光学显微镜的构造和使用
光学显微镜的结构、使用及保养
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光学显微镜的结构、使用及保养光学显微镜是一种光学仪器,用于放大微小物体的图像。
它的结构由光源、物镜、目镜、准直镜、台架和调焦机构等组成。
光学显微镜的结构主要包括以下几个部分:1. 光源:光学显微镜一般使用白炽灯或者LED灯作为光源,通过透明物体上方的准直镜照射样品,使其被照亮。
2. 物镜:物镜是光学显微镜最重要的组成部分之一,它位于样品下方,负责放大样品的图像。
物镜通常有多个镜片组成,其放大倍数一般在4倍至100倍之间。
3. 目镜:目镜是光学显微镜的另一重要组成部分,位于物镜的上方。
目镜的主要作用是进一步放大物镜成像后的图像,使观察者能够清晰地观察样品。
4. 准直镜:准直镜位于光源和物镜之间,它的作用是聚焦光线,使其成为平行光线照射到样品上,提高样品的清晰度和分辨率。
5. 台架:台架是光学显微镜的支撑结构,用于固定和调整光学元件的位置。
6. 调焦机构:调焦机构是用于调节物镜和目镜之间的距离,以便观察者能够获得清晰的图像。
调焦机构通常包括粗调节和细调节两个部分,用于快速和精细调节焦距。
光学显微镜的使用:1. 开启光源:首先需要打开光源开关,确保光源正常工作。
2. 调节准直镜:通过调节准直镜,使光线成为平行光线照射到样品上。
3. 调节物镜和目镜:根据需要选择合适的物镜和目镜,然后使用调焦机构将物镜和目镜调节到合适的位置,以获得清晰的图像。
4. 放置样品:将待观察的样品放置在显微镜的样品台上,并通过调节样品台的位置使其与物镜对齐。
5. 观察样品:通过目镜观察样品,并根据需要调节焦距和光源亮度,以获得清晰的图像。
6. 记录和分析:根据需要,可以使用相机或其他设备记录观察到的图像,并进行进一步的分析和研究。
光学显微镜的保养:1. 使用后的清洁:使用完光学显微镜后,应该及时清理物镜、目镜和样品台等部件上的污渍和油渍,可以用纯净的棉纱蘸取少量酒精或者特定的清洁剂进行擦拭。
注意不要用力过大,以免损坏光学元件。
2. 防止霉菌:光学显微镜应放置在干燥通风的地方,避免受潮和发霉。
显微镜的结构和使用
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实验一普通光学显微镜的结构与使用方法一、光学显微镜的基本构造(一)机械部分1、镜筒:为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构,其上端装有目镜,下端与物镜转换器相连。
2、物镜转换器:是安装在镜筒下方的一圆盘状构造。
其上均匀分布有3~4个圆孔,用以装载不同放大倍数的物镜。
3、镜臂:为支持镜筒和镜台的弯曲状构造,是取用显微镜时握拿的部位。
在使用临时装片时,千万不要倾斜镜臂,以免液体或染液流出,污染显微镜。
4、粗/细准焦螺旋:为调节焦距的装置,位于镜臂的上端或下端。
粗准焦螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的升降,能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中,适于低倍镜观察时的调焦。
而细准焦螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度的升降(升或降的距离不易被肉眼观察到),适用于高倍镜观察,一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调焦螺旋,精细调节焦距。
5、载物台:是放置被观察的玻片标本的地方。
平台的中央有一圆孔,称为通光孔,来自下方光线经此孔照射到标本上。
在载物台上通常装有标本移动器(也称标本推进器),移动器上安装的弹簧夹可用于固定玻片标本,另外,转动与移动器相连的两个螺旋可使玻片标本前后左右地移动,这样寻找物像时较为方便。
6、镜柱:为镜臂与镜座相连的短柱。
7、镜座:位于显微镜最底部的构造,为整个显微镜的基座,用于支持和稳定镜体。
(二)光学系统部分光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置(反光镜、聚光器和光圈等)。
1、目镜:又称接目镜,安装在镜筒的上端,起着将物镜所放大的物像进一步放大的作用。
常见的有5×、10×和15×(×表示放大倍数)的目镜,可根据不同的需要选择使用,最常使用的是10×目镜。
目镜的长度与放大倍数成反比。
2、物镜:也称接物镜,安装在物镜转换器上。
常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种。
物镜的放大倍数与其工作距离成反比。
光学显微镜的结构及各部件功能
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光学显微镜的结构及各部件功能光学显微镜,这个名字听起来就很高大上,是吧?但是别担心,今天咱们就来聊聊这个神奇的玩意儿,深入浅出,让你听得懂,记得住。
显微镜就像是一位细心的侦探,能够帮助我们看到肉眼看不到的微观世界,真是个好帮手啊!那么,它到底是由哪些部分构成的,又各自有什么功能呢?走,我们一起来探探究竟!1. 光学显微镜的基本构造首先,咱们得知道,光学显微镜主要分为几个重要的部分。
首先是“光源”,这可是显微镜的心脏呢!没有它,显微镜就像个没电的手机,完全没有用。
一般来说,光源会用白炽灯或者LED灯,提供强烈而均匀的光线,让你能清晰地看到标本。
1.1 目镜然后是“目镜”。
你可能会问,目镜是干啥的?它就像是一个超级放大镜,帮助你把看到的东西放大。
通常情况下,目镜的放大倍数在10倍左右,当然也有更高的选择。
没错,它能让微小的细胞、细菌变得如此显眼,就像把小虫子放在显微镜下,瞬间就变成了巨无霸,吓死你!1.2 物镜接下来,就是“物镜”了!这个小家伙也是显微镜的灵魂之一,通常有几种不同的放大倍数可供选择,比如4倍、10倍、40倍、100倍等。
物镜就像是显微镜的“眼睛”,它负责捕捉光线,帮助你更细致地观察标本。
你知道吗?物镜的镜头上会有一些特别的涂层,能减少反射,提高成像质量,真的是妙不可言。
2. 显微镜的支架和调焦机构说完光学部分,咱们再来看看显微镜的“身体”,也就是支架和调焦机构。
这些部分虽不那么显眼,但却是支撑显微镜的基础,缺了它们,显微镜可真不能用啊!2.1 支架显微镜的支架就像一根大腿,把整个显微镜撑起来。
它的设计不仅要稳固,还要方便调节。
毕竟,在观察的时候,你可不想显微镜摇摇晃晃,让你看不清楚,简直是“没事找事”!有的显微镜甚至配备了移动平台,可以轻松调整标本的位置,省时省力。
2.2 调焦机构再说说调焦机构,它就是调节显微镜焦距的部分。
没错,你要是没调好焦,那些美丽的细胞图案就像一幅模糊的画,怎么看都不对劲。
实验一光学显微镜构造及使用
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实验一光学显微镜构造及使用光学显微镜是一种利用光的折射,放大观察微观物体的仪器。
它由物镜、目镜、光源、载玻片夹、焦距调节装置等组成。
光学显微镜的构造分为三部分:光学部分、机械部分和照明部分。
光学部分由物镜、目镜以及准直镜等组成。
物镜是显微镜的主镜头,它位于载物台下方。
目镜是用于观察显微镜的辅助镜头,位于物镜上方。
准直镜用来调整光源的光线,使之呈现平行光。
机械部分由支架、调焦机构、载物台等组成。
支架是显微镜的骨架,起支撑作用。
