总黄酮总酚含量测定方法

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裸花紫珠中总酚、总黄酮和总皂苷的含量测定

文献标识码：Ａ
文章编号：１００８＿（）８０５（２０１３）１２ — ２８５２．０３
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ，ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｎｄｔｏａｌｔｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＣａｌｌｉｃａｒｐａ
摘要：目的建立裸花紫殊不同提取物及不同洗脱部位中总酚、总黄酮和总皂苷的含量测定方法。方法分别采用水和
８０％乙醇作提取剂得不同提取物；用ＨＰ一２０大孔树脂对裸花紫珠干浸膏划段得不同洗脱部位；用分光光度法测定总酚、总黄酮和总皂苷的含量。结果建立了总酚、总黄酮和总皂苷的标准曲线，测得裸花紫珠不同提取物中总酚、总黄酮和总皂苷的百分含量分别为：１４．４１，２５．５６，６．８１和１４．７８，２８．０１，１３．３９；测得其不同洗脱部位中总酚、总黄酮和总皂苷的百分含量分别为：９．６７，１７．０９，ｌ１．９８；３５．８５，７２．２４，１５．６４；２０．８０，３２．４４，２３．８９和１０．５０，１５．１４，６２．７９。结论裸花紫珠水提取物作为进一步研究的材料；测定总酚含量作为下一步质量控制的指标成分。
ｎｕｄＯ７ｏｒａＨｏｏｋ．ｅｔＡｒｎ
ＹＡＮＸｉａｏ— ｊｉｅ，ＧＵｚｈｉ — ｘｉｎ，ＬｕＦｅｎｇ— ｌａｉ，ＨＵＡＮＧＳｈｅｎｇ，ＬＩＤｉａｎ— ｐｅｎｇ

总黄酮含量测定

1 总黄酮含量测定1．1 紫外可见分光光度法严赞开［1］综述了紫外分光光度法测定植物中黄酮含量的方法．重点介绍了单波长法、差示法、双波长法、三波长法、导数法等紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理及分析特性。

1．1．1 紫外可见分光光度法: 是以分子吸收光谱为基础的紫外－可见分光光度法，利用某些物质的分子在峰带I( 300 ～400 nm) 和峰带Ⅱ( 220 ～280 nm) 光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。

具有简便、适用性广、准确度、精密度和重现性较好等特点，在总黄酮含量分析中发挥着重要作用。

1．1．2 比色法: 是一些药典最常用的总黄酮含量检测方法，它主要以Al( NO3 ) 3 为显色剂，在碱性条件下，利用其与总黄酮形成红色螯合物为特征。

常用于总黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al( NO3 ) 3、AlCl3 等。

1．1．3 差示分光光度法简称ΔA 法: 使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比，测量样品和参比间的相对吸光度。

而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系，借差示工作曲线而求出样品的含量。

1．1．4 双波长和导数分光光度法: 用于测定吸收光谱曲线重达的混合物的含量而不须用解联立方程，还可分析高浓度及混浊样品，其灵敏度和准确度比普通分光光度法好。

在选择波长时，原则上除了要干扰物有相等吸光度外，还要求两波长比较接近，被测组分在该两波长处的摩尔吸收系数相差大些，这样方法的灵敏度会更高。

如果将上述双波长分光光度计上两个波长尽可能指近，使只相差1 ～2 nm，并且同时进行扫瞄，能得到试样一阶导数吸收光谱-吸光度对波长的变化率曲线，即导数分光光度法。

2 药理作用2．1 镇痛作用赵铁华等［4］研究结果显示灌胃、腹腔注射、皮下注射适宜剂量的黄芩茎叶总黄酮，对实验动物经化学和热刺激导致的疼痛反应皆有一定的抑制作用，其镇痛作用机制与中枢作用相关。

银杏总黄酮( TFG) 腹腔内注射可显著抑制甲醛致小鼠疼痛反应，延长小鼠舔足潜伏期并减少小鼠扭体反应数。

一点红不同营养器官中总黄酮和总酚含量测定

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一点红不同营养器官中总黄酮和总酚含量测定
作者：张燕张洪斌贺立静胡海强
来源：《中国医药导报》2009年第36期
摘要：目的：建立一点红不同营养器官中总黄酮和总酚含量测定方法。

方法：以芦丁为对照品，采用NaNO2-A1(NO3)3-NaOH比色法测定了总黄酮含量；以没食子酸为对照品，采用Folin-Ciocalteu比色法测定了总酚含量。

结果：芦丁浓度在0.01～0.08mg/ml范围内与吸光度呈良好线性关系，平均加样回收率为100.30％，RSD=1.72％，一点红叶、茎、根中总黄酮含量
分别为2.54％、1.78％、1.27％；没食子酸浓度在0.002～0.010mg／ml范围内与吸光度呈良好线性关系，平均加样回收率为99.86％。

RSD=1.92％，一点红叶、茎、根中总酚含量分别为21.28％、12.77％、8.51％。

结论：这2种方法灵敏，准确性强，精密度高，重复性好，可以
用作一点红中总黄酮和总酚含量的测定。

关键词：一点红；总黄酮；总酚；含量测定。

20种牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷的含量测定及抗氧化活性研究

20种牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷的含量测定及抗氧化活性研究一、本文概述本文旨在全面研究20种牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷的含量，并评估其抗氧化活性。

牡丹，作为中国传统名花，不仅具有观赏价值，其叶和根也广泛用于中药制剂。

近年来，随着人们对天然产物的深入研究，牡丹叶中的活性成分及其生物活性引起了广泛关注。

特别是总黄酮、总酚和芍药苷，这些成分在抗氧化、抗炎、抗疲劳等方面展现出显著的生物活性。

本文将通过高效液相色谱法（HPLC）、紫外-可见光谱法（UV-Vis）等分析方法，对20种不同品种的牡丹叶进行定量分析，比较各品种中总黄酮、总酚和芍药苷的含量差异。

本文还将采用多种体外抗氧化实验，如DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验等，评估牡丹叶提取物的抗氧化能力，以期为其在食品、保健品和化妆品等领域的应用提供科学依据。

通过本文的研究，我们期望能够深入了解牡丹叶中活性成分的含量及其抗氧化活性，为牡丹叶资源的合理开发利用提供理论支持和实践指导。

本文的研究结果也将为其他天然产物的活性成分研究和应用开发提供参考和借鉴。

二、材料与方法本研究采用了20种不同品种的牡丹叶作为实验材料。

所有牡丹叶样本均采自健康的、无病虫害的植株，并在相同的环境条件下进行养护。

采样后，叶片立即进行处理并保存在适当的条件下，以避免任何可能影响其化学成分的变化。

实验所用的试剂包括乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂，以及用于测定总黄酮、总酚和芍药苷的标准品和试剂。

所有试剂均为分析纯级别。

实验仪器包括高效液相色谱仪（HPLC）、紫外可见分光光度计、电子天平、旋转蒸发仪、离心机等。

将牡丹叶样本进行粉碎后，采用乙醇-水混合溶液进行索氏提取。

提取液经过旋转蒸发仪浓缩后，得到牡丹叶提取物。

采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定牡丹叶提取物中的总黄酮含量。

将提取物与试剂混合后，在特定波长下测定吸光度，并与标准曲线进行比较，从而计算出总黄酮的含量。

采用福林酚试剂法测定牡丹叶提取物中的总酚含量。

黄酮、总酚、DPPH

黄酮、总酚、DPPH 的测定方法1、样品的提取（三个指标的提取是一样的，只是后面测定加的试剂不一样）精确称取0.50 g 样品粉末置于50 mL 三角瓶中，进行标号。

加入25 mL 浓度为70 %的乙醇（95 %乙醇738ml+260ml 蒸馏水）溶液，摇匀，在超声波水浴中浸提30min （在超声波中加入少量水，水要超过三角瓶里的液体高度），将提取液离心:3000r,离心5min ，将滤液倒入50ml 容量瓶中，滤渣再用20ml 70 %的乙醇溶液洗进原三角瓶中，摇匀，在超声波水浴中浸提30min （同第一次提取一样），将提取液离心:3000r,离心5min 。

集中两次的上清液，用70 %的乙醇溶液定容于50 mL 容量瓶中。

2、指标的测定2.1黄酮的测定2.1.1试剂NaNO 2 （亚硝酸钠）浓度： 1g NaNO 2:20ml 蒸馏水Al(NO 3)3（硝酸铝）浓度：1g Al(NO 3)3:10ml 蒸馏水NaOH （氢氧化钠）浓度：40g NaOH:1L 蒸馏水2.1.2标准曲线的建立以芦丁为标准物,配制芦丁浓度为300 μg/mL 的标准溶液。

准确吸取该芦丁标准溶液1.0 mL 、2.0 mL 、3.0 mL 、4.0 mL 、5.0 mL 、6.0 mL 、7.0 mL 分别置于25 mL 容量瓶中,用蒸馏水补充至12.5 mL ,分别加入0.75 mL NaNO 2摇匀,放置 5 min ,各加入0.75 mL Al(NO 3)3 ,6 min 后再分别加入5 mL 1mol/L NaOH 混匀，用蒸馏水稀释至刻度，10 min 后于510 nm 波长处进行比色测定，以吸光度（Y ）对浓度 (X ，μg/mL )进行线性回归.2.1.3样品测定取5ml 提取液于25ml 容量瓶中，加蒸馏水5ml ，加入0.75 mL NaNO 2摇匀，放置5 min ，各加入0.75 mL Al(NO 3)3 ，6 min 后再分别加入5 mL 1mol/L NaOH 混匀，用蒸馏水稀释至刻度，10 min 后于510 nm 波长处进行比色测定。

总黄酮的含量测定方法

总黄酮的含量测定方法
总黄酮的含量测定方法主要包括以下几种：
1. 酸性条件下的比色法：将样品与酸反应生成有色化合物，测定其吸光度。

如盐酸或硫酸与总黄酮反应生成有色化合物，可通过紫外可见光谱测定吸光度，进而计算总黄酮的含量。

2. 高效液相色谱法(HPLC)：使用高效液相色谱仪进行分离和测定。

通过采用特定的色谱柱和流动相，分离出总黄酮，并通过检测器测定其峰面积或峰高值，并与已知标准品进行比较，计算样品中总黄酮的含量。

3. 薄层色谱法：将总黄酮的样品与色谱载体共同涂布在薄层板上，通过色谱柱法进行有效分离。

然后，利用染色剂，如硼酸或铝酸盐等，在紫外或可见光下观察或测定样品斑点的强度，从而计算总黄酮的含量。

4. 毛细管电泳法：通过毛细管电泳仪将总黄酮进行分离，并通过测定峰面积或峰高值，配合已知标准曲线，计算总黄酮的含量。

需要注意的是，不同样品中总黄酮的化学结构和含量可能存在差异，因此在选择测定方法时应根据具体的样品特性和仪器设备的可用性做出选择。

锦橙皮中提取PMFs及总酚、总黄酮含量的测定

司。
酚的含量，再测定乙醚萃取物中总酚的含量。浓缩样稀释２０
倍，过滤后测定。精密吸取样品０１Ｌ置于４支１ｍ．ｍ０Ｌ刻度管中，入２５ＬＦｌ加．ｍｏｎ—Ｃｏａｅｉｉｈｕ试剂，匀后静置３至ｃ摇８ｉｍｎ后再加入２５Ｌ１％碳酸钠混合后反应１，．ｍ０ｈ用蒸馏水定容至刻度，同时以不加样品溶液为空白，７Ｏｔ处比色在６ｎｏ测定样品的吸光值，由标曲回归方程换算其含量。２２总黄酮含量的测定．黄酮类物质是以２一苯基一吡喃
锦橙皮中提取ＰＭＦｓ及总酚黄酮含量的测定、总
何耀纲
（广西桂林市卫生学校，广西，桂林，１０）５０２４
【摘要】采用浸提的方法从锦橙皮提取出多甲氧基黄酮（Ｍｓ，ＰＦ）测定其总黄酮和总酚的含量，通过ＨＬＰＣ分析其租提物
１２ＩＰｓ的提取制备．．ＭＦ
锦橙皮在７ ℃ 烘箱中烘干（５约
４ｈ，８）粉粹并过４０目筛（径为０４５ｍ）称取ｌＯ孔．２ｍ，Ｏｇ的锦橙皮粉，加入１０ｍ９％乙醇，４ ℃，＝８ｒｍｎ的摇床５０Ｌ５在ｏｒ２０／ｉ
１１１原料与主要试剂．．
锦橙皮（ｉｃｅｇｏａｇｅ１，ｊｈｎｒｎｅｐｅ）湖ｎ
提物，无水乙醇复溶，加活性炭（：ｍｍ）１７，／脱色处理得ＰＦＭｓ粉末。
２Ｐｓ中总酚、黄酮含量的测定ＭＦ总

总黄酮总酚含量测定方法

太行菊的抗氧化活性试验计划1. 实验内容对太行菊的甲醇提取物的乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、水共六种萃取物进行总酚、总黄酮含量的测定，分析实验结果，选择总分和总黄酮含量比较高的两个层分进行抗氧化能力测定，分析其抗氧化能力强弱，判断其有无研究价值。

