第六章微生物的生长及其控制2共35页PPT资料
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微生物的生长繁殖及其控制
每ml活菌数＝同一稀释度平均数×稀释倍数×5
注意：要三个以上重复平板平均计数；不适合丝状菌
C，比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度 (optical density, 即O.D.)表示菌量。 注意： 测量应在菌浓度与O.D.成正比的线性范围内，否则不准
2.重量法 测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法。 以干重（105℃）、湿重直接衡量微生物群体
P146
1.个体计数法 A.直接法
利用血球 计数板， 在显微镜 下计算一 定容积里 样品中微 生物的数 量。
缺点：
不适于1对m运m动2 细菌2的5（计1数6）；中格 需要相对高1的6（细2菌5浓）度小；格， 个体小的细共菌4在00显小微格镜下难以观察；
B.简接法
原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可 以通过生长形成菌落。
• 高密度培养常用于重组蛋白质药物的生产; • 主要的优势:节约成本.
六、微生物培养法概论
• 实验室培养法; • 生产实践中微生物培养法;
实验室培养法
固体培养法
好氧菌：斜面、琼脂平板等
厌氧菌：高层琼脂柱、、厌氧 培养皿、厌氧罐等
液体培养法
试管液体培养 三角瓶液体培养 摇瓶培养 台式发酵罐
生产实践中微生物培养法
μ ：比生长速率，每单位数量细菌
在单位时间增加的量 t：培养时间
重要参数:
（1）繁殖代数（n）
x2=x1·2n 以对数表示： lgx2=lgx1+nlg2
n= 3.322 (lgx2-lgx1)
（2）比生长速率常数（μ）
lgNt - lgN0) μ=
t - t0
（3）代时（G）:在群体生长里,细菌数量增加一
注意：要三个以上重复平板平均计数；不适合丝状菌
C，比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度 (optical density, 即O.D.)表示菌量。 注意： 测量应在菌浓度与O.D.成正比的线性范围内，否则不准
2.重量法 测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法。 以干重（105℃）、湿重直接衡量微生物群体
P146
1.个体计数法 A.直接法
利用血球 计数板， 在显微镜 下计算一 定容积里 样品中微 生物的数 量。
缺点：
不适于1对m运m动2 细菌2的5（计1数6）；中格 需要相对高1的6（细2菌5浓）度小；格， 个体小的细共菌4在00显小微格镜下难以观察；
B.简接法
原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可 以通过生长形成菌落。
• 高密度培养常用于重组蛋白质药物的生产; • 主要的优势:节约成本.
六、微生物培养法概论
• 实验室培养法; • 生产实践中微生物培养法;
实验室培养法
固体培养法
好氧菌：斜面、琼脂平板等
厌氧菌：高层琼脂柱、、厌氧 培养皿、厌氧罐等
液体培养法
试管液体培养 三角瓶液体培养 摇瓶培养 台式发酵罐
生产实践中微生物培养法
μ ：比生长速率，每单位数量细菌
在单位时间增加的量 t：培养时间
重要参数:
（1）繁殖代数（n）
x2=x1·2n 以对数表示： lgx2=lgx1+nlg2
n= 3.322 (lgx2-lgx1)
（2）比生长速率常数（μ）
lgNt - lgN0) μ=
t - t0
（3）代时（G）:在群体生长里,细菌数量增加一
第六章微生物的生长及其控制
（2） 恒化器：
