2017年课件药物血浆半衰期的测定
药物血浆半衰期测定实验PPT资料(正式版)
每次取血前应先将动脉插管内残余血放掉！
比色杯必须配套，擦干净;721分光光度计调零点时至少三次后再测；
取1 ml移入1号离心管，充分摇匀，以 10．显色：各管加入10%三氯化铁（FeCl3）0.
3．分离颈总动脉，头端用线结扎，心端用动脉夹夹闭。 4．动脉插管，备取血用。
1
ln / t 比色杯必须配套，擦干净;721分光光度计调零点时至少三次后再测；
OD 1．取3支离心管标记1、2、3，加入10％三氯醋酸4ml ；
2
C1,C2,C3备用。
11．比色、测光密度值：以C1号管为对照管，用721分光光度计在520 nm波长下读取C2、C3号管的光密度值。 比色杯必须配套，擦干净;721分光光度计调零点时至少三次后再测；
A1→B1→ C1 A2→B2→ C2 A3→B3→C3
10．显色：各管加入10%三氯化铁 （FeCl3）0.5 ml，显色。
比色杯必须配套，擦干净;721分光光 度计调零点时至少三次后再测；清洗 比色杯后用卫生纸单向擦拭透光面，
11．比色、测光密度值：以C1号管为 对照管，用721分光光度计在520 nm 波长下读取C2、C3号管的光密度值。
6．取血: 开启动脉夹取血约1～1.5 ml， 11．比色、测光密度值：以C1号管为对照管，用721分光光度计在520 nm波长下读取C2、C3号管的光密度值。
1．取3支离心管标记1、2、3，加入10％三氯醋酸4ml ； 5 ml， 放入A1号试管，再从A1号试管准确吸取1 ml移入1号离心管，充分摇匀，以沉淀血浆蛋白。
药物血浆半衰期测定实验
【目的】学习药物血浆半衰期测定方法。 【药品】 10%水杨酸钠， 10％三氯醋
药物血浆半衰期, 表观分布容积和清除率的测定ppt课件
器材与药品:
分光光度计，离心机 试管(5ml，3只草酸钾玻璃试管，3只
干燥塑料试管) 试管架，移液枪，注射器3个 0.6%酚磺酞，10%草酸钾溶液，稀释
液(生理盐水29ml+1mol/L NaOH 1ml)
4
方法与步骤:
家兔，称重，心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中， 摇匀
i.v.酚磺酞1.0ml/kg，记录时间，给药后5min， 15min分别心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中， 摇匀
以上试管离心10min(转速1500转/分) 离心后，分别从每管中吸出血浆0.2ml转移至另3试
管中，再分别加入稀释液3ml 用给药前管做对照调零，在560nm处用分光光度计
测每管的光密度(D) 根据标准曲线查出C1C2，根据公式计算出各参数值5Fra bibliotek注意事项
操作：心脏取血; 每次取血提前几分; 标本明显溶血，不能用于PSP的含量测定 定量试验，加样（血、试剂）准确; T：实际间隔时间; 离心前试管要调平衡; 分光光度计：提前打开，预热，调零。禁
9
思考题
1. 检测血药浓度有何临床意义？ 2. 影响血药浓度的因素有哪些？
10
家兔心脏取血方法
一人稳妥固定家兔，腹面向上 采血者一手持采血用注射器，另一手指于家兔 前胸部查找心跳最强处（一般位于胸骨左缘4-5肋 间），于肋间隙进针，垂直刺入 待有突破感即刺入胸腔，垂直向下刺入心脏 如刺入心脏，则注射器颤动均匀稳定，与心跳 频率一致 此时回吸血液，有血液进入则证明进入心脏
止用手触摸比色皿的光面。
6
血浆半衰期(half-life, t1/2) :
t1/2 =T×log2/(logC1-logC2)min
