龙凤竹愈伤组织诱导及再分化的试验
中国水仙花器官愈伤组织诱导、分化及组织学观察
的花 梗 和花 药 培 养 基 中 添 加 不 同 浓 度 ６ ． 苄 基腺 嘌 呤 （ ６ － Ｂ Ａ） 、 硫酸腺瞟呤 （ Ａ ｄ ） 、 萘 乙酸 （ Ｎ Ａ Ａ） 和 ２， ４ － 二 氯 苯 氧 乙 酸
（ ２ ， ４ 一 Ｄ） ， 筛选 出愈伤组织诱导及鳞茎芽再生 的最适 培养 基配方。结果表 明 ： 花梗 愈伤组织 诱导及鳞茎 芽分化 的最 佳 培养 基为 ＭＳ＋１ ｇ・ Ｌ —Ｎ ａ Ｈ ２ Ｐ Ｏ ４＋ ０ ． ０ ０ ３ ｇ・ ＬＩ １ ６ － Ｂ Ａ ＋０ ． ０ ０ １ ｇ・ ＬＩ １ Ｎ Ａ Ａ＋ ０ ． ２ ｇ・ ＬＩ １ Ａ ｄ＋３ ０ ｇ・ Ｌ Ｉ １ 蔗糖 ，
Ｃａ ｌ ｌ ｕ ｓ Ｉ ｎｄ ｕｃ ｔ ｉ ｏ ｎ，Ｄｉ ｆｅ ｒ ｅ ｎｔ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｈｉ ｓ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ Ｏｂｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｎａ ｒ ｃ ｉ ｓ ｓ ｕ ｓ ｔ ａ ｚ ｅ ｔ ｔ ａ ｖ ａ ｒ ．ｃ ｈｉ ｎｅ ｎ ｓ ｉ ｓ Ｆｌ ｏ ｒ ａ ｌ Ｏｒ ｇ ａ ｎｓ
花药愈伤组织诱导及鳞茎芽分化 的最佳培养基 为 ＭＳ＋ ０ ． ０ ０ ２ ｇ・ Ｌ ６ － Ｂ Ａ＋ ０ ． ０ ０ １ ｇ・ Ｌ Ｎ Ａ Ａ＋３ ０ ｇ・ Ｌ 蔗糖 ； 花
梗 愈伤组织诱导到鳞茎芽分化的时间需要 ３ ０～ ３ ５ ｄ ， 而花药这一 过程 为 ８ ０～ ９ ０ ｄ 。对花梗 愈伤组织诱 导及鳞 茎
一种竹节诱导愈伤组织再生植株的方法[发明专利]
![一种竹节诱导愈伤组织再生植株的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/65e6009df46527d3240ce0f7.png)
专利名称：一种竹节诱导愈伤组织再生植株的方法专利类型：发明专利
发明人：杨海芸,王洁
申请号：CN202011114363.X
申请日：20201019
公开号：CN112189562A
公开日：
20210108
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种竹节诱导愈伤组织再生植株的方法，属于植物组织培养技术领域。
本发明将消毒的试管苗切取长度0.1～8cm带芽竹节为外植体，接种至含1～3mg/L2,4‑D的MS培养基上诱导培养，得到愈伤组织；将愈伤组织接种至增殖培养基上增殖培养，得到的颗粒致密的愈伤组织接种至含0.5～2mg/L6‑BA、2～4mg/LKT、1mg/LZT、0.5～1mg/LTDZ的MS培养基上分化培养，得到再生苗。
本发明通过对植物生长调节物质筛选、竹节大小位置、培养周期等优化筛选，促进竹节愈伤组织诱导与分化体系，建立高效再生体系，为建立花叶矢竹转基因技术体系、定向改良培育新竹种提供技术支撑。
申请人：浙江农林大学
地址：311300 浙江省杭州市临安区武肃街666号
国籍：CN
代理机构：北京高沃律师事务所
代理人：薛红凡
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植物愈伤组织培养以及再分化实验原理及步骤
实验二十植物愈伤组织培养以及再分化实验目的了解培养基母液的配制方法和注意事项；掌握培养基的配制和灭菌方法，掌握植物组织培养的一般方法实验原理（一）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，因此在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
这个概念虽然在本世纪初已经提出，但在当时的技术条件下，在实践上并没做到，经过几十年来组织培养技术的不断改进，目前细胞的全能性不但在理论上完全被证实，而且为组织培养在实践上的应用奠定了基础。
植物细胞要表现出全能性，须经过几个步骤：成熟细胞→分生细胞→胚状体→完整植株。
成熟细胞→愈伤组织→出根出芽→完整植株。
脱分化也就是已经分化定型的细胞，经过诱导成为重新恢复了分裂能力（也就是成为分生状态）细胞的过程。
不但植物体细胞可以表现全能性，花粉在培养条件下也可能进行脱分化，通过愈伤组织或胚状体发育成单倍体植株。
诱导细胞的脱分化，需要许多外界条件。
任何一个分化的细胞都具有保持分生组织状态的潜势，不过它平常处于受抑制的状态，消除抑制作用就可以使细胞恢复分裂。
在各种外界条件中，外源激素对脱分化起重要作用。