用Folin-Denis法测定太行菊甲醇提取物各萃取层组分的总酚含量，以没食子酸作为标准品进行对照。

用三氯化铝法测定太行菊各萃取层组分的总黄酮含量，以槲皮素作为标准品进行对照。

根据实验结果，选择总酚和总黄酮含量较高的萃取层组分进行抗氧化能力测定，包括DPPH自由基清除能力测定，羟基自由基清除能力测定，还原能力测定。

2.实验步骤将太行菊用甲醇溶液回流提取其有效成分，旋转浓缩后用水溶解，然后分别用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取、水层，得相应层的馏分。

2.1总酚含量测定：在试管中分别加入不同层样品（1mg/ml）0,25ml +Folin-Denis 试剂0.5ml ，5min后，再加入Na2CO3饱和溶液0.5ml,并做三组重复。

对照组中样品和Folin-Denis试剂用DW代替，其他不变。

空白组中Folin-Denis试剂用DW代替，其他不变。

在760nm紫外光下测定吸光度。

对实验结果处理后做标准曲线，以没食子酸为标准品。

以没食子酸的微克数表示总酚含量:吸光度=0.0069 μg没食子酸－0.042。

Folin-Denis试剂的配制：在2L烧瓶中加入750ml蒸馏水，再加入100g钨酸钠和20g磷钼酸，再加入50ml正磷酸回流2h, 冷却后装入1L容器内置于暗处实验组*3:体积Folin-Denis的体积Na2CO3MEOH层0.25ml 0.5ml 0.5mlH层0.25ml 0.5ml 0.5mlCH层0.25ml 0.5ml 0.5mlEA层0.25ml 0.5ml 0.5mlBUOH层0.25ml 0.5ml 0.5mlW层 1 2 2对照组*3：DW DW Na2CO3体积0.25ml 0.5ml 0.5ml空白组*3：体积DW的体积Na2CO3MEOH层0.25ml 0.5ml 0.5 mlH层0.25ml 0.5ml 0.5 mlCH层0.25ml 0.5ml 0.5mlEA层0.25ml 0.5ml 0.5mlBUOH层0.25ml 0.5ml 0.5 mlW层0.25ml 0.5ml 0.5ml2.2总黄酮含量测定：在试管中分别加入不同层样品(1mg/ml) 0.5ml + 1M CH3COOK溶液0.1ml + DW 2.8ml + 95%乙醇 1.5ml + 10% AlCl3·6H2O溶液0.1ml，并做三组重复。

枣叶和酸枣叶的总酚、总黄酮以及抗氧化能力含量测定

枣叶和酸枣叶的总酚、总黄酮以及抗氧化能力含量测定一、本文概述本文旨在测定枣叶和酸枣叶中的总酚、总黄酮含量，并评估其抗氧化能力。

酚类和黄酮类化合物是植物中常见的次生代谢产物，具有广泛的生物活性，如抗氧化、抗炎、抗癌等。

枣树和酸枣树作为常见的果树，其叶片中含有丰富的酚类和黄酮类化合物，因此具有一定的药用和保健价值。

本研究通过化学方法提取枣叶和酸枣叶中的总酚和总黄酮，并采用标准曲线法对其含量进行测定。

通过DPPH自由基清除实验和ABTS 自由基清除实验评估其抗氧化能力。

通过对比枣叶和酸枣叶中总酚、总黄酮含量及抗氧化能力的差异，为进一步开发利用这两种植物资源提供理论依据。

本研究的结果将为枣叶和酸枣叶的开发利用提供重要参考，同时也有助于深入了解植物次生代谢产物的生物活性及其与人体健康的关系。

本研究还将为植物资源的综合利用和农业可持续发展提供新的思路和方法。

二、材料与方法本实验所用的枣叶和酸枣叶采自同一地区、相同生长条件下的健康植株。

采样时间为春季，选择新鲜、无病虫害的叶片，经过清洗、干燥、粉碎后备用。

实验所用试剂包括福林酚试剂、碳酸钠、铝离子试剂、芦丁标准品等，均为分析纯。

实验仪器包括紫外可见分光光度计、电子天平、离心机、恒温水浴锅等。

采用福林酚法测定总酚含量。

取适量样品粉末，加入一定浓度的福林酚试剂，充分反应后，测定吸光度值，根据标准曲线计算总酚含量。

采用铝离子比色法测定总黄酮含量。

取适量样品粉末，加入铝离子试剂，充分反应后，测定吸光度值，根据标准曲线计算总黄酮含量。

采用DPPH自由基清除法测定抗氧化能力。

取适量样品粉末，加入DPPH自由基溶液，充分反应后，测定吸光度值，根据公式计算DPPH 自由基清除率，从而评估样品的抗氧化能力。

实验数据采用Excel软件进行整理与计算，采用SPSS软件进行统计分析。

所有数据均以平均值±标准差表示，不同样品间的比较采用t检验。

通过本实验方法，我们可以对枣叶和酸枣叶的总酚、总黄酮以及抗氧化能力进行定量测定，为深入研究这两种植物的药理活性提供科学依据。

亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定

亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定田芳窦德强迟玉新吴阳朱红丘鹰昆康廷国董锋【摘要】目的成立亚贡叶总黄酮、总酚酸的含量测定方式。

方式利用分光光度计通过测定吸光度计算总黄酮、总酚酸的含量。

结果实验成立了总黄酮、总酚酸的标准曲线，测得亚贡叶中总黄酮平均含量为%, RSD=%（n=6）；总酚酸平均含量为%, RSD=%（n=6）。

结论成立了亚贡叶的总黄酮、总酚酸含量测定方式，该法简单、快捷，重现性好，可用于亚贡叶的质量操纵和定量分析。

【关键词】亚贡总黄酮总酚酸Abstract：ObjectiveTo establish the determination methods of total flavonoids and total phenolic acid from leaf of Yacon. MethodsThe content of total flavonoids and total phenolic acid were determined by spectrophotometry. ResultsCalibration graphs were constructed for total flavonoids and total phenolic acid. The content of total flavonoids was % and the total phenolic acid was %. ConclusionThe methods are rapid, reliable, accurate and suitable for analysis of total flavonoids and total phenolic acid and quality control in Smallanthus sonchifolius.Key words：Yacon; Total flavonoids; Total phenolic acid亚贡Smallanthus sonchifolius (Poepp．et End1．)H．Robinson为菊科向日葵属连年生草本植物，俗称“雪莲果”“雅龙果”，英文名为“YACON”。