与恒浊器相反，恒化器是一种设法使培养液 流速保持不变，并使微生物始终在低于最高 生长速率下进行生长繁殖的一种连贯培养装 置 在恒化器中，一方面菌体密度会随时间的增 长而增高，另一方面，限制因子的浓度会随 时间的增长而降低，（使菌体生长慢），两 者相互作用，会出现生长与流速相平衡，这 样，即可获得一定生长速率的均一菌体，又 可获得虽低于最高菌体产量，却能保持稳定 菌体密度的菌体。
3、 防腐：（Antisepsis）
是指利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁 殖，从而达到防止食品等发生霉变的措施。
措施：
（1） 低温： （2） 缺氧： （3） 干燥： （4） 高渗： （5） 高酸度： （6） 防腐剂：
4、化疗：（Chemotheraph）
即化学治疗，它是利用对病原菌具有高度毒力，而对 宿主细胞无显著毒性的化学物质来抑制宿主体内病原 微生物的生长繁殖，借以达到治疗在目的。
连续培养的优缺点：
优点： A、高效，简化了装料、灭菌，出料、清洗等 程序。 B、产品质量较稳定。 C、自控，可利用各种仪表加以控制。 D、节约人力、动力、资源（水、汽等） 缺点： A、菌种易于退化 B、易遭杂菌污染。
第二节 影响微生物生长的主要因素
影响微生物生长的外界因素很多，除一些营养 条件外，还有许多物理条件，其中最重要的有 温度，PH、氧气等。 一、 温度： 微生物的生长T有宽窄，但总有最低生长T，最 适生长T，最高T。并称为生长温度三基点。 最低生长T：一般-5---10。C，极端为-30。C 最适生长T：嗜冷菌；中温菌；嗜热菌。 最高生长T：一般为80—95。C，极端为105— 300。C。
三、 影响加压灭菌效果的因素：
6-1-微生物的生长和控制
直接法: 间接法:
在显微镜下计数 平板菌落计数法
不管采用什么方法，都有其优缺点和使用范 围。所以，在使用前，一定要根据自己的研 究对象和研究目的的不同，选用最合适的方 法。
第二节 微生物的生长规律
一、单细胞微生物的典型生长曲线
生长曲线(growth curve)： 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律 的实验曲线
恒化连续培养的方法： 将某种必需的营养物质 控制在较低的浓度， 以 作为限制性因子，而其 他营养物均过量。
通过控制流速可以得到 生长速率不同但密度基 本恒定的培养物
（细菌的生长速率取决于 限制性因子的浓度，并低 于最高生长速率）
限制性因子必须是机体生长 所必需的营养物质，如氨基
酸和氨等氮源，或是葡萄糖、麦
恒浊连续培养的用途：
一般用于菌体以及与菌体生长平行 的代谢产物生产的发酵工业
（连续发酵） 连续发酵与单批发酵相比的优点：
缩短发酵周期，提高设备利用率； 便于自动控制； 降低动力消耗及体力劳动强度； 产品质量较稳定；
缺点：杂菌污染、菌种退化、营养物的利用率低
恒化连续培养
使培养液流速保持不变，并使微生物始终在 低于其最高生长速率下进行生长繁殖。
产量的某营养物，称为生长限制因子
指数期的意义：
指数期的微生物因其整个群体的生理特性较一致、 细胞成分平衡发展和生长速率恒定，可作为代谢、 生理等研究的良好材料，是增殖噬菌体的最适宿 主菌龄，也是发酵生产中用作“种子”的最佳种 龄。
3．稳定期（stationary phase）
又称恒定期或最高生长期
芽糖等碳源或者是无机盐，因 而可在一定浓度范围内能决 定该机体生长速率。
恒化连续培养的用途： 多用于科研
第六章-微生物的生长及其控制PPT课件
繁殖代数 n=3.322(lgx2-lgx1)
生长速率常数R=
代时G=
t2 -
3.322(lgx2-lgx1) t1 t2 - t1
3.322(lgx2-lgx1)
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一些细菌的代时
菌名 培养基 培养温度
代时
E. coli（大肠杆菌） 肉汤
37℃ 17min
E. coli 牛奶
37 12.5