有些植物的外植体仅需加入生长素（IAA"吲哚乙酸"，NAA"萘乙酸"，2，4-D）即可诱导细胞的分裂与生长，如菊苣；有的仅需加入加细胞激动素类，如大豆、萝卜；另一类需加生长素和细胞激动素类，如烟草髓、胡萝卜、马铃薯；还有一类不需加任何激素，如冠瘿组织，烟草肿瘤组织。
（二）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织（meristemoid）即具有分生能较往年小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。
有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
所以器官发生有两种方式，即直接和间接的。
（1）外植体→器官发生（根、芽或胚状体）→再生植株。
（2）外植体→愈伤组织→类分生组织→根、芽→再生植株。
甘草愈伤组织的诱导与再分化研究
ｈｔｔｐ：／／ｈｌｊｎｙｋｘ．ｈａａｓｅｐ．ｃｎ ＤＯＩ：１０．１１９４２／ｊ．ｉｓｓｎ１００２２７６７．２０２１．０８．００７９
吕 晴 ，张 东 向 ，刘 丽 杰 ，等 ．甘 草 愈 伤 组 织 的 诱 导 与 再 分 化 研 究 ［Ｊ］．黑 龙 江 农 业 科 学 ，２０２１（８）：７９８４．
１ 材 料 与 方 法
１．１ 材 料 经 专 家 鉴 定 为 当 年 生 甘 草 （犌犾狔犮狌狉狉犻犺犻狕犪
狌狉犪犾犲狀狊犻狊Ｆｉｓｃｈ．）的干燥成熟种子，保存于４ ℃冰 箱中。
６苄 氨 基 嘌 呤 （６ＢＡ），分 析 纯 ，天 津 光 复 化 工 厂 ；０．１％ 升 汞 ，北 京 化 工 厂 ；吲 哚３乙 酸（ＩＡＡ），分 析纯，辽宁 瑞 泉 试 剂 有 限 公 司；吲 哚 丁 酸 （ＩＢＡ）， 分 析 纯 ，辽 宁 瑞 泉 试 剂 有 限 公 司 ；激 动 素 （ＫＴ），分 析 纯 ，上 海 四 联 化 工 厂 。
药用植物决明的愈伤组织诱导与生长增值的培养条件研究
药用植物决明的愈伤组织诱导与生长增值的培养条件研究王镨;宋家祥;付群英
【期刊名称】《中草药》
【年(卷),期】1997(28)12
【摘要】本实验成功地以决明的胚轴、子叶诱导出愈伤组织。
实验表明，MS比B5更利于愈伤组织诱导。
正交试验表明，添加1mg／L的IAA、6－BA、GA3可明显促进愈伤组织的生长；添加1mg／L的NAA、2，4－D可抑制其生长；添加1mg／L的6－BA、2，4－D对抑制愈伤组织的分化有明显的效应。
适合愈伤组织生长及维持分化率低水平的蔗糖浓度为2％～3％。
愈伤组织的诱导及生长周期为30d左右。
【总页数】4页(P739-742)
【关键词】药用作物;决明;愈伤组织;组织培养
【作者】王镨;宋家祥;付群英
【作者单位】浙江工业大学轻工系
【正文语种】中文
【中图分类】S567.219
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余龙江;栗茂腾
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4.培养条件对双荚决明愈伤组织诱导的影响 [J], 刘正兰;冯秋平
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竹子愈伤组织培养与植株再生
竹子愈伤组织培养与植株再生
阙国宁;诸葛强
【期刊名称】《竹子研究汇刊》
【年(卷),期】1991(010)004
【摘要】一、概况:竹子为我国南方最重要的经济植物,它以其种类繁多,分布广泛而著称于世。
关于竹子组织培养研究,在国外仅印度、泰国等少数国家开展,其培养方法基本属于促进节芽萌生的微繁殖体系。
在我国,关于竹子组培尚未见有报导,特别是通过愈伤组织培养从中产生具胚性细胞分化成再生植株,这对于目前正在进行的竹子单细胞液体悬浮培养以及进而分离具高活力原生质体等方面研究都具有极其重要的参考价值。
【总页数】2页(P79-80)
【作者】阙国宁;诸葛强
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S795.04
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半夏愈伤组织诱导和分化再生植株的研究
半夏愈伤组织诱导和分化再生植株的研究
和凤美;朱永平
【期刊名称】《现代农业科技》
【年(卷),期】2010(000)004
【摘要】研究半夏外植体愈伤组织诱导、放置方式、外植体的苗龄对分化再生植株的影响,结果表明:块茎的愈伤组织诱导效果最佳,叶片次之,叶柄最差.当MS+6-BA 2mg/L+2,4-D 2mg/L激素组配时,愈伤组织分化率达100%.外植体的放置方式对分化出苗有很大影响,块茎垂直放置出芽率最高,而叶柄和叶片平放于培养基效果较好.无菌苗苗龄对分化率有较大的影响,最适无菌苗苗龄为10～25d.当6-BA为3mg/L时芽增殖倍数达4倍左右,而当6-BA0.2mg/L+2,4-D0.2mg/L组配时,生根效果最好.
