凝胶DNA回收试剂盒说明书
胶回收QC操作标准

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(离心柱型)QC标准操作流程1. 实验试剂和耗材1.2 实验试剂1.3 耗材2. 实验操作流程胶回收试剂盒的检测须进行两个实验验证,第一个实验为GelRed染色法,第二个实验为EB染色法。
2.1 GelRed染色法2.1.1 1.5%琼脂糖凝胶的制备(1)准确称取1.5g琼脂糖置于250ml三角锥形瓶中,添加125ml 1×TAE溶液。
(2)轻微混匀后将其置于微波炉中,高火加热6min至溶液沸腾,取出锥形瓶放置室温2min。
(3)添加1×TAE溶液至110ml,再次于微波炉中高火加热3min至溶液沸腾。
(4)室温放置10min后将溶液倒入插有梳子的胶槽内,待胶块凝固后使用。
2.1.2 胶回收实验(1)取6个2ml离心管,依次编号为1-6号,使用分析天平准确称取空离心管的重量。
(2)用干净锋利的手术刀片切下不含核酸染料的1.5%琼脂糖凝胶胶块,放入已称重的2ml离心管中,称取胶块与离心管总重,计算凝胶块的重量。
要求胶块重量不超过200mg 为宜。
(3)添加溶胶液Binding Solution B,要求1、2号管中每100mg琼脂糖凝胶加入200ul Binding Solution B,3、4号管中每100mg琼脂糖凝胶加入300ul Binding Solution B,5、6号管中每100mg琼脂糖凝胶加入400ul Binding Solution B.(4)每管中添加50ul DL2502,混匀后置于60℃水浴5min,期间间断混合,直至凝胶块完全融化。
【注意事项】观察各管内溶胶液溶解胶块的快慢程度。
(5)将上述混合液转移至套放于2ml收集管的GenClean柱中,室温放置2min,10000rpm 室温离心1min,取出GenClean 柱,并倒掉收集管中废液。
(6)将GenClean 柱重新放回收集管中,加入500ul Wash Solution,于12000rpm,室温离心1min,倒掉收集管中废液。
天根切胶回收说明书