③调整培养基的成分，应适当丰富，且发酵培养基成分尽 量与种子培养基的成分接近。
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（二）指数期
1、特点： ➢ 生长速率常数R最大，即代时最短; ➢细胞进行平衡生长，菌体大小、形态、 生理特征等比较一致; ➢酶系活跃，代谢最旺盛。
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2、指数期中的的 x2
三个重要参数
x1
t1 t2
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lg细胞数（个/ml）
连续流入 新鲜培养液
单批培养
连续培养
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单批培养 恒浊法
连续培养 恒化法
时间
40
1、连续培养器
按控制方式分 内控制（控制菌体密度）：恒浊器 外控制（控制培养液流速、以控制 生长速率）：恒化器
连续
培养 器
按培养器的级数分
单级连续培养器 多级连续培养器
按细胞状态分 一般连续培养器 固定化细胞连续培养器
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二、微生物的个体生长和群体的同步生长
➢ 使用同步培养技术，即设法使群体中的所有细 胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂周期中， 然后分析此群体的各种生物化学特征，从而了 解单个细胞所发生的变化。
➢ 通过同步培养而使细胞群体处于分裂步调一致 的状态即同步生长。进行同步分裂的细胞称为 同步细胞。
微生物学PPT格式课件第六章微生物的生长及控制
微生物的高密度培养
指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常 规培养10倍以上的生长状态或培养技术；
目前由于研究的微生物种类主要局限于
E.coli and S.cerevisiae 等兼性厌氧菌；
第三节 影响微生物生长的主要因素
一、 温度 二、 氧气 三、 pH值
一、 温度(temperature)
0.5mg/ml 0.2mg/ml
时间
营养物浓度对生长速度和菌体产量的影响
Ⅲ 稳定期(stationary phase)
①生长速率常数R=0，即新繁殖的细胞数与衰亡的细 胞数相等；
②菌体产量达到最高点，且产量与营养物质的消耗出现 有规律的比例关系，用生长产量常数Y表示；
Y = (X-X0) / C0-C = (X-X0) / C0
2、恒化器 (chemostat)
是一种设法使培养液的流速保持不变，并使 微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进 行繁殖的连续培养装置；
主要获得不同生长速率的菌体；
恒浊与恒化培养控制装置
Turbidostat & chemostat的比较
装置
恒浊器
恒化器
控制对象 菌体密度(内控制) 培养基流速(外控制)
= (t2-t1) / 3.322(lgX2-lgX1)
R = 1 /G = 3.322 (lgX2-lgX1) / (t2-t1)
t1 t2
Ⅱ 指数期 (exponential phase)
影响代时长短的因素
（1）菌种 （2）营养成分 （3）营养物浓度 （4）培养温度
细胞数或菌体量
8.0mg/ml 6.0mg/ml 4.0mg/ml 2.0mg/ml 1.0mg/ml
沈萍微生物学第六章PPT课件
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2. 丝状微生物群体生长曲线
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影响衰亡期的因素及实践意义