【总页数】3页(P136-137,141)
【作者】和凤美;朱永平
【作者单位】云南农业大学园林园艺学院,云南昆明,650201;云南农业大学农学与生物技术学院
【正文语种】中文
【中图分类】S567.239
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5.半夏愈伤组织的诱导和植株再生的研究 [J], 苏新
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实验-愈伤组织的分裂与分化
愈伤组织的分裂与分化实验目的：1、探索植物细胞的全能性2、了解愈伤组织细胞分化的各时期的特点3、愈伤组织培养在植物栽培的意义实验仪器：超净台、酒精灯、镊子、小刀、烧杯实验药品：MS培养基、实验取材：烟草生长部1cm左右，外植体保留一片苗叶（位于侧枝，新叶处）实验步骤：1、MS培养基的配置（1）配置大量元素A液和B液（2）配置微量元素（3）配置铁盐溶液（4）配置有机溶液（5）取大量元素100g/ml，微量元素10g/ml，铁盐溶液10g/ml，有机溶液10g/ml，KT （0.5mg/ml）0.4ml，IBA(0.5mg/ml)0.8ml，脯氨酸500mg，谷氨酰胺500mg，水解络蛋白300mg，蔗糖3%，琼脂0.8%，调节PH=5.82、MS培养基的消毒放于高压蒸汽锅中，灭菌1.5h之后，每瓶摇匀之后，放于24℃的恒温培养室。
静置2d之后，观察培养基上有无杂菌的生成。
如无，继续实验，如有，则重做培养基3、外植体的选择烟草生长部1cm左右，外植体保留一片苗叶（位于侧枝，新叶处）4、外植体的消毒（1）用洗涤剂清洗外植体，再蒸馏水洗涤之后，擦干（2）在超净台上，用75%的酒精溶液洗涤之后，再擦干，之后在2%的次氯酸钠中浸泡5s，蒸馏水冲洗10次，用无菌滤纸吸干。
之后用小刀切取生理形状较好的叶片于灭菌的MS培养基中（一瓶放置1-2个）5、观察有无被污染在24℃的恒温培养室中暗处理2d之后，观察有无杂菌生成。
6、对照观察将生理状况相似的愈伤组织分成2组。
一组光照，一组黑暗。
保证环境的其他的物理性质相同，处理1周之后，观察2组培养物的再分化情况。
7、得出结论。
孝顺竹愈伤组织诱导及植株再生
孝顺竹愈伤组织诱导及植株再生袁金玲;顾小平;李潞滨;岳晋军;姚娜;郭广平【期刊名称】《林业科学》【年(卷),期】2009(045)003【摘要】利用孝顺竹小穗和种胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织并成功实现植株再生.对影响愈伤组织诱导和分化的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选,结果表明:愈伤组织诱导以NB,N6基本培养基附加4 mg·L-1 2,4-D较好;外植体在NB+500 mg·L-1脯氨酸+500 mg·L-1谷氨酰胺+300 mg·L-1水解酪蛋白+30 g·L-1蔗塘+8 g·L-1卡拉胶(Carrageenan)+4 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上经20 d培养,小穗愈伤组织诱导率达87.30%,种胚愈伤组织诱导率为76.27%.愈伤组织预分化及分化的基本培养基以MS较适宜,经MS+30 g·L-1蔗糖+10 g·L-1卡拉胶+4 mg·L-1 KT培养基预分化7 d后,转入无激素的MS培养基上分化14 d,小穗愈伤组织仅个别长出绿色芽头;但种胚愈伤组织芽分化率可达80.0%.分化芽中有8%左右的白化苗,并伴有花叶苗出现.优化后的种胚愈伤组织预分化最佳培养基是MS+3 mg·L-1 6-BA+3 mg·L-1 KT.分化芽苗在添加2mg·L-1 NAA的MS培养基上生根良好,移栽成活率可达70%以上.【总页数】6页(P35-39,插2)【作者】袁金玲;顾小平;李潞滨;岳晋军;姚娜;郭广平【作者单位】中国林业科学研究院亚热带林业研究所,富阳,311400;中国林业科学研究院亚热带林业研究所,富阳,311400;中国林业科学研究院林业研究所,国家林业局林木培育重点实验室,北京,100091;中国林业科学研究院亚热带林业研究所,富阳,311400;中国林业科学研究院林业研究所,国家林业局林木培育重点实验室,北京,100091;中国林业科学研究院亚热带林业研究所,富阳,311400【正文语种】中文【中图分类】S718.46;Q943.1【相关文献】1.