调焦机构用来调节物镜与载物台的距离,以获得清晰的像。
载物台是放置待观察物体的平台。
照明部分由光源及其控制装置组成。
光源是用来提供光源的设备,可以是电子光源或者自然光源。
控制装置用来调节光源的亮度和颜色,保证适宜的观察环境。
使用光学显微镜的步骤如下:1.将待观察的物体放置在载物台上,用载玻片夹固定。
2.打开光源,调节光源的亮度和颜色,使之适宜。
3.转动调焦机构,将物镜与载物台距离调节至最近,然后慢慢向上调节,直到观察到清晰的像。
4.可以通过转动目镜对焦调节,或者通过动物镜或微调透镜来调整清晰度。
5.使用准直镜来调整光源的光线,让光线呈现平行光。
使用光学显微镜时需要注意以下几点:1.使用前检查显微镜的清洁度,保证物镜和目镜的光学表面清洁。
2.注意调节物镜与载物台的距离,保持适当的焦距。
3.调节光源亮度时,避免过亮或过暗,以免损坏样品或减低观察效果。
4.使用时避免碰撞或摔落,保持显微镜的稳定性和耐用性。
光学显微镜在生物学、医学、材料科学和研究等领域起到了重要的作用。
通过光学显微镜的观察,我们能够观察到微小物体的结构和特征,为科学研究和应用提供了重要的工具。
光学显微镜的构造组成和使用步骤
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光学显微镜的构造组成和使用步骤一、光学显微镜的构造组成:1.物镜:物镜是光学显微镜的主要部分之一,它负责实际放大和对被观察物体的成像。
物镜通常由多个透镜组成,其焦距决定了物镜的放大倍数。
2.目镜:目镜位于显微镜的顶部,用于放大物镜形成的物体图像。
通常目镜的放大倍数为10倍。
3.光源:光源提供光线,使其通过被观察物体并进入显微镜系统。
常用的光源有白炽灯、荧光灯、激光等。
4.准直镜:准直镜是用来调整光源入射光线方向的装置,确保光线垂直且均匀地通过被观察物体。
5.反光镜:反光镜位于物镜与目镜之间,主要用于反射由物镜形成的物体图像。
反光镜通常倾斜45度,使得用户可以通过目镜观察到放大的物体图像。
6.调焦机构:调焦机构可实现对样品与物镜的间距调整,从而在不同位置获得清晰的图像。
7.台座:台座是显微镜系统的支撑结构,可以调整显微镜的角度和位置,以便观察者能够舒适地使用显微镜。
二、光学显微镜的使用步骤:1.准备样品:根据研究目的选择适当的样品,并对其进行必要的处理和预处理。
2.打开光源:根据需要选择适当的光源,并打开它们。
确保光源完全照亮样品。
3.调节光源:使用准直镜调节光源入射角度和强度,确保光线均匀且垂直地照射样品。
4.调节物镜:将物镜转到最低放大倍数,然后将样品放在台座上。
在显微镜的底部,找到旋钮或手柄以调整物镜的焦距。
缓慢旋转手柄,逐渐调整焦距,使样品变得清晰。
5.调节目镜:观察到清晰图像后,可以通过调节目镜来获得更大的放大倍数。
目镜通常有一个或多个调节环,通过旋转调整目镜放大倍数。
但需要注意的是,过高的放大倍数可能会降低图像的清晰度。
6.观察样品:根据需要,可以通过调整物镜和目镜的放大倍数来观察样品的不同部分和特征。
同时,观察者还可以使用调焦机构来调整物镜与样品之间的距离,以获得清晰的图像。
7.记录和分析:使用目视方法或将显微镜连接到数码相机或摄像机,记录所观察样品的图像和视频。
根据需求对图像进行分析和处理。
光学显微镜的结构和功能
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光学显微镜的结构和功能1.照明系统:光源是显微镜中的一个重要组成部分,它能够提供足够亮度的光线源以照亮样本。
常见的照明系统包括反射式和透射式两种。
反射式照明系统使用反射镜将光源产生的光线直接照射到样本上。
透射式照明系统则通过透明样本的下方通过光源照亮,使样本上的细胞组织能够反射和透射光线,从而形成图像。
2.物镜:物镜是显微镜中的一个非常重要的组成部分。
它通常由多个透镜组成,具有不同的焦距和放大倍率。
物镜接收样本反射或透射的光线,并将其放大形成一个倒立的实像。
物镜可以有不同的放大倍率,比如10X、40X、100X等,这些倍率取决于人眼能够承受的最大对焦距离和分辨率。
3.目镜:目镜是物镜和人眼之间的透镜系统,用于放大物镜形成的实像。
它通常由两个或多个透镜组成,并具有较小的放大倍率,例如10X。
目镜形成的放大倍率与物镜的倍率相乘,最终提供人眼可以看到的总体放大倍率。
4.焦平面:焦平面是光学显微镜中光线聚焦形成的平面。
当样本放置在焦平面上时,物镜能够产生一个清晰的图像。
确保样本位于焦平面上是获得清晰图像的关键。
1.放大:光学显微镜通过物镜和目镜的组合倍率,能够将样本的图像放大使其变得可见。
放大倍率取决于物镜和目镜的综合倍率。
2.分辨:光学显微镜通过控制入射光的波长,能够区分并看到样本中的细微结构。
分辨取决于入射光的波长和光学系统的性能。
3.观察和研究:光学显微镜使得研究人员能够观察和研究样本的形态、结构、组织、细胞等,从而深入了解生物学、医学、材料学等领域的细节。
4.拍摄和记录:现代光学显微镜通常配备了数码相机或摄像机,使研究人员能够拍摄和记录观察到的图像和视频。
这使得研究成果能够被更广泛地分享和分析。
总结起来,光学显微镜的结构主要由照明系统、物镜、目镜和焦平面等组成。
它的主要功能是放大、分辨、观察和研究样本,并能够拍摄和记录图像和视频。
光学显微镜在生物学、医学和材料学等领域中起着重要的作用,为人们提供了一种观察微观世界的强大工具。
光学显微镜的使用PPT课件(初中科学)
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显微镜的使用
二、对光
3.转动转换器,使低倍物 镜对准通光孔(物镜的前端 与载物台要保持5厘米的距 离)。
显微镜的使用
三、视察
4.把所要视察的玻片标本 放在 载物台上,用压片夹压 住,标本要正对通光孔的中 心。
显微镜的使用
5.转动粗准焦螺旋,使镜筒 慢慢降落,直到物镜接近玻片 标本为止(眼 睛看着物镜, 以免物镜碰到玻片标本)。
(7)调焦装置:为了得到清楚的物像,必须调 节物镜与标本之间的距离,使它与物镜的工作距 离相等。这种操作叫调焦。在镜臂两侧有粗、细 调焦螺旋各一对,旋转时可使镜筒上升或降落。 大的一对是粗准焦螺旋,调动镜筒升降距离大, 旋转一周可使镜筒移动2毫米左右。小的一对是 细焦螺旋,调动镜筒的升降距离很小,旋转一周 可使镜筒移动约0.1毫米。在用低倍物镜视察时, 使用粗调焦螺旋;用高倍物镜视察时,用细调焦 螺旋。
6.向目镜内看,同时反方向 转动粗准焦螺旋,使镜筒慢慢 上升,直 到看清物像为止。 再略微转动细准焦螺旋,使看 到的物像更加清楚。
7、换高倍物镜:如果进一步使用高倍物镜视察,应 在转换高倍物镜之前,把物像中需要放大视察的部分 移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜视察时, 视野中的物像范围缩小了很多)。如果换高倍物镜后 物像不一定很清楚,可以转动细准焦螺旋进行调节。 在转换高倍物镜并且看清物像之后,可以根据需要调 节光圈或聚光器,使光线符合要求(一般将低倍物镜 换成高倍物镜视察时,视野要稍变暗一些,所以需要 调节光线强弱)。
(8)聚光器:以调节光线。
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2、光学部分 由成像系统和照明系统组成,成像系统包 括物镜和目镜,照明系统包括反光镜和聚 光器。
1.目镜: 直插式:长度和放大倍数成反 比。 规格:5倍、10倍、16倍和40倍