•与菌种的遗传特性有关: 有些细菌的培养经历所有的 各个生长时期，几天以后死亡, 有些细菌培养几个月乃 至几年以后仍然有一些活的细胞；
•与是否产芽孢有关：产芽孢的细菌更易于幸存下来；
•与营养物质和有毒物质有关：补充营养和能源，以及 中和环境毒性，可以减缓死亡期细胞的死亡速率，延 长细菌培养物的存活时间。
菌丝球不等。
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图示 丝状真菌的沉淀生长
起始培2养021/6时/7 菌丝体
培养18小时后的菌丝体 22
影响因素：
接种体积的大小、接种物是否凝集、以及菌丝体是 否易于断裂等因素的综合作用决定着丝状微生物是 丝状生长还是沉淀生长。
工业发酵意义：
丝状微生物在液体培养中的生长方式在工业生产中 很重要，因为它影响发酵过程的通气性、生长速率 、搅拌能耗及菌丝体与发酵液的分离难易等。
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达到 生物 量阈 值
DNA 复制 启动
间隙期G
达到 长度 阈值
细胞 分裂 过程 启动
DNA复制与分离
染色体复制期C
分裂蛋白和 横 隔前体成分
横隔 形成
细胞 分裂
分开的 DNA拷贝
分裂期D
时间（min）
三、细菌的分裂与调节
细胞周期各期启动机制（以大肠杆菌为例）：
DNA复制启动：细胞必须达到某一阈值体积或起始物质量。
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第一节 细菌的个体生长
•单细胞微生物个体生长表现为细胞体积的增加 和细胞内物质含量的增加两个方面, 当细胞生 长到一定时期，就分裂成为两个子细胞。 •多细胞微生物个体生长则反映在构成个体的细 胞数目增加和每个细胞个体生长两个方面。
第六章 微生物生长及其控制
第五节 有害微生物生长繁殖的控制
一、基本概念
防腐(antisepsis)：在某些化学物质或物理因子作用下，能防止 或抑制霉腐微生物生长的一种措施 。比如:低温、缺氧、干燥、 高渗、高酸度、高醇度、加防腐剂等等。 消毒(disinfection)：利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所 有病原微生物的一种措施。比如：巴氏消毒法 灭菌(sterilization)：指利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内 的所有微生物的一种措施。包括杀菌和溶菌。比如：高压蒸汽 灭菌法 化疗(chemotherapy)：利用具有选择毒性的化学物质如磺胺、 抗生素等对生物体内部被微生物感染的组织、病变细胞进行治 疗，以杀死组织内的病原微生物或病变细胞，但对机体本身无 毒害作用的治疗措施。以达到治疗传染病的目地。 四个概念的比较：p174表6-8
G = t1 - t0 /3.32(lgy - lgx) 特点：1）细菌个体形态、化学组成和生理特性等均 较一致2）代谢旺盛3）生长迅速、代时最短。 应用：研究微生物基本代谢、生理的良好材料。也常 在生产上用作种子
3.稳定期
表现： 新增殖细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，活菌数动态 平衡。 特点： 1）生长速率为0---动态平衡,细胞总数最高. 2）细胞内开始积累内含物 3）开始形成芽孢、次生代谢物 原因： 养分减少；有毒代谢物产生。 延长： 补料，调pH、温度等。
嗜冷微生物 兼性嗜冷微生物 嗜温微生物 嗜热微生物 超嗜热或嗜高温微生物
最适生长温度：某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度
(二) PH
微生物生长过程中机体内发生的绝大多数的反 应是酶促反应，而酶促反应都有一个最适pH范围， 在此范围内只要条件适合，酶促反应速率最高，微 生物生长速率最大，因此微生物生长也有一个最适 生长的pH范围。
微生物的生长及其控制(共98张PPT)
就总体而言，微生物生长的温度范围较广， 已知的微生物在-10～95℃范围内生长。 而对某一具体微生物而言，只能在一定的 温度范围内生长，且此温度范围有宽、有 窄。
生长温度三基点：任何微生物的生长温度 总有最低生长温度、最适生长温度、最高 生长温度。
温度
最适生长温度：
即某微生物分裂代 时最短或生长速率最高 时的培养温度。不同微 生物的最适生长温度是 不一样的。 应该着重 指出：最适生长温度不 一定是一切代谢活动的 最适温度。
膜洗脱（常用）等。
诱导法
诱导因子：不影响微生物生长，可特异性抑制细胞分裂， 消除该抑制后，细胞同时出现分裂。
此法会扰乱细胞的正常代谢
举例： 1、温度调整法； 2、营养条件调整法；
3、抑制DNA合成法（代谢抑制剂：）
（抑制DNA合成法是利用代谢抑制剂阻碍DNA合成相当一
段时间，然后解除其抑制，可达到同步目的。常用的代
（一）微生物细胞数目的测定
－－适用于单细胞微生物或丝状微生物的孢子
直接计数法－－总菌计数 1、计数板计数法（常用）
2、比例计数法
间接计数法－－活菌计数
1、平板菌落计数法
2、液体稀释法
3、厌氧菌菌落计数
其他计数法
1、比浊法
2、膜过滤法
血球计数板
各 种 型 号 的 全 自 动 血 球 计 数 仪
活菌计数的一般步骤
二、单细胞微生物的典型生长曲线
三、微生物的连续培养
四、微生物的高密度培养
一、微生物的个体生长和同步生长
微生物在适宜的环境条件下，不断地吸收 营养物质，并按照自己的代谢方式进行代 谢活动，如果同化作用大于异化作用，则 细胞质的量不断增加，体积得以加大，于 是表现为生长。简单地说，生长就是有机 体的细胞组分与结构在量方面的增加。
生长温度三基点：任何微生物的生长温度 总有最低生长温度、最适生长温度、最高 生长温度。
温度
最适生长温度：
即某微生物分裂代 时最短或生长速率最高 时的培养温度。不同微 生物的最适生长温度是 不一样的。 应该着重 指出：最适生长温度不 一定是一切代谢活动的 最适温度。
膜洗脱（常用）等。
诱导法
诱导因子：不影响微生物生长，可特异性抑制细胞分裂， 消除该抑制后，细胞同时出现分裂。
此法会扰乱细胞的正常代谢
举例： 1、温度调整法； 2、营养条件调整法；
3、抑制DNA合成法（代谢抑制剂：）
（抑制DNA合成法是利用代谢抑制剂阻碍DNA合成相当一
段时间，然后解除其抑制，可达到同步目的。常用的代
（一）微生物细胞数目的测定
－－适用于单细胞微生物或丝状微生物的孢子
直接计数法－－总菌计数 1、计数板计数法（常用）
2、比例计数法
间接计数法－－活菌计数
1、平板菌落计数法
2、液体稀释法
3、厌氧菌菌落计数
其他计数法
1、比浊法
2、膜过滤法
血球计数板
各 种 型 号 的 全 自 动 血 球 计 数 仪
活菌计数的一般步骤
二、单细胞微生物的典型生长曲线
三、微生物的连续培养
四、微生物的高密度培养
一、微生物的个体生长和同步生长
微生物在适宜的环境条件下，不断地吸收 营养物质，并按照自己的代谢方式进行代 谢活动，如果同化作用大于异化作用，则 细胞质的量不断增加，体积得以加大，于 是表现为生长。简单地说，生长就是有机 体的细胞组分与结构在量方面的增加。
第六章微生物的生长与控制ppt
（2）氨基氮的测定 具体方法是离心发酵液，取上清液，加入甲基红和盐酸作指示剂，加
入0.02N的NaOH调色至颜色刚刚褪去，加入上清液18%的中性甲醛，反 应片刻，加入0.02N的NaOH使之变色，根据NaOH的用量折算出氨基氮 的含量。根据培养液中氨基氮的含量，可间接反映微生物的生长状况。
（3）其他生理物质的测定 P、DNA、RNA、ATP、NAM（乙酰胞壁酸）等含量以及产酸、产气、
二、微生物生长量的测定
（一）微生物细胞数目的测定方法 1．细胞总数计数法