富贵竹的愈伤组织诱导与植株再生试验研究 [J], 范昭鹤2.四川竹根姜胚性愈伤组织诱导和植株再生 [J], 郭英华;张振贤;关秋竹3.金丝慈竹愈伤组织培养及植株再生研究 [J], 吴涛;卢娟娟;丁雨龙4.矮牵牛梅林愈伤组织诱导与植株再生 [J], 张洁;郑益平;杨成龙;林觅;林智敏5.红花烟草叶片愈伤组织诱导与植株再生 [J], 董行健;余宗波因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
半夏愈伤组织诱导和分化再生植株的研究
半夏愈伤组织诱导和分化再生植株的研究摘要研究半夏外植体愈伤组织诱导、放置方式、外植体的苗龄对分化再生植株的影响,结果表明:块茎的愈伤组织诱导效果最佳,叶片次之,叶柄最差。
当MS+6-BA 2mg/L+2,4-D 2mg/L激素组配时,愈伤组织分化率达100%。
外植体的放置方式对分化出苗有很大影响,块茎垂直放置出芽率最高,而叶柄和叶片平放于培养基效果较好。
无菌苗苗龄对分化率有较大的影响,最适无菌苗苗龄为10~25d。
当6-BA为3mg/L时芽增殖倍数达4倍左右,而当6-BA 0.2mg/L+2,4-D 0.2mg/L组配时,生根效果最好。
关键词半夏;组织培养;分化再生;愈伤组织StudiesonCallusInductionandPlantletsRegenerationofPinelliaternataHE Feng-mei1ZHU Yong-ping2(1College of Horticulture and Landscape,Yunnan Agricultural University,Kunming Yunnan 650201; 2College of Agriculture and Biotechnology,Yunnan Agricultural University)AbstractThe effect of callus induction,orientation and age of explants on plantlets regeneration of Pinellia ternata was studied.Results showed that tuber had the best ability in callus induction which was followed by leaf and petiole.The combination of MS+6-BA 2mg/L+2,4-D 2mg/L was optimized for differentiation of callus with differentiation frequency up to 100%.There were significant effect of explants orientation on optimum seedling differentiation in which the tuber vertically,and leaf and petiole horizontally placed on medium. Explants harvested from 10 to 25-day-old in vitro shots were significantly better than others in regeneration. The optimum hormone for bud proliferation was MS+6-BA 3mg/L and proliferation multiple of buds achieved 4 times.The combination of MS+6-BA 0.2mg/L+2,4-D 0.2mg/L was optimized for rooting.Key wordsPinellia ternata;tissue culture;preparation and regeneration;callus半夏(Pinelliae ternata)为天南星科多年生草本植物,药用历史悠久,其地下块茎干燥炮制后入药,具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结之功效[1]。
富贵竹的愈伤组织诱导与植株再生试验研究
富贵竹的愈伤组织诱导与植株再生试验研究摘要以富贵竹茎段为外植体诱导腋芽，再以腋芽诱导愈伤组织，最后进行分化及植株再生，筛选出各阶段的最适培养基，即腋芽萌生为MS+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.1mg/L，愈伤组织诱导和植株再生均为MS+6-BA 3.0mg/L＋NAA 0.3mg/L。
关键词富贵竹；组织培养；愈伤组织；植株再生；培养基富贵竹广泛分布于亚洲热带地区，我国南方各地广泛栽植。
其叶尖长，富有竹韵，柔美而坚韧，清雅而高贵；叶色墨绿有革质，光泽锃亮，叶柄基部抱茎、互生、全缘，茎杆笔直挺拔，常作盆栽供室内摆设，又可剪取茎株插瓶用清水养育作瓶花观赏，也可将剥除叶片后的茎干剪成枝条进行催芽做成外围低中心高3～18层的鸿运宝塔摆设于厅室内，还可作高级艺术插花素材，具有较高的观赏价值。
富贵竹的适应性极强，容易养护管理，极耐阴，常温下只要供给足够的水分，就可正常生长。
富贵竹的繁殖为扦插繁殖，繁殖速度5～7倍，很难满足产业化生产对种苗的需求(需种苗33万株/hm2)。
通过组织培养途径诱导腋芽萌发，进而诱导愈伤组织和植株再生，为富贵竹的繁殖提供了一条新的途径。
1材料与方法1.1供试材料富贵竹的茎段、顶芽、腋芽。
1.2各阶段采用的培养基1.2.1腋芽诱导。
外植体不同部位诱导腋芽萌生能力强弱所用培养基：①6-BA 6mg/L+NAA 0.1mg/L。
中下部茎断诱导腋芽萌生的培养基：②6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L；③6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L；④6-BA 2.5mg/L+NAA 0.1 mg/L；⑤6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L；⑥6-BA 4.0mg/L+NAA 0.1mg/L；⑦6-BA 5.0mg/L+NAA 0.1mg/L；⑧6-BA 6.0 mg/L+NAA 0.1mg/L；⑨6-BA 7.0mg/L+NAA0.1mg/L；⑩6-BA 9.0mg/L+NAA 0.1mg/L。
龙凤竹的组织培养
Ｔｉｓ ｕ ｔ ｅ ｏ ｄ ｌｎｔ ｓｔｔｙ ａ ｏｄｅ ａ ． ｎ ｓｕｅ ｃ ｌｕｒ ｆＰｅ ｉ ａ ｈｕ ｉ ｍ ｌ ｉ ｓｖ ｒ ｈ ａｎｕ ＧＵ ｕ－ｅ ｓ Ｆ ｇ ｎ，Ｓ ＵＮ ｎ － ａ Ｂｉｇ ｙ ｏ，ＣＨＥＮ ｉｑ ｎ Ｒｕ － ｉ ｇ
ｕ ｉｇｓｅ ｆ ｄｌｎｈ ｓｔｈ ｍａｏｄ ｓ（ ． ｏｔ ａ．ｎ ｎ ￥Ｄｒｓｌｒａ ｘ ｌｎｓ ｈ ｅｕｔ ｓ ｏ ｓ ｔｍｓｏ ｉ ｔｕ ｉ ｙ ｌｉｅ Ｌ ）Ｐ ｉ ｎ Ｐｅ ａ ｔ ．ｖ ｒ ａ ｕ ｅｓｅ ｓｅ ｐａ ｔ．Ｔ ｅｒｓ ｌ ｈ ｗ ｓ
ｔ ａ ｈ ｐ ｉ ｌｓｅｉｉａ ｉｎ ｈ ｔｔ ｅ ｏ ｔｍａ ｔｒｌｚ ｔｏ ｍｅｈ ｄ ｏ ｔ ｍ ｓ ｇ ｎ ｓｏ ｔ ｏ ｆｓｅ ｅ ｍｅ ｔ ｆＰ．ｔｔ ｙ ｉｈ ｍａｌｉ ｅ ａ ． ｎ ｎ ｓｉ ｏ ｋ ｎ ｎ １ ０ ｏ ｄ ｓｖ ｒ ａ ｕ Ｓｓ ａ ｉ ｇ ｉ ． ｇ・Ｌ～ Ｈｇ ，ｓ ｌ ｔ ｎ ｆ ｒ４—１ ｎ ｈ ｅ ｏ ｔ ｌｍｅ ｉ ｍ ｆｃ ｌｕ ｎ ｕ ｔ ｎ ｉ ｄ ｕ ｃ ｎ ａｎ ｎ Ｃ１ ｏ ｕ ｉ ｏ ｏ ０ ｍｉ ．Ｔ ｐ ｉ ｄ ｕ ｏ ａｌ ｓｉ ｄ ｃ ｉ ＳＭＳ ｍｅ ｉ ｍ ｏ ｔｉ ｉ ｇ ｍａ ｏ １ ５ ｍｇ・Ｌ一 ． ６一 ＢＡ， ０．１ 一０． ５ ｍｇ ・Ｌ一 ＮＡＡ， ３ ・Ｌ～ Ｏ １ ０ｇ ｓ ｃ ｏ ｅ ｎ ・Ｌ ｕ ｒ ｓ ａ ｄ ６ ｇ ａ ａ ｐｏ ｅ ｇｒ ｗｄ ｒ
龙凤竹的组织培养
龙凤竹的组织培养顾福根;孙丙耀;陈瑞卿【期刊名称】《植物资源与环境学报》【年(卷),期】2008(17)3【摘要】以龙凤竹[Pedilanthus tithymaloides(L.)Poit. var. nanus Dressler]茎段为外植体,研究了龙凤竹愈伤组织诱导、植株再生以及试管苗继代保存培养的培养条件.结果表明,龙凤竹茎段灭菌的最佳方法是用1.0 g·L-1 HgCl2处理4～10 min;愈伤组织诱导与分化的最佳培养基为添加1.5 mg·L-1 6-BA和0.10～0.15 mg·L-1 NAA的MS培养基(含有30 g·L-1蔗糖和6 g·L-1琼脂粉,pH 5.78～pH 5.80);试管苗生根的最佳培养基为含有0.2mg·L-1 NAA的生根培养基(1/2 MS,含有15 g·L-1蔗糖和6 g·L-1琼脂粉,pH 5.78～pH 5.80),试管苗生根率可以达到93.3%;经过炼苗并移栽后,龙凤竹试管苗的成活率可达95.0%以上;龙凤竹试管苗的最佳继代保存培养条件为:在含有0.1 mg·L-1 NAA的牛根培养基中,于温度15℃、光照强度20 μmol·m-2·s-1的条件下继代保存.此外,龙风竹愈伤组织可以直接分化产生大量丛生芽,达到龙凤竹试管苗增殖的目的.【总页数】5页(P73-77)【作者】顾福根;孙丙耀;陈瑞卿【作者单位】苏州大学生命科学学院,江苏,苏州,215123;苏州大学生命科学学院,江苏,苏州,215123;苏州大学生命科学学院,江苏,苏州,215123【正文语种】中文【中图分类】S682.304+3;Q943.1【相关文献】1.药用植物短蕊万寿竹的组织培养研究 [J], 王一诺;秦双双;黄宝优;韦莹;李翠;韦坤华2.龙凤竹愈伤组织再分化方法的优化 [J], 袁云香3.龙凤竹愈伤组织诱导及再分化的试验 [J], 袁云香4.慈竹组织培养消毒方法筛选及丛芽诱导研究 [J], 王曙光;丁雨龙;林树燕;唐国建5.基于文献计量分析的竹组织培养研究进展 [J], 李雪梅;吕丹丹;张文根;陈天国;杨光耀因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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doi ：10．3969/j．issn．1000－8101．2013．01．030龙凤竹愈伤组织诱导及再分化的试验袁云香（渭南师范学院化学与生命科学学院，陕西渭南714000）摘要：以龙凤竹茎段为外植体，采用不同培养基进行愈伤组织诱导试验。
将获得的龙凤竹愈伤组织转入再分化培养基中，采用正交设计实验，添加不同浓度6－BA 、NAA 和蔗糖，组成9种不同的再生植株分化培养基，对龙凤竹愈伤组织进行再分化培养。
结果表明:NMB 为最适的基本培养基;诱导培养基中添加6－BA 1mg /L +NAA 0．1mg /L 时，有利于龙凤竹愈伤组织形成，诱导率达86．67%;再分化率最高的培养基配方为NMB +6－BA 2．0mg /L +NAA 0．2mg /L +5%蔗糖。
关键词：龙凤竹;组织培养;愈伤组织;再分化Experiment on callus induction and redifferentiation of Pedilanthus tithymaloides var．nanus ∥YUANYun-xiangAbstract ：The stems of Pedilanthus tithymaloides var．nanus were taken as explant and induced callus formation．The dif-ferent culture media ，the proportion of different plant hormone were investigated．To add different concentration 6－BA and NAA to the medium composed of 9different plant regeneration medium by orthogonal design L 9（34）were investigated．The results showed that the suitable media NMB was in favor of the induction ，the induction medium added 1mg /L 6－BA and 0．1mg /L NAA was beneficial to the callus induction．