光学显微镜的结构和使用方法
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光学显微镜的结构和使用方法一、结构1. 物镜(Objective lens):物镜是显微镜的主要部件之一,负责放大和聚焦样品图像。
常见的物镜有4x、10x、40x和100x等。
物镜一般采用多片式设计,使得可以通过选择不同的物镜来获得不同的放大倍数。
物镜一般安装在显微镜的转盘上,可以通过旋转转盘来更换不同的物镜。
2. 目镜(Eyepiece):目镜是显微镜的另一个主要部件,用于放大物镜成像后的图像,使得人眼可以观察到放大后的样品结构。
常见的目镜有10x、15x、20x等。
目镜一般安装在显微镜的眼镜筒上,通过调节目镜焦距,可以使得观察者的眼睛与目镜成像平面对齐。
3. 光源(Light source):光源提供光线用于照明样品。
常见的光源有白炽灯、日光灯和LED等。
光源一般安装在显微镜的镜背上,通过控制光源的亮度和方向,可以调节样品的照明条件。
4. 镜背(Illuminator):镜背是光学显微镜内部的一个小灯,负责照亮样品。
它在显微镜的光源和物镜之间,通常由凹面镜或反射镜构成。
镜背可以通过距离样品的远近调节样品接收到的光线和背景的明暗程度。
5. 调焦机构(Focusing mechanism):调焦机构用于调节物镜与样品之间的距离,从而获得清晰的图像。
常见的调焦方式有粗调和细调。
粗调一般通过调节显微镜架上的液压杠杆或滑块来实现,而细调一般通过调节显微镜架上的螺旋钮来实现。
6. 舞台(Stage):舞台是样品放置的平台,通常由金属或玻璃制成。
舞台可以通过两个方向的移动,使得样品可以在显微镜的视野中移动。
舞台上通常配有样品夹持器,可以固定样品并调整其位置。
二、使用方法1.确保显微镜和样品的整体清洁。
检查物镜和目镜是否有灰尘或污垢,并使用清洁纸或镜片清洗剂进行清理。
同时,确保样品清洁,避免阻碍观察。
2.调节光源亮度。
根据样品的需求,选择合适的亮度。
切忌过亮或过暗,以免影响清晰度。
3.放置样品。
将样品放置在舞台上,并使用夹持器固定样品。
光学显微镜的结构与使用方法
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光学显微镜的结构与使用方法目的要求1、熟悉光学显微镜的主要构造及其性能.2、掌握低倍镜及高倍镜的使用方法.3、初步掌握油镜的使用方法.4、了解光学显微镜的维护方法.实验原理光学显微镜lightmicroscope是生物科学和医学研究领域常用的仪器,它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其他有关学科的教学研究工作中有着极为广泛的用途,是研究人体及其他生物机体组织和细胞结构强有力的工具.光学显微镜简称光镜,是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器.目前使用的光镜种类繁多,外形和结构差别较大,有些类型的光镜有其特殊的用途,如暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜,倒置显微镜等,但其基本的构造和工作原理是相似的.一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成,而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件.光镜是如何使微小物体放大的呢物镜和目镜的结构虽然比较复杂,但它们的作用都是相当于一个凸透镜,由于被检标本是放在物镜下方的1~2倍焦距之间的,上方形成一倒立的放大实相,该实相正好位于目镜的下焦点焦平面之内,目镜进一步将它放大成一个虚像,通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处,在视网膜上形成一个直立的实像.显微镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相吻合的,该虚像看起来好像在离眼睛25cm处.分辨力是光镜的主要性能指示.所谓分辨力resolvingpower也称为辨率或分辨本领,是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处,能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力,即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力.据测定,人眼的分辨力约为100μm.显微镜的分辨力由物镜的分辨力决定,物镜的分辨力就是显微镜的分辨力,而目镜与显微镜的分辨力无关.光镜的分辨力RR值越小,分辨率越高可以下式计算:这里n为聚光镜与物镜之间介质的折射率空气为1、油为1.5;为标本对物镜镜口张角的半角,sin的最大值为1;为照明光源的波长白光约为0.5m.放大率或放大倍数是光镜性能的另一重要参数,一台显微镜的总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积.一、光学显微镜的基本构造及功能一机械部分1、镜筒:为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构,其上端装有目镜,下端与物镜转换器相连.根据镜筒的数目,光镜可分为单筒式或双筒式两类.单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种.而双筒式光镜的镜筒均为倾斜的.镜筒直立式光镜的目镜与物镜的中心线互成45度角,在其镜筒中装有能使光线折转45度的棱镜.2、物镜转换器:又称物镜转换盘.是安装在镜筒下方的一圆盘状构造,可以按顺时针或反时针方向自由旋转.其上均匀分布有3~4个圆孔,用以装载不同放大倍数的物镜.转动物镜转换盘可使不同的物镜到达工作位置即与光路合轴.使用时注意凭手感使所需物镜准确到位.3、镜臂:为支持镜筒和镜台的弯曲状构造,是取用显微镜时握拿的部位.镜筒直立式光镜在镜臂与其下方的镜柱之间有一倾斜关节,可使镜筒向后倾斜一定角度以方便观察,但使用时倾斜角度不应超过45度,否则显微镜则由于重心偏移容易翻倒.在使用临时装片时,千万不要倾斜镜臂,以免液体或染液流出,污染显微镜.4、调焦器:也称调焦螺旋,为调节焦距的装置,位于镜臂的上端镜筒直立式光镜或下端镜筒倾斜式光镜,分粗调螺旋大螺旋和细调螺旋小螺旋两种.粗调螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的升降,能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中,适于低倍镜观察时的调焦.而细调螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度的升降升或降的距离不易被肉眼观察到,适用于高倍镜和油镜的聚焦或观察标本的不同层次,一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调焦螺旋,精细调节焦距.有些类型的光镜,粗调螺旋和细调螺旋重合在一起,安装在镜柱的两侧.左右侧粗调螺旋的内侧有一窄环,称为粗调松紧调节轮,其功能是调节粗调螺旋的松紧度向外转偏松,向内转偏紧.