吸光度越小,利用分光光度计测出各管的吸光度后,取处于升高与降低趋势之间的较小吸光度范围对应的pH 值即为唾液淀粉酶的最适pH。

关键词:唾液淀粉酶、酶活性测定。

前言:生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质和核酸,前者是机体内催化各种代谢反应最重要的催化剂。

酶分子中的许多极性基团。

在不同的PH条件下解离状态不同,其所带电荷的种类和数量也各不相同,酶活性中心的某些必需基团往往仅在某一解离状态时才最容易同底物结合或具有最大的催化活性。

许多具有可解离基团的底物和辅酶的荷电状态也受PH改变的影响,从而影响酶对它们的亲和力。

此外,PH还可以影响酶活性中心的空间构象,从而影响酶的活性。

正文:实验原理:1.酶催化活性最高时反应体系的PH值称为酶的最适PH值。

人体正常唾液PH值为6.6~7.1,吸光度值在6.0~8.0范围内随着PH的增大先减小后增大。

2.在底物足量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同的条件下,接近最适PH的反应体系中消耗淀粉的量最大,剩余淀粉与碘液生成的颜色越浅,在660mm吸光度A越小,利用分光光度计测出各管的吸光度后,以PH为横坐标,吸光度值为纵坐标,曲线上最低点所对应的PH值即为唾液淀粉酶的最适PH值。

实验材料:移液枪,试管,吸量管(5ml,10ml),试管架,小烧杯,722型分光光度计,恒温箱,洗耳球试剂:0.01mol/l碘液,0.2mol/l磷酸氢二钠,0.2mol/l磷酸二氢钠,淀粉溶液,唾液,蒸馏水实验步骤:1.缓冲溶液的配制,取七支试管进行编号1-7,按下表加入试剂2.唾液的采集:先给备取者一杯纯净水让其漱口,将漱口液吐掉,口含蒸馏水,适宜时间后将蒸馏水连同唾液一同放置于小烧杯中,置于冰水中冷却。

唾液淀粉酶活性测定1

唾液淀粉酶活性测定1

一、实验原理:酶促反应速率受多种元素的影响,如温度、PH、激活剂和抑制剂等。

在温度等其他条件相同时,唾液淀粉酶的活性在最适PH处达到最大,在最适PH的反应体系中,淀粉被消耗最多,剩余的淀粉与碘液显色最浅,在660nm波长吸光度也最小,最后以吸光度值为纵坐标,PH值为横坐标作图,从而得到唾液淀粉酶的最适PH值。

二、实验仪器:吸量管,试管,试管架,小烧杯,722型分光光度计,恒温箱,洗耳球三、实验试剂:0.01mol/L碘液,0.2mol/L Na2HPO4,0.2mol/L NaH2PO4,2.5g/L淀粉溶液,唾液,蒸馏水四、实验思路:相同时间内,在温度,酶浓度相同,PH不同的条件下,唾液淀粉酶的活性不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量的碘液作用所显示的颜色也不同,并通过测定吸光度,得出唾液淀粉酶的最适PH范围。

五、操作步骤:1、唾液的获取及稀释以备取者蒸馏水漱口2~3次,然后含大口蒸馏水于口腔内并反复做咀嚼动作,一段时间后以烧杯承接唾液;而后分别进行4、8、12、16、20倍数稀释;2、唾液稀释液稀释倍数的确定取若干洁净试管,按表1添加试剂并进行实验操作表1 唾液稀释液稀释倍数的确定(用量:ml)试剂 1 2 3 4 5 空白管唾液稀释液倍数/2ml 20 40 60 80 100 0 淀粉溶液 1 1 1 1 1 1振荡混匀后37℃水浴10分钟碘液/滴 2 2 2 2 2 2振荡混匀后观察颜色变化,以“+”表示颜色深浅颜色变化深浅由此表中数据确定稀释倍数为______的唾液稀释液作为下一步步骤试剂3、淀粉用量的确定按表2进行操作表2 淀粉用量的确定(单位:mL)试剂 1 2 3 4 5 空白唾液稀释液(倍数已定) 2 2 2 2 2 2 2.5g/L淀粉溶液0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0蒸馏水0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 1混匀做10分钟水浴操作后,滴加碘滴2滴观察颜色变化深浅,以“+”表示颜色变化深浅由表中数据确定淀粉用量为______mL,作为下一步反应试剂参数4、不同PH的NaH2PO4–Na2HPO4缓冲液配制按照表2进行操作表3 不同PH的Na2HPO4–NaH2PO4缓冲液配制表(用量:ml) PH. 0.2mol/LNa2HPO4溶液0.2mol/LNaH2PO4溶液5.8 0.40 4.606.0 0.615 4.3756.2 0.925 4.0756.4 1.325 3.6756.6 1.875 3.1256.8 2.45 2.557.0 3.05 1.957.2 3.60 1.407.4 4.05 0.957.6 4.35 0.657.8 4.575 0.4258.0 4.735 0.2755、唾液淀粉酶最适PH的测定按表3添加试剂,进行实验操作【实验数据】表4—1 唾液淀粉酶活性的测定(单位:ml)试剂 1 2 3 4 5淀粉唾液稀释液 2 2 2 2 2缓冲溶液相应PH(5mL) 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8水浴10分钟后,滴加碘液2滴,混匀后测吸光度A660表4—2 唾液淀粉酶活性的测定(单位:mL)试剂 6 7 8 9淀粉唾液稀释液 2 2 2 2缓冲溶液相应PH(5mL)7.0 7.2 7.4 7.6水浴10分钟后,滴加碘液2滴,混匀后测吸光度A660六、结果:由表4中实验数据可知唾液淀粉酶在PH为_______时活性最高。

酶性质——最适pH值测定

酶性质——最适pH值测定

酶性质——最适pH选择姓名:俞华军班级:09级生科3班学号:200900140157 时间:2011/04/11一.实验目的1.了解掌握测定酶最适pH的实验原理和方法2.了解酶的一般特性和性质二.实验原理酶的催化活性与环境PH有密切关系,通常各种酶只在一定PH范围内才有活性,酶活性最高时的PH,称为酶的最适PH。

高于或低于此PH时酶的活性逐渐降低。

值得指出的是,不同的酶最适PH也不同,如胃蛋白酶的最适PH为1.5—2.5,胰蛋白酶的最适PH为8。

酶的最适PH不是一个特征性的物理常数,对于同一个酶,其最适PH因缓冲液和底物的性质不同而有差异。

如唾液淀粉酶最适PH为6.8,但在磷酸缓冲液中,其最适PH为6.4—6.6,而在乙酸缓冲液中则为5.6。

三.实验器材1. 试剂:氯化钠、柠檬酸、磷酸氢二钠、淀粉试剂(A.R)、碘液;2. 仪器:8支试管(15x15)、电磁搅拌器、水浴锅、电磁加热炉、沸水浴、玻璃棒、锥形瓶(x9)、100ml容量瓶(x2)、吸管2ml(x2)、10ml(x2)、3ml(x3)、液枪0.5ml(x2)、1.0ml(x2)、点样板、吸管(x2)、烧杯200ml(x2)、洗耳球、冰水浴;3. 材料:人口腔唾液淀粉酶。

四.实验步骤1.配制溶液A:配制0.2mol/L的磷酸氢二钠溶液200ml,称取14.3256g磷酸氢二钠标准试剂于300ml锥形瓶中,加入200ml蒸馏水充分溶解;B:配制0.1mol/L的柠檬酸溶液100ml;称取2.1g柠檬酸于200ml锥形瓶中,加入100ml水充分溶解;C:配制0.3%氯化钠0.5%淀粉溶液,称取0.3g氯化钠于200ml烧杯中,充分溶解后,取出约20ml到100ml烧杯中,剩余的溶液放到电磁加热炉上加热至沸,然后称取0.5g淀粉加入到有20ml左右的少量氯化钠溶液中,用玻璃棒搅成糊状后,加入到已煮沸的大量氯化钠溶液中,充分搅拌,使淀粉完全溶解;D:配制唾液淀粉酶液,漱口后在嘴里含100ml蒸馏水30s—1min后,倒于200ml烧杯中,并置于冰水浴中保藏;E:用0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液配制PH为5.4,6.0,6.4,6.8,7.2,7.6,8.0的缓冲液,分别置于锥形瓶中并贴上标签:表一配制不同pH缓冲液所加试剂量表2.测定保温时间(1)取一支试管,加入0.3%氯化钠0.5%淀粉溶液2毫升,加入pH6.8磷酸氢二钠—柠檬酸钠缓冲液3毫升,放入37℃水浴锅中保温5min,随后加入稀释100—300倍的唾液2毫升,并开始计时。

