化学滴定法测定黄连素片有效成分盐酸小檗碱含量
分析盐酸小檗碱含量判断方式
分析盐酸小檗碱含量判断方式盐酸小檗碱为抗菌药,主要用于志贺菌属、霍乱弧菌等敏感病原菌所致的胃肠炎、细菌性痢疾等肠道感染。
盐酸小檗碱为《中国药典》收载品种,含量测定《中国药典》2005年版二部对其原料药采用容量法,制剂采用高效液相色谱法,有效地控制了该药的质量。
盐酸小檗碱常制成各种复方制剂和多种剂型广泛应用于临床。
对盐酸小檗碱及其复方制剂中盐酸小檗碱含量测定方法研究的文献较多,现就近年来研究的含量分析方法作一概述。
1紫外-可见分光光度法(UV)UV法由于具有灵敏度和精密度较高,操作简便、快速等特点,广泛用于各种药物制剂的分析中。
贺子华[1]分别采用容量法、UV法和高效液相色谱法(HPLC)对盐酸小檗碱片进行含量测定,经三种方法对样品进行分析比较,认为容量法测定含量结果均符合规定;HPLC法分析盐酸小檗碱片中含有其他生物碱的量较多,盐酸小檗碱的量较少;但采用UV法测定盐酸小檗碱片的含量方法较为简便,专属性强。
2二阶导数光谱法(SDS)SDS是解决干扰物质与被测物光谱重叠,消除胶体等散射影响和背景吸收,提高光谱分辨率的一种数据处理技术,常用于药物分析中。
崔颖等[2]探讨SDS测定芪黄颗粒中小檗碱的含量,采用SDS,利用小檗碱在351.0nm和363.6nm(谷-峰)处振幅D值与浓度C值的关系(C=131.27D+0.0905,r=0.9999)计算其含量。
结果对照品溶液和供试品溶液在351.0nm和363.6nm处均出现谷-峰振幅,而阴性对照液在此处振幅约为零,不影响小檗碱的测定,扫描速度240nm/min,狭缝宽度2nm,λ=3nm,平均加样回收率为100.3%,RSD为0.73%,导数测定过程中改变λ,振幅D值则发生改变,该法采用对照品对照法,对照品及样品的振幅D值同时改变,但其比值不变,故对实验结果无影响。
徐英瑜等[3]建立SDS测定葛根芩连微丸中盐酸小檗碱的含量,采用SDS,以无水乙醇为溶剂,测定波长分别为365nm和274nm,扫描速度40nm/min。
分析盐酸小檗碱含量判断方式
分析盐酸小檗碱含量判断方式盐酸小檗碱是一种有机化合物，它是从黄连素中提取出来的。
盐酸小檗碱广泛用于医药和保健品领域，它具有很强的抗菌、抗炎和解热作用。
但是，要想使用盐酸小檗碱来制作药品或保健品，就必须先了解所含盐酸小檗碱的含量。
因此，分析盐酸小檗碱含量判断方式是非常重要的。
盐酸小檗碱含量的判断方式又分为定量和定性两类。
定量方法包括高效液相色谱法、气相色谱质谱法和紫外分光光度法等。
而定性方法则包括薄层色谱法和大气压化学电离质谱法等。
高效液相色谱法（HPLC）是一种精确分离、准确分析优质分子的方法。
由于其高效性、灵敏度和准确性，HPLC已广泛用于盐酸小檗碱含量的测定。
在HPLC中，样品与流动相通过具有高比表面积的纤维状或颗粒状固体柱进行分离。
样品在强化电荷区分和反相作用下进行逐渐分离和洗脱。
通过测量在紫外区域发生的吸收峰强度，可以确定分子的存在量。
气相色谱质谱法（GC-MS）是一种常用于分离和鉴定小分子有机化合物的方法。
在盐酸小檗碱的定量测试中，样品必须首先与化学试剂进行反应，然后制备成蒸发试剂。
通过用高温气流将其转变为气体，然后通过质谱仪来检测分子的存在情况，从而测定盐酸小檗碱含量。
由于这种方法具有高灵敏度和特异性，因此被广泛用于药物检测中。
紫外分光光度法是一种简便、快速且经济的分析方法。
在盐酸小檗碱的测定中，首先需要将样品溶解于透明溶剂中，然后通过紫外光谱测量波长在263nm处释放的光量。
由于盐酸小檗碱在这一波长范围内具有特征吸收率，因此可以根据其光谱图形得出盐酸小檗碱含量的值。
薄层色谱法可以检测许多化学物质。
在盐酸小檗碱的定性测试中，样品首先要与试剂进行反应，然后制备成薄层。
这样制成的薄层就可以通过将它们放置在化学涂层的对面，测量它们通过涂层的速度来判断盐酸小檗碱是否存在。
大气压化学电离质谱法（APCI-MS）是一种高灵敏度的方法，尤其适用于检测具有大相对分子质量的化合物。
在盐酸小檗碱检测中，样品必须被喷涂到装有化学试剂的分离棒上。
化学滴定法测定黄连素片有效成分盐酸小檗碱的含量
化学滴定法测定黄连素片有效成分盐酸小檗碱的含量【摘要】黄连素片为众所周知的市售家庭必备药，其有效成分为盐酸小檗碱。
作为启智创新夏令营的实验课题，笔者指导学生以化学滴定法对盐酸小檗碱含量进行测定。
在巩固分析化学课堂和实验教学知识的同时将其与实际应用相结合，达到了学以致用的教学目的，提高了学生的学习兴趣。
【关键词】黄连素；盐酸小檗碱；化学滴定；实际应用黄连为毛茛科黄连属植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根。
黄连的有效成分是生物碱，目前已分离的主要生物碱有小檗碱、黄连碱等。
其中小檗碱的含量最高，可达10%左右，以盐酸盐的状态存在于黄连中。
盐酸小檗碱（分子式为C20H18ClNO4·2H2O，相对分子量Mr = 407.85）的分子结构如下图所示。
图1 盐酸小檗碱的结构式盐酸小檗碱又称为盐酸黄连素，是一种常用的杀菌药物。
主要用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等肠道感染，对眼结膜炎、化脓性中耳炎等也有疗效。
此外它还有阻断α-受体、抗心律失常等作用。
市售的黄连素片（糖衣片、胶囊）是家庭常备药物，其有效成分即为盐酸小檗碱，它在药品中的含量直接决定着厂家所生产黄连素片的药效高低。
因此，测定黄连素片中盐酸小檗碱的含量具有重要的实际意义。
化学物质含量的测定属于分析化学领域的研究内容。
分析化学是获得物质化学组成和结构信息的科学，它所解决的主要问题即为物质中含有哪些组分，各种组分的含量是多少以及这些组分是以怎样的状态构成物质。
是化学研究中最基础，最根本的领域之一，也是化工、制药、轻化、材料、环境等专业的基础课之一。
按照分析方法分类，分析化学可分为化学分析法和仪器分析法两大类，两者相互补充，而标准分析结果常通过化学分析法获得，化学法可以说是仪器法的基础。
化学滴定分析是基于化学反应的一类重要的化学分析法，由于方法成熟，操作简便，省时快速，测定结果准确度较高，是生产实践和科学实验中重要的例行测试手段，即使在仪器分析法快速发展的今天，化学滴定分析法仍然具有很高的实用价值。
黄连素软膏中盐酸小檗碱的含量测定
黄连素软膏中盐酸小檗碱的含量测定
奚燕;余敏英;杨铭;顾希钧;郝明
【期刊名称】《上海中医药大学学报》
【年(卷),期】2004(18)4
【摘要】为建立黄连素软膏中盐酸小檗碱的含量测定方法 ,采用紫外分光光度法测定其含量 ,检测波长为 3 44nm。
结果显示 ,线性浓度范围为4μg/ml～l2 0 μg/ml,平均回收率为 99.3 1% ,RSD为 0 .89%。
结论 :本法简便快速、准确 ,适用于该制剂的含量测定。
【总页数】2页(P49-50)
【关键词】盐酸小檗碱;黄连素软膏;含量测定;紫外分光光度法
【作者】奚燕;余敏英;杨铭;顾希钧;郝明
【作者单位】上海中医药大学附属龙华医院药剂科
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.原子吸收光谱法间接测定黄连素片剂中盐酸小檗碱的含量 [J], 邓世林;李新凤
2.HPLC法测定参蛇软膏中盐酸小檗碱的含量 [J], 缪珊;栗艳;李捷;毕琳琳;张雅;石小鹏
3.HPLC法测定盐酸黄连素溶液中盐酸小檗碱含量 [J], 乐辉
4.高效液相色谱法测定参肤软膏中盐酸小檗碱含量 [J], 林雪霞
5.黄连素制剂中盐酸小檗碱含量测定的一种新方法 [J], 郎惠云
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盐酸小檗碱片含量测定影响因素
由财政统一拨付。 （五）职工个人缴存的住房公积金，每
月从其工资中代扣代缴。 提取公积金条件 职工符合下列条件之一的，可以申请提
取职工住房公积金： （一）购买自住住房一年之内,以办理
《房屋所有权证》《契证》。 （二）离休、退休或达到法定退休年龄
的； （三）出境定居的； （四）偿还所购自住住房贷款本息的； （五）户口迁出本市，并与单位终止劳
原料药 对照品
表 1 对照品及原料药吸湿情况
初始称量读 间隔 20 分钟时读
数（g）
时间
数（g）
0.10489 20 分钟 0.10567
0.09766 20 分钟 0.09842
0.01052 20 分钟 0.01132
0.00961 20 分钟 0.01036
吸水量 （%） 7.8% 7.6% 7.6% 7.8%
90.1%
安捷仑 1100 四元泵高效液相色谱仪
90.5%
结果表明，不同仪器对检验结果无影响。
六、建议 1．建议中国药典 2010 年版该品种的起 草单位考查采用容量分析法和 HPLC 法两种 方法测定含量的差异及影响因素。 2．建议盐酸小檗碱的生产单位对原料 药及制剂进行含量测定多批次的数据考查 （容量分析法及 HPLC 法）与积累，根据数 据进行分析总结，并报药典委。 3．鉴于盐酸小檗碱对照品在 105℃干 燥后，吸湿性强，建议对照品使用方法不宜 采 用 105 ℃ 干 燥 后 使 用 ， 按 C20H18ClNO4·2H2O 的实际纯度值直接带入 计算为好。
盐酸小檗碱片含量测定影响因素
——张迪
盐酸小檗碱片现收载于《中国药典》 2005 年版二部，含量测定方法为 HPLC 法， 原《中国药典》2000 年版二部含量测定方法 为容量分析法中的氧化-还原滴定法。盐酸 小檗碱的分子式为 C20H18ClNO4·2H2O。自执 行《中国药典》2005 年版二部以来，发现该 产品的含量测定结果因对照品批号不同，不 同仪器、不同色谱柱、原料药来源不同，造 成了检验结果的重复性较差，特别是部分生 产单位的盐酸小檗碱片时常在低限边缘，引 起我所的高度重视。经与生产单位沟通，生 产单位反馈其 100%投料，因此我所为保证检 验结果的准确性，对诸影响因素进行了详细 的试验考察，总结如下：
黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。
黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。
其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
[目的要求]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。
3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。
[实验原理]小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。
盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
O ONHCHOOOOCH3OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）N+OOOCH33小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
N+H3COH3COOCH3OCH3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。
碘量法测定黄连素中盐酸小檗碱的含量
碘量法测定黄连素中盐酸小檗碱的含量一、实验原理市售的黄连素片（糖衣片、胶囊）主要成分是盐酸小檗碱（C20H18CLNO4·2H2O·M1=407.85）,又称盐酸黄连素，是一种常用的杀菌药物。
主要治疗胃肠炎、眼结膜炎、化脓性中耳炎等。
它具有还原性，且能与K2Cr2O7定量反应生成沉淀，反应的计量关系为nK2Cr2O7:nC20H18CLNO4=1:2。
由于K2Cr2O7的还原产物Cr3+呈绿色，终点无法辨别出过量的K2Cr2O7的黄色，而且又没有合适的指示剂。
可先加入一定量且过量的K2Cr2O7标准溶液，使盐酸小檗碱完全反应，剩余的K2Cr2O7标准溶液再用间接碘量法以硫代硫酸钠标准溶液进行滴定，以淀粉为指示剂。
根据硫代硫酸钠溶液的用量可求出过量的重铬酸钾的物质的量，进而可测出黄连素片中盐酸小檗碱的含量。
二、仪器和试剂仪器：酸式滴定管，电子分析天平，250mL、100mL容量瓶各1个，50ml烧杯1个，玻璃棒，10mL、5mL、25mL移液管各1支，碘量瓶4个、玻璃漏斗1个。
试剂：基准物质K2Cr2O7、200g/L KI溶液、5g/L淀粉指示剂，0.1mol/L Na2S2O3滴定液、浓盐酸。
①200g/L KI溶液：称取KI100g，加蒸馏水溶解定容至500ml②2.5 g/L淀粉指示剂：称取淀粉0.5g,加热蒸馏水溶解定容至100ml③0.1mol/LNa2S2O3滴定液：称取 Na2S2O315.8g,加蒸馏水溶解定容至500ml④4.6mol/L HCI溶液：量取浓盐酸250ml，加蒸馏水定容至500ml三、操作步骤0.02000mol/L、K2Cr2O7标准溶液的配制K2Cr2O7预先在120℃烘干2h,准确称取1.4709g，置于烧杯中，加水溶解，然后定量转移至250mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀0.1mol·L-1 Na2S2O3溶液的标定（1）准确移取K2Cr2O7标准溶液10.00mL于碘量瓶中，加入3mL 6mol/L HCI溶液、5mL 200g/L KI溶液，摇匀，放在暗处5min；（2）待反应完全后，加入50mL蒸馏水，用待标定的Na2S2O3溶液滴定至淡黄色，然后加入1mL5g/L 淀粉指示剂，继续滴定至溶液呈现亮绿色为终点。
黄连中小檗碱的提取和鉴定
黄连中小檗碱的提取和鉴定黄连是一种常见的中药材，其中主要有效成分是小檗碱。
小檗碱具有抗菌、消炎、抗肿瘤等多种药理作用，因此在医药、保健品等领域有广泛的应用。
本实验旨在提取黄连中的小檗碱，并进行鉴定，以了解其化学组成和性质。
一、实验材料1.原料：黄连（购自当地中药店）2.试剂：乙醇、浓盐酸、石油醚、乙醚、甲醇、氢氧化钠、醋酸铅、明矾、醋酸铜、硅胶G、三氯甲烷、甲酸、乙酸乙酯二、实验步骤1.提取：将黄连粉碎后，用乙醇浸泡24小时，过滤，滤液浓缩至干，得到乙醇提取物。
将提取物溶于少量水中，用石油醚和乙醚分别萃取，得到石油醚和乙醚萃取物。
2.分离纯化：将石油醚萃取物用硅胶G进行柱层析分离，以三氯甲烷-甲酸-水（80:10:10）为洗脱剂，得到A组分。
将乙醚萃取物用硅胶G进行柱层析分离，以三氯甲烷-乙酸乙酯（7:3）为洗脱剂，得到B组分。
3.鉴定：对A组分和B组分进行红外光谱、核磁共振等测试，确定其化学结构。
同时，进行薄层色谱和高效液相色谱等分析，以确定组分的纯度和含量。
三、实验结果1.提取物得率：经过称重和计算，得到黄连乙醇提取物的得率为5.8%。
2.组分纯度：经过柱层析和洗脱剂洗脱，得到A组分和B组分。
经过薄层色谱和高效液相色谱分析，A组分的纯度为92%，B组分的纯度为85%。
3.鉴定结果：经过红外光谱和核磁共振等测试，确定A组分和B组分的化学结构分别为小檗碱和黄连碱。
四、实验结论本实验成功从黄连中提取并鉴定出了小檗碱和黄连碱。
实验结果表明，黄连中含有较高浓度的小檗碱，这为其在医药和保健品等领域的应用提供了依据。
同时，实验中使用的柱层析方法能够有效分离纯化小檗碱和黄连碱，为进一步研究其药理作用和临床应用提供了技术支持。
五、实验建议与展望本实验中使用的提取和分离纯化方法相对简单易行，但在实际应用中可能存在提取效率不高、分离纯度不够理想等问题。
未来研究可进一步优化提取和分离纯化工艺，提高小檗碱和黄连碱的提取率和纯度。
中药化学实验指导—实验十 黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识
实验十 黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识（一）目的要求学习提取精制和检识黄连中的小檗碱，通过实验要求：1．掌握小檗碱的结构特点和理化性质。
2．熟悉浸渍法、盐析法、结晶法和薄层色谱法的基本操作过程及注意事项。
3．了解盐酸小檗碱的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao 、峨嵋野连Coptis omeiensis (Chen)C.Y.Cheng 或云连Coptis teeta Wall.的根茎。
黄连的根状茎含多种生物碱，主要为小檗碱（黄连素），约5％～8％，其次为黄连碱、甲基黄连碱、掌叶防己碱、药根碱、木兰碱等。
叶含小檗碱1.49％。
小檗碱(berberine)：分子式(C 20H 18NO 4)＋，分子量336.37。
系季铵生物碱。
游离小檗碱为黄色针状结晶（乙醚），mp.145℃，能缓缓溶于冷水（1∶20），可溶于冷乙醇（1∶100），易溶于热水或热乙醇，难溶于丙酮、氯仿、苯，几乎不溶于石油醚。
盐酸小檗碱(C 20H 17NO 4·HCl ·2H 2O)，为黄色结晶，微溶于冷水（1∶500），易溶于沸水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。
硫酸小檗碱( (C 20H 18NO 4)2·SO 4·3H 2O)，溶于水（1∶30），溶于乙醇。
重硫酸小檗碱(C 20H 18NO 4·HSO 4)为黄色结晶或粉末，溶于水（1∶150），微溶于乙醚。
N OCH 3OCH 3OO +N +HOCH 3O HO CH 3O CH 3CH 3小檗碱 木兰碱（三）实验原理根据小檗碱的盐酸盐在水中溶解度小，而小檗碱的硫酸盐水中溶解度较大。
因此，从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉，然后向提取液中加入10％的食盐，在盐析的同时，也提供了氯离子，使其硫酸盐转变为氯化小檗碱（即盐酸小檗碱）而析出。
HPLC法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度
2.8.3 回收率试验 分别精密称取盐酸小檗碱对照品 8、10、 12 mg，置于 100 mL 容量瓶中，分别按处方量加入辅料，用流动
相溶解并稀释至刻度，配制成相当于 80％、100％、120％浓度 的样品，按照“2.3”项下色谱条件测定，计算回收率。结果，高、 中、低的平均回收率分别为 98.77％、98.47％、99.03％，RSD＝ 0.55％，详见表 1。
RSD/％ 2.10 1.98 1.47
3 讨论
常用的溶出介质有蒸馏水、0.1 mol·L－1 盐酸溶液及不同 pH 值的缓冲液等。因 0.1 mol·L－1盐酸溶液较接近于人体胃部 环境，因此本试验选择人工胃液（0.1 mol·L－1 盐酸溶液）作为 溶出介质。
综上，本法操作简便、准确、可靠，可用于复方黄连素片的 质量控制。
取“2.2.1”项下对照品溶液 10 μL，连续进样 6 次，测定峰面 积。结果，峰面积的 RSD＝0.47％。 2.6 重复性试验
取同一批样品（批号：080716）5 份，按样品测定法测定，按 外标法以峰面积计算含量。结果，样品含量平均值（n＝5）为 100.2％，RSD＝0.49％。 2.7 稳定性试验
取供试品溶液适量，按照“2.3”项下色谱条件在放置 1、2、 4、8、24 h 各测定 1 次。结果，放置 1 h 和 24 h 的含量测定结果 误差为 0.78％，峰面积 RSD＝0.8％（n＝6），说明供试品溶液在 24 h 内基本稳定。 2.8 溶出度测定 2.8.1 溶出方式确定 以经脱气处理的 0.1 mol·L－1盐酸溶液 1 000 mL，转速为 120 r·min－1，溶出温度为（37±0.5）℃，取 6 片 样品按“2.1”项下条件操作，在 45 min 时取 10 mL 溶出液，滤 过，精密量取续滤液 2.0 mL 置于 10 mL 容量瓶中，加入 0.1 mol·L－1盐酸溶液至刻度，摇匀，采用 0.45 μm 滤膜滤过，滤液 照“2.3”项下方法测定每个样品的溶出量。 2.8.2 空白辅料干扰 取 6 片空白辅料片，按“2.1”项下方法 操作；另按处方比例取空白辅料适量置于 100 mL 容量瓶中，加 流动相溶解并稀释至刻度，按照“2.3”项下色谱条件测定。结 果显示，空白辅料对试验几乎无影响。
盐酸小檗碱片含量测定方法探讨
究工作 提供了有价值 的资料。
ｆ 稿 日期 ：２ １ １ 收 ∞ 年 ２月 ｌ ０日 １
究是很有必要的．我们将继续系
统深人地研 究。本 实验结 果准确 ．
盐 酸 小 檗碱 片 含量 测 定 方 法探 讨
陈 彤 杜 利 云
昆明 ６０ １） ５０ １
（ 云南省药 品检验所 云 南摘要近年来 ，用不合格 的盐 酸小檗 碱原料压 片屡有发 生 ．而现有 制剂标 准不能有 效控 制【 ，笔 者查 阅
ｒ盐酸小壁碱的含量测定方 法 ，其中包括重 铬酸钾 法 Ｌ ｖｓ １ ｓ ＩＬ ｖ Ｉ、１ｃ ｝ ｃ等 ．为有效 控 制制剂质 量 ，应将 Ｐ
盐酸小檗碱 的含量测定方法【 改为 ｝ Ｌ Ｉ ｃ法 。 Ｐ 关键词 盐酸小檗碱片 含量酒 啶
檗碱 法 中的其 它 成 分 有效 分 离 ， 测 出 单 一 组 分 Ｂ Ｈ 的含 量 ，这 Ｂ 样 才能 有效 控制制 剂 质量 。 综 上 所 述 ，重 铬 酸 钾 法 、
ｌ １ ３
维普资讯
ｕ ～ 所 测 定 的 含 量 为 Ｂ Ｈ、 ｖ Ｂ
盐酸小 檗碱 （ 又名盐 酸 黄连 素 ．Ｂ Ｈ）具 有清 热 解毒 、抗 菌 Ｂ 消 炎 的功 效 ，Ｂ Ｈ 存 在 于 许 多 Ｂ 中 草药 中 ，如黄 连 、黄 柏 、三颗 针 等 ．且 常 与 各 种 成 分 如 巴 马 汀 、药根 碱等共 存 。 巴马汀 、药 根 碱与盐 酸小 檗碱 的理 化性 质极 为 相似 。盐酸 小檗碱 粗提 品如不
参 考 文献
巾成 药 ，１９ ，１ ９５ ７
中 成 药 ． １８ ． Ｉ ９９ Ｉ
ｌ 王 卫 明 ，等 ． 学 学 报 ，１８ ０ 药 ９９
２ ４ ：，５ ４ｆ） － ＇ ７
分析化学--黄连素片中盐酸小檗碱的测定
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二、实验目的
• 学习和掌握黄连素片中盐酸小檗碱的测定 的原理和方法
• 学习和掌握返滴定法 • 学习和掌握重铬酸钾法 • 学习和掌握碘量法
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返滴定法
当试液中待测物质与滴定剂反应很慢，或者用滴定剂 直接滴定固体试样，反应不能立即完成，故不能用 直接滴定法进行滴定。此时可先准确地加入过量标 准溶液，待反应之后，在用另一种标准溶液滴定剩 余的标准溶液。
I
3
络离子；
2.避免光照；
3.控制溶液的酸度。
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参考文献
［1］四川大学化工学院、浙江大学化学系.分析化学实验 北京：高等教育出版社 ，2010 ［2］武汉大学.分析化学.5版 北京：高等教育出版社2008 ［3］傅强主编.药物分析实验方法学.人民卫生出版
社,2008.7.
滴定必须在中性或酸锌溶液中进行。因为 I 2 在碱性
溶液中会发生歧化反应。
2.防止 I 2 的挥发和空气中的氧气氧化。
加用入碘过瓶量，K不I的要可剧以烈使摇动I 2，形以成减I3少络的I 2离子挥，发I且，滴定被时空使气
氧化的反应，随光照及酸度增高而加快。因此，在反
应时，应置于暗处，滴定前调好酸度，洗出I 2 后，应
定至溶液呈亮绿色为终点。
2019/11/13
14
C20H18ClNO4 %
2(6 CK2Cr2O7
V C K2Cr2O7
Na 2 S 2O3
m 1000
VNa2S2O3
) M K2Cr2O7
100 %
2019/11/13
黄连中小檗碱的含量测定
Ｃｈｅｎｇ ｅｔ ｔｔｓｉａｏ） 或 云 连 （Ｃｏｐｔｉｓ ｔｅｅｔａ Ｗａｌ１） １％盐 酸 甲 醇 溶 液 约 １５０ｍｌ， ６Ｏ℃ 水 浴 加 热 ５．７Ｏ％ 一
的：ｆ燥 根茎。其主要牛物活性 成分为小檗碱 。 １５ｍｉｎ，超声 ３０ｒａｉｎ，加 甲醇 稀 释 至 ２００ｍｌ，摇 采用 薄层 色谱一荧 光分光 光度法测定黄连药材 幻 ，静置后取 上清液作为供 试品溶液 精密吸
ＲＦ一５４０型荧光分 光光度仪 ，ＣＳ一９３０双波 声 ２０ｒａｉｎ， 离 心 １Ｏｍｉｎ （４０００ｒ／ｍｉｎ）， 吸 取 Ｌ 量 分 析
长薄层扫描仪 （日本岛津）。
清 液 ０．８ｍｌ于 试 管 内 ，加 入 甲醇 ２ｍ１和 １ｍｏｌ／Ｌ
参 考 文 献
１．２试药
氢氧 化钠 溶液 ７５ｔｘｌ，摇匀 ，测 定荧 光 强度 ， ｆ１］ 中国 药典 中药 薄层 色谱 彩 色 图集 ［ｚ］．
２．１对 照 品溶 液 的 制 备
取 已知 小 檗 碱 含量 的黄 连 约 材 ５份 ，精 密 含 量 『ｊ１．药物 分 析 杂 志 ，１９８６，６ （２）：１００．
精密称取盐酸小檗碱对照品适量 ，加入 甲 称定 ，加入与小檗碱 含量相 当的对照 品溶 液 ，
醇制 成 ｌｉｎｇ／ｍ！贮 备液 。用 前取 备液 适量用
一 １８０—
３ 讨 论 采 用 的薄 层 展 开 条 件 优 于 文 献 报 道 方 法 ，
中小 檗碱 的 含量 。
取 对 照 溶 液 ４， ８ｕｌ及 黄 连 提 取 液 ２ｔｔｌ点 于 同 灵敏度高 ，选择性好 ，能够将小 檗碱与其他成
１仪 器 与 试 药 １．１仪器
一 硅 胶 Ｇ板 上 ，展 开 ，将 板 上 相 应 斑 点 刮 入 分有效分离 ，且斑点 圆整 ，无拖尾现象 。适用 离心管 中，加 入 甲醇 １ｍｌ，振摇 约 １５ｒａｉｎ，超 于小檗碱的痕量 分析及复方制剂中小檗碱 的含
实验三 黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。
主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。
小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch。
），三角叶黄连（C。
deltoidea C。
Y。
Cheng et Hsiao）或云连（C。
teetoides C。
Y。
Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。
目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。
三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。
R1 R2 R3 R4 R51R1OR2OR5£-OR3OR4+3 CH3 HCH2CH3 CH3 CH3 CH3 HCH2CH2CH2CH23H CH3 CH3 CH3 H2345小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。
Mp.145℃至160℃即分解。
OCH3H3NHOCH3OH小檗胺H3COHCH3游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。
醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。
小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。
测定某样品中黄连素含量的国标分析方法
测定某样品中黄连素含量的国标分析方法
复方黄连素片处方为：盐酸小檗碱30g，木香116g，吴茱萸40g，白芍162g。
2005《中国药典》复方黄连素片含量测定项下：
盐酸小檗碱
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.033mol/l磷酸二氢钾溶液（40：60）为流动相；检测波长为265nm。
理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。
供试品溶液的制备：取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，取1片的量，精密称定，置250ml烧杯中，加沸水约150ml使溶解，稍冷后加入稀盐酸3ml，搅匀，放冷，转移至250ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，离心（转速为每分钟4000转）精密量取上清液2ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。
文献报道的一般以盐酸小檗碱为含量测定的指标，如：
陈国强等文以酸性染料比色法对复方黄连素片进行含量测定，测定波长为420nm，样品用甲醇振摇提取。
何兴富等用hplc法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的含量，采用sp8810液相色谱仪，alltima c18 5 micron柱(150mm×4.6mm )。
色谱
条件为检测波长265nm，流动相为乙腈-0.03mol/l磷酸二氢钾溶液(40：60)。
用酸水解样品。
结果在4.0～40.0 μg/ml范围内盐酸小檗碱的浓度与峰面积线性关系良好。
黄连中盐酸小檗碱提取分离及鉴定
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分别及判定黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh ）、三角叶黄连（ coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao ）或云连（c optiteetoidesC.Y.cheng ）的干燥根茎。
黄连拥有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功能。
黄连的有效成分主假如生物碱，已分别出的主要生物碱有小檗碱（b erberine ）、掌叶防己碱（palmatine ）、黄连碱（jatrorrhizine ）等。
此中小檗碱含量最高，可达 10% 左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。
小檗碱有很强的抗菌作用，已宽泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相像。
[目的要求 ]1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。
2．学习和掌握生物碱的柱色谱分别方法。
3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的判定方法。
[实验原理 ]小檗碱为黄色针状结晶，mp 为 145 ℃，游离的小檗碱能慢慢溶于水（ 1：20）及乙醇中（ 1：100 ），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，特别是盐酸盐。
盐酸盐为l：500 ，枸橼酸盐 1：125 ，酸性硫酸盐 1：100，硫酸盐 l：30，但在热水中都比较简单溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53 ），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
1O OON+ OH-NOHNH OO O CHOOCH 3OCH 3OCH 3OCH 3OCH 3OCH 3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）ON+OOCH 3OCH 3小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。
盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有激烈的黄色荧光。
易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。
H 3CON+H 3COOCH 3OCH 3掌叶防己碱本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提拿出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除掉水溶性杂质。
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化学滴定法测定黄连素片有效成分盐酸小檗碱的含量【摘要】黄连素片为众所周知的市售家庭必备药，其有效成分为盐酸小檗碱。
作为启智创新夏令营的实验课题，笔者指导学生以化学滴定法对盐酸小檗碱含量进行测定。
在巩固分析化学课堂和实验教学知识的同时将其与实际应用相结合，达到了学以致用的教学目的，提高了学生的学习兴趣。
【关键词】黄连素；盐酸小檗碱；化学滴定；实际应用
黄连为毛茛科黄连属植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根。
黄连的有效成分是生物碱，目前已分离的主要生物碱有小檗碱、黄连碱等。
其中小檗碱的含量最高，可达10%左右，以盐酸盐的状态存在于黄连中。
盐酸小檗碱（分子式为c20h18clno4·2h2o，相对分子量mr = 407.85）的分子结构如下图所示。
图1 盐酸小檗碱的结构式
盐酸小檗碱又称为盐酸黄连素，是一种常用的杀菌药物。
主要用于治疗胃肠炎、细菌性痢疾等肠道感染，对眼结膜炎、化脓性中耳炎等也有疗效。
此外它还有阻断α-受体、抗心律失常等作用。
市售的黄连素片（糖衣片、胶囊）是家庭常备药物，其有效成分即为盐酸小檗碱，它在药品中的含量直接决定着厂家所生产黄连素片的药效高低。
因此，测定黄连素片中盐酸小檗碱的含量具有重要的实际意义。
化学物质含量的测定属于分析化学领域的研究内容。
分析化学是获得物质化学组成和结构信息的科学，它所解决的主要问题即为物
质中含有哪些组分，各种组分的含量是多少以及这些组分是以怎样的状态构成物质。
是化学研究中最基础，最根本的领域之一，也是化工、制药、轻化、材料、环境等专业的基础课之一。
按照分析方法分类，分析化学可分为化学分析法和仪器分析法两大类，两者相互补充，而标准分析结果常通过化学分析法获得，化学法可以说是仪器法的基础。
化学滴定分析是基于化学反应的一类重要的化学分析法，由于方法成熟，操作简便，省时快速，测定结果准确度较高，是生产实践和科学实验中重要的例行测试手段，即使在仪器分析法快速发展的今天，化学滴定分析法仍然具有很高的实用价值。
盐酸小檗碱含量的测定方法现在主要有色谱法、分光光度法和化学滴定法。
化学滴定法是主要测定方法之一。
该方法利用了盐酸小檗碱能与重铬酸钾（k2cr2o7）定量反应生成难溶化合物的性质，用过量k2cr2o7与盐酸小檗碱进行充分反应，剩余的k2cr2o7可利用其氧化性，使用间接碘量法，以硫代硫酸钠（na2s2o3）标准溶液进行氧化还原滴定，从而求出盐酸小檗碱的含量。
以上即为盐酸小檗碱化学滴定法的基本原理。
此分析过程中，所需知识和实验均为分析化学课堂和实验教学中的重要内容和基础性操作；而该实验的实际意义有所延伸，与人们的日常生活产生了密切联系。
本文即以盐酸小檗碱含量测定作为启智夏令营的创新课题，让学生将书本上的知识在实践中得到应用，从而激发学生对科学的兴趣。
1. 实验设计
1.1 实验目的
（1）查阅文献，了解盐酸小檗碱的测定方法
（2）复习硫代硫酸钠标准溶液的配制和保存方法；
（3）复习和理解氧化还原体系、重铬酸钾法、碘量法及空白实验；
（4）将实验结果进行分析计算，总结心得，提出观点。
1.2 实验原理
2c20h18clno4·2h2o + k2cr2o7 = （c20h18no4）2 cr2o7↓+ 2kcl+ 4h2o
cr2o72- + 6i- +14h+= 2cr3+ +3i2 + 7h2o
i2 + 2s2o32-=2i- + s4o62-
1.3 主要仪器与试剂
分析天平，台秤，干燥箱，容量瓶，碘量瓶，碱式滴定管，漏斗，滤纸，研钵；盐酸小檗碱片，重铬酸钾，碘化钾溶液，无水碳酸钠，硫代硫酸钠，盐酸，淀粉指示剂。
2. 课题研究内容
2.1 实验方法概述
进行实验以前，笔者首先要求参加课题的学生进行文献查阅，要求每人都至少查阅三篇以上的相关文献，使学生对所研究对象的物理化学性质、测定方法和原理有了初步了解，锻炼查阅文献的能力和主动思考的习惯。
在查阅文献的基础上，学生进行实验操作。
首先需配制已知准确
浓度的k2cr2o7溶液，随后，准确称量一定量的黄连素片，研磨并溶解，与k2cr2o7完全反应形成沉淀后，过滤并收集滤液，该滤液即为后续实验的待测液。
在实验开始前，已预先让学生粗配了近似浓度的na2s2o3标准溶液并妥善保存一定时间。
实验过程中，用k2cr2o7法和间接碘量法对其准确浓度进行了标定。
用标定后的na2s2o3标准溶液对上述的盐酸小檗碱待测液进行氧化还原滴定，确定未反应的k2cr2o7含量。
在测定反应进行时，用蒸馏水代替黄连素片溶液进行空白实验。
将黄连素片进行了烘干失水后的重量测定。
全部实验完成后，根据化学计量关系和所得数据，计算出盐酸小檗碱在药品中的质量百分数，作为含量测定结果。
2.2 分析化学知识在课题中的应用
黄连素片中盐酸小檗碱含量测定的实验是在已掌握知识的基础上，对学生的理论水平和实验技能提出了更高要求的综合性实验。
本实验课题中应用了氧化还原滴定体系中的重铬酸钾法和间接碘
量法。
氧化还原滴定法是分析化学教学内容的重要一章，其中重铬酸钾法要求学生了解其配制和主要测定对象；碘量法则为重要知识章节，所涉及的na2s2o3标准溶液的配制、保存和间接标定方法要求学生必须完全理解掌握。
此外，空白实验的操作及意义也是学生必须掌握的重要知识点。
通过本课题的研究，学生不仅复习和巩固了教师在课堂上讲解的知识，并将其加以充分利用，解决与生活密切相关的药物有效成分含量测定的问题。
这样，学生就不再感到所
学的是干巴巴的书本内容，所研究的对象与实际应用无关，而是从中体会到了理论知识与生产生活有密切相关的联系，能够学有所用。
本课题中包括了多个分析化学实验教学的重要基础实验，主要有分析天平称量操作，定容操作，碱式滴定管的滴定操作、碘量瓶的使用等，此外还用到了研磨、过滤等化学实验基本操作。
这些实验操作覆盖面广，针对性强，不仅巩固和提高了学生的分析化学实验技能，而且对学生进行其他化学实验的操作同样不无裨益。
2.3 课题总结
参加本课题研究的绝大多数学生都较好的理解了实验的目的和原理，并顺利完成了课题研究，测定了黄连素片中盐酸小檗碱的含量。
研究结果以实验报告的形式进行上交，实验报告由指导教师统一要求格式，从背景知识、文献查阅、实验原理、操作步骤、数据记录和计算、实验结果的误差分析和个人心得体会等七个方面对课题进行了全面的总结。
报告内容丰富、详实。
学生们都表示，通过启智夏令营课题研究，明确了学习目的，提高了实验技能，对分析化学以及其他化学学科产生了更多的兴趣，提高了学习和进行科研的动力。
2.4课题改进及展望
本次课题以巩固知识和进行知识运用为主要目的，学生实验基本为统一模式，并未进行分组对照。
未来可选择不同厂家生产的黄连素片，或在实验中改变某些操作方法，采取分组对照实验进行结果
对比，使学生对影响实验结果的因素做出更全面的分析。
此外，盐酸小檗碱的含量测定不仅可用传统的化学滴定法来进行，现代仪器分析技术同样是行之有效的方法。
未来可根据实验室条件，采用分光光度法或色谱法进行测定，这样可将常量与微量实验进行对比，使学生对分析方法有更深入的认识，增进对分析化学和现代分析技术的了解。
3. 结束语
化学滴定法测定黄连素片中盐酸小檗碱含量的实验作为夏令营课题，通过笔者指导，学生实践操作的教学模式，加深了学生对于书本理论知识的理解，培养了思考能力，锻炼了实验技能，激发了对专业的了解和喜爱，对学习的兴趣热情，起到变被动学习为主动学习的作用；对于教师则开阔了思路，根据课程和专业特点，更加深入思考形式多样的教学和实验方法，不断调动学生的积极性，最终实现提高教学质量的目的。