天根切胶回收说明书
天根切胶回收试剂盒说明书
一、产品简介
天根切胶回收试剂盒是一种高效的DNA片段回收试剂盒,能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段。
该试剂盒采用独特的吸附技术,能够有效地去除凝胶中的杂质,纯化DNA片段。
回收的DNA片段可用于后续的克隆、测序、PCR等实验。
二、产品特点
1. 高效回收:能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段,回收率高达90%以上。
2. 纯度高:能够有效去除凝胶中的杂质,纯化DNA片段,提高后续实验的准确性和可靠性。
3. 操作简便:采用独特的吸附技术,无需使用有机溶剂,简化了操作步骤。
4. 稳定性好:试剂盒中的成分稳定,便于长期保存和使用。
三、使用方法
1. 准备凝胶和电泳缓冲液:将凝胶和电泳缓冲液按照要求准备妥当。
2. 切胶:按照实验要求将凝胶切成适当大小的胶块。
3. 洗涤:将切好的胶块放入离心管中,加入适量的洗涤液,充分混匀,洗涤去除凝胶中的杂质。
4. 吸附:将洗涤后的胶块放入吸附柱中,按照说明书要求进行吸附操作。
5. 洗脱:将吸附后的DNA片段进行洗脱,收集洗脱液。
6. 检测:对回收的DNA片段进行检测,如琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测。
四、注意事项
1. 使用前请仔细阅读本说明书,确保按照说明书要求正确操作。
2. 本试剂盒仅供实验室使用,请勿用于食品、药品等领域。
3. 使用过程中请注意安全,避免直接接触眼睛、皮肤和衣物等。
如不慎接触到皮肤或眼睛,请立即用清水冲洗,并及时就医。
4. 本试剂盒中的试剂和耗材均为一次性使用,用后请及时处理废弃物。
爱思进胶回收说明书
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爱思进胶回收说明书
爱思进胶回收试剂盒的使用说明书如下:
1. 制备琼脂糖凝胶电泳:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据Marker 判断PCR产物的大小是否符合要求。
2. 切胶:切下包含目的片段的凝胶,尽量切去上下两端的凝胶,以减少非特异性产物的影响。
3. 胶的融化:将切下的凝胶放入一个离心管中,加入适量的胶融化液,使凝胶完全溶解。
4. 洗涤:将凝胶溶液加入一个离心柱中,离心柱的管底会有一个膜,可以吸附凝胶中的DNA片段。
然后加入洗涤液,将离心柱离心,去除残留的胶融化液。
5. 洗脱:加入适量的洗脱液,离心柱离心,将DNA从膜上洗脱下来。
6. 检测:取洗脱液进行电泳检测,观察电泳结果是否包含目的片段。
以上是爱思进胶回收试剂盒的使用说明书的大致步骤,由于不同版本的产品可能存在差异,因此建议在使用前仔细阅读说明书或咨询专业人士。
DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期:常温运输和保存,保质期一年。
产品描述:本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。
试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系,或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ,回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。
得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
产品组分:使用方法:1.凝胶回收:切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中,用移液枪头捣碎,按重量比为1:3到1:5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。
PCR 产物回收:直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液,混匀,然后跳过第2步、直接从第3步做起。
如果PCR 反应中使用了石蜡,需要预先去除。
2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟),其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。
如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下,建议不要加热,以免DNA变性,影响回收率。
3.在等待期间,活化离心吸附柱。
在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12,000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。
活化后的离心吸附柱必须在当天使用。
4.在上柱前,在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇(对100mg胶块,加50uL),快速振荡10秒混匀。
AxyPrep DNA 凝胶回收试剂盒 说明书
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AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至8 μg DNA(70bp-10Kb),回收率为60-85%。
琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A溶液)中溶解,其中的保护剂能防止线状DNA在高温下降解,然后在DE-B溶液的作用下使DNA选择性结合到膜上。
纯化的DNA纯度高,并保持片断完整性和高生物活性,可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性说明书,耗材:DNA制备管、2 ml离心管、1.5 ml离心管。
Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA保护剂,防止DNA在高温下降解。
室温密闭贮存。
Buffer DE-B:结合液(促使大于70 bp的DNA片段选择性结合到DNA制备膜上)。
室温密闭贮存。
若出现沉淀,应于70°C温育溶解并冷却至室温后再使用。
Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液,使用前,根据瓶上数量加入乙醇,混合均匀,室温密闭贮存。
可用100%无水乙醇或95%乙醇。
Eluent:2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5,室温密闭贮存。
二、注意事项1. 在步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型DNA长时间暴露在高温条件下易于水解),从而提高回收率。
勿将含DNA的凝胶长时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA 造成的损伤。
2. 在步骤2中凝胶必须完全熔化,否则将严重影响DNA回收率。
3. 将Eluent或水加热至65°C,有利于提高洗脱效率。
4. DNA分子呈酸性,建议在2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5洗脱液中保存。
三、实验准备1. 第一次使用前,Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇。
2. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。
3. 准备75°C水浴。
四、操作步骤1. 在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面液体并切碎。
实验十 DNA 片段从凝胶中回收
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DNA浓缩,去盐及去除杂质 浓缩, 浓缩
加入3倍量的碘化钠溶液于样品DNA溶液中(若 DNA为固态,则先将之溶于适量水或TE中,再加 3倍体积的碘化钠溶液)。 加20ul或更多的“基因纯”试剂(每ul该试剂可 20ul ul 吸附0.3ugDNA,操作者可根据这一指标自行决 定“基因纯”试剂的用量,但不应少于10ul)。 以下步骤与“从琼脂糖凝胶中分离纯化DNA片段” 中步骤d到j相同。
从凝胶中分离回收DNA的方法
现在常用的技术有: 电洗脱法 低熔点琼脂糖凝胶法 DEAE滤膜插片法等 其中电洗脱法,经济节省,操作方便, 对D NA的回收效果好。
低熔点琼脂糖凝胶法
65oC琼脂糖凝胶熔点 低熔点琼脂糖凝胶 37oC 液体
DEAE滤膜插片法
High efficient DNA high quality for microinjection <5kb fragment 100ng DNA fragment 10mmol/L EDTA(pH8.0) 5 minutes 0.5 mol/L NaOH 5 minutes 低盐缓冲液50mM/LTris .Cl 0.15M/L NaCl 10mM/L EDTA(pH8.0) 高盐缓冲液50mM/LTris .Cl 1M/L NaCl 10mM/L EDTA(pH8.0)
13.12000g,4℃下离心10分钟,得DNA沉 淀。 14.弃上清,加入70%乙醇洗涤2次后弃干乙 醇。 15.加入50µl TE溶解DNA。 16.取10µl DNA溶液加入2µl Loading buffer 于0.8%琼脂糖上, 40伏电泳,3小时。 17.在紫外透射仪上观察结果。 18.测定DNA溶液OD260,OD280值。
PCR 或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书

PCR或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书
【试剂盒简介】
本试剂盒将可以特异结合DNA的高性能磁性复合微球与独特的溶液系统有机结合在一起,适合从各种电泳凝胶(TAE或TBE)中提取线性DNA(70 bp-10 Kb),回收率在60-90%以上,本试剂盒还可从凝胶中回收质粒。
纯化后的线性DNA保持完整的生物活性,适用于多种用途,如:连接、体外转录、PCR、测序、Southern 杂交、微注射等分子生物学研究。
本试剂盒结合自动化设备,可以实现DNA琼脂糖凝胶回收的高通量、自动化提取。
【试剂盒组成】
Cat. No. YR03009-01YR03009-02YR03009-03
制备次数 50次100次200次
Lysis-Binding Buffer 20mL40mL120mL
Wash Buffer W1 70mL140mL400mL
Magnetic beads 1mL2mