分光光度计的操作方法
分光光度计使用原理及操作方法
分光光度计使用原理及操作方法分光光度计使用原理及操作方法一、引言分光光度计是一种用于测定物质在不同波长下吸收或透射光的仪器。
它广泛应用于化学、生物、环境科学等领域的实验室研究和工业生产过程中。
本文将介绍分光光度计的使用原理和操作方法。
二、使用原理1.分光光度计基本构成分光光度计由光源、样品室、检测器和信号处理系统等组成。
光源通常使用可见光波段的白炽灯、氘灯或钨灯等。
样品室包含了样品槽和光路，用于将光从光源引导到样品上，并将样品吸收或透射的光引导到检测器上。
检测器一般是光电二极管或光电倍增管，用于将光信号转换为电信号。
信号处理系统对电信号进行放大、滤波和数值计算等处理，最终给出光吸收或透射的数值结果。
2.工作原理分光光度计的工作原理基于比耦光度计定律，即光强与样品中物质浓度成正比。
当光通过样品时，样品中的物质会吸收特定波长的光，导致光强减弱。
通过测量光源发出的光经样品后的光强，可以推导出样品中物质的浓度。
三、操作方法1.准备工作（1）将分光光度计放置在平稳的台面上，并接通电源。
（2）设置所需的工作波长和光强范围，确保仪器处于所需工作状态。
（3）清洁样品室和样品槽，确保无灰尘或杂质影响测量结果。
2.插入样品（1）打开样品室，将待测样品精确地放置在样品槽中，并确保样品紧密地与光路接触。
（2）关闭样品室，确保样品室的密封性。
3.零点校正（1）选择空白试样，即不含待测物质的样品，放置在样品槽中。
（2）按下零点校正按钮，使分光光度计记录下此时的光强值作为参考值。
4.测量样品（1）选择待测样品，放置在样品槽中。
（2）按下测量按钮，分光光度计会记录下此时样品吸收或透射的光强值。
（3）重复进行多次测量，以提高结果的准确性。
5.数据处理利用分光光度计提供的信号处理系统，对测量到的光强值进行相应的操作，如放大、滤波和数值计算等。
四、附件本文档无附加内容。
五、法律名词及注释（1）分光光度计：一种用于测定物质在不同波长下吸收或透射光的仪器。
分光光度计操作方法
分光光度计操作方法
1、打开计算机→打开分光光度计开关→打开UVProbe 2.33软件→点击“连接”后出现自检
对话框，等待自检通过，→点击确定→等待分光光度计预热1小时。
2、点击“光度测定”按钮→点击“方法”按钮→“光度测定方法向导—【波长】”→波长
类型：点→波长：420→点击加入→点击下一步
【标准曲线】→类型：多点→定量法：固定波长→WL1：WL420.0→单位：mg/l→参数选择吸收值（A）=f（浓度）→曲线次数：1次→点击下一步
【测定参数（标准）】→选择仪器→样品重复：1→选择：无→点击下一步
【测定参数（样品）】→选择仪器→样品重复：1→选择：无→点击下一步
【文件属性】→文件名点击…→D盘分光光度计文件夹→点击打开→点击完成→点击关闭→点击到波长：420→点击确定
3、放入两个空白样→点击“自动调零”按钮→取出外侧空白样
4、填充标准表绘制标准曲线：放入标准样品1→样品ID：标样1→浓度；***→WL420.0
点击“读取Std”按钮→取出标准样品1→放入标准样品2→样品ID：标样2→浓度；***→WL420.0点击“读取Std”按钮→取出标准样品2→放入标准样品3→样品ID：标样3→浓度；***→WL420.0点击“读取Std”按钮→取出标准样品3
5、建立样品表：放入待测样品1→样品ID：样品1→选择浓度→点击“读取Unk”按钮会
出现其浓度值和吸光度值→记录数据，测试完毕→取出待测样品和空白样。
6、关机顺序：点击“断开”按钮→关闭UVProbe 2.33软件→关闭分光光度计仪器开关→关
闭计算机。
分光光度计的使用方法
分光光度计的使用方法一、准备工作1.检查仪器：确保分光光度计处于正常工作状态，检查是否有损坏或故障。
2.准备试剂：根据实验需要，准备好所需的试剂溶液或样品。
二、进样1.打开仪器：打开分光光度计电源，并按照仪器说明书进行启动和预热。
2.选择光程：根据样品的吸收强度选择适当的光程，一般来说，如果样品浓度较高，可选择较短的光程，反之则选择较长的光程。
3.选择波长：根据实验需要选择适当的波长。
一般情况下，可根据物质的吸收峰选择最大吸收光的波长。
4.进样：将试剂溶液或待测样品倒入透明的样品池中，注意不要溢出或弄脏边缘。
三、调零1.调节零位：根据仪器说明书调节零位，通常为调整样品池为空极或将样品池填满纯溶剂。
确保读数为零或接近零。
2.稳定仪器：根据仪器要求等待一段时间，使仪器系统稳定。
四、测量样品1.设置参比：根据需要选择一个参考物质，可以是纯溶剂或者与待测样品相似的物质，通过与参考物质的比较，可以减少溶液浑浊、杂质等因素对测量结果的影响。
2.读取数据：进行光度值的测量。
读取数据的方法有两种：直接读取和保存数据。
直接读取：先置于比色池中参比物，调节至零位，再将样液置入比色池中，测量吸收度，读取显示屏上的数值。
保存数据：通过设置保存模式，将测量数据保存到仪器的内存中，后期可以通过导出功能将数据导出到计算机或者其他设备中进行分析和处理。
五、数据处理1.曲线绘制：若需要进一步分析和比较各组数据，可以根据测得的吸光度数据绘制吸光度-浓度曲线。