细胞总数计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种 方法。一般包括显微镜直接计数法、涂片计数法和比浊法。 （1）显微镜直接计数法 这类方法是利用特定的血球计数板，在显微镜下计算一定容 积里样品中微生物的数量。此法的缺点不能区分死菌与活菌。
图6-5 刻度离心管
3．测定菌种细胞内化学成分
测定菌种细胞内化学成分的方法较复杂，操作困难，但较准确，菌种 细胞内化学成分的多少，可反映出群体中菌体数量的多少。
（1）测定含氮量
微生物细胞的含氮量一般比较稳定，所以常作为生长量的指标，大多 数细菌的含氮量为其干重的12.5％，酵母菌为7.5％，霉菌为6.0％。 根据其含氮量再乘以6.25，即可测得其粗蛋白的含量（包括了杂环氮 和氧化型氮）。细菌中蛋白质含量占细菌固形物的50%～80%，一般 以65%为代表，因此总含氮量与蛋白质总量之间的关系可按下列公式 计算：
每毫升原液所含菌体数＝每小格平均菌体数×400×10000×稀释倍数
（2）涂片计数法 用计数板附带的0.01mL吸管，吸取定量稀释的细菌悬液，放置刻有1cm2 面积的玻片上，使菌液均匀地涂布在1cm2面积上，固定后染色，在显微 镜下任意选择几个乃至十几个视野来计算细胞数量。根据计算出的视野面 积核算出1cm2中的菌数，然后按1cm2面积上的菌液量和稀释度，计算每 毫升原液中的含菌数。
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影响微生物对热抵抗力的因素
菌种的遗传特性 菌龄 微生物的数量 基质的特性（组成、浓度、理化条件） 加热的时间与温度
灭菌与消毒的概念
灭菌是指采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一 切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施；消毒是一 种采用较温和的理化因素，仅杀死物体中病原微生物 的措施 加热灭菌和加热消毒的方法
生长速度常数（R）
n R = t2 – t1
= ㏒ x2 - ㏒ x1 t2 – t1
代时(G) 1
G= R =
t2 – t1 3.322(㏒ x2 - ㏒ x1)
稳定期特点
1 生长速率常数R等于0 2 菌体产量达到了最高值 3 合成次生代谢产物 4 细胞内出现储藏物质，芽孢菌内开始 产生芽孢
产生原因：
高温对培养基的不利影响： 形成沉淀物（有机沉淀物如多肽类，无机沉淀物如磷 酸盐）；破坏营养；提高色泽（褐变如产生氨基糖 等）；改变培养基的pH值；降低培养基的浓度
消除有害影响的措施 采用特殊的加热灭菌法 过滤除菌法 加入螯合剂
低温对微生物生长的影响
低温微生物耐低温的原因：
胞内酶耐低温；细胞膜中不饱和脂肪酸的含量高。
❖ 根据微生物生长与氧气的关系，可将微生物分为： 专性好氧菌：在正常大气压下 (0.2巴)进行好氧呼吸产能 兼性好氧(厌氧)菌：以呼吸为主，兼营发酵或无氧呼吸产能 微好氧菌：只能在0.01-0.03巴大气压下生活 厌氧菌,耐氧菌：只能以发酵产能，但分子氧无毒害 (专性)厌氧菌：只能生长在无氧或基本无氧条件下，氧剧毒 ❖ 过氧化物歧化酶、过氧化氢酶、细胞色素氧化酶的分布情
营养物尤其是生长限制因子的耗尽 营养物的比例失调，如碳氮比不合适 有害代谢废物的积累（酸、醇、毒素等） 物化条件（pH、氧化还原势等）不合适
衰亡期特点
1 R为负值 2 细胞的形态发生变化，出现不规则的衰退形 3 释放次生代谢产物，芽孢等 4 菌体开始自溶
产生原因：
生长条件的进一步恶化，使细胞内的分解代谢大大超 过合成代谢，继而导致菌体的死亡
细菌研究中常用的三个参数
繁殖代数（n）
指数生长方式： 1 2 4 8… …2n
设接种时细胞数为x1, 时间为t1, 到时间t2后，繁殖n代， 细胞数为x2，它们之间的相互关系为：
x2 = x1*2n 以对数表示： ㏒ x2 = ㏒ x1 + n㏒2
∴n=
㏒
x2 ㏒2
㏒
x1 =
3.322(㏒ x2 - ㏒ x1 )
干热灭菌法:火焰灭菌法,干燥加热空气灭菌法