药物血浆半衰期表观分布容积和清除率的测定ppt课件
器材与药品:
分光光度计，离心机 试管(5ml，3只草酸钾玻璃试管，3只
干燥塑料试管) 试管架，移液枪，注射器3个 0.6%酚磺酞，10%草酸钾溶L NaOH 1ml)
4
方法与步骤:
家兔，称重，心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中， 摇匀
i.v.酚磺酞1.0ml/kg，记录时间，给药后5min， 15min分别心脏穿刺取血2ml，放入草酸钾试管中， 摇匀
以上试管离心10min(转速1500转/分) 离心后，分别从每管中吸出血浆0.2ml转移至另3试
管中，再分别加入稀释液3ml 用给药前管做对照调零，在560nm处用分光光度计
测每管的光密度(D) 根据标准曲线查出C1C2，根据公式计算出各参数值
5
注意事项
操作：心脏取血; 每次取血提前几分; 标本明显溶血，不能用于PSP的含量测定 定量试验，加样（血、试剂）准确; T：实际间隔时间; 离心前试管要调平衡; 分光光度计：提前打开，预热，调零。禁
11
此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！
12
Vd =D0/C0 (L) D0:静脉进入体内的药量(mg) C0:预期零时浓度(mg/L) C0 =C1×log-1(0.301×t1/t1/2) t1：第一次取血时间
8
清除率(clearence, CL):
CL = Vd ×K (L/min, L/h) K :消除速率常数 K =0.693/t1/2
止用手触摸比色皿的光面。
6
血浆半衰期(half-life, t1/2) :
t1/2 =T×log2/(logC1-logC2)min
C1:第一次取血时的药浓度 C2:第二次取血时的药浓度 T：两次取血的间隔时间
药物血浆半衰期测定精品PPT课件
血浆药物浓度的测定 【半衰期(t1/2)测定】
【目的】 了解药物tl／2的简单测定方法 药物血浆半衰期的临床意义 学习兔采血技术
【原理】
水杨酸钠在酸性环境中可变为 水杨酸，后者与三氯化铁生成一种 配位化合物。该化合物在520nm波长 下比色，其光密度与水杨酸的浓度
成正比。Lambert-Beer定律 (A=KLC)
3．按下表进行操作。
4.水杨酸钠 2ml/kg (iv)
肝素0.3ml/kg (iv)
注意事项：
1.量具的使用（微量取样器、定量溶液 瓶）；离心机的使用。
2.药前取血必须！采血后及时处理，吸头 等需及时清洗。
3.若未能按时采血，以实际采血时间计算。
4.血样处理严格按步骤进行，切忌试管编 号混乱。
开始实验……
小结
实验结果（A值） 影响因素 实验报告内容及注意事项
测定ｔ1/2的意义:
A、药物分类的依据（短、中、长效） B、确定给药间隔时间 C、预测达到稳态血药浓度的时间 D、预测药物基本消除的时间
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
13
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End 演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
-dC/dt=kC n
【计算】
(lgC1-lgC2)= (A= KLC) (lgC只，称重，于兔箱中固定。 用(12500u/2ml)肝素0.3ml/kg(iv)进行 耳缘静脉注射。 2.准备：
半衰期PPT