UV法测定苗药仙鹤草中总黄酮、总酚的含量

[Ｓ].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社ꎬ１９９３.[７]买买提明吾布力ꎬ伊河山伊明ꎬ玉素甫江艾力ꎬ等.维吾尔矿物药库西台法[Ｍ].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社ꎬ２０１６:１－３.２０１８年５月１２日收稿㊀ә基金项目:黔南州科技局项目(黔南科合社字(２０１６)２２号)ꎻ黔南民族医学高等专科学校(ＱＮＹＺ２０１６００９)ꎮ㊀作者简介:胡志平(１９８３－)男ꎬ中药学硕士ꎬ讲师ꎬ黔南民族医学高等专科学校药学系教师.主要从事民族医药的质量控制及化学成分研究ꎮＵＶ法测定苗药仙鹤草中总黄酮㊁总酚的含量ә胡志平㊀王传明㊀陆廷祥㊀魏学军(黔南民族医学高等专科学校ꎬ贵州㊀都匀㊀５８００１３)摘㊀要㊀目的:建立测定仙鹤草中总黄酮㊁总酚含量的测定方法ꎮ方法:以芹菜素为对照品ꎬ采用紫外分光光度法在３４５ｎｍ处测定仙鹤草中黄酮的含量ꎻ以没食子酸为对照品ꎬ采用分光光度法在２５９ｎｍ处测定仙鹤草中多酚的含量ꎮ结果:芹菜素在０.００２０~０.０１００㎎/ｍＬ范围内呈良好的线性关(ｙ＝８７.１９００ｘ－０.０２４０ꎬＲ２＝０.９９９１)ꎬ回收率的ＲＳＤ为４.９３％ꎬ(ｎ＝６)ꎻ没食子酸在０.００３２~０.０１６０㎎/ｍＬ范围内呈良好线性关系(ｙ＝１.３８９３ｘ－０.０７４１ꎬＲ２＝０.９９９９)ꎬ回收率的ＲＳＤ为３.２５％(ｎ＝６)ꎮ结论:该方法简便㊁准确ꎬ具有良好的精密度㊁稳定性㊁重复性ꎬ可用于仙鹤草中黄酮㊁总酚的含量测定ꎮ关键词㊀仙鹤草ꎻ紫外分光光度法ꎻ总黄酮ꎻ总酚中图分类号:Ｒ２９１.６㊀文献标识码:Ｂ㊀文章编号:１００６－６８１０(２０１８)０８－００３９－０３㊀㊀仙鹤草(ＡｇｒｉｍｏｎｉａｐｉｌｏｓａＬｅｄｅｂ)为蔷薇科植物龙牙草的干燥地上部分ꎮ多生长在上坡草地㊁路旁及田边ꎮ在民间广泛用于治疗吐血㊁痢疾㊁腹泻以及外伤出血等疾病[１]ꎮ其黄酮㊁总酚在植物体中广泛存在ꎬ称之为二次代谢产物ꎮ国内外学者对仙鹤草的研究大多数在生态学㊁化学成分㊁对各成分的提取方法㊁药理及临床作用方面ꎮ近年来ꎬ对仙鹤草的化学成分研究显示:其全草含有挥发油㊁黄酮类㊁总酚类㊁鞣质类及生物碱类等化合物[２]ꎬ目前从仙鹤草中得到的黄酮具有降糖㊁抗心率失常等药理作用ꎻ鹤草酚能降低Ｋ５６２白血细胞的活性ꎬ提高癌细胞的凋亡率并且驱虫广且疗效好[３－４]ꎮ但有关仙鹤草酚㊁黄酮物质含量测定方面的研究报道很少ꎬ为了在临床上能够合理分配剂量㊁充分地利用其仙鹤草中黄酮㊁总酚这类物质ꎬ所以寻找能准确测定其黄酮㊁总酚含量的方法是有必要的ꎮ本试验以芹菜素㊁没食子酸分别为对照品ꎬ通过紫外分光光度法测定仙鹤草黄酮㊁总酚的含量ꎬ并对确定的试验条件从方法学的精密度㊁稳定性㊁重复性㊁回收率等多方面进行验证ꎮ望能为合理开发利用仙鹤草多酚类物质提供参考性依据ꎮ１㊀试验部分１.１㊀试验仪器㊁材料１.１.１㊀试验仪器㊀紫外分光光度计(苏州市莱顿科学仪器有限公司)ꎻ电子分析天平(３５０－８１０５－０００ｆ１)ꎻ１０１－３ＡＢ型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯仪器有限公司)ꎻＦＺ１０２微型植物式样粉碎机(河北黄骅市齐家务科学仪器厂)ꎻ５０１型超级恒温水浴锅(上海试验仪器有限公司)ꎮ１.１.２㊀药品材料㊀芹菜素(中国药品生物制品检定所ꎬ批号:２０１７０３１５ｃ)ꎻ没食子酸(中国药品生物制品检定所ꎬ批号:１１０８３１－２０１６０５)ꎻ甲醇为分析醇ꎻ水为蒸馏水ꎻ仙鹤草采于贵州省都匀(匀东镇)ꎬ经黔南民族医专药学系王传明副教授鉴定为仙鹤草(ＡｇｒｉｍｏｎｉａｐｉｌｏｓａＬｅｄｅｂ)ꎮ１.２㊀试验方法１.２.１㊀对照品的制备㊀芹菜素:精密称取芹菜素０.００４７ｇꎮ置容量瓶中ꎬ甲醇定容至２５ｍＬꎬ摇匀ꎬ配制成０.１８８ｍｇ/ｍＬ的对照品溶液ꎮ没食子酸:精密称取没食子酸０.００４０ｇꎮ置容量瓶中ꎬ甲醇定容至２５ｍＬꎬ摇匀ꎬ配制成０.１６ｍｇ/ｍＬ的对照品溶液ꎮ１.２.２㊀样品溶液的制备㊀溶液:精密称取仙鹤草粉末约２.００００ｇꎬ置２５ｍＬ锥形瓶中ꎬ加入８倍量６０％的甲醇ꎬ连续回流提取３次ꎬ每次１ｈꎬ过滤后合并滤液ꎬ将其在６０ｏＣ恒温水浴锅中蒸干ꎬ转移到２５ｍＬ容量瓶中ꎬ用甲醇定容至刻度线即得ꎮ１.２.３㊀测定波长的选择㊀芹菜素:精密移取对照品和仙鹤草样品溶液于１０ｍＬ容量瓶中ꎬ用甲醇定容ꎮ分别用紫外分光光度计在２００~４００ｎｍ范围内进行扫描ꎬ选择最大吸收波长为ꎮ没食子酸:精密移取对照品和仙鹤草样品溶液于１０ｍＬ容量瓶中ꎬ用甲醇定容ꎮ分别用紫外分光光度计在２００~４００ｎｍ范围内进行扫描ꎬ选择最大吸收波长为ꎮ１.２.４㊀标准曲线的绘制㊀芹菜素:精密移取芹菜素０.１㊁０.２㊁０.３㊁０.４㊁０.５ｍＬ于１０ｍＬ容量瓶中ꎬ甲醇定容配置成不同浓度的标准溶液ꎬ从中吸取４ｍＬ置于比色皿中ꎬ在确定波长处测定吸光度值ꎬ见图１ꎮ９３中国民族医药杂志㊀２０１８年８月㊀第２４卷㊀第８期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀图1芹菜素的标准曲线㊀㊀没食子酸:精密移取没食子酸０.１㊁０.２㊁０.３㊁０.４㊁０.５ｍＬ于５ｍＬ容量瓶中ꎬ甲醇定容配置成不同浓度的标准溶液ꎬ从中吸取４ｍＬ置于比色皿中ꎬ在确定波长处测定吸光度值ꎬ见图２ꎮ图2没食子酸的标准曲线２㊀方法学考察２.１㊀精密度试验㊀总黄酮:精密移取对照品芹菜素溶液ꎬ按所确定的方法测定其吸光度(ｎ＝５)ꎬ结果表明仪器精密度良好ꎬ见表１.表１㊀总黄酮的精密度编号１２３４５ＲＳＤ(％)吸光度０.４９２５０.４８９９０.４８８８０.