唾液淀粉酶最适pH值测定

唾液淀粉酶最适pH值测定

唾液淀粉酶最适pH值测定广西医科大学2012级8班3组崖晓怡(201250424)路海燕(201250426)实验原理:淀粉经唾液中淀粉酶的水解,生成糊精和麦芽糖。

在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物唾液淀粉酶最适pH为6.8,但在磷酸缓冲溶液中,其最适pH为6.4—6.6,而在乙酸缓冲溶液中则为5.6。

在底物过量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同的条件下,接近最适pH 的反应体系中消耗淀粉的量最大,剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅,吸光度越小,利用分光光度计测出各管的吸光度后,取处于升高与降低趋势之间的较小吸光度范围对应的pH 值即为唾液淀粉酶的最适pH。

一、材料与方法仪器:吸量管(5mL,1mL),试管,试管架,小烧杯,722 型分光光度计,恒温箱,吸耳球试剂:0.01mol/L 碘液,0.2mol/L 磷酸氢二钠,0.2mol/L 磷酸二氢钠,淀粉溶液,唾液,蒸馏水二、方法:相同时间内,在温度、酶浓度相同、pH 不同的条件下,酶的活度不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量碘液生成的颜色不同,通过在660nm测量吸光度,得出酶的最适pH 范围。

操作步骤:1、唾液的获取:蒸馏水漱口后在口中含蒸馏水,适宜时间后将蒸馏水连同唾液一同放置于事先准备好的容器中即可,在实验过程中应注意酶的失活,为了防止此现象发生应将此液体置于冰水中冷却。

2、不同pH 缓冲液配制:根据下表配置各个pH 值的缓冲溶液各10ml 单位:ml3、淀粉用量的确定:单位:ml1 2 3 4 PH7.0缓冲液0.90.90.90.92.5g/L 淀粉 0.1 0.2 0.3 -释10倍酶液0.10.1 0.1 0.137℃水浴7.5min试管 1 2 3 4 5 6PH6.26.4 6.6 6.87.0 7.20.2mol/L42HPO Na0.925 1.325 1.875 2.450 3.050 3.6000.2mol/L42PO NaH4.075 3.675 3.125 2.550 1.950 1.400碘液2滴为了更好观察颜色变化,可以加入适量蒸馏水使总体积相同。

测定唾液淀酶的最适PH值

测定唾液淀酶的最适PH值

测定唾液淀粉酶的最适PH 值制作人:叶小晴学号:201140095 班组:15-4 学院:护理学院摘要:酶催化活性最大时相应的环境PH 称为酶促反应的最适PH 值。

虽然不同酶的最适PH 值各不相同,但大多数酶的最适PH 值接近中性,本论文主要在一定浓度、温度等条件下研究唾液淀粉酶的最适PH 值,从而知道唾液淀粉酶的最适PH 值,进而了解影响酶的活性的因素。

关键词:唾液淀粉酶、最适PH 值、活性前言:生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质或核酸,酶是机体内最重要的生物催化剂。

在不同PH 条件下,酶分子的许多极性基团的解离状态不同,受到PH 变化的影响,从而影响酶对它们的亲和力。

PH 还会影响酶的活性中心的空间构象,从而影响酶的活性,因而PH 的改变对酶的催化作用影响很大。

材料与方法:1、材料:唾液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水、温水、试管、试管架、洗耳球、烧杯、胶头滴管、水浴箱、分光光度计、吸量管、坐标纸2、方法:(1)缓冲溶液的配置:根据各个PH 值的缓冲溶液(用量:ml)表1:2)唾液的获取:温的水漱口,将蒸馏水含于口中2min后吐于烧杯中,取5ml唾液20ml水配成1/5的唾液,从中取5ml的1/5的唾液再加入10ml水配成1/10 的唾液。

(3)测量PH:取12 支管,分别标上1~12,按下表操作:表2:3、分别加入两滴碘液4、水浴加热5、测量吸光度6、作标准曲线图本实验中,当唾液淀粉酶的活性最大时,淀粉被分解得最大,剩余的底物最少.A 值最小,过酸或过碱均会抑制酶的活性,使之分解的底物减少,A 值增大。

由所作的曲线可知,唾液淀粉酶的最适PH值为6.6。

当PH<6.6时,唾液淀粉酶的活性随PH值的增大而增大,当PH=6.6时,唾液淀粉酶的活性达到最大,当PH>6.6 时,唾液淀粉酶的活性随PH 值的增大而减小。

参考文献:《分子酶学》陈惠黎李文杰编著人民卫生出版社酶与酶工程及其应用》孙君社主编化学工业出版社酶学》郭勇郑穗平编著华南理工大学出版社医用生物化学》陈诗书孔良曼章有章主编上海医科大学出版社生物化学》高国全主编人民卫生出版社。