高温灭菌
巴氏消毒法，煮沸消毒法，间歇灭菌法
湿热灭菌法
（常压）
高压蒸汽灭菌法，连续加压灭菌法 （加压）
影响加压蒸汽灭菌效果的因素
灭菌物体的含菌量 灭菌锅内空气的排除程度 灭菌物体的pH值 灭菌对象的体积 加热与散热的速度
高温对培养基的影响及其防止措施
主要的生长参数
迟缓时间：实际达到对数生长期所需时间与理想条件 下达到对数期所需时间之差。延缓生长量反映了迟缓 期给细胞物质的工业化生产造成的损失。
比生长率：表示生长速度与生长基质浓度之间的关系， 当营养物质浓度很低时，比生长率与营养物质浓度成 正比。
总生长量：通过培养获得的微生物总量与原来接种的微 生物量之差值。
中草药有效成分
温度
不同的微生物生长的温度范围不同，根据生长与温度 的关系，微生物的生长有三个温度基点，即最适、最 高、最低生长温度，根据微生物的最适生长温度的不 同，可将微生物分为：低温微生物、中温微生物和高 温微生物，它们的生长温度如下表
高温对微生物生长的影响
嗜热微生物的生长特性
生长曲线的各个时期均短暂，因此常会在腐败食品中检 测不到，这在食品检验中要特别注意
低于冰点的温度对微生物的影响：
水分的丧失；冰晶对细胞膜的物理损伤。
❖ 速冻、缓冻与反复冻溶对微生物细胞的影响
低温的用途
菌种保藏
液氮的温度（-195℃）、干冰温度（-70 ℃ ）、-20 ℃和4 ℃（常加大分子保护剂如糊精、血清白蛋白等）
食品冷藏
冷藏（0-4 ℃ ）与动藏（-18 ℃ ）
氧气
影响延滞期长短的因素
接种龄 接种量 培养基成分
发酵工业上需尽量缩短该期，以降低生产成本 在食品工业上，尽量在此期进行消毒或灭菌
指数期的特点
生长速度常数R最大;细胞进行平衡生长; 酶系活跃，代谢旺盛
影响指数期微生物增代时间的因素
菌种;营养成分;营养物的浓度 发酵工业上尽量延长该期，以达到较高的菌体密度 食品工业上尽量使有害微生物不能进入此期
产量常数：总生长量与消耗基质总量之比。
第三节 影响微生物生长的主要因素
物理因素
化学因素
染料
温度 氧气 辐射,干燥,渗透压,超声波与微波 酸、碱与pH 重金属及其化合物 表面消毒剂有机化合物（酚类、醇类、醛类）
卤族元素及其化合物 表面活性剂（新洁尔灭、杜灭芬）
抗代谢药物：磺胺类等 化学治疗剂 抗生素
高温菌在高温下生长的原因
抗热的酶，膜中的高饱和脂肪酸
微生物耐热性大小的几种表示方法
热力致死时间：在特定的温度及其它条件下，杀死一定 数量的微生物所需要的时间 F值：在一定的基质中，温度为121.1℃，加热杀死一 定数量微生物所需的时间 D 值：利用一定温度进行加热，活菌数减少一个对数 周期（即90%活菌被杀死）所需的时间 Z值：在加热致死曲线中，时间降低一个对数周期（即 缩短90%的加热时间）所需要升高的温度
二、微生物的同步生长
同步生长的概念：采用一定的方法使细胞群体处于分裂步调一 致的状态，称为同步生长
通过环境条件诱导同步生长群体 获得同步生长的方法 （温度、培养基成分等）
通过物理方法选择同步生长群体 (离心、硝酸纤维素滤膜过滤)
三、
比浊法
间接法
测含碳量
重点
微生物生长量和繁殖数量的测定方法（常用） 单细胞微生物的生长曲线及相关应用 常见理化因素对微生物生长的影响
第一节 微生物纯培养的生长
一、获得微生物纯培养的方法
纯培养的概念：微生物学中将从一个细胞得到的后 代称为纯培养
获得微生物纯培养的方法： 稀释倒平板法 划线法 单细胞挑取法 利用选择培养基培养法
生理指标法 测含氮量
DNA）
其它（P 、
计繁殖数
直接法 间接法
比例计数法 血球计数法 液体稀释法 平板菌落计数法
第二节 微生物的生长规律
㏒ 细 胞 数
延滞期 指数期 稳定期 衰亡期 单细胞微生物的典型生长曲线
延滞期的特点
生长速度为零 细胞体积急剧增大 细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高，细胞呈嗜碱性 合成代谢活跃，易产生诱导酶 对外界不良环境条件敏感