另外,在左侧粗调螺旋的内侧有一粗调限位环凸柄,当用粗调螺旋调准焦距后向上推紧该柄,可使粗调螺旋限位,此时镜台不能继续上升但细调旋仍可调节.5、载物台:也称镜台,是位于物镜转换器下方的方形平台,是放置被观察的玻片标本的地方.平台的中央有一圆孔,称为通光孔,来自下方光线经此孔照射到标本上.6、镜柱:为镜臂与镜座相连的短柱.7、镜座:位于显微镜最底部的构造,为整个显微镜的基座,用于支持和稳定镜体.有的显微镜在镜座内装有照明光源等构造.二光学系统部分光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置反光镜、聚光器和光圈等.1、目镜:又称接目镜,安装在镜筒的上端,起着将物镜所放大的物像进一步放大的作用.每个目镜一般由两个透镜组成,在上下两透镜即接目透镜和会聚透镜之间安装有能决定视野大小的金属光阑——视场光阑,此光阑的位置即是物镜所放大实像的位置,故可将一小段头发粘附在光阑上作为指针,用以指示视野中的某一部分供他人观察.另外,还可在光阑的上面安装目镜测微尺.每台显微镜通常配置2~3个不同放大倍率的目镜,常见的有5×、10×和15××表示放大倍数的目镜,可根据不同的需要选择使用,最常使用的是10×目镜.2、物镜:也称接物镜,安装在物镜转换器上.每台光镜一般有3~4之个不同放大倍率的物镜,每个物镜由数片凸透镜和凹透镜组合而成,是显微镜最主要的光学部件,决定着光镜分辨力的高低.常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种.一般将8×或10×的物镜称为低倍镜而将5×以下的叫做放大镜;将40×或45×的称为高倍镜;将90×或100×的称为油镜这种镜头在使用时需浸在镜油中.在每个物镜上通常都刻有能反映其主要性能的参数,主要有放大倍数和数值孔径如10/0.25、40/0.65和100/1.25,该物镜所要求的镜筒长度和标本上的盖玻片厚度160/0.17,单位mm等,另外,在油镜上还常标有“油”或“Oil”的字样.油镜在使用时需要用香柏油或石蜡油作为介质,这是因为油镜的透镜和镜孔较小,而光线要通过载玻片和空气才能进入物镜中,玻璃与空气的折光率不同,使部分光线产生折射而损失掉,导致进入物镜的光线减少,而使视野暗淡,物像不清.在玻片标本和油镜之间填充折射率与玻璃近似的香柏油或石蜡油时玻璃、香柏油和石蜡油的折射率分别为1.52、1.51、1.46,空气为1,可减少光线的折射,增加视野亮度,提高分辨率.物镜分辨力的大小取决于物镜的数值孔径numerialaperture,N.A.,N.A.又称为镜口率,其数值越大,则表示分辨力越高.图1-3物镜的性能参数及工作距离C线为盖玻片的的上表面,10物镜的工作距离为7.63mm;40物镜的工作距离为0.198mm;10/0.25、40/0.65、100/1.25表示镜头的放大倍数和数字孔径.160/0.17表示显微镜的机械镜筒长度标本至目镜的距离和盖玻片的厚度.即镜筒长度为160mm,盖玻片厚度为0.17mm.不同的物镜有不同的工作距离.所谓工作距离是指显微镜处于工作状态焦距调好、物像清晰时,物镜最下端与盖玻片上表面之间的距离.物镜的放大倍数与其工作距离成反比.当低倍镜被调节到工作距离后,可直接转换高倍镜或油镜,只需要用细调螺旋稍加调节焦距便可见到清晰的物像,这种情况称为同高调焦.不同放大倍数的物镜也可从外形上加以区别,一般来说,物镜的长度与放大倍数成正比,低倍镜最短,油镜最长,而高倍镜的长度介于两者之间.3、聚光器:位于载物台的通光孔的下方,由聚光镜和光圈构成,其主要功能是光线集中到所要观察的标本上.聚光镜由2~3个透镜组合而成,其作用相当于一个凸透镜,可将光线汇集成束.在聚光器的左下方有一调节螺旋可使其上升或下降,从而调节光线的强弱,升高聚光器可使光线增强,反之则光线变弱.光圈也称为彩虹阑或孔径光阑,位于聚光器的下端,是一种能控制进入聚光器的光束大小的可变光阑.它由十几张金属薄片组合排列而成,其外侧有一小柄,可使光圈的孔径开大或缩小,以调节光线的强弱.在光圈的下方常装有滤光片框,可放置不同颜色的滤光片.4、反光镜:位于聚光镜的下方,可向各方向转动,能将来自不同方向的光线反射到聚光器中.反光镜有两个面,一面为平面镜,另一面为凹面镜,凹面镜有聚光作用,适于较弱光和散射光下使用,光线较强时则选用平面镜现在有些新型的光学显微镜都有自带光源,而没有反光镜;有的二者都配置.二、光学显微镜的使用方法-准备将显微镜小心地从镜箱中取出移动显微镜时应以右手握住镜壁,左手托住镜座,放置在实验台的偏左侧,以镜座的后端离实验台边缘约6~10cm为宜.首先检查显微镜的各个部件是否完整和正常.如果是镜筒直立式光镜,可使镜筒倾斜一定角度一般不应超过45度以方便观察观察临时装片时禁止倾斜镜臂.二低倍镜的使用方法1、对光:打开实验台上的工作灯如果是自带光源显微镜,这时应该打开显微镜上的电源开关,转动粗调螺旋,使镜筒略升高或使载物台下降,调节物镜转换器,使低倍镜转到工作状态即对准通光孔,当镜头完全到位时,可听到轻微的扣碰声.打开光圈并使聚光器上升到适当位置以聚光镜上端透镜平面稍低于载物台平面的高度为宜.然后用左眼向着目镜内观察注意两眼应同时睁开,同时调节反光镜的方向自带光源显微镜,调节亮度旋钮,使视野内的光线均匀、亮度适中.2、放置玻片标本:将玻片标本放置到载物台上用标本移动器上的弹簧夹固定好注意:使有盖玻片或有标本的一面朝上,然后转动标本移动器的螺旋,使需要观察的标本部位对准通光孔的中央.3、调节焦距:用眼睛从侧面注视低倍镜,同时用粗调螺旋使镜头下降或载物台上升,直至低倍镜头距玻片标本的距离小于0.6cm注意操作时必须从侧面注视镜头与玻片的距离,以避免镜头碰破玻片.然后用左眼在目镜上观察,同时用左手慢慢转动粗调螺旋使镜筒上升或使载物台下降直至视野中出现物像为止,再转动细调螺旋,使视野中的物像最清晰.如果需要观察的物像不在视野中央,甚至不在视野内,可用标本移动器前后、左右移动标本的位置,使物像进入视野并移至中央.在调焦时如果镜头与玻片标本的距离已超过了1cm还未见到物像时,应严格按上述步骤重新操作.三高倍镜的使用方法1、在使用高倍镜观察标本前,应先用低倍镜寻找到需观察的物像,并将其移至视野中央,同时调准焦距,使被观察的物像最清晰.2、转动物镜转换器,直接使高倍镜转到工作状态对准通光孔,此时,视野中一般可见到不太清晰的物像,只需调节细调焦螺旋,一般都可使物像清晰.请注意:1在从低倍镜准焦的状态下直接转换到高倍镜时,有时会发生高倍物镜碰擦玻片而不能转换到位的情况这种情况,主要是高倍镜、低倍镜不配套,即不是同一型号的显微镜上的镜头,此时不能硬转,应检查玻片是否放反、低倍镜的焦距是否调好以及物镜是否松动等情况后重新操作.如果调整后仍不能转换,则应将镜筒升高或使载物台下降后再转换,然后在眼睛的注视下使高倍镜贴近盖玻片,再一边观察目镜视野,一边用粗调螺旋使镜头极其缓慢地上升或载物台下降,看到物像后再用细调螺旋准焦.2由于制造工艺上的原因,许多显微镜的低倍镜视野中心与高倍镜的视野中心往往存在一定的偏差即:低倍镜与高倍镜的光轴不在一条直线上,因此,在从低倍镜转换高倍镜观察标本时常会给观察者迅速寻找标本造成一定困难.为了避免这种情况的出现,帮助观察者在高倍镜下能较快找到所需放大部分的物像,可事先利用羊毛交叉装片标本来测定所用光镜的偏心情况,并绘图记录制成偏心图.具体操作步骤如下:①用在高倍镜下找到羊毛交叉点并将其移至视野中心;②换低倍镜观察羊毛交叉点是否还位于视野中央,如果偏离视野中央,其所在的位置就是偏心位置;③将前面两个步骤反复操作几次,以找出准确的偏心位置,并绘出偏心图.