唾液淀粉酶活性观察实验报告

唾液淀粉酶活性观察实验报告

一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生理功能及其在人体消化过程中的作用。

2. 掌握观察唾液淀粉酶活性的实验方法。

3. 分析影响唾液淀粉酶活性的因素,如温度、pH值等。

二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,具有催化淀粉水解为麦芽糖的作用。

本实验通过观察唾液淀粉酶催化淀粉水解的过程,分析影响酶活性的因素。

三、实验材料与试剂1. 实验材料:唾液、淀粉溶液、碘液、蒸馏水、试管、移液器等。

2. 实验试剂:0.5%淀粉溶液、稀碘溶液、NaCl溶液、醋酸溶液、NaOH溶液等。

四、实验步骤1. 将唾液用蒸馏水稀释10倍,混匀。

2. 取两支试管,分别加入0.5%淀粉溶液和唾液稀释液各2ml。

3. 将试管放入37℃水浴中,保温5分钟。

4. 向两支试管中分别加入2滴碘液,观察溶液颜色变化。

5. 分别设置不同温度(如25℃、37℃、50℃、75℃)的实验组,重复步骤2-4。

6. 分别设置不同pH值(如4、6、7、8、10)的实验组,重复步骤2-4。

7. 分别设置不同浓度的NaCl溶液、醋酸溶液、NaOH溶液的实验组,重复步骤2-4。

五、实验结果与分析1. 在37℃水浴中,唾液淀粉酶催化淀粉水解,溶液颜色由蓝色变为无色,表明唾液淀粉酶具有活性。

2. 在不同温度下,唾液淀粉酶活性随温度升高而增强,在37℃时活性最强,超过此温度后活性逐渐降低。

3. 在不同pH值下,唾液淀粉酶活性在pH值为6.8时最强,过高或过低的pH值均会降低酶活性。

4. 在不同浓度的NaCl溶液中,唾液淀粉酶活性随NaCl浓度增加而增强,但超过一定浓度后活性不再增加。

5. 在不同浓度的醋酸溶液和NaOH溶液中,唾液淀粉酶活性均受到抑制,且抑制程度随浓度增加而增强。

六、实验结论1. 唾液淀粉酶具有催化淀粉水解为麦芽糖的生理功能。

2. 温度、pH值、NaCl浓度等均会影响唾液淀粉酶的活性。

3. 唾液淀粉酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.8。

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 参考

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验    参考

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验实验目的:1、掌握用碘-淀粉比色法的方法精测唾液淀粉酶最适pH值。

2、学会常用的缓冲溶液配制的方法。

3、进一步熟悉分光光度计的使用。

一、实验原理:1、酶催化活性最高时反应体系的pH值称为酶的最适pH值。

人体正常唾液pH值为6.6~7.1,吸光度值在6.0~8.0范围内并且随着pH的增大先减小后增大。

2、在不同pH条件下,淀粉经淀粉酶水解后不同程度的水解产物能与碘液反应呈现不同颜色,可用分光光度计测量出反应后各溶液在660nm 处的吸光度A,由朗伯-比尔定律可知,吸光度A值越大,其相应的酶活力越低,从而可间接得出唾液淀粉酶的最适pH值。

三、仪器材料和试剂:仪器材料:1. 白瓷板、中试管、试管架、毛刷、吸耳球、玻璃笔、烧杯、漱口水2. 37 C恒温水浴箱、分光光度计、沸水浴3.1ml吸量管、5ml吸量管,胶头滴管、100ul移液器实验试剂:0.02%淀粉溶液、 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水四、实验步骤:1、试剂的配制:0.02%淀粉溶液—取2.5g/L的淀粉溶液4ml,置于50ml容量瓶中,加蒸馏水稀释到50mL。