半衰期（Half life, t1/2）H lf lif1/2）•描述消除过程的参数•血浆药物浓度下降半的时间血浆药物浓度下降一半的时间H lf lif1/2）半衰期（Half life, t1/2）•某药在体内按一级动力学消除，在其吸收达高峰后取两次血样，测其血浆浓度分别为180ug/ml及后取两次血样测其血浆浓度分别为/l22.5ug/ml，两次取样间隔9h，该药的半衰期是•A 1 h B 1.5 h C 2 h D 3 h E 4 h按零级动力学消除的药物的按零级动力学消除的药物的t 1/2因：C t = －k 0t ＋C 0t 1/2时的C t = 故：t 1/2 =0.5C 0C 0零级动力学的血浆消除半衰期和血浆药物初始浓度成正比即给药剂量越大2k 0成正比，即给药剂量越大，t 1/2越长/t 1/2意义： 确定给药间隔时间通常给药间隔时间为个 通常给药间隔时间为一个t 1/2/t 1/2意义：•某药口服给药，一日三次，应如何给药？小时一次•A 每隔8小时次•B 按一日三餐的时间，饭前或饭后服/t 1/2意义：不同给药时间口服氨茶碱(0.2 g/次，3次/日)后的血药浓度和疗效给药时间血药浓度(ug/ml)疗效不等间隔2.0~9.7哮喘控制不好6287等间隔 6.2~8.7哮喘控制好不等间隔给药时间分别为8:00、11:00、16:00等间隔给药时间分别为6:00、14:00、22:00意义t 1/2意义：•预计体内药物轨迹•一次给药后约经过次给药后约经过5 个t 1/2药物可从体内基本消除•多次给药时约经过5 个t 1/2药物可基本达到稳态血药浓度下次按一级动力学消除的药物的t 1/2t 1/2给药给药前单次给药1100%50%50%2150%75%25%3175%87.5%12.5%41875%9375%625%4187.5%93.75% 6.25%5193.75%96.875% 3.125%6196.875%98.438% 1.26%总结半衰期•半衰期（t 1/2）•血浆药物浓度下降一半的时间•确定给药间隔；预计体内药物轨迹药物代谢•药物作为一种异物进入体内后，机体要动员各种机制使药物发生化学结构改变，称药物的转化，称药物的转化或称生物转化，又称药物代谢。
水杨酸钠血浆半衰期的测定 ppt课件
PPT课件
8
三、实 验 原 理
Experimental principle
（五）为什么选用水杨酸钠？
• 水杨酸钠可在酸性条件下生成水杨酸， 水杨酸与三氯化铁反应生成一种紫色络 合物。因此通过测定510nm处吸光度值， 可计算得到水杨酸钠的浓度。
PPTபைடு நூலகம்件
9
四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps
水杨酸钠血浆半衰期 的测定
Determination of plasma half-life of sodium salicylate
PPT课件
1
Contents
目 录
1
实验前预习
2
实验目的
3
实验原理
4
实验对象
5 实验器材和药品
6 实验方法和步骤
7 实验注意事项
8
分析与思考
9
探索性实验
PPT课件
2
PPT课件
17
分光光度计的使用
1.接通电源，开机预热30分钟。 2.通过波长旋钮选择实验需要波长510nm. 3.打开比色皿暗箱盖，将黑体、参比液、待测液依次放入 比色皿暗箱滑槽中，合上盖。 4.拉动滑杆，让黑体进入光路中按下 键切换到T档。 5.按 键校零。 6.再按 键切换到A档，将参比液放入光路中，按 键调零。 7.再将待测液放入光路中，即可得出待测液的吸光度。
给药后10分钟和 40分钟时，分别 从心脏取血2ml放 入B及C管，记录 取血时间
PPT课件
14
心脏取血
肝素湿润注 射器内壁
食指压住 剑突
中指在食指 上1.2cm-
1.5cm
垂直进针后 向右偏斜不 超过15度
水杨酸钠血浆半衰期的测定ppt课件
四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps
6.比色
以A管为对照管， 用分光光度计测定
光密度。
V1100型可见光分光光度计
17
分光光度计的使用
1.接通电源，开机预热30分钟。 2.通过波长旋钮选择实验需要波长510nm. 3.打开比色皿暗箱盖，将黑体、参比液、待测液依次放入 比色皿暗箱滑槽中，合上盖。 4.拉动滑杆，让黑体进入光路中按下 键切换到T档。 5.按 键校零。 6.再按 键切换到A档，将参比液放入光路中，按 键调零。 7.再将待测液放入光路中，即可得出待测液的吸光度。
家兔称重
耳缘静脉取血 2ml,加入A管。
12
四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps 3. 注射药物
由耳缘缓慢注射10％水杨酸 钠1.5ml/Kg。
13
四、实验方法和步骤
Experimental methods and steps
4.取血2次
给药后10分钟和 40分钟时，分别 从心脏取血2ml放 入B及C管，记录 取血时间
Experimental purpose
1.用比色法测定水杨酸钠浓度并计 算半衰期。
2.学习心脏取血操作。
3
二、实验对象及器材
1.Experimental subjects
家兔
2.Experimental Materials
分光光度计，离心管，离心机， 移液管，注射器。10％的三氯醋酸，
10％水杨酸钠，10％三氯化铁
4
三、实 验 原 理
Experimental principle （一）半衰期的概念
1.生物半衰期：药物效应下降1/2的时间。 2.药物半衰期：药物消除（浓度）下降1/2 的时间。
药物血浆半衰期的测定实验报告
药物血浆半衰期的测定实验报告实验报告：药物血浆半衰期的测定摘要：本实验旨在通过实验室方法测定一种药物在人体内的血浆半衰期。
通过检测药物在不同时间点的血浆中的浓度，计算出药物在人体内的半衰期以及消失速率。
本实验结果表明，该药物在人体内的血浆半衰期为5.2小时，并且得到了合理的测定数据结果。
材料与方法：材料：药物、离心机、显微镜、平衡盘、均分器、测量杯、离心管、紫外吸收分光光度计。
方法：1. 实验开始前，在实验室消毒药物、容器和工具。
2. 将药物按照预先设定的计量取出，加入等量的生理盐水混合均匀，得到一个初始浓度的药物溶液。
3. 将6只小鼠随机排列，每只小鼠的体重大致相同，并进一步进行编号标记。
4. 取出小鼠的尾部，在创口处轻轻揉搓尾部，使其尾部有足够的血流出，并于刚有血流出时记录下时间t0。
5. 然后将甲醛溶液沾满棉球，擦拭尾部创口处以止血。
6. 待小鼠进入恢复期后，将药物溶液通过均分器注入到小鼠的胃部内。
同时，第1组小鼠体内采取1ml药物溶液；第2组小鼠体内采取2ml药物溶液；以此类推。
每组小鼠均取3只。
7. 于灌胃后不同的时间点（包括灌胃后立即、0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h），分别取出相应的小鼠尾部血液样本，并将其置于离心管中。
8. 离心管内的血液置于离心机中，进行离心处理。
离心处理后样本中的血浆部分将被分离出来。
9. 取出离心管中的血浆样本，使用紫外吸收分光光度计检测药物在血浆中的浓度。
结果与分析：根据实验结果的研究，药物在血浆中的浓度可以通过使用紫外吸收分光光度计进行测量。
使用同种方法在不同时间点的血浆浓度得到以下数据：时间(t/h) 1 2 4 6 8 12 24浓度(C/μg/mL) 3.6 2.6 1.6 1.1 0.7 0.5 0.1通过对测定数据的统计分析，计算得到该药物在血浆中的半衰期(T1/2)为5.2小时，并且其消失速率(k)为0.133/h。
结论：本实验研究了一种药物在人体内的血浆消失情况，通过对不同时间点的血浆浓度进行测量，计算得到该药物的半衰期为5.2小时。
药物血浆半衰期测定
Ct = C0 ⋅e
− kt
【方法、步骤 】 方法、
1．取3支离心管标记 、2、3，加入 ． 标记1、 、 ， 支离心管标记 10％三氯醋酸 ％三氯醋酸4ml ； 标记： 取9支试管标记：A1,A2,A3 支试管标记 B1,B2,B3 C1,C2,C3备用。 备用。 备用 2．取家兔一只，称重，麻醉（20％ ．取家兔一只，称重，麻醉（ ％ 乌拉坦5 乌拉坦 ml/kg，2/3 iv，1/3 ip） ， ， ）
每次取血前应先将 动脉插管内残余血 放掉！ 放掉！
8． 取血 在给药后 分钟和 分钟时， ． 取血: 在给药后20分钟和 分钟时， 分钟和40分钟时 开启动脉夹取血约1～ 开启动脉夹取血约 ～1.5 ml 20分钟→A2→准确取 ml→2号离心管 分钟→ →准确取1 分钟 → 号离心管 40分钟→A3 →准确取 ml→3号离心管。 分钟→ 准确取1 号离心管。 分钟 → 号离心管
t
1 2
0 . 693 = OD 1 ln OD 2 / t
0 . 301 = OD 1 log /τ OD 2
t1 / 2
浓 度
零级
对 数 浓 度
零级 级
级血1～1.5ml ～来自三氯醋酸4ml 三氯醋酸
离 心 （ 30 00 3 ）
三氯 氯 0.5ml
3ml
rpm. min
A1
1
B1
C1
血 1
A1→B1→ C1 → → A2→B2→ C2 → → A3→B3→C3 → →
10．显色：各管加入10%三氯化铁 ．显色：各管加入 三氯化铁 （FeCl3）0.5 ml，显色。 ） ，显色。
药物血浆半衰期的测定实验报告
药物血浆半衰期的测定实验报告药物血浆半衰期的测定实验报告引言：药物血浆半衰期是指药物在血浆中的浓度下降到初始浓度的一半所需的时间。
它是评估药物在体内代谢和排泄速度的重要指标，对于合理用药和药物治疗的安全性和疗效具有重要意义。
本实验旨在通过测定药物在动物体内的血浆浓度变化，计算出药物的血浆半衰期。
实验步骤：1. 实验动物的选择与准备选择健康的实验动物，如小鼠或大鼠，并确保它们在实验前一天饮食和饮水正常。
实验前，对动物进行适当的禁食和禁水处理，以确保实验结果的准确性。
2. 药物给药将待测药物按照一定剂量溶解在适量的溶剂中，制备成给药液。
使用适当的方法将给药液注射到实验动物体内，如经口给药、静脉注射等。
确保给药剂量准确、一致。
3. 血浆采集在给药后的不同时间点，通过尾静脉或其他适当的方法采集实验动物的血样。
使用适当的抗凝剂处理血样，避免血液凝结。
4. 血浆样本处理将采集到的血样离心，分离出血浆。
使用适当的方法，如超高速离心或沉淀法，除去血浆中的细胞和固体颗粒。
5. 药物浓度测定使用适当的方法，如高效液相色谱法（HPLC）或质谱法（MS），测定血浆中药物的浓度。
确保测定方法准确、灵敏。
6. 数据处理与半衰期计算绘制药物浓度与时间的曲线图，根据浓度变化趋势确定血浆半衰期。
使用适当的计算公式，如一阶动力学方程，计算半衰期的数值。
结果与讨论：通过实验测定，得到了药物在实验动物体内的血浆浓度随时间的变化曲线图。
根据曲线图的形态，可以确定药物的血浆半衰期。
半衰期的数值可以反映药物在体内的代谢和排泄速度。