当光镜的偏心点找出之后,在使用该显微镜的高倍镜观察标本时,事先可在低倍镜下将需进一步放大的部位移至偏心位置处,再转换高倍镜观察时,所需的观察目标就正好在视野中央.四油镜的使用方法1、用高倍镜找到所需观察的标本物像,并将需要进一步放大的部分移至视野中央.2、将聚光器升至最高位置并将光圈开至最大因油镜所需光线较强.3、转动物镜转换盘,移开高倍镜,往玻片标本上需观察的部位载玻片的正面,相当于通光孔的位置滴一滴香柏油折光率1.51或石蜡油折光率1.47作为介质,然后在眼睛的注视下,使油镜转至工作状态.此时油镜的下端镜面一般应正好浸在油滴中.4、左眼注视目镜中,同时小心而缓慢地转动细调螺旋注意:这时只能使用微调节螺旋,千万不要使用粗调节螺旋使镜头微微上升或使载物台下降,直至视野中出现清晰的物像.操作时不要反方向转动细调节螺旋,以免镜头下降压碎标本或损坏镜头.5、油镜使用完后,必须及时将镜头上的油擦拭干净.操作时先将油镜升高1cm,并将其转离通光孔,先用干擦镜纸揩擦一次,把大部分的油去掉,再用沾有少许清洁剂或二甲苯的擦镜纸擦一次,最后再用干擦镜纸揩擦一次.至于玻片标本上的油,如果是有盖玻片的永久制片,可直接用上述方法擦干净;如果是无盖玻片的标本,则盖玻片上的油可用拉纸法揩擦,即先把一小张擦镜纸盖在油滴上,再往纸上滴几滴清洁剂或二甲苯.趁湿将纸往外拉,如此反复几次即可干净.三、使用显微镜应注意的事项1、取用显微镜时,应一手紧握镜臂,一手托住镜座,不要用单手提拿,以避免目镜或其它零部件滑落.2、在使用镜简直立式显微镜时,镜筒倾斜的角度不能超过450,以免重心后移使显微镜倾倒.在观察带有液体的临时装片时,不要使用倾斜关节,以避免由于载物台的倾斜而使液体流到显微镜上.3、不可随意拆卸显微镜上的零部件,以免发生丢失损坏或使灰尘落入镜内.4、显微镜的光学部件不可用纱布、手帕、普通纸张或手指揩擦,以免磨损镜面,需要时只能用擦镜纸轻轻擦拭.机械部分可用纱布等擦拭.5、在任何时候,特别是使用高倍镜或油镜时,都不要一边在目镜中观察,一边下降镜筒或上升载物台,以避免镜头与玻片相撞,损坏镜头或玻片标本.6、显微镜使用完后应及时复原.先升高镜筒或下降载物台,取下玻片标本,使物镜转离通光孔.如镜筒、载物台是倾斜的,应恢复直立或水平状态.然后下降镜或上升载物台,使物镜与载物台相接近.垂直反光镜,下降聚光器,关小光圈,最后放回镜箱中锁好.7、在利用显微镜观察标本时,要养成两眼同时睁开,双手并用左手操纵调焦螺旋,右手操纵标本移动器的习惯,必要时应一边观察一边计数或绘图记录.。
光学显微镜的结构及使用
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光学显微镜的结构及使用光学显微镜(Optical Microscope)是一种通过光学方式来观察微观物体的仪器,它是一种广泛应用于生物学、药学、医学、材料科学等领域的重要工具。
光学显微镜的主要结构包括光源、凸透镜、物镜、目镜、载物台等组成部分。
在使用光学显微镜时,首先需要将待观察的样品放置在载物台上,调整光源和透镜的位置,通过调节目镜和物镜的距离和焦距,可以观察到样品的细微结构和细胞组织。
下面将详细介绍光学显微镜的结构及使用方法。
1.光源:光源是光学显微镜的一个重要组件,它用来提供光线,使样品被照亮。
常见的光源有白光源以及透射式或反射式的激光器光源。
2.凸透镜:凸透镜通常用于聚焦和放大光线。
它位于光源和样品之间,可以调整光线的聚焦度。
3.物镜:物镜是位于样品下方的镜头,它是放大样品的主要部分。
物镜通常有多个镜片组合而成,不同的物镜具有不同的放大倍数和焦距。
常用的物镜有4X、10X、40X、100X等。
4.目镜:目镜是位于物镜上方的镜头,用于放大和观察样品。
目镜通常有10X或者15X的放大倍数。
5.载物台:载物台是用来放置待观察的样品的平台。
它通常是一个可移动的平台,可以通过调节螺旋装置来调整样品的位置。
6.焦距调节装置:焦距调节装置用于调整物镜和目镜之间的距离,以便观察不同放大倍数下的样品。
使用光学显微镜的步骤如下:1.打开光源,调整适当的亮度,使样品得到充分的照明。
2.将待观察的样品放置在载物台上,固定好位置。
3.通过调节载物台的高度,使样品与物镜保持适当的距离,准备观察。
4.眼睛对准目镜,通过调节焦距和目镜的调焦装置,使样品清晰地显示在目镜中。
5.如果需要更高的放大倍率,可以通过旋转物镜转盘来切换不同的物镜。
注意,在切换物镜时需要调整焦距。
6.观察到感兴趣的结构后,可以通过移动载物台或者调节显微镜的焦距,来寻找更小的细节。
7.观察结束后,关闭光源,并将样品从载物台上移开。
1.在观察之前,确保透镜表面干净。
光学显微镜的结构与使用方法
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光学显微镜的结构与使用方法一、光学显微镜的结构:光源系统:光源系统是为了将光源产生的光线引导到样品上,并提供足够的亮度,使样品上的细小结构清晰可见。
常见的光源有白炽灯、氙气灯、LED灯等。
在光源系统中还有反光镜(凹面镜),反光镜用于反射光源产生的光线。
光学系统:光学系统主要由物镜和目镜构成。
物镜是用来形成物体的放大影像的光学元件,通常有多种倍率可供选择。
目镜是用来接收形成的物体放大影像进行观察的光学元件。
物镜和目镜之间通过内管相互连接,形成光路系统。
调焦系统:调焦系统是用来调节物镜与样品之间的距离,以便获得更清晰的图像。
常见的调焦系统有粗调焦和细调焦。
粗调焦用于快速调节焦距,而细调焦用于微调焦距。
在调焦系统中,还常常有一个旋转的镜筒,用来装配和固定物镜和目镜,也可以根据需要旋转以换取不同的物镜。
图像形成和观察系统:图像形成和观察系统主要由目镜和眼睛组成。
物体放大后的图像通过目镜传送到眼睛进行观察。
通常显微镜上有两个目镜,可以使用双目观察,提高观察舒适度。
支撑结构:支撑结构用于固定和支撑光源系统、光学系统和调焦系统。
支撑结构通常由底座、支柱、臂和台面等组成,保证整个显微镜的稳定性。
二、光学显微镜的使用方法:1.准备工作:将显微镜稳固地放在台面上,将光源系统调整到合适的亮度。
检查物镜和目镜是否清洁,如果有污迹可以使用适当的清洁布小心地将其擦拭干净。
2.样品准备:准备好待观察的样品,确保样品干燥、清洁,可以使用盖玻片或载玻片将样品封装起来。
3.调焦:先使用粗调焦将物镜与样品保持适当的距离,然后通过旋转调焦手柄使物镜逐渐靠近样品,直到样品变得清晰可见。
接下来使用细调焦进行微调,以获得更清晰的图像。
4.观察:通过目镜或双目镜仔细观察样品,可以使用移动台面或显微镜的移动装置调整样品的位置,使观察到的部分处于视野的中央位置。
5.重点调焦:如果需要观察样品的不同部分,可以使用旋转镜筒换取不同倍率的物镜,并重新调焦。
光学显微镜的结构和功能
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光学显微镜的结构和功能
光学显微镜是一种利用透光性玻璃镜片和光学系统来观察微观物体的仪器。
它主要由以下几个部分组成:
1. 目镜(眼镜片):位于显微镜的顶部,设计为凸透镜,用于放大镜中的影像并让人眼观察到物体。
2. 物镜:位于光学系统的下方,是一个或多个具有不同焦距的凸透镜组合,用于从物体上收集光线,并形成放大影像。
3. 可调焦系统:通过旋转或移动物镜和目镜,来调节光学系统的焦距,从而使得观察者能够清晰地看到物体的细节。
4. 被观察物体平台:位于显微镜下方,用于放置待观察的样本或物体。
5. 光源:通常是一种强光或均匀光源,用于照明物体并产生可观察的光线。
光学显微镜的功能主要包括以下几个方面:
1. 放大功能:通过物镜和目镜的组合,能够将物体的细节放大多倍,并使得人眼能够观察到这些微小的结构。
2. 分辨率功能:光学显微镜可以帮助观察者分辨两个物体间的最小距离,也就是分辨率。
分辨率决定了显微镜可以观察到的最小细节。
3. 三维观察功能:通过使用两个物镜或利用一些特殊的技术(例如双光束干涉和共焦显微镜),光学显微镜能够提供三维观察样本的能力,使得观察者能够更好地了解物体的结构和形态。
4. 照明功能:光学显微镜通常带有照明设备,可以提供充足而均匀的光线,用于照亮样本并产生可观察的影像。
光学显微镜的构造和使用
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光学显微镜的构造和使用一、光学显微镜的构造1. 物镜(Objective Lens):物镜是显微镜最重要的部分之一,它位于底部并接近被观察的物体。
物镜由多个透镜组成,通常有多个放大倍数可供选择。
2. 目镜(Eyepiece Lens):目镜是显微镜上方的镜头,人眼通过它观察被物镜放大的物体。
目镜通常有10倍的放大倍数。
3. 轴(Axis):显微镜的轴是连接物镜和目镜的部分,它允许光线在两个镜头之间传播。
轴还含有位于特定焦距位置的光阑(Aperture),用于控制光线的数量和角度,以增加图像的清晰度和对比度。
4. 支架(Stage):支架是物体放置平台,通常位于物镜下方。
样本可以放置在支架上,并通过微动装置(Coarse/Fine Adjustment Knobs)控制上下运动。
5. 照明系统(Illumination System):照明系统通常由一个光源和一组透镜组成,用于照亮样本。
光源可以是白炽灯、荧光灯或LED等。
二、光学显微镜的使用方法使用光学显微镜需要一定的技巧和步骤,下面是一般的使用方法:1.调整光源:首先,打开光源,并调整照明系统以获得所需的亮度和对比度。
可以使用光源控制旋钮或切换按钮进行调整。
2.放置样本:将样本放置在支架上,并使用微动装置将其调整到物镜直接下方。
确保样本位于轴上的中心位置。
3. 调整目镜:通过观察目镜,使用调焦轮(Fine Adjustment Knob)和粗调焦轮(Coarse Adjustment Knob)来将样本初步聚焦。
4.调整物镜:选择较低的放大倍数的物镜,通过调整物镜旁边的切换钮或旋钮来切换物镜。
随后,使用调焦轮进行细调,使图像逐渐变得清晰。
5.调整光阑:在确定最佳清晰度后,可以尝试使用光阑来控制被观察物体的角度和数量。
适当调整光阑可以增加图像的对比度和细节。
6.观察和记录:通过目镜观察样本,记录感兴趣的结构和现象。
可以使用标尺或目镜上的刻度来测量样本的尺寸。
显微镜的构造及使用
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对照实物并结合以下说明认识光学显微镜的各部结构及功能。
(一)机械部分:1、镜座1:在镜的底部,是显微镜的基座,通常为马蹄形或方形,以稳定和支持整个镜体。
2、镜柱2:自镜座向上直立的短柱,用以支持镜臂。
3、镜臂3: a 、斜筒式:以略大于90°的倾角与镜柱相连成一体。
b 、直筒式:连接在镜柱上面的弓形部分,支持镜筒等部分,拿镜时握持此臂。
其下以关节与镜柱相连,此关节称为倾斜关节(斜筒式无此关节),可使镜体作90°角内倾斜,便于观察。
使用时只应倾斜45°以内,以免失去重心而使显微镜翻倒落地.4、镜筒4:连在镜臂前方的圆筒。
分直筒与斜筒两种。
上端装有目镜,下端装有物镜转换器。
5、物镜转换器5:装置在镜筒下端的圆盘,有3-4个物镜孔,可安装不同放大率的物镜,旋转此盘可以调换物镜头,其边缘有一固定卡,当物镜与镜台中央的圆孔对准时可听到固定卡发出吻合的“咋喀’声,并产生一到位的阻力感。
6、镜台6:物镜转换器下方的方形平台,用以放置玻片标本,中央有一圆形镜孔,台上附用以夹紧玻片标本的标本夹8,并可通过下方横向、纵向移动手轮9来调节标本的位置。
7、调焦装置7:有粗动、微动两种,装在镜柱(或镜臂)上,用以调节物镜和标本之间的距离。
旋转粗动调焦手轮时,两者之间距离变化较大;旋转微动调焦手轮时,距离变化缓而不显,变化范围仅1一2毫米,只允许在一圈范围之内旋转,特别适合高倍及油镜进行调焦的需要。
(二)照明部分:1、反光镜:装在镜柱前的圆镜,一面平,一面凹,可灵活转动以反射任何方向的光线入聚光镜。
凹面有聚光作用,故实验室中常用凹面取光。
本显微镜采用电光源12。
1 2 4 5 6 7 8 10 11 12 显微镜的构造及使用2、聚光器:在镜台之下,用以聚集光线,以增加标本上的照明度,有的显微镜其外侧有一升降调节柄10,可调节其升降,上升时光线较强,下降时光线较弱。
3、光圈:亦称光阑,装在聚光器下,由许多半月形金属薄片组成,在中心部分形成一圆孔。
简述光学显微镜的构造组成和使用步骤

光学显微镜是一种利用透镜和物镜的光学装置,可以放大微小的物体,使其能够在人眼中被观察到。
它的构造组成主要包括镜筒、镜头、物镜、镜座和台座等部分。
在使用光学显微镜时,首先要将显微镜放置在光线充足的位置,调节镜头和物镜的位置和焦距,接着放置被观察的样品,通过调节物镜和镜筒来使样品清晰可见。
对观察到的样品进行记录和总结。
光学显微镜是现代生物学和医学研究中不可或缺的工具之一。
它广泛应用于细胞学、病理学、生物技术领域,对于人类的健康和疾病的诊断起着至关重要的作用。
在工业生产和科学研究中,光学显微镜也扮演着重要的角色。
深入了解光学显微镜的构造组成和使用步骤对于生活和工作都具有重要意义。
光学显微镜的构造组成主要包括镜筒、镜头、物镜、镜座和台座等部分。
镜筒是显微镜的主要骨架,承载着其他部件,保护了光学系统。
镜头是显微镜中的重要透镜部分,可以放大被观察样品的影像。
物镜是最靠近被观察物体的一组透镜,它直接影响到样品在视野中的清晰度和放大倍数。
镜座和台座则是支撑显微镜的基础,保证显微镜的稳定性和安全性。
以上这些部分的协同作用使得光学显微镜能够有效地放大和观察微小物体,是显微镜的重要组成部分。
光学显微镜的使用步骤是非常重要的。
在使用光学显微镜时,首先需要将显微镜放置在光照充足、温度适宜、洁净无尘的环境中,以防影响观察效果。
需要调节镜头和物镜的位置和焦距,使其能够放大并清晰呈现待观察的样品。
将待观察的样品放置在显微镜台上,通过调节物镜和镜筒,使样品在视野中清晰可见。
在观察过程中,需要不断调整焦距和放大倍数,以获取更清晰的图像。
对观察到的样品进行记录和总结,以备后续研究和分析。
光学显微镜的构造组成和使用步骤对于科研、医学和工业都具有重要意义。
在实际使用时,需要根据具体情况灵活调整光学显微镜的部件,以获得最佳的观察效果。
光学显微镜的应用范围广泛,对于人类的生活和健康都具有深远的意义,深入了解光学显微镜的构造和使用方法对于提高观察和研究的效率非常重要。
中药鉴定专项技能—显微鉴定技术
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三、显微镜使用注意事项
1.搬动显微镜时,要一手握镜臂,一手扶镜座,两上臂紧靠 身体。切勿一手斜提或前后摆动,不要发生太大震动,以防镜 头或其他零件跌落。
2.观察标本时,显微镜离实验台边缘应保持一定距离(5cm), 以免显微镜翻倒落地。
3.使用时要严格按步骤操作,熟悉显微镜各部件性能,掌握 粗、细调节钮的转动方向与载物台升降关系。转动粗调节钮向 下时,眼睛必须注视物镜头。
二、使用方法
(2)高倍镜的使用
①依照低倍镜操作步骤,先用低倍镜找到清晰物像。