0.2mol/L磷酸二氢钠溶液—准确称取14.200g,加入20ml蒸馏水溶解在烧杯,然后置于500ml容量瓶中稀释至刻度备用。

0.2mol/L磷酸氢二钠溶液—准确称取12.000g,加入20ml蒸馏水溶解在烧杯,然后置于500ml容量瓶中稀释至刻度备用。

根据下表,混合溶液至50.00ml后用蒸馏水稀释到100.00ml.pH 值 0.2mol/LNa2HPO4(ml)(丁) 0.2mol/LNaH2PO4 (ml)(霞)5.8 4.00 46.006.0 6.15 43.856.2 9.25 40.756.4 13.25 36.756.6 18.75 31.256.8 24.50 25.507.0 30.50 19.507.2 36.00 14.507.4 40.50 9.507.6 43.50 6.507.8 45.75 4.258.0 47.35 2.652、唾液的获取:(1)蒸馏水漱口,然后用舌尖抵住上额或下额齿根后,微低头.轻启双唇,将下嘴唇搁在烧杯边缘,让唾液自然流入试管中.(2)唾液的稀释:取10支试管,分别编上号铭1~10。

唾液淀粉酶最适pH值

唾液淀粉酶最适pH值

陆绍龙广西医科大学七年制临床医学10级4班摘要:目的:1)掌握测定唾液淀粉酶最适pH值的测定方法以及原理;2)熟悉不同pH值缓冲溶液的配制和分光光度计的使用;方法:通过唾液淀粉酶在不同pH环境中水解淀粉,测出未被水解的淀粉与碘液结合成的蓝色复合物的分光光度值,根据实验数据判断酶的最适pH;结果:当pH=时,唾液淀粉酶的活性最高。

关键词:唾液淀粉酶 pH 分光光度计前言:酶学与医学的关系密切。

人体的许多疾病和酶都密切相关。

酶分子中的许多极性基团,在不同的pH条件下解离状态不同,其所带电荷的种类和数量也各不相同,酶活性中心的某些必需基团往往仅在某一解离状态时才容易同底物结合或具有最大的催化活性。

此外,pH的改变还可以引起酶活性中心的构象改变,因此pH的改变对酶的催化作用影响很大。

人的唾液中99%是水,有机物主要是唾液淀粉酶、粘多糖、粘蛋白及溶菌酶等,无机物有钠、钾、钙、氯和硫氰离子等。

唾液中含有的一种有催化活性的蛋白质,可以催化淀粉水分解为麦芽糖。

唾液淀粉酶发挥作用的最适pH值在中性范围内,唾液中的氯和硫氰酸盐对此酶有激活作用。

食物进入胃后,唾液淀粉酶还可继续使用一段时间,直至胃内容物变为pH值约为~的酸性反应为止。

正文:1.材料与方法:仪器:吸量管(5mL,1mL),试管若干,试管架,小烧杯,洗耳球,721G-722G 分光光度计,恒温箱(含温度计),一次性纸杯,pH试纸。

试剂:L淀粉,L Na2HPO4溶液,L NaH2PO4 溶液,蒸馏水,唾液,碘液。

2.操作步骤1)1. 不同pH缓冲液配制按下表加样,最后加蒸馏水稀释至10ml。

pHL Na2HPO4溶液(mL)L NaH2PO4 溶液(mL)注:应用pH值试纸来确定所配溶液pH。

2)唾液的获取先漱口1~2次,然后含一大口水约1min,期间做咀嚼运动,然后收集至杯子中。

3)淀粉用量的确定123空白缓冲液L淀粉——唾液(稀释10倍)混匀,37℃水浴,然后向每管加2滴碘液O6H2混匀,观察现象,并选择适中一支,记录其用量4)酶稀释液的倍数确定稀释倍数51015202530酶液(mL)1O(mL)4H2稀释倍数51015202530空白缓冲液(mL)L淀粉由第3步操作确定唾液——混匀,37℃水浴,然后向每管加2滴碘液HO6666666 2混匀,观察现象,并选择适中一支,记录其稀释倍数5)最适pH值的确定pHpH缓冲液某倍数唾液(由由第3步操作确定第四步确定)混匀,37℃水浴,然后向每管加2滴碘液O6666666H2混匀,37℃水浴,然后向每管加2滴碘液A660以蒸馏水调零,用分光光度计测出各试管中溶液的A值,记录好数据。

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唾液淀粉酶最适pH值的测定实验
实验目的:
1、掌握用碘-淀粉比色法的方法精测唾液淀粉酶最适pH值。

2、学会常用的缓冲溶液配制的方法。

3、进一步熟悉分光光度计的使用。

一、实验原理:
1、酶催化活性最高时反应体系的pH值称为酶的最适pH值。

人体正常唾液pH值为6.6~7.1,吸光度值在6.0~8.0范围内并且随着pH的增大先减小后增大。

2、在不同pH条件下,淀粉经淀粉酶水解后不同程度的水解产物能与碘液反应呈现不同颜色,可用分光光度计测量出反应后各溶液在660nm 处的吸光度A,由朗伯-比尔定律可知,吸光度A值越大,其相应的酶活力越低,从而可间接得出唾液淀粉酶的最适pH值。