2.数据分析：根据实验需要进行吸光度数据的定量或定性分析，例如计算样品的浓度、比较各组数据等。
3.定量测定：根据标准曲线或者已知吸光度和浓度的关系，计算样品的浓度。
六、使用注意事项1.操作规范：按照仪器操作说明进行操作，避免操作失误。
2.避免污染：保持样品池的清洁，避免样品残留对后续测量的影响。
3.避免干扰：仪器放置在稳定的平台上，避免机械振动对测量结果的影响。
4.选择适当的波长：根据样品的物理、化学性质选择适当的波长进行测量。
分光光度计的使用方法
D、测定有色溶液吸光度时，一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量误差。
F、在实际分析工作中，通常根据溶液浓度的不同，选用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2-0.7。
分光光度计使用方法
1、操作方法
（1）预热仪器
为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。
（2）选定波长
根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。
（3）固定灵敏度档
根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
（6）测定
轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后，打开比色皿暗箱盖。
（7）关机
实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
分光光度计使用方法
2、注意事项：
（1）为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。
（4）调节“0”点
轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）。
（5）调节T=100%
将盛蒸馏水（或空白溶液或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=100%，即表头指针恰好指在T=100%处。
（2）比色皿的使用方法：
分光光度计的操作与注意事项
分光光度计的操作与注意事项
一、操作程序
1.1将仪器的电源开关接通，仪器预热约20分钟。
打开比色皿暗箱盖，选择需用的单色波
长，按“0”电位器使显示“0”，然后将比色皿暗箱盖合上，比色皿座处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，按“100%”电位器使显示“100”。
1.2预热后，按1.1连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可以进行测定工作。
1.3如果大辐度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，钨灯在急剧改变亮
度后需要一段热平衡时间，当指针稳定后重新调整“0”和“100%”即可工作。
二、注意事项
2.1为确保仪器稳定工作，电压波动较大的地方，220V电源要预先稳压。
2.2 仪器要接地良好。
2.3 仪器底部有两只干燥剂筒，应保持其干燥性，发现变色立即换新的或加以烘干再用。
2.4 当仪器停止使用后，应将另两包硅胶放在比色皿暗箱内，也应刻定期烘干。
2.5 当仪器停止工作时，必须切断电源，开关放在“关”。
2.6 为了避免仪器积灰和玷污，在停止工作时间内，再用塑料套子罩住整个仪器，在套子内
应放数袋防潮硅胶。
2.7 仪器工作几日或搬动后，要检查波长精确性等方面，以确保仪器的使用和测定的精确。
分光光度计的使用方法
分光光度计的使用方法主体内容：1．使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。
以及各个操作旋钮之功能。
在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。
通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。
仪器在使用前先检查一下，放大器暗盒的硅胶干燥筒(在仪器的左侧)，如受潮变色，应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶，烘干后再用。
2．将灵敏度旋钮调置“ 1档”(放大倍率最小)。
3．开启电源，指示灯亮，选择开关置于“ T，”波长调至测试用波长。
仪器预热20 分钟。
4．打开试样室盖(光门自动关闭)，调节“ 0旋”钮，使数字显示为“ 00.0，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“ 100%旋”钮，使数字显示为“ 100.0。
”5．如果显示不到“ 100.0，”则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能置低倍率档使用，这样仪器将有更高的稳定性。
但改变倍率后必须按(4)重新校正“0和”“ 100%。
”6．预热后，按(4)连续几次调整“ 0和”“100%，”仪器即可进行测定工作。
7．吸光度 A 的测量按(4)调整仪器的“ 00.0和”“100%，”将选择开关置于“A，”调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000，”然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
8．浓度 C 的测量：选择开关由“A旋”置“C，”将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。
9．如果大幅度改变测试波长时，在调整“ 0和”“ 100%后”稍等片刻，（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“0和”“100%”即可工作。
10．每台仪器所配套的比色皿，不能与其它仪器上的比色皿单个调换。
11．本仪器数字表后盖，有信号输出0～1000MV，插座1脚为正，2脚为负接地线。
分光光度计的使用
100.0 BLA
100% T
（5）重复（验证）（ ）、（4）两步，直至透 ）重复（验证）（3）、（ ）两步， ）（ ）、（ 射比为 0.000 和 100% 不变。 不变。 按“MODE”键至“ABSORBANCE”灯亮（此 键至“ 灯亮（ 键至 灯亮 时转换到测吸光度功能上）。 时转换到测吸光度功能上）。
将手柄向操作者方向再拉出一档（听到“咔嚓” 将手柄向操作者方向再拉出一档（听到“咔嚓” 一声），此时被测（ ），此时被测 溶液进入光路。 一声），此时被测（1 号）溶液进入光路。 此时仪器所显示的数值即为 1 号被测溶液的吸光 度值（记录下来）。 度值（记录下来）。
0.186 - 0.000
再拉出一档， 再拉出一档，仪器所显示的数值为 2 号溶液的吸 光度值。 光度值。 将 1、2 号吸收池换装入 3 、4 号溶液（黑体 、 号溶液（ 号参比溶液不动）， ），然后同法测定各溶液的 和 0 号参比溶液不动），然后同法测定各溶液的 吸光度、并一一记录下来，记录格式如下表。 吸光度、并一一记录下来，记录格式如下表。
×.××× ×××
4
4.00
×.××× ×××
5
5.00
×.××× ×××
6
未知
×.××× ×××
五、标准曲线（图） 标准曲线（ 六、从标准曲线上查得的 ρ(F =××× m ⋅ L e) g
−1
50 −1 e) g 七、原试液的 ρ(F = ρ查得× = ××× m ⋅ L 5
八、思考题
2号 透 光 窗 1号 0号 遮光 黑体 通过手柄将池架推到头， 通过手柄将池架推到头， 此时黑体对着入射光。 此时黑体对着入射光。
然后盖上盖子。 然后盖上盖子。
（3）调节投射比为 0.000 ）
分光光度计的使用方法以及注意事项
分光光度计的使用方法以及注意事项使用方法：1.准备样品：将需要测量的溶液或物质准备好，确保它是均匀的并无悬浮物质。
如果必要，可以通过过滤或离心的方式去除悬浮物。
2.校准仪器：打开分光光度计并进行校准。
这可以通过校准溶剂或标准物质进行，从而获得正确的基准值。
3.设置光程：根据实验目的，选择合适的光程。
光程是指光通过样品的距离，通常以毫米为单位。
4.设置波长：选择想要测量的波长。
分光光度计可以在可见光至紫外光范围内进行测量，根据样品需要选择适当的波长。
5.测量样品：将样品放置在光程区域，并将光源通过样品。
记录下通过样品的光的强度数据，可以使用显示器或计算机进行记录。
6.分析数据：使用测量得到的数据进行进一步的分析。
可以根据数据计算出物质的浓度或进行光谱扫描。
注意事项：1.保持仪器干净：分光光度计是非常精密的仪器，所以需要保持它的干净和整洁。
使用柔软的纸巾或净化棉轻轻擦拭仪器的外表，并避免使用粉尘较多的环境中进行操作。
2.维护波长校准：定期校准分光光度计的波长，以保证测量结果的准确度。
校准可以使用标准物质或校准溶剂进行，按照仪器操作手册中的方法进行校准。
3.避免反射和散射：在测量样品时，避免外部光源的反射和样品本身的散射对结果产生干扰。
可以使用黑色容器或覆盖物来最小化这些干扰。
4.注意样品浓度：在测量样品时，确保样品的浓度在仪器量程内。
如果样品过于稀释或过于浓缩，可能会导致无法准确测量或出现非线性响应。
5.光程保持稳定：对于相同的实验，保持相同的光程以保证结果的可比性。
使用恒温仪器或室温范围内进行测量可以避免由于温度变化引起的光程变化。
分光光度计使用原理及操作方法
分光光度计使用原理及操作方法分光光度计使用原理及操作方法1. 使用原理分光光度计是一种用于测量溶液中吸光度的仪器。
其工作原理基于比尔－朗伯定律，即溶液中的吸光度与溶液中的物质浓度成正比关系。
分光光度计通过以下步骤来测量溶液的吸光度：1. 光源：分光光度计使用可见光、紫外光或红外光作为光源。
光源发出的光通过狭缝变窄并通过一系列的光学元件（如棱镜、电离室等）来保证光的稳定性和光谱的选择性。
2. 光的分离和选择：进入分光光度计的光线经过棱镜或光栅的分光作用，使不同波长的光分别出射，形成一个连续的光谱。
在测量特定波长的光时，分光光度计会旋转光栅或调节棱镜角度，使得待测波长的光通过。
3. 透射和吸收：分光光度计将选定波长的光通过样品溶液，样品溶液吸收部分光能，使得透射光的强度减弱。
4. 探测和记录：透射光通过光电探测器，其产生的电流经过放大并转换成可读数值。
这个数值与溶液的吸光度成正比，反映了溶液中物质的浓度。
2. 操作方法以下是使用分光光度计的一般操作方法：1. 打开仪器电源，并等待一段时间使其预热。
2. 调节仪器上的波长选择器，选择所需测量波长。
3. 调零：用空白试剂（即纯溶剂）进行初始测量。
将空白试剂放入光化池中，并按下测量按钮。
4. 采样：取得待测样品溶液，将其转移到光化池中。
5. 测量：按下测量按钮，分光光度计将测量样品溶液的吸光度。
6. 记录结果：将读取到的吸光度数值记录下来，并按需进行进一步计算或分析。
7. 清洗：使用纯溶剂清洗光化池和光学元件，以避免样品交叉污染。
请注意，具体的操作方法可能因不同品牌和型号的分光光度计而有所不同。
在使用仪器前，请务必参考仪器的使用手册，以获取准确的操作指南。
荧光分光光度计操作步骤
荧光分光光度计操作步骤荧光分光光度计是一种用于分析化学荧光光谱的仪器。
它能够测量物质在特定激发波长下的荧光发射光谱，并可对荧光强度进行定量测量。
其操作步骤如下：一、仪器检查步骤1. 仪器打开：先将仪器上的电源打开。
打开久了需要30秒的时间，在此期间，显示界面上应该看到一行高亮的文字，“Warming up”，说明仪器正在升温，不要操作仪器，待升温结束后进行操作。
步骤2. 清洁：待升温结束后，检查仪器是否有灰尘，如有，应用精细纤维布将荧光分光光度计的探头进行清理。
步骤3. 稳固水平：检查仪器是否水平，如不水平，请调整仪器位置，确保仪器稳固水平。
二、準备工作步骤1. 真空：将样品、荧光探针、所用电极等全部准备妥当，在开始操作前，应首先开启荧光分光光度计上的真空泵，让仪器完全真空，否则将导致读数不太正。
步骤2. 取得标准曲线：按照实验的要求取得标准曲线。
标准曲线可以测定出样品浓度与荧光强度之间的关系，用于后续分析测量。
三、参数设置步骤1. 激发波长与发射波长：根据荧光产生物的性质，分别设置荧光激发波长和测量荧光发射波长。
这两个参数是荧光分光光度计测量荧光的关键参数之一。
步骤2. 光强度：设置荧光激发光强度与荧光发射光强度。
荧光分光光度计使用激发光束与测量光束。
光强度参数设置直接影响荧光测量的灵敏度。
若荧光发射信号偏低，需增加激发光束和测量光束的光强度，并重新调节参数。
四、样品检测步骤1. 加样：准备好测量的样品，按照实验操作要求将样品加入荧光探针中。
同时将电极接入到样品，以确保仪器能够顺利读取信号。
步骤2. 调节波长：根据实验要求测量荧光信号，依照实验操作步骤逐渐调节荧光分光光度计上的荧光探头的激发波长和发射波长。
逐渐改变荧光激发波长和荧光发射波长，寻找到荧光信号最大的点，并记录下相应的值。
步骤3. 进行测量：找到荧光信号最大的波长后，可以将荧光光度计上的样品罩盖，开始正式测量，记录下样品的荧光信号强度。
紫外分光光度计使用说明
紫外分光光度计使用说明1.准备工作：a.校准：首先需对光度计进行校准，根据厂家说明书操作，保证测量结果的准确性。
b.清洁：检查光度计光源、样品室和光栅等部分是否干净，并在需要时清洁它们，避免污染样品。
2.打开紫外分光光度计电源开关，并等待光度计进行自检。
a.按照使用手册上的操作步骤，打开光度计电源开关。
b.光度计将开始进行自检，等待自检完毕。
3.设置基线：a. 点击或转动前面板上的“Baseline”按钮或旋钮，以将光度计调整到基线模式。
b.将基础吸光度设置为零，通过将样品室中的“空白”溶液或透明盖玻片放入样品室中，调节光度计操作界面上的参数。
4.设定波长和扫描速度：a. 在光度计操作界面上，输入所需的波长（nm）。
b.选择适当的扫描速度以适应样品的待测范围，确保测量结果有足够的准确性。
一般来说，扫描速度设置在中等档位。
5.放入样品：a.打开样品室盖，并将待测的样品放入样品室。
b.关闭样品室盖，确保样品在光度计操作过程中不受外界光线干扰。
6.测量：a. 点击或转动前面板上的“Measure”按钮或旋钮，以开始测量。
b.光度计将通过测量样品吸光度或透射率，输出测量结果。
7.数据分析与记录：a.根据实验需求，选择合适的数据处理软件。
b.使用该软件将测量结果转化为所需的吸光度或透射率数据，并进行计算、分析和记录。
8.清洗与保养：a.在每次使用结束后，及时清洗样品室，避免样品残留导致的污染。
b.定期检查和清洁光源和光栅部分，以确保光度计正常工作。
9.注意事项：a.避免直接触摸光栅和其他光学元件，以免损坏。
b.对于不同波长的测量，需要更换合适的光栅或滤光片。
c.避免样品蒸发和光源老化等因素产生的测量误差。
总之，紫外分光光度计使用简单方便，但在使用过程中需要小心谨慎，避免对仪器造成损害。
合理设置测量参数，正确处理数据，对结果进行分析和解释，将会得到准确可靠的实验结果。
如何正确使用分光光度计简答
如何正确使用分光光度计简答一、引言分光光度计是一种常用的实验室仪器，用于测量溶液中化合物的吸光度，从而推断化合物的浓度或反应的进程。
正确使用分光光度计对实验结果的准确性至关重要。
本文将介绍如何正确使用分光光度计的步骤和注意事项。
二、步骤1. 准备实验样品：根据实验要求，准备好所需的溶液样品。
确保样品的浓度和体积都符合实验要求。
2. 打开分光光度计：按照仪器的操作手册或标贴上的指示，打开分光光度计的电源开关。
等待一段时间，使仪器预热。
3. 设置波长：根据实验需要，设置适当的波长。
可以通过旋转波长选择盘或通过数码显示屏进行设置。
4. 校准仪器：使用标准溶液进行仪器校准。
校准的目的是确保分光光度计的读数准确。
校准方法可以根据仪器的型号和使用说明进行操作。
5. 清洁比色皿：使用去离子水和无尘纸轻轻擦拭比色皿，确保其表面干净无杂质。
6. 取得基准值：使用去离子水进行基准值的测量。
将去离子水注入比色皿中，然后放入分光光度计，记录下基准值。
7. 测量样品吸光度：将样品注入比色皿中，确保比色皿完全填满。
然后将比色皿放入分光光度计，读取吸光度值。
8. 记录实验数据：将实验数据记录在实验笔记本中，包括样品的吸光度值和波长。
9. 清洗比色皿：在测量完一个样品后，及时清洗比色皿，以免污染下一个样品。
10. 处理数据：根据实验要求，对测得的吸光度数据进行处理，例如绘制吸光度-波长曲线或计算样品浓度。
三、注意事项1. 使用时要小心，避免与仪器发生碰撞，以免损坏仪器。
2. 操作前要仔细阅读仪器的使用说明书，了解仪器的性能和使用方法。
3. 注意比色皿的清洁度，避免杂质对实验结果的影响。
4. 操作时要注意避免手指直接接触比色皿，以免留下指纹或污染样品。
5. 测量样品时，确保比色皿完全填满，避免气泡产生。
6. 校准仪器的频率要根据实验要求而定，通常建议每天或每次实验开始前都进行一次校准。
7. 实验结束后要及时关闭分光光度计的电源，以免浪费电能。
分光光度计使用方法
分光光度计使用方法分光光度计是一种用于测量溶液中物质浓度或溶液中特定物质含量的仪器，它利用光的吸收特性来进行测量。
在实验室中，分光光度计被广泛应用于化学、生物、环境等领域。
下面将介绍分光光度计的使用方法，希望能对您有所帮助。
1. 准备工作。
在使用分光光度计之前，首先要进行仪器的准备工作。
确保仪器处于正常工作状态，检查光源、光栅、检测器等部件是否完好。
同时，还需要校准仪器，以确保测量结果的准确性。
2. 样品处理。
在进行光度测量之前，需要对待测样品进行处理。
通常情况下，样品需要进行稀释或者过滤，以确保测量结果的准确性。
另外，还需要注意避免气泡的产生，因为气泡会影响光的透过性，从而影响测量结果。
3. 设置参数。
在进行光度测量之前，需要根据样品的特性来设置分光光度计的参数。
包括选择合适的波长、设定光程、调整灵敏度等。
这些参数的设置将直接影响到测量结果的准确性，因此需要认真对待。
4. 测量操作。
当准备工作完成并且参数设置好之后，就可以进行光度测量操作了。
将样品装入光度计的样品室中，关闭样品室，并启动仪器进行测量。
在测量过程中，需要确保仪器的稳定性，避免外界因素对测量结果的影响。
5. 数据处理。
测量完成后，得到的数据需要进行处理和分析。
根据实际情况选择合适的数据处理方法，比如绘制标准曲线、计算浓度等。
同时，还需要对测量结果进行验证，确保数据的准确性和可靠性。
6. 仪器维护。
在使用分光光度计之后，需要对仪器进行及时的清洁和维护工作。
清洁仪器表面和样品室，保持仪器的整洁和干净。
另外，还需要定期对仪器进行维护和保养，延长仪器的使用寿命。
总结。
分光光度计是一种非常重要的实验仪器，它在科研和实验室工作中扮演着重要的角色。
正确的使用方法和维护保养对于保证测量结果的准确性至关重要。
希望通过本文的介绍，能够帮助您更好地掌握分光光度计的使用方法，提高实验工作的效率和准确性。
分光光度计的操作方法
分光光度计的操作方法
1.准备工作：
-打开光源开关，预热分光光度计，一般需要预热10-15分钟。
-将分光光度计的光程调节控制旋钮调至最小位置。
-准备样品溶液。
2.调零：
-提前调零是为了保证准确测量样品的吸光度值。
将纯溶剂（作为空白）倒入比色皿中，将比色皿放置于分光光度计的样品槽中。
-打开分光光度计，调节光程旋钮，直到显示屏的数值稳定在0附近。
-可选择"调零"按钮进行自动调零。
3.设置波长：
-根据需要的波长，选择合适的滤光片或进入光纤。
-打开分光光度计，使用波长调节旋钮设置所需的波长。
波长调节旋
钮上通常有独立的目录盘，可直接选择波长。
-调节波长时，观察光束的响应，当显示屏上的数值稳定后即可。
4.测量样品吸光度：
-将样品溶液倒入比色皿，并将其放入样品槽中。
-关闭样品槽盖，并调节光程旋钮，直到显示屏上的数值稳定。
-将样品槽中的溶液吸光度读数记录下来，这个数值即为样品的吸光度。
-执行上述操作之前，最好将比色皿和样品槽进行清洁和干燥，以避
免外界因素对读数的干扰。
5.计算结果：
-根据测得的吸光度值，结合吸光度对应的摩尔吸光度，使用贝尔-朗
伯定律计算物质的浓度。
6.注意事项：
-在操作前注意检查仪器的光源是否正常，是否需要更换滤光片。
-避免直接用手触摸比色皿，以免污染样品。
-在进行波长选择时，应避免过多的频繁操作，以维持仪器的稳定性。
-操作完成后，及时关闭分光光度计，将光程旋钮调至最小位置。
紫外可见分光光度计的操作和使用
紫外可见分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、药物等领域的实验仪器，它可以用来测量样品对紫外和可见光的吸收情况，从而得到样品的吸光度和浓度等重要参数。
在科研实验室和生产现场中，紫外可见分光光度计的操作和使用技巧非常重要，正确的操作可以确保实验结果的准确性和可靠性。
下面将介绍紫外可见分光光度计的操作和使用方法：一、准备工作1.1 样品的制备：首先要准备好需要测量的样品，确保样品的制备符合实验要求，并且样品溶液的浓度和透明度在光度计测量范围内。
1.2 仪器的准备：打开紫外可见分光光度计的电源，将仪器预热至稳定的工作温度，同时检查仪器的灯泡和光栅等部件是否正常。
二、测量操作2.1 校准仪器：在进行测量之前，必须对仪器进行校准，保证测量结果的准确性。
2.2 装样品：将样品溶液分别加入光度计的比色皿或石英比色皿中，注意不要留下气泡或杂质。
2.3 设定参数：根据样品的特性和测量要求，设定光度计的波长、光程和测量范围等参数。
2.4 测量数据：开始测量之后，观察样品的吸光度变化曲线，并记录下稳定的吸光度数值。
三、数据处理3.1 计算浓度：根据测得的吸光度数值，使用比色法或标样法计算出样品的浓度。
3.2 分析结果：根据测得的数据，分析样品的吸收特性和浓度变化规律，得出实验结论。
四、仪器维护4.1 清洁保养：每次使用完毕后，要及时清洁光度计的仪器和光学部件，确保仪器的稳定性和精度。
4.2 故障排除：如果在使用过程中发现仪器出现故障或异常，及时进行故障排除和维修处理。
五、注意事项5.1 防止污染：在操作过程中要注意避免样品污染或交叉污染，确保测量结果的准确性。
5.2 安全操作：使用化学药品和致癌物质时，要做好个人防护，避免对身体造成伤害。
通过以上对紫外可见分光光度计的操作和使用方法的介绍，相信大家对这一实验仪器有了更加深入的了解。
正确的操作和使用方法可以帮助科研人员和实验人员获得准确可靠的实验数据，为科学研究和生产实践提供有力支持。
分光光度计的操作规程
分光光度计的操作规程
《分光光度计操作规程》
一、目的：
为了正确、安全地操作分光光度计，保证实验数据的准确性和可靠性。
二、操作步骤：
1. 打开分光光度计电源，并预热30分钟。
2. 打开分光光度计软件，进行系统自检，并调整仪器为待测物质的最佳波长。
3. 调整仪器的光谱扫描参数，包括扫描范围、扫描速度等。
4. 使用洁净的玻璃仪器盖，将待测溶液倒入比色皿中，放入分光光度计样品舱。
5. 调节光路长度，使得样品舱内的溶液透光度最大。
6. 在软件中启动光谱扫描，记录扫描结果。
7. 将待测溶液倒出，用纯水清洗比色皿和样品舱，然后用吸水纸吸干。
8. 关闭分光光度计软件，关闭仪器电源，清洁并整理工作台面。
三、注意事项：
1. 操作人员必须穿戴实验服和实验手套，避免对待测溶液的污染。
2. 切勿将溶液倒入分光光度计内部，防止对仪器造成损坏。
3. 操作过程中要注意光谱扫描的速度和范围，避免错过待测物质的吸收峰。
4. 定期对分光光度计进行维护保养，保证仪器的稳定性和准
确性。
四、总结：
分光光度计是一种精密的仪器，操作规程的严格执行可以确
保实验数据的准确性和可靠性。
操作人员应严格按照规程进行操作，同时定期对仪器进行维护保养，以保证其长期稳定运行。
分光光度计的使用操作
分光光度计的使用操作
使用分光光度计进行测量的基本操作包括以下几个步骤：
1. 准备工作：确保分光光度计处于正常工作状态，检查光源、接收器、滤光片等部件是否正常，若有需要则进行调整或更换。
2. 校零操作：将分光光度计调零，使得光度计读数为零。
一般情况下，先关闭光源，然后将空白试样放入仪器并调整至零点读数。
3. 设置波长：根据需要进行波长调整，选择合适的波长。
通常，可根据样品的特性确定适当的波长。
4. 放入样品：将待测样品放入分光光度计的样品室中，确保样品与测量器件充分接触，防止遮光等干扰。
5. 读取光度：打开光源，并开始测量。
根据设备的使用说明，可在显示屏上读取相应的光强度或透过率数值。
6. 记录和分析结果：根据测量结果，记录光强度或透过率数值，并根据需要进行数据分析和处理。
7. 清洁和保养：使用完毕后，注意清洁分光光度计的各个部件，尤其是样品室，以免污染下一次测量。
需要注意的是，不同型号的分光光度计可能有一些差异，因此
在使用前最好先参考设备的相关操作说明书或咨询专业人士了解具体的操作步骤。
分光光度计 操作规程
分光光度计操作规程
《分光光度计操作规程》
一、仪器准备
1. 将分光光度计放置在水平台面上，并确认仪器处于稳定状态。
2. 打开仪器电源，等待仪器进行自检和初始化。
二、样品处理
1. 准备样品溶液，并确保样品溶液清澈透明，没有悬浮物或沉淀。
2. 将样品溶液装入样品池中，并用无色透明玻璃片轻轻覆盖在样品池上。
三、设置光度计参数
1. 根据样品溶液的特性选择合适的检测波长，并将光度计波长设置为该值。
2. 设置光度计的扫描速度和数据采集间隔。
3. 进行基准校准，确保零点和百分比透射率的校准值准确无误。
四、测量样品
1. 双击“开始扫描”按钮，开始测量样品。
2. 在测量过程中，确保仪器周围环境无干扰。
3. 测量完成后，保存数据并进行必要的数据处理。
五、清洁与维护
1. 使用无纤维的软布轻轻擦拭光度计表面。
2. 定期对光度计进行校准和验证，确保仪器的准确性和稳定性。
3. 关闭仪器电源，清理工作台面并将仪器放置在干燥通风的地方。
以上就是《分光光度计操作规程》，希望能够帮助用户正确操作和维护分光光度计，保证测量准确性和仪器稳定性。
分光光度计使用方法
最佳答案1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。
2.将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。
）3.根据所需波长转动波长选择钮。
4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。
5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。
6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。
7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净分光光度计使用的外部环境要求分光光度计属于精密仪器，应当妥善保管和精心维护，这样才能保证分光光度计长期使用、长期的稳定可靠、测量精度高。
元析公司在多年的生产和应用的过程中，得到了一套在一定环境下维护分光光度计的经验，具体如下：1、环境温度在条件容许的情况下，尽量保持在15-30摄氏度之间，这样能保持电器件稳定工作，不易老化，使分光光度计不易损坏，灯源的使用寿命得到延长。
若条件不容许，在高温的情况下，缩短开机时间，高效使用分光光度计，使电器件不要长期保持在高温下。
在低温下，使预热时间比常温下的预热时间要长，这样能保证在仪器稳定的情况下进行测试。
2、环境湿度在条件容许的情况下，尽量保持在60%以下，这样能保证光度计内部的光学件和电器件不易受潮、腐蚀、和上霉。
若条件不容许，在高湿度和低湿度的情况尽量保持通风。
3、环境在条件容许的情况下尽量保持洁净，打扫环境时动作不宜太大，不要扬起灰尘，打扫之前用防尘罩盖上分光光度计，不要让灰尘进入分光光度计内部。
以上仅就仪器使用的外部环境作了描述，以供使用用户参考。
分光光度计的使用分光光度计的应用常识分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。
常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。
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（二）原子吸收分光光度法
1．基本原理 2．组成 3．原子吸收分光光度法的特点
（三）荧光光度分析法
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（三）偏离Lambert-Beer定律的因素 应用Lambert-Beer定律产生误差主要来源于光学 和化学两方面的因素。
1．光学因素：
要求入射光是单色光。入射光的谱带越宽，其误差越大。 2．化学因素：
浓度、pH、溶剂和温度等因素可影响化学平衡。
9
二、分光光度计的基本结构
最常用的是可见分光光度计和紫外-可见光分光光度计
A = KLC
（Lambert-Beer定律适用于可见光、紫外光、红外光和均匀非散射的液体。）
式中A为吸光度；K为比例常数，称为吸光系数；L为溶液 层厚度，称为光径；C为溶液浓度
7
据Lambert-Beer定律，当液层厚度为 cm，浓度单位为mol/L时，吸光系数K称为 摩尔吸光系数(ε)。ε的意义是：当液层 厚度为1cm，物质浓度为1mol/L时在特定波 长下的吸光度值。ε是物质的特征性常数。
17
制作和应用标准曲线时应注意下面几点：
（1）测定条件发生变化时（如更换标准品和试剂等），应重新 绘制。 （2）标准品应有高的纯度，标准液的配制应准确。 （3）当待测液吸光度ห้องสมุดไป่ตู้过线性范围时，应将标本稀释后再测定。 （4）标本测定的条件应和标准曲线制作时的条件完全一致。
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2．比较法
己知浓度的标准品和标本作同样处理，使用相同的空白， 同时测定标准管和标本的吸光度，根据测定的吸光度及标准 品浓度，可直接计算出标本的浓度，计算公式为：
第五章
常用生物化学检验技术
1
本章内容概要
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 光谱分析技术 电化学分析 电泳技术 层析技术 离心技术 自动生化分析技术
只讲第一节，其它内容在《临床检验 仪器学》中讲授。
2
教学目标和要求