The suitable regeneration medium was NMB containing 2．0mg /L 6－BA ，0．2mg /L NAA and 5%sucrose ，it could improve obviously the frequency of regenerated shoots．Key words ：Pedilanthus tithymaloides var．nanus ；tissue culture ；callus ；redifferentiationAuthor ’s address ：College of Chemistry and Life Science ，Weinan Teachers University ，Weinan 714000，Shaanxi ，China收稿日期：2012－08－28修回日期：2012－10－29基金项目：陕西省教育厅项目（编号：12JK0832）；陕西省教育厅项目（编号：09JK434）；国家自然科学基金项目（编号：31000410）。
作者简介：袁云香（1980－），女，讲师，主要从事植物分子遗传学研究工作。
E-mail ：yuanyunxiang2006@126．com 龙凤竹（Pedilanthus tithymaloides var．nanus ）为大戟科红雀珊瑚属红雀珊瑚的变种之一，植株小巧玲珑、通体绿色、茎肉质、叶排成两列、株型极为美观，其栽培育种技术已受到人们的高度重视。
目前，关于其他变种的多肉多浆花卉的引种栽培研究已有报道，例如红雀珊瑚、玉麒麟、非洲霸王树等品种的栽培技术较为成功。
由于龙凤竹种苗资源有限，常规的繁殖方法耗时长、难以满足市场需求［1］。
因此，组织培养技术已成为龙凤竹快速繁殖的重要途径。
在组织培养过程中，不同培养基、不同植物生长调节剂种类以及同一种植物生长调节剂的不同浓度都会影响龙凤竹愈伤组织植株的再生。
因此，开展不同植物生长调节剂对龙凤竹愈伤组织植株再生的影响研究，有利于筛选出一种高效快速的龙凤竹愈伤组织植株再生方法，为龙凤竹的规模化生产研究奠定良好基础。
1材料与方法1．1试验材料以渭南市花鸟市场购买的龙凤竹当年生枝条的嫩茎为试验材料。
1．2试验方法1．2．1龙凤竹愈伤组织的诱导剪取龙凤竹当年生枝条的新嫩枝，放入烧杯中，加入适量洗衣粉，在自来水下冲洗约2h 后，再用蒸馏水冲洗5min ，于超净工作台内，先用75%酒精处理15s ，再用0．1%升汞处理8min ，然后用无菌水冲洗5 6次，切成约0．5 1．0cm 的茎段作外植体，接种于诱导培养基上进行培养。
诱导培养基基本成分为N 6、MS 、NMB 、NB 。
其中：（1）NMB 为N 6大量元素+MS 微量元素+B5有机元素；（2）NB 为N 6大量元素+B5微量元素及有机元素。
4种基本培养基均添加脯氨酸500mg /L +水解酪蛋白300mg /L +6－BA 1．0mg /L +NAA 0．1mg /L +蔗糖3%+0．7%琼脂，pH 5．8（单位下同）。
培养条件为24 26ħ光照培养，光照强度为1500 2000lx 、每天光照时间12h 。
21d 后统计诱导率，并观察愈伤组织诱导及生长状态。
每个试验重复3次。
1．2．2龙凤竹愈伤组织的再分化诱导培养21d后，将结构致密、浅绿色愈伤组织小心切下，分别接种于不同的再分化培养基上。
每瓶接种5块愈伤组织，培养温度（25ʃ1）ħ、光照强度为1500 2000lx、每天光照时间13h。
分化培养基的筛选采用正交设计L9（33）［6］，设置3个因素分别为6－BA，NAA，蔗糖，每个因素设置3个水平数。
6－BA的浓度分别为1．0、2．0、3．0mg/L；NAA的浓度分别为0．1、0．2、0．5mg/L；蔗糖的浓度分别为3%、4%、5%（表1）。
接种40d后统计再分化率。
表1龙凤竹愈伤组织再分化的因素与水平水平因素（A）6－BA/（mg·L－1）（B）NAA/（mg·L－1）（C）蔗糖/%11．00．1322．00．2433．00．552结果与分析2．1不同培养基对龙凤竹愈伤组织诱导的影响龙凤竹茎段培养10d左右就能在茎的上端开始看到愈伤组织，质地致密，颜色淡绿（图1）。
20d左右茎的上端全部愈伤组织化。
从表2可以看出，NMB 培养基愈伤组织诱导率最高，达100%，N6最低为86．7%。