三、仪器材料和试剂:
仪器材料:
1. 白瓷板、中试管、试管架、毛刷、吸耳球、玻璃笔、烧杯、漱口水
2. 37 C恒温水浴箱、分光光度计、沸水浴
3.1ml吸量管、5ml吸量管,胶头滴管、100ul移液器
实验试剂:
0.02%淀粉溶液、 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水
四、实验步骤:
1、试剂的配制:
0.02%淀粉溶液—取2.5g/L的淀粉溶液4ml,置于50ml容量瓶中,加蒸馏水稀释到50mL。

0.2mol/L磷酸二氢钠溶液—准确称取14.200g,加入20ml蒸馏水溶解在烧杯,然后置于500ml容量瓶中稀释至刻度备用。

0.2mol/L磷酸氢二钠溶液—准确称取12.000g,加入20ml蒸馏水溶解在烧杯,然后置于500ml容量瓶中稀释至刻度备用。

根据下表,混合溶液至50.00ml后用蒸馏水稀释到100.00ml.
pH 值 0.2mol/LNa2HPO4(ml)(丁) 0.2mol/LNaH2PO4 (ml)(霞)
5.8 4.00 4
6.00
6.0 6.15 43.85
6.2 9.25 40.75
6.4 13.25 36.75
6.6 18.75 31.25
6.8 24.50 25.50
7.0 30.50 19.50
7.2 36.00 14.50
7.4 40.50 9.50
7.6 43.50 6.50
7.8 45.75 4.25
8.0 47.35 2.65
2、唾液的获取:
(1)蒸馏水漱口,然后用舌尖抵住上额或下额齿根后,微低头.轻启双唇,将下嘴唇搁在烧杯边缘,让唾液自然流入试管中.
(2)唾液的稀释:取10支试管,分别编上号铭1~10。

试管号铭1 铭 2 铭 3 铭 4 铭 5 铭 6 铭 7 铭8 铭 9 铭 10 唾液(ml) 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 蒸馏水(ml) 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 (3)唾液稀释倍数的选取
另取10支试管,分别编上霞1~10号,分别精取上述稀释的唾液各
1.00ml,分别加入相应编号的试管里,向10支试管内同时加入1.00ml 的0.02%的淀粉溶液,振荡混匀后放入37 C恒温水浴5分钟后取出,滴加3d碘液,振荡混匀,观察颜色,选取颜色变化适中的一支,记录
稀释倍数。

(颜色应出现浅黄,蓝紫色,深蓝色,如果只出现黄色或者
蓝色应该扩大或缩小稀释倍数重新选取)
(4)、测量pH:取12支试管,分别标上号赵1~12,按下表操作
赵1 赵2 赵 3 赵4 赵 5 赵6 赵7 赵8 赵9 赵10 赵11 赵 12
淀粉溶液(ml) 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
2ml缓冲冲溶液ph 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.00
稀释唾液(ml) 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
充分混匀,放入37 C恒温水浴5分钟,加3d碘液,振荡混匀
以蒸馏水调零,用分光光度计测出各试管溶液的吸光度A值,做好记录
A660
五、实验数据及处理:
以pH值为横坐标,吸光度A为纵坐标,在坐标纸上作出平滑曲线,取曲线最低点对应的pH值,即为唾液淀粉酶的最适pH值。

六、实验讨论
1、唾液淀粉酶随食物进入胃内,能否继续将淀粉分解为麦芽糖?
不能,唾液淀粉酶的最适pH在7左右,而胃液的pH在2左右,会使唾液淀粉酶失活并以蛋白质的形式被胃蛋白酶水解
2、在唾液稀释倍数的选取中,如何挑出颜色变化适中的那管溶液?
七、实验分工
1、溶液的配制:
缓冲溶液的配制—吴金霞、黄彩丁
唾液淀粉酶的稀释—杨铭铭
需测量PH的溶液配制—赵凯丽
2、观察颜色,选取颜色变化适中的一支,记录稀释倍数,大家一起完成(保证实验数据的可靠)
3、测A660:
黄彩丁负责测,杨铭铭负责倒溶液,吴金霞负责擦比色管,赵凯丽负责记数据。

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