较长的半衰期意味着药物在体内停留的时间较长，需要较长时间才能被代谢和排泄。
而较短的半衰期则意味着药物在体内的停留时间较短，代谢和排泄速度较快。
药物的血浆半衰期对于合理用药具有重要意义。
对于需要长时间维持治疗效果的药物，应选择半衰期较长的药物，以确保药物在体内的浓度保持在治疗范围内。
而对于需要快速起效的药物，应选择半衰期较短的药物，以便迅速达到治疗效果。
--w药物血浆半衰期测定.ppt
0.301 (lgX1-lgX2)
/Δt
(lgX1-lgX2)= (lgA1-lgA2)= lg(A1/A2)
小结
• 实验结果（A值） • 影响因素 • 实验报告内容及注意事项
1．取家兔1只，称重，于兔箱中固定。 用(12500u/2ml)肝素0.2ml/kg进行耳缘 静脉注射。 2.准备： 长试管若干，编号备处理血样用。（0、 1、2、3、4…..） 短试管若干，编号备离心用。（0、1、2、 3、4…..） 3．按下表进行操作。
单位：ml
项目/试管
0 对照管 （药前）
实验三
血浆药物浓度的测定 【半衰期(t1/2)测定】
【目的】 • 了解药物tl／2的简单测定方法 • 药物血浆半衰期的临床临床意义 • 学习兔采血技术
【原理】
水杨酸钠在酸性环境中可变为水 杨酸，后者与三氯化铁生成一种配位 化合物。该化合物在520nm波长下比 色，其光密度与水杨酸的浓度成正比。
【方法】
1
药后 5min
2
药后 15min
3
4
药后 药后 30min 45min
Fecl3+AcCl3混合液 2.0
2.0
2.0 2.0 2.0来自血样约1ml 约1ml 约1ml 约1ml 约1ml
精密量取0.6ml至相应编号的短试管中
蒸馏水
5.0
5.0
5.0 5.0 5.0
混 匀，离 心
3000rmp/min，10min
取上清液
520nm ,测光密度
调零
A1=
A2=
A3= A4=
注意事项：
1.量具的使用（微量取样器、定量溶液 瓶）；离心机的使用。
2.药前取血必须！采血后及时处理，吸头 等需及时清洗。
药物血浆半衰期测定
3．分离颈总动脉，头端用线结扎，心端用动脉夹夹闭。 2．取家兔一只，称重，麻醉（20％乌拉坦5 ml/kg，3/4 iv，1/4 ip） 比色杯必须配套，擦干净;721分光光度计调零点时至少三次后再测； 5 ml， 放入1号试管，再从1号试管准确吸取1 ml移入1号离心管，充分摇匀，以沉淀血浆蛋白。 10．显色：各管加入10%三氯化铁（FeCl3）0. 10．显色：各管加入10%三氯化铁（FeCl3）0. 在吸取上清液之前，首先将其漫漫倾倒入对应编号的1、2、3号试管中。 2．取家兔一只，称重，麻醉（20％乌拉坦5 ml/kg，3/4 iv，1/4 ip） 每次移入离心管的血量务必准确
药物血浆半衰期测定
【目的】学习药物血浆半衰期测定方法。 【药品】 10%水杨酸钠， 10％三氯醋
酸4ml， 0.5％肝素生理盐水， 10%三 氯化铁
【动物】 家兔
1．取3支离心管标记，加入10％三氯醋酸4ml ,备用。 1．取3支离心管标记，加入10％三氯醋酸4ml ,备用。 OD1和OD2分别为2、3号管的光密度值。 6．取血: 开启动脉夹取血约1～1. 5 ml，分别放入2、3号试管，再从2、3号试管准确吸取1 ml分别移入2、3号离心管，充分摇匀，以沉淀血浆蛋白。 6．取血: 开启动脉夹取血约1～1. 11．比色、测光密度值：以1号管为对照管，用721分光光度计在520 nm波长下读取2、3号管的光密度值。 【药品】 10%水杨酸钠， 10％三氯醋酸4ml， 0. 6．取血: 开启动脉夹取血约1～1.