４９４５０.４９０７０.４６㊀㊀总酚酸:精密移取没食子酸溶液ꎬ按所确定的方法测定其吸光度(ｎ＝５)ꎬ结果表明仪器精密度良好ꎬ见表２表２㊀总酚酸的精密度编号１２３４５ＲＳＤ(％)吸光度０.０８７４０.０８８８０.０８６６０.０８７２０.０８７３０.９３２.２㊀稳定性试验㊀总黄酮:取仙鹤草样品溶液ꎬ按所确定的方法每隔１５ｍｉｎ测定一次吸光度ꎮ１ｈ内测定其吸光度(ｎ＝５)ꎮ其结果表明该试验方法对于仙鹤草样品在１ｈ内有良好的稳定性ꎬ见表３ꎮ表３㊀总黄酮的稳定性编号０ｍｉｎ１５ｍｉｎ３０ｍｉｎ４５ｍｉｎ６０ｍｉｎＲＳＤ(％)黄酮０.４６４６０.４６２９０.４６３２０.４６８９０.４６２２０.５８㊀㊀总酚酸:取仙鹤草样品溶液ꎬ按所确定的方法每隔１５ｍｉｎ测定一次吸光度ꎮ１ｈ内测定其吸光度(ｎ＝５)ꎮ其结果表明该试验方法对于仙鹤草样品在１ｈ内有良好的稳定性ꎬ见表４ꎮ表４㊀总酚酸的稳定性编号１２３４５ＲＳＤ(％)吸光度０.３９９８０.４００５０.４００１０.３９９６０.４００３０.０９２.３㊀重复性试验㊀总黄酮:称取同一批仙鹤草２.０ｇꎬ按所确定的条件提取制备样品溶液ꎬ在按确定的方法测定其吸光度(ｎ＝５)ꎬ见表５.表５㊀总黄酮的重复性编号１２３４５ＲＳＤ(％)吸光度０.５０３２０.５０４３０.４９６００.４８８５０.４８５１１.７３㊀㊀总酚酸:称取同一批仙鹤草２.０ｇꎬ按所确定的条件提取制备样品溶液ꎬ在按确定的方法测定其吸光度(ｎ＝５)ꎬ见表６ꎮ表６㊀总酚酸的重复性编号１２３４５ＲＳＤ(％)吸光度０.４０５００.４０２７０.４１０３０.３９４７０.４０５７１.４２２.４㊀回收率试验㊀芹菜素:精密称取５月采收的仙鹤草１.００００ｇꎬ６份ꎬ加入一定量的对照品ꎬ按确定的方法测定吸光度ꎬ见表７ꎮ表７㊀总黄酮的回收率样品量(ｇ)对照品(ｍｇ)吸光度总黄酮含量ｍｇ/ｍＬＲＳＤ(％)回收率％１.０６７６０.１０.２６４１０.００３３１.０３０００.２０.２８５２０.００３５１.０６３００.１０.２９８００.００３７１.００２００.１０.２９５７０.００３７１.０５９００.２０.２９８６０.００３７１.００２１０.１０.３０２８０.００３７４.９３９９.８㊀㊀没食子酸:精密称取６月采收的仙鹤草０.１０００ｇꎬ６份ꎬ加入一定量的对照品ꎬ按确定的方法测定吸光度ꎬ见表８ꎮ表８㊀总酚酸的回收率样品量(ｇ)加入对照品(ｍｇ)吸光度总酚含量(ｍｇ/ｍＬ)ＲＳＤ(％)回收率％１.０００８２.６０.２９３００.２６４２１.０００３２.５０.３０８４０.２７５３１.０００７２.７０.２９６４０.２６６７１.０００４２.８０.２８２８０.２５６９１.０００４２.７０.２９６２０.２６６５１.０００６２.７０.３０８００.２７５０３.２５１０１３㊀样品含量的测定总黄酮:精密称取各批次样品２.００００ｇꎬ且每批次３份ꎮ按确定的条件提取制备样品溶液ꎬ在按确定的方法测定其吸光度ꎬ见表９ꎮ０４㊀㊀㊀㊀㊀ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＰｈａｒｍａｃｖｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｉｎｏｒｉｔｉｅｓ㊀Ａｕｇｓｔ２０１８ꎬＶｏｌ.２４Ｎｏ.８表９㊀总黄酮的含量采收期样品量(ｇ)吸光度总黄酮含量(ｍｇ/ｍＬ)平均含量五月２.００６３０.５５５５０.００６６２.００６６０.５２１５０.００６３２.００６００.５５８００.００６７０.００６５六月２.０００５０.４８１３０.００５８２.００４９０.４５８９０.００５５２.０４０８０.４４９００.００５４０.００５６七月２.００９００.５２８７０.００６３２.００３５０.５２０３０.００６２２.００９３０.５４９９０.００６６０.００６４八月２.０５７２０.４１０１０.００５０２.００７９０.４９２００.００５９２.０８６３０.４９２８０.００５９０.００５６九月２.００２００.３６７７０.００４５２.０００３０.３７９８０.００４６２.００４８０.３７５８０.００４６０.００４６㊀㊀总酚酸:精密称取各批次样品２.００００ｇꎬ且每批次３份ꎮ按确定的条件提取制备样品溶液ꎬ在按确定的方法测定其吸光度ꎬ见表１０ꎮ４㊀结论与讨论仙鹤草中组成成分较多ꎬ提取筛选条件应以多种有效成分为主进行考察ꎮ此试验条件是用不同浓度的甲醇㊁不同时间及次数来提取仙鹤草ꎬ通过紫外分光光度计测其含量ꎮ筛选出的条件为８倍量６０％的甲醇为溶剂㊁提取３次㊁每次１ｈꎮ本试验采用连续回流法提取样品ꎬ在该试验条件下建立的测定黄酮及总酚含量的方法都有很好的结果ꎬ如仪器精密度好㊁样品重复性好㊁得率高ꎮ可作为仙鹤草黄酮㊁总酚含量的测定方法ꎮ也为以后仙鹤草新的药理作用的开发及充分利用仙鹤草资源提供依据ꎮ表１０㊀总酚酸的含量采收期样品量(ｇ)吸光度总酚含量(ｍｇ/ｍＬ)平均含量五月２.００６３０.３０５３０.２７３１２.００６６０.２７６３０.２５００２.００６００.３６１４０.３１３５０.２７８９六月２.０００５０.２６７００.２４５５２.００４９０.２６４３０.２４５６２.０４０８０.２６７１０.２４５６０.２４５６七月２.００９００.４２２１０.３５７２２.００３５０.４０１４０.３４２３２.００９３０.４０３００.３４３４０.３４７６八月２.０５７２０.３４５６０.３０２１２.００７９０.３８２８０.３２８９２.０８６３０.３９１００.３３４８０.３２１９九月２.００２００.２５４００.２３６２２.０００３０.２８０７０.２５５４２.００４８０.２８４６０.２５８２０.２４９９参考文献[１]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[Ｓ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２０１０:９４.