NMB培养基和N6比较，高出23．3%。
培养基的营养成份，对愈伤组织的诱导极为重要。
营养成份愈丰富，诱导率也相应较高。
表2不同基本培养基对龙凤竹愈伤组织诱导率的影响基本培养基外植体数诱导率/%愈伤组织质地N63086．7ʃ1．25结构较致密，淡绿色MS3093．3ʃ2．07结构较致密，浅绿色NMB30100．0ʃ1．80结构致密，深绿色NB3096．7ʃ3．12结构致密，浅绿色注：出愈率=（产生愈伤组织外植体块数/接种的外植体数）ˑ100% 2．2不同因素对龙凤竹愈伤组织再分化的影响在按照正交设计的L9（33）龙凤竹愈伤组织再分化培养基中，龙凤竹愈伤组织都能不同程度地分化出再生苗（表3）。
从表3直观分析得出，适宜再分化的培养基为NMB+6－BA2．0mg/L+NAA0．2mg/L+ 5%蔗糖，影响因素最大为6－BA，其次为NAA，最小为蔗糖。
通过方差分析可以看出，6－BA各水平间的差异有统计学意义，而且差异极显著，而NAA和蔗糖各水平间的差异不显著（表4）。
在龙凤竹愈伤组织再分化过程中，不添加NAA和蔗糖对再分化率影响不大。
用再分化培养基NMB+6－BA2．0mg/L+ NAA0．2mg/L+5%蔗糖进行龙凤竹愈伤组织再分化培养确认试验，在再分化培养35d后进行统计，再分化率可达到86%左右，再生苗生长正常（图2）。
因此，可以确定龙凤竹愈伤组织再分化培养基为NMB+6－BA2．0mg/L+NAA0．2mg/L+5%蔗糖。
表3龙凤竹愈伤组织再分化的正交试验结果试验号A B C再分化/% 111152212248313342421284522386623178731364832158933254T1142200188T2248192186T3176174192x1476763x2836462x3595864R3692注：再分化率=（分化的愈伤组织块数/接种的愈伤组织块数）ˑ100%。
表4再分化培养正交试验结果的方差分析方差来源自由度平方和均方F值p值6－BA20．19530．0976313．85710．0032NAA20．01180．005919．00000．0500蔗糖20．00120．00061．85710．3500误差20．00060．0003总和80．2089图1愈伤组织诱导图2愈伤组织再分化3讨论龙凤竹为红雀珊瑚属红雀珊瑚的变种之一，是近年从国外引进的一种常绿草本植物［1］。
广泛用于盆栽供欣赏，或庭园种植作绿篱。
目前园艺生产上多采用分株及扦插繁殖［2－3］，但繁殖系数小，市场供不应求。
因其具有极高的观赏价值，其组织培养前人已有研究［4－6］。
不同培养基及植物生长调节剂是影响愈伤组织再分化的关键性因素。
朱至清等研制的N6培养基广泛适用于粳稻，M8、B5培养基适用于籼稻。
在培养基中添加或修改营养成份可不同程度提高水稻愈伤组织诱导和再生率［7－8］。
本实验研究显示NMB为最适基本培养基，最适的诱导激素组合为6－BA1．0mg/L+NAA0．1mg/L，再分化率最高的组合为6－BA2．0mg/L+NAA0．2mg/L。
本实验在获得龙凤竹大量愈伤组织的基础上，再进行龙凤竹愈伤组织再分化，而不是在诱导愈伤组织的同时直接就进行芽的诱导，这种方法可以获得更多的愈伤组织进行再分化培养基的优化，也有利于获得更多的龙凤竹再生植株，也可进行龙凤竹的遗传育种研究。
参考文献［1］顾福根，孙丙耀，陈瑞卿．龙凤竹的组织培养［J］．植物资源与环境学报，2008，17（3）：73－77．［2］艾金才，周苏岚．红雀珊瑚扦插一法［J］．中国花卉盆景，2005（11）：21．［3］何平，李元良，陈建雄，等．三种多肉多浆花卉的引种与栽培［J］．西南园艺，2006，34（2）：47－48，53．［4］周维燕．红雀珊瑚茎尖再生植株［J］．植物生理学通讯，1986（1）：39．［5］施和平，何含杰．斑叶红雀珊瑚叶片组织培养和植株再生［J］．亚热带植物科学，2004，33（4）：64，68．［6］龙明华，覃海明．银边红雀珊瑚快速繁殖研究［J］．广西科学，1996，3（1）：53－55．［7］朱至清，王敬驹，孙敬三，等．通过氮源比较试验建立一种较好的水稻花药培养基［J］．中国水稻科学，1975（5）：484－490．［8］朱根发，余毓君．水稻愈伤组织状态的调控［J］．华中农业大学学报，1995，14（3）：213－219．(责任编辑史洁葛华忠)。