3．分离颈总动脉，头端用线结扎，心端用动脉夹夹闭。
【原理】血中药物浓度随时间推移呈规律性（一级动力学消除）下降。
在吸取上清液之前，首先将其漫漫倾倒入对应编号的1、2、3号试管中。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
5/13/2017
15
磺胺类药物半衰期的测定
药理学教研室
实验目的
1.测定磺胺噻唑钠半衰期（t1/2）等药 动学参数的基本方法。 2.理解常用药动学参数的临床意义。
5/13/2017
2
实验原理
药物在机体内由于代谢、排泄等原 因，血液中药物浓度逐渐下降。多
数药物的血液浓度变化呈一级反应，
即药物血液浓度的对数与相应时间 呈直线关系。
管号
给药时间 光密度值 磺胺噻唑钠 浓度
磺胺噻唑钠 对数浓度
０
１
２
标准管
5/13/2017
10
计算
5/13/2017
11
计算
第1次取血的 药物浓度
第2次取血的 药物浓度
给药后两 次取血的 时间间隔
5/13/2017
12
计算
体内药物 总量/kg
5/13/2017
13
注意事项
1. 注射器、EP管全用肝素溶液过一遍，所有管子 牢记要做好标记。
5/13/2017 5
方法与步骤
1.取试管4只，依次用A０、A标、A1、A2标记，各加入
8.1%三氯醋酸2.6ml备用。 2.取EP管3只，依次用B0, B1, B2标记。 3.取试管4只，依次用Ｃ０、Ｃ标、Ｃ1、Ｃ2标记，注射 器、针头及EP管经肝素处理,以抗凝。 4.取家兔，称重，计算给药剂量: 10%磺胺噻唑钠溶 液1ml/kg（100mg/kg）。 5.食指轻弹兔耳根部,使耳缘静脉充盈。 6.以酒精棉球消毒后进行静脉穿刺,耳缘静脉注入10% 磺胺噻唑钠溶液，记录注完时间（准确到秒）。
6
７.给药前(0 min)、给药后5min、35min，分别从耳缘 静脉采血0.5～1ml （给药前采血量要求达到1ml ）， 分别置于EP(B0, B1, B2 )管，记录取血标本的准确 时间（准确到秒）。 ８.从EP管中吸取400μl加入相应的各A管（ A０和A标 管均取自从B0管）, 各管以3000转/分离心10min （注意配平）；分别取离心后的上清液1.5ml至标 记Ｃ管（取上清1.4ml至Ｃ标管），加0.5%亚硝酸 钠溶液0.5 ml，摇匀，再加0.5%麝香草酚1ml，可 见橙红色反应。以给药前血样作空白对照，分光光 度计于525nm波长下测OD值。 ９.标准管的准备：在Ｃ标管中加入0.1ml磺胺噻唑钠 溶液（0. 2mg/ml），其它反应步骤同上。
2. 耳缘静脉穿刺尽量从远端开始，进针后水平推 进。给药前先抽血，接着推注药物可减少一次 穿刺。 3. 消毒用酒精棉球，压迫止血用干棉球。
4. 给药时间及各取血点均要准确记录，加样精确， 减少误差。
5. 离心所得上清液加入亚硝酸钠充分摇匀后方可 加入麝香草酚。 6. 离心注意配平
5/13/2017 14
药物浓度 0 0.000667 0.001333 0.002667 0.005333 0.010667
OD值 0 0.29 0.566 1.045 1.684 2.4
药物标准曲线
2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005 0.006 y = 311.96x + 0.0931 R² = 0.982
5/13/2017
橙红色
4
材料与方法
一、实验动物：家兔1只。
二、器材:注射器2ml 4支，离心管（8支），EP管（3 个），蒸馏水，废液杯，废物杯(放废弃枪头)，酒精 棉球（干、湿）、标记笔，手套（ 2 副），移液器 （ 1mL 、 100uL ）及相应的枪头，试管架，离心机， 分光光度计。 三、药品 :10% 磺胺噻唑钠， 0.2mg/ml 磺胺噻唑钠， 8.1% 三 氯 醋 酸 ， 0.5% 亚 硝 酸 钠 ， 0.5% 麝 香 草 酚 （20%NaOH新鲜配）、肝素注射液。
5/13/2017 3
实验原理
磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物，在酸性溶液中，可与亚硝酸 钠起重氮反应，产生重氮盐。在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物 （麝香草酚）起偶氮反应，形成橙红色的偶氮化合物。可在525nm波 长下进行比色测定。根据Beer-Lamber定律，浓度与光密度成正比关
系。其化学反应式如下：
5/13/2017 7
静脉取 血约大 于0.5ml
加0.5％亚硝 酸钠0.5ml
加0.5%麝香草 酚1ml
准确移 液 0.4ml
混匀
1500转/分 离心5min
准确移 上清液 1.5ml
525nm测光密度
８.１%三氯 醋酸2.6ml
CBΒιβλιοθήκη A偶氮反应橙红色
5/13/2017
8
分光光度计使用
给药后不同时间点的磺胺噻唑钠浓度