[２]路芳ꎬ巴晓雨ꎬ何永志.仙鹤草的化学成分研究[Ｊ].中草药ꎬ２０１２ꎬ４３(５):８５１－８５５.[３]阳向波.仙鹤草的现代药理研究进展及临床研究应用[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２００３ꎬ１４(１２):７８０.[４]李鹏ꎬ尹雅玲ꎬ李嘉ꎬ等.鹤草酚对Ｋ５６２白血细胞的抑制作用[Ｊ].安徽农业大学ꎬ２０１１ꎬ３９(２２):１３４１７－１３４１８.２０１８年５月２５日收稿ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｎｄｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｌｉｎｔｈｅＭｉａｏｍｅｄｉｃｉｎｅＡｇｒｉｍｏｎｉａｐｉｌｏｓａｌｅｄｅｂｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＵＶｍｅｔｈｏｄＨＵＺｈｉ－ｐｉｎｇＡＮＧＣｈｕａｎ－ｍｉｎＬＵＴｉｎ－ｘｉａｎｇＷＥＩＸｕｅ－ｊｕｎＫｉｎｇｏｆｈｏｃｈｉｍｉｎｈꎬｌｕｔｉｎｇｘｉａｎｇꎬｗｅｉｘｕｅｊｕｎＱｉａｎｎａｎｃｏｌｌｅｇｅｏｆｅｔｈｎｉｃｍｅｄｉｃｉｎｅꎬＧｕｉｚｈｏｕＤｕｙｕｎ５８００１３[Ａｂｓｔｒａｃｔ]Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ:Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｆｌａｖｏｎｅａｎｄｔｈｅｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｌｓｃｏｎｔｅｎｔｉｎａｇｒｉｍｏｎｉａｐｉｌｏｓａｌｅｄｅｂ.Ｍｅｔｈｏｄｓ:Ｔｈｅａｐｉｇｅｎｉｎａｓｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｌｓｉｎａｇｒｉｍｏｎｉａｐｉｌｏｓａｌｅｄｅｂ３４５ｎｍｂｙｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙꎻＧａｌｌｉｃａｃｉｄａｓｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｉｍｉｎｅｔｈｅｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｉｓｉｎａｇｒｉｍｏ￣ｎｉａｐｉｌｏｓａｌｅｄｅｂ２５９ｎｍｂｙｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ.Ｒｅｓｕｌｔｓ:Ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆａｐｉｇｅｎｉｎｓｉｎｔｈｅｉｎｔｅｒｖａｌｏｆ０.００２０~０.０１００㎎/ｍＬｗｅｒｅｓｈｏｗｅｄａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ.ｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅａｔ３４５ｎｍｗａｓｙ＝８７.１９００ｘ－０.０２４０ꎬＲ２＝０.９９９１ａｎｄｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ４.９３％ꎬｎ＝６ꎻＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｇａｌｌｉｃａｃｉｄｉｎｔｈｅｉｎｔｅｒｖａｌｏｆ０.００３２~０.０１６０㎎/ｍＬｗｅｒｅｓｈｏｗｅｄａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ.ｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅａｔ２５９ｎｍｗａｓｙ＝１.３８９３ｘ－０.０７４１ꎬＲ２＝０.９９９９ａｎｄｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ３.２５％ꎬｎ＝６.Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ:Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅꎬａｃｃｕｒａｔｅꎬａｎｄｈａｓａｌｌｒｉｇｈｔｐｒｅｃｉｓｉｏｎꎬｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ.ｗｈｉｃｈｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｌｓａｎｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎａｇｒｉｍｏｎｉａｐｉｌｏｓａｌｅｄｅｂ.[Ｋｅｙｗｏｒｄｓ]ａｇｒｉｍｏｎｉａｐｉｌｏｓａｌｅｄｅｂꎻｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙꎻｆｌａｖｏｎｅꎻｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｌｓ.１４中国民族医药杂志㊀２０１８年８月㊀第２４卷㊀第８期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀。

亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定

亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定背景作为食品和药品等领域的常用添加剂，总黄酮和总酚酸广受关注。

亚洲人民喜欢饮用茶水，茶叶中富含黄酮类和酚酸类物质。

亚贡叶是一种茶树的近亲，也含有丰富的总黄酮和总酚酸。

因此，对于亚贡叶中总黄酮及总酚酸的含量测定具有一定的研究意义。

实验方法实验器材•分析天平•恒温器•恒温槽•磨粉器•容量瓶•离心管•手动振荡器实验试剂•甲醇•乙酸乙酯•乙醇•硫酸实验步骤1.用磨粉器将亚贡叶制成细粉末，称取一定量置于离心管中。

2.加入甲醇，并振荡30分钟，放置15分钟静置。

3.经离心制成沉淀，加入乙酸乙酯，并振荡，再静置15分钟。

4.取上层液体移到新的烧杯中。

5.将离心管里的沉淀放到容量瓶内，加入乙酸乙酯，振荡10分钟，用乙酸乙酯补充至刻度线。

6.将乙酸乙酯提取液过滤，取一部分蒸干。

7.取一定量蒸干物质加入乙醇，振荡，放置15分钟。

8.将液体放到新的烧杯中。

9.取一部分乙醇液体移动到离心管中，加入硫酸，振荡2分钟，放置15分钟静置。

10.取上层液体移到新的离心管中，弃去底部混浊物质。

11.将液体移动到新的烧杯中并蒸干。

12.用甲醇溶解蒸干的物质。

13.用分析天平，分别对总黄酮和总酚酸量进行测定。

结论根据实验结果，亚贡叶中总黄酮的含量为 X 毫克/克，总酚酸的含量为 Y 毫克/克。

实验过程中，需要注意样品的制备和测量方法。

由于各种因素的干扰，需要重复多次实验，取平均值来得出较为准确的数据。

花青素、总酚、类黄酮含量测定

花青素、总酚和类黄酮是植物中重要的生物活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物功能。

因此，测定这些成分的含量对于评估植物的营养价值和药用价值具有重要意义。

花青素是一类天然色素，具有蓝色、紫色等颜色，广泛存在于植物的花、果、叶等部位。

花青素含量的测定方法有多种，其中常用的是分光光度法。

该方法利用花青素在特定波长下的吸收特性，通过测定吸光度来计算花青素的含量。

在实际操作中，需要注意选择合适的提取溶剂、控制提取时间和温度等因素，以保证测定结果的准确性。

总酚是指植物中所有酚类化合物的总量，包括单酚、多酚等。

酚类化合物具有很强的抗氧化活性，对于预防心血管疾病、癌症等疾病具有重要作用。

总酚含量的测定方法有多种，其中常用的是福林-酚法。

该方法利用酚类化合物与福林试剂的氧化还原反应，通过测定反应产物的吸光度来计算总酚的含量。

需要注意的是，福林试剂的浓度和反应时间等因素对测定结果有较大影响，需要进行严格控制。

类黄酮是一类具有黄酮结构的化合物，广泛存在于植物中，具有抗氧化、抗炎、抗过敏等多种生物活性。

类黄酮含量的测定方法有多种，其中常用的是高效液相色谱法。

该方法利用类黄酮在色谱柱上的保留特性，通过测定峰面积或峰高来计算类黄酮的含量。

需要注意的是，样品的处理方法和色谱条件等因素对测定结果有较大影响，需要进行优化和标准化。

综上所述，花青素、总酚和类黄酮是植物中重要的生物活性成分，其含量测定对于评估植物的营养价值和药用价值具有重要意义。

在实际操作中，需要选择合适的方法进行测定，并严格控制各种影响因素，以保证测定结果的准确性和可靠性。

总黄酮的测定方法

总黄酮的测定方法总黄酮是指一种天然的化合物，属于类黄酮类物质。

总黄酮是一类化合物的总和，包括黄酮，异黄酮和类黄酮等。

这些化合物广泛分布于植物中，并具有许多生理功能，如抗氧化性、抗癌性、降血脂、心脑血管保护等。

因此，对总黄酮的测定方法很重要，能够为药理研究和食品营养分析提供支持。

总黄酮的测定方法多种多样，根据不同的化学性质、测量目的和样品的性质，采用不同的测定方法。

下面介绍一些常见的总黄酮测定方法。

1. 酸碱比色法酸碱比色法是总黄酮测定的一种常用方法。

它是根据总黄酮具有酸碱变色性质，利用酸碱指示剂变色的原理进行测定。

具体实验流程如下：（1）取一定量的样品，加入稀盐酸，使样品酸化。

（2）加入稀氨水，使RH值在6.5～7.0之间。

（3）加入酚酞指示剂，观察样品溶液颜色变化，从而计算出总黄酮含量。

这种测定方法操作简便、快速，但由于酸碱条件的控制较为严格，且无法区分具体的黄酮类化合物，所以在某些情况下需要结合其他方法进行测定。

2. 溶解性法溶解性法是另一种常用的总黄酮测定方法。

它是通过将样品与有机溶剂混合，将总黄酮从样品中提取出来，然后用紫外光谱或比色法进行测定。

具体实验流程如下：（1）取一定量的样品，加入适量的有机溶剂（如甲醇、乙醇等），在恒温水浴中振荡提取一定时间。

（2）离心沉淀，取上清液用紫外光谱或比色法进行测定。

这种测定方法能够将总黄酮从样品中提取出来，并且可区分不同种类的黄酮化合物。

但由于实验中需用到有机溶剂，因此分析结果存在一定的误差。

3. 高效液相色谱法高效液相色谱法是对总黄酮测定的一种较为精确的方法。

该方法是利用高效液相色谱仪对总黄酮进行分离和定量。

具体实验流程如下：（1）取一定量的样品，经过萃取、分离和净化处理后，进行高效液相色谱分析。

（2）色谱分离后，对不同种类的黄酮进行检测和定量。

该方法具有分离效果好、灵敏度高、稳定可靠等优点，是总黄酮测定的可靠方法。

总的来说，总黄酮的测定方法有很多，根据实验条件、样品性质和分析目的不同，可以选择不同的方法。

药典中总黄酮测定方法

药典中总黄酮测定方法
总黄酮是一类具有类黄酮结构和作用的化合物，广泛存在于植物中。

药典中常用的总黄酮测定方法包括以下几种：
1. 显色法：将含总黄酮样品与乙醇-水混合溶液及磷酸钠溶液混合后，加入硼酸试液，产生紫色或蓝色显色反应，通过比色法测定总黄酮含量。

2. 二苯基丙烯酸法：将含总黄酮样品与二苯基丙烯酸溶液混合后，利用紫外可见光谱法测定吸光度，通过标准曲线计算总黄酮含量。

3. 铝试剂法：将含总黄酮样品与铝试剂溶液混合后，加入氢氧化钠溶液，经酸化处理后用紫外可见光谱法测定吸光度，计算总黄酮含量。

4. 比色法：将含总黄酮样品与乙醇-氢氧化钾溶液混合后加入稀硫酸溶液，以黄烷酮为对照品，经比色法测定吸光度，计算总黄酮含量。

以上是比较常用的药典中总黄酮测定方法，选择不同的方法需考虑到样品类型、检测精度等实际问题。

黄酮、多酚和抗氧化

1、总黄酮含量(硝酸铝～亚硝酸钠比色法，以芦丁计)芦丁标准标准溶液的配制：准确称取经105 ℃干燥至恒重的芦丁标准品15.0 mg（精确至0.0001g），用甲醇溶解并定容至100 mL，配成150 μg/mL 的芦丁标准溶液，制备标准曲线。

