显微镜测微尺的使用

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显微镜测微尺的使用

目镜测微尺是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成

100等分。测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜

测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于

镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相

对长度。

镜台测微尺(即物镜尺)是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,

每格长l0μm(即0.0lmm),是专门用来校正目镜测微尺的。校正时,将镜台测微尺放在载物台上.

由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入

视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的

读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测

微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。

目镜测微尺的校正:

把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。先用低倍镜观察,对准焦距,视野中

看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重

合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为

镜台测微尺的刻度每格长l0μm,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小格重叠,已知镜台测微尺每小格为l0μm,则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5=10μm

用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。

由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和

附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度)进行,而且只能在特定的情况下重复使用,当更

换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。

2.显微测微尺的使用显微测微尺是用来测量显微镜下所见物体长度、大小的标尺,包括镜台测微尺和目镜测微尺。镜台测微尺;为一特制的载玻片,在载玻片的中央封有1mm长的小尺,精确分成l0大格,每大格又分l0小格,共100小格,每小格长度为0.01mm,即10μm(实验图3-1)。标尺的外围有一小黑环,便于在显微镜下寻找标尺。载台测微尺并不直接用来测量显微镜下物体的长度和大小,而是用以校正目镜测微尺的。经过校正之后的目镜测微尺,方可用来测量显微镜下物体的大小。目镜测微尺为一直径约20mm的圆形玻片,

玻片的中央部分具有一小尺,精确的分成50小格或100小格。使用目镜测微尺时,将目镜自镜筒中抽出,旋开镜片,将目镜测微尺的标尺正面向上,按放在目镜中部的隔板上,旋上镜片,放回原镜筒内.进行测量。由于目镜测微尺每小格的长度随显微镜放大的倍数而改变,故在使用前必须将各物镜头逐一用载台测微尺加以校正,以便确定在使用此显微镜时各组镜头下目镜测微尺每小格所代表的实际长度。

1.目镜量尺2.载台量尺3.表示视野中目镜量尺与载台量尺上的重合线

(1)目镜测微尺的校准:将载台测微尺放在显微镜的载物台上,于高倍镜下将测微尺清晰的调整到视野的中央,将目镜测微尺放入目镜内(有的已将目镜测微尺固定在目镜内),适当移动载台测微尺,使二种尺子的刻度重合,找出二尺的重合刻度线,根据二条重合线间小格数的比值,计算目镜测微尺在高倍物镜下每小格的数值(μm)如:目镜测微尺的77小格(0→77)与载台测微尺的30小格(0.7→1.0)相重合(实验图3-1)则目镜测微尺在高倍镜下每小格为10μm×30÷77=3.89μm。一般需测试数次,取其平均值。如果接物镜和接目镜的放大倍数改变,目镜测微尺应重新校正。

(2)细微物体的测量:将欲测量物体封于载玻片上,于显微镜下用已校正的目镜测微尺测量其长度或直径为目镜测微尺的几小格,然后乘以每小格的μm数即得。如:高倍镜下测得薄荷腺鳞直径为24小格,即为3.89μm×24=93μm。微细物体的测量,通常在高倍接物镜下测量,测定结果比较准确,但在测量较长的物体,如纤维、导管或非腺毛的长度时,则用低倍接物镜测量较好。

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