②将需要观察的部分移到视野的中央。
③眼睛从侧面注视物镜,用手移动转换器,换高倍镜40X。
④眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调节钮,直至视野内看到清晰的物 像为止。此时应把聚光器的孔径光阑适当调大,使之与物镜的镜口率相匹配。光 源的强度也应调高。
党参菊糖(水合氯醛装置)
五、装置液的作用
水合氯醛装 置液的作用
➢使细胞膨胀,便于观组织、细胞及 其内含物特征。 ➢去除细胞表面或内部杂质。 ➢增强透明度。
五、装置液的作用
稀甘油装置 液的作用
➢增加透明度。 ➢防止气泡生成。 ➢防止水合氯醛结晶析出。
显微鉴定技术
目录
CONTENTS
01 02 03
二、测微尺的使用方法
中药粉末制片
目录
CONTENTS
01
02
03 04 05
粉末临时制片操作要领 水装片或斯氏液装片 水合氯醛加热透化装片 水合氯醛或乙醇装片 装置液的作用
一、粉末临时制片操作要领
➢粉末用量:米粒大小,尽可能少。 ➢每次滴加装置液2~3滴。 ➢每次滴加装置液后需要搅拌均匀。 ➢控制搅拌范围约为盖玻片大小。 ➢如加热透化,则重复进行3~4次, 沸即离火,勿烧干、焦。
光学显微镜的结构及使用
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光学显微镜的结构及使用一、光学显微镜的结构1.物镜:物镜是光学显微镜中最关键的部件之一、它通常由多片透镜叠加形成,具有高放大倍数和高分辨率。
物镜位于镜筒底部,负责将待观察的样品进行放大。
2.目镜:目镜位于镜筒顶部,用于观察放大后的样品。
一般情况下,目镜的放大倍数较低,通常为10倍或者15倍。
3.搬物平台:搬物平台用于放置待观察的样品。
搬物平台通常具有XY轴调节功能,使用户可以方便地移动样品并调整观察角度。
4.光源:光学显微镜的光源通常为白炽灯或者荧光灯,用于照亮样品。
光源一般位于底部,通过镜筒的反射系统使样品得到充分的照明。
5.调焦系统:调焦系统用于调整样品与物镜之间的距离,以实现清晰的观察效果。
常见的调焦方式包括粗调和细调,用于快速调节和微调焦距。
6.镜筒:镜筒是光学显微镜的主体部分,其中包含物镜、目镜等关键组件。
镜筒还具有调焦系统,允许用户自由调节焦距并观察样品。
二、光学显微镜的使用1.准备工作:首先确保光学显微镜的电源连接正常,并打开光源。
然后调节搬物平台,将待观察的样品放置于搬物平台上,并用夹子固定住。
2.调节光源:通过调节光源的亮度,使样品获得适当的照明。
可以根据具体需要选择白炽灯或者荧光灯,并调整亮度以获得最佳效果。
3.调节目镜:通过调节目镜的焦距,使样品在眼睛观察时看起来清晰。
通常情况下,通过旋转目镜来实现目镜的调焦,直到观察到清晰的图像为止。
4.调节物镜:选择适当的物镜,并通过旋转物镜进行精确的调焦。
通过粗调焦距快速调整,然后通过细调焦距进行微调,直到观察到所需放大倍数和清晰度。
5.观察样品:通过镜筒的目镜观察样品,并通过镜筒的调焦系统进行焦距的微调,以获得最佳的观察效果。
6.清理和维护:使用完毕后,应该清理光学显微镜,特别是物镜和目镜的镜片。
可以使用专用的清洗剂和清洗纸进行清理,注意避免镜片受到划伤。
总结:光学显微镜的结构包括物镜、目镜、搬物平台、光源、调焦系统和镜筒等关键组件。
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实验一普通光学显微镜的构造和使用一、目的要求1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。
2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。
3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。
二、显微镜的基本构造显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成(图1-1)。
光学显微镜的构造(图1-1)1. 物镜转换器2. 接物镜3.游标卡尺4.载物台5.聚光器6. 彩虹光阑7.光源8. 镜座9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13.镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋1.机械装置镜座(base)和镜臂(arm)镜座位于显微镜底部,呈马蹄形,它支持全镜。
镜臂有固定式和活动式两种,活动式的镜臂可改变角度。
镜臂支持镜筒。
镜筒(body tube)是由金属制成的圆筒,上接目镜,下接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种,单筒又可分为直立式和后倾式两种。
而双筒则都是倾斜式的,倾斜式镜筒倾斜45°。
双筒中的一个目镜有屈光度调节装置,以备在两眼视力不同的情况下调节使用。
转换器(no sepiece)为两个金属碟所合成的一个转盘,其上装3—4个物镜,可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。
载物台(stage)又称镜台,为方形或圆形的盘,用以载放被检物体,中心有一个通光孔。
在载物台上有的装有两个金属压夹称标本夹,用以固定标本;有的装有标本推动器,将标本固定后,能向前后左右推动。
有的推动器上还有刻度,能确定标本的位置,便于找到变换的视野。
调焦装置是调节物镜和标本间距离的机件,有粗动螺旋(coarse adjustment)即粗调节器和微动螺旋(fine adjustment)即细调节器,利用它们使镜筒或镜台上下移动,当物体在物镜和目镜焦点上时,则得到清晰的图像。
2.光学系统物镜(objective)物镜安装在镜筒下端的转换器上,因接近被观察的物体,故又称接物镜。
其作用是将物体作第一次放大,是决定成像质量和分辨能力的重要部件。
物镜上通常标有数值孔径、放大倍数、镜筒长度、焦距等主要参数。
如:NA0.30;10×;160/0.17;16mm。
其中“NA0.30”表示数值孔径(numerical aperture,简写为NA),“10×”表示放大倍数,“160/0.17”分别表示镜筒长度和所需盖玻片厚度(mm),16mm表示焦距。
目镜(ocular lens)装于镜筒上端,由两块透镜组成。
镜把物镜造成的像再次放大,不增加分辨力,上面一般标有7×、10×、15×等放大倍数,可根据需要选用。
一般可按与物镜放大倍数的乘积为物镜数值孔径的500—700倍,最大也不能超过1000倍的选择。
目镜的放大倍数过大,反而影响观察效果。
聚光器(condenser)光源射出的光线通过聚光器汇聚成光锥照射标本,增强照明度和造成适宜的光锥角度,提高物镜的分辨力。
聚光器由聚光镜和虹彩光圈(iris diaphragm)组成,聚光镜由透镜组成,其数值孔径可大于1,当使用大于1的聚光镜时,需在聚光镜和载玻片之间加香柏油,否则只能达到1.0。
虹彩光圈由簿金属片组成,中心形成圆孔,推动把手可随意调整透进光的强弱。
调节聚光镜的高度和虹彩光圈的大小,可得到适当的光照和清晰的图像。
光源(light source)较新式的显微镜其光源通常是安装在显微镜的镜座内,通过按钮开关来控制;老式的显微镜大多是采用附着在镜臂上的反光镜,反光镜是一个两面镜子,一面是平面,另一面是凹面。
在使用低倍和高倍镜观察时,用平面反光镜;使用油镜或光线弱时可用凹面反光镜。