精密称取一定量的测定样品，用30 %的乙醇溶液溶解定容至100 mL，取1 mL的待测液，加入30 %乙醇溶液至5 mL，加入5%亚硝酸钠溶液0.3 mL，混匀后放置5 min，加入10 %硝酸铝溶液0.3 mL，混匀后放置6 min，加入1.0 mol/L氢氧化钠溶液4 mL，用30 %乙醇定容至10 mL，静置10分钟，以零管为空白，摇匀后用1 cm的比色杯，在510 nm的波长处测定吸光度，并根据芦丁的标准曲线计算试样的总黄酮含量。

2、酚酸含量（福林试剂还原比色法，以没食子酸计）没食子酸标准溶液的配制：称取经真空干燥至恒重的没食子酸对照品25.0 mg，用30 %的乙醇溶液溶解并定容至100 mL，配成0.250 mg/mL的没食子酸标准溶液，制备标准曲线。

精密称取一定量的测定样品，用30 %的乙醇溶液溶解、定容，并稀释至适宜浓度，记录总体积。

取0.1 mL样品，并用水稀释至5.0 mL，各加入0.5 mL 未稀释的福林试剂，混匀后静置8 min，加入1.5mL 20%Na2CO3水溶液，室温暗处静置2 h，以零管为空白，用1cm的比色杯，在765 nm的波长处测定吸光度，并根据没食子酸的标准曲线计算试样的总酚含量。

抗氧化方法ABTS˙+法先配制140 mmol/L过硫酸钾（K2S2O8）溶液和7 mmol/L ABTS储备液，然后取176 µL 140 mmol/L过硫酸钾溶液和10 mL 7 mmol/L ABTS储备液混合，在室温条件下避光储备12-16 h。

测定之前加入乙醇将ABTS˙+溶液稀释至吸光值为0.700±0.02（734 nm）下将3.9 mL 的ABTS˙+溶液与0.1 mL待测样溶液（所用测试样品均溶解在50 %的甲醇中）混合摇匀，在室温下反应6 min，在734 nm 波长下测定吸光值，以50 %的甲醇为空白对照(Re, Pellegrini, Proteggente, et al, 1999)。

总黄酮含量测定方法

总黄酮含量测定方法
总黄酮含量测定呀，有几种常见方法呢。

紫外- 可见分光光度法。

先得把样品处理好，就像给食材做前期准备一样。

把含有总黄酮的样品进行提取，提取液要纯净呀，不能有太多杂质干扰，杂质多了就像炒菜的时候锅没洗干净，那肯定做不出好菜。

然后在特定波长下测定吸光度，这个波长就像一把专门开总黄酮这把锁的钥匙，得找对喽。

这方法安全性挺高的，只要按照正常操作流程，不会有啥危险情况，稳定性也不错呢，只要仪器正常工作，数据偏差不会太大。

在食品、药品检测领域应用可广泛了，能快速知道产品里总黄酮的大概含量。

我知道一家小型制药厂，想检测新研发的药品里总黄酮含量，就用这个方法，快速得到结果，他们高兴得不得了，就像挖到宝藏一样。

还有高效液相色谱法。

这得把样品制成合适的溶液，溶液就像一支整齐有序的队伍，不能乱哄哄的。

然后注入色谱仪，色谱仪就像一个超级严格的裁判，把不同成分分得清清楚楚。

测定过程中要保证仪器的清洁和稳定，这可不能马虎呀，不然数据就乱套了。

这个方法安全性也还好，就是操作要细心些。

在科研中用得很多，能精确测定总黄酮含量，优势就是精准度高呀。

有个科研团队研究植物中的总黄酮含量，用这个方法得到准确数据，他们兴奋地说这简直是找到了解开谜团的密码。

我觉得这些总黄酮含量测定方法各有各的好，在合适的场景下都能发挥大作用，就像不同的工具在不同的工作里都能大显身手。

黄珠子草不同部位总黄酮和总酚含量及抑菌活性测定

黄珠子草不同部位总黄酮和总酚含量及抑菌活性测定张云;韩树;王俊儒【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2009(018)006【摘要】采用紫外分光光度法,NaNO_2-Al(NO_3)-NaOH和Folin-Ciocalteu比色法测定黄珠子草根、茎、叶、果实4个部位中总黄酮、总酚含量,采用滤纸片法测定了根、茎、叶、果实4个部位乙醇提取物对7种常见病原菌(草莓枯萎病菌、辣椒疫霉病菌、青霉病菌、黄瓜枯萎菌、西瓜枯萎病菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)的抑菌活性.叶中总黄酮和总酚含量均最高,分别为31.07 mg·g~(-1)、23.85 mg·g~(-1),叶中总黄酮含量分别是茎、根及果实的2.86、1.83、1.21倍;叶中总酚分别是茎、根及果实的27.10、22.29、2.52倍.叶中总黄酮、总酚含量均较其他部位高,果实次之,茎最低.在预设质量浓度为40 mg·mL~(-1)时,叶的乙醇提取物对病原菌的抑制效果最好,特别是对黄瓜枯萎病原菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,抑制率分别为100%、89.78%、100%,且最小抑菌质量浓度分别为10 mg·mL~(-1)、20 mg·mL~(-1)、10 mg·mL~(-1).果实部分的抑菌效果稍次于叶部分的,但对黄瓜枯萎病原菌表现出强抑菌性,其抑制率为98.13%.根部分整体抑菌效果较弱,但对黄瓜枯萎病原菌、大肠杆菌有较强的作用,抑制率分别为65.28%,90.04%.而茎基本上没有什么活性.叶和果实的活性成分含量均较高,抑菌活性也较强,药用价值很高,是黄珠子草的主要药用部位.【总页数】4页(P306-309)【作者】张云;韩树;王俊儒【作者单位】西北农林科技大学,生命科学学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学,理学院,陕西杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.磨盘草不同营养器官中总黄酮和总酚含量测定 [J], 张燕;张洪斌;陈忠荫;林伟;陈光宙2.骏枣枣吊不同部位枣叶总黄酮、总酚含量的动态变化 [J], 邹玲;冯彬;白红进3.贵州产黄珠子草总黄酮毒性及抗CCl4、AAP中毒小鼠肝损伤实验 [J], 谢珊;贾宪生4.黄珠子草总黄酮含量测定 [J], 谢珊;龙国友5.不同产地不同药用部位鸡骨草总黄酮含量测定 [J], 戴艳萍;张春凤;杨中林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。