1、掌握分光光度技术的基本原理及定性和定量方法。 2、熟悉分光光度计的的基本结构和操作方法光源检查 和波长校正、原子分光光度计的类型和影响荧光分析的 因素
3、了解其他光谱分析技术的基本原理及在生化检验中 的应用。
3
第一节
光谱分析技术
分光光度技术的基本原理 分光光度计的基本结构 分光光度计的操作方法
分光光度技术的定性和定量方法
4
光谱分析技术原理：
利用各种化学物质都具有发射、吸收或散射光谱谱系的特 征，以此来确定物质性质、结构或含量。
光谱分析技术分类：
发射光谱分析技术：火焰光度法、原子发射光谱法和荧光光谱法 吸收光谱分析技术：紫外、可见光分光光度法，原子吸收分光光
度法和红外光谱法
散射光谱分析技术：比浊法
5
一、分光光度技术的基本原理
（一）吸光度与透光度
当光线通过均匀、透明的溶液时可出现三种情况：一部分 光被散射，一部份光被吸收，另有一部分光透过溶液。设入射 光强度为I0，透射光强度为I，I和I0之比称为透光度，即：
T = I/I0
T×100为T%称为百分透光度。透光度的负对数称为吸光度 即：
A = -lgT = -lgI/I0 = lgI0/I
6
（二）Lambert-Beer定律
Lambert-Beer定律是讨论溶液吸光度同溶液浓度和溶液层 厚度之间关系的基本定律，该定律是分光分析的理论基础。其 表达式为：
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（二）吸光度的校正
铬酸钾的标准液可用于校正分光光度计的吸 光度。在25℃，将4mg铬酸钾溶于100ml的 0.05mol/L KOH中，放入比色池中，在不同波长 下测定吸光度值，与己知的标准吸光度校正表进 行比较，可检测仪器吸光度的准确度。
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四、分光光度技术的定性和定量方法
（一）分光光度技术的定性方法
定性依据： 最大吸收波长λmax和摩尔吸光系数ε 1.最大吸收波长λmax方法
2.摩尔消光系数ε方法
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（二）分光光度技术的定量方法
1.标准曲线法
方法：
根据Lambert-Beer定律，液体的浓度在一定范 围内与吸光度成正比关系。配制一系列浓度的标准 品溶液（浓度应包含高、中、低浓度范围），按标 本处理方法作相同处理，在特定波长下测定吸光度， 以标准液浓度为横座标，以吸光度为纵座标，按最 小二乘法的原理，将对应各点连成一条通过原点的 直线，这条直线称为标准曲线。待测溶液测定吸光 度后，从标准曲线上可查出其相应的浓度。
结构： 五大部份
光源
单色器
比色杯
检测器
显示器
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（一）光源 光源定义：
指一种可以发射出供溶液或吸收物质选择性吸收的光。光 源应在一定光谱区域内发射出连续光谱，并有足够的强度和良 好的稳定性，在整个光谱区域内光的强度不应随波长有明显的 变化。
光源种类：
可见光分光光度计常用光源是钨灯或卤钨灯。 紫外光光度计常用氢灯作为光源。
（五）显示器
是将光电管或光电倍增管放大的电流通过仪表显示出来的 13 装置。
三、分光光度计的操作方法
（一）分光光度计的基本操作 以721-A型分光光度计为例，其基本的操作步骤为：
1.开721-A分光光度计的开关，将比色池的盖子打开，通电20分钟使仪器预热。 2.将波长旋至测定的波长。 3.将空白液、校准液或待测液放入比色池，将空白液置于光路中。 4.将开关置于T位，打开比色池盖子，用光量粗调和光量细调调节T为0.0,关上 比色池盖子，调节T为100.0。 5.将开关置于A，用消光调零调节A为0.0 6.重复步骤4和5 7.将校准液或待测液推入光路，测量溶液的吸光度（A）
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（二）单色器 定义： 将来自光源的复合光分散为单色光的装置称为分 光系统或单色器。 种类：
滤光片
棱镜
光栅
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（三）比色杯
又称为吸收池或比色皿
材料： 常用无色透明、耐腐蚀和耐酸碱的玻璃或石英材料做成
（四）检测器
检测器是将透过溶液的光信号转换为电信号，并将电信号 放大的装置。常用的检测器为光电管和光电倍增管。
Cu=(Au×Cs)/As
其中Cu和Au为标本管浓度和吸光度，Cs和As分别为标准 管浓度和吸光度。用标准品法定量时，标准品的浓度应尽量 和标本管浓度相近。
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3．其它分析方法
包括差示法、多组份混合物分析和利用 摩尔吸光系数分析等方法。
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五、其它光谱分析技术
（一）火焰光度法
1．基本原理 2．组成