滤光片(filter)可见光是各种颜色的光组成的,不同颜色的光线波长不同。
如只需某一波长的光线时,就要用滤光片。
选用适当的滤光片,可以提高分辨力,增加影像的反差和清晰度。
滤光片有紫、青、蓝、绿、黄、橙、红等各种颜色的,分别透过不同波长的可见光,可根据标本本身的颜色,在聚光器下加相应的滤光片。
三、油镜物镜的基本原理微生物学研究用的显微镜的物镜通常有低倍物镜(16mm,10×)、高倍物镜(4mm,40—45×)和油镜(1.8 mm,95—100×)三种。
油镜通常标有黑圈或红圈,也有的以“OI(oil immer-sion)字样表示,它是三者中放大倍数最大的。
根据使用不同放大倍数的目镜,可使被检物体放大1000—2 000多倍。
从图Ⅲ-3中可看出油镜的焦距和工作距离(标本在焦点上看得最清晰时,物镜与样品之间的距离)最短,光圈则开得最大,因此,在使用油镜观察时,镜头离标本十分近,需特别小心。
使用时,油镜与其他物镜的不同是载玻片与物镜之间不是隔一层空气,而是隔一层油质,称为油浸系。
这种油常选用香柏油,因香柏油的折射率n=1.52,与玻璃相同。
当光线通过载玻片后,可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气,则称为干燥系,当光线通过玻片后,受到折射发生散射现象,进入物镜的光线显然减少,这样就减低了视野的照明度(图1-2)。
(图1-1)利用油镜不但能增加照明度,更主要的是能增加数值孔径,因为显微镜的放大效能是由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径,即光线投射到物镜上的最大角度(称为镜口角)的一半正弦,乘上玻片与物镜间介质的折射率所得的乘积,可用下列公式表示:NA=n·sinα式中 NA=数值孔径;n=介质折射率;α=最大入射角的半数,即镜口角的半数。
因此,光线投射到物镜的角度愈大,显微镜的效能就愈大(图Ⅲ-5),该角度的大小决定于物镜的直径和焦距。
同时,α的理论限度为90°,sin90°=1,故以空气为介质时(n=1),数值孔径不能超过1,如以香柏油为介质时,则n 增大,其数值孔径也随之增大。
如光线入射角为120°,其半数的正弦为sin60°=0.87,则:以空气为介质时:NA=1×0.87=0.87以水为介质时:NA=1.33×0.87=1.15以香柏油为介质时:NA=1.52×0.87=1.32显微镜的分辨力是指显微镜能够辨别两点之间最小距离的能力。
它与物镜的数值孔径成正比,与光波长度成反比。
因此,物镜的数值孔径愈大,光波波长越短,则显微镜的分辨力愈大,被检物体的细微结构也愈能明晰地区别出来。
因此,一个高的分辨力意味着一个小的可分辨距离,这两个因素是成反比关系的,通常有人把分辨力说成是多少微米或纳米,这实际上是把分辨力和最小分辨距离混淆起来了。
显微镜的分辨力是用可分辨的最小距离来表示的。
式中λ=光波波长。
我们肉眼所能感受的光波平均长度为0.55μm,假如数值孔径为0.65的高倍物镜,它能辨别两点之间的距离为0.42μm。
而在0.42μm以下的两点之间的距离就分辨不出,即使用倍数更大的目镜,使显微镜的总放大率增加,也仍然分辨不出。
只有改用数值孔径更大的物镜,增加其分辨力才行。
例如用数值孔径为1.25的油镜时,能辨别两点之间的因此,我们可以看出,假如采用放大率为40倍的高倍物镜(NA=0.65),和放大率为24倍的目镜,虽然总放大率为960倍,但其分辨的最小距离只有0.42μm。
假如采用放大率为90倍的油镜(NA=1.25),和放大率为9倍的目镜,虽然总的放大率为810倍,但却能分辨出0.22μm间的距离。
四、器材显微镜、香柏油、乙醇-乙醚混合液、擦镜纸、吸水纸等。
细菌三种形态的染色标本。
五、操作步骤1.观察前的准备(1)1、显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时,要用右手紧握镜臂,左手托住镜座,平稳地将显微镜搬运到实验桌上。
(2)将显微镜放在自己身体的左前方,离桌子边缘约10cm左右,右侧可放记录本或绘图纸。
(3)调节光照:不带光源的显微镜,可利用灯光或自然光通过反光镜来调节光照,光线较强的天然光源宜用平面镜;光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜,但不能用直射阳光,直射阳光会影响物像的清晰并刺激眼睛。
将10×物镜转入光孔,将聚光器上的虹彩光圈打开到最大位置,用左眼观察目镜中视野的亮度,转动反光镜,使视野的光照达到最明亮最均匀为止。
自带光源的显微镜,可通过调节电流旋钮来调节光照强弱。
凡检查染色标本时,光线应强;检查未染色标本时,光线不宜太强。
可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器、旋转反光镜调节光线。
2.低倍镜观察镜检任何标本都要养成必须先用低倍镜观察的习惯。
因为低倍镜视野较大,易于发现目标和确定检查的位置。
将标本片放置在载物台上,用标本夹夹住,移动推动器,使被观察的标本处在物镜正下方,转动粗调节旋钮,使物镜调至接近标本处,用目镜观察并同时用粗调节旋钮慢慢下降载物台,直至物像出现,再用细调节旋钮使物像清晰为止。
用推动器移动标本片,找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。
3.高倍镜观察在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜。
较好的显微镜,低倍、高倍镜头是同焦的,在转换物镜时要从侧面观察,避免镜头与玻片相撞。
然后从目镜观察,调节光照,使亮度适中,缓慢调节粗调节旋钮,慢慢下降载物台直至物像出现,再用细调节旋钮调至物像清晰为止,找到需观察的部位,并移至视野中央进行观察,并准备用油镜观察。
4.油镜观察(1)用粗调节器将镜筒提起约2cm,将油镜转至正下方。
(2)在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。
(3)从侧面注视,用粗调节器将镜筒小心地降下,使油镜浸在香柏油中,其镜头几乎与标本相接,应特别注意不能压在标本上,更不可用力过猛,否则不仅压碎玻片,也会损坏镜头。
(4)从接目镜内观察,进一步调节光线,使光线明亮,再用粗调节器将镜筒徐徐上升,直至视野出现物像为止,然后用细调节器校正焦距。
如油镜已离开油面而仍未见物像,必须再从侧面观察,将油镜降下,重复操作至物像看清为止。
5. 观察完后复原下降载物台,将油镜头转出,先用擦镜纸擦去镜头上的油,再用擦镜纸蘸少许乙醚乙醇混合液擦去镜头上残留油迹,最后再用擦镜纸擦拭2—3下即可,(注意向一个方向擦拭)。
将各部分还原,转动物镜转换器,使物镜头不与载物台通光孔相对,而是成八字形位置,再将载物台下降至最低,降下聚光器,反光镜与聚光器垂直,最后用柔软纱布清洁载物台等机械部分,然后将显微镜放回柜内或镜箱中。
六、注意事项1.学生使用显微镜固定镜号、位置,填写使用卡,本学期一直使用本台显微镜。
2.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏3.镜面只能用擦镜纸擦,不能用手指或粗布,以保证光洁度。
4.观察标本时,必须依次用低、高倍镜,最后用油镜。
当目视接目镜时,特别在使用油镜时,切不可使用粗调节器,以免压碎玻片或损伤镜面。
5.观察时,两眼睁开,养成两眼能够轮换观察的习惯,以免眼睛疲劳,并且能够在左眼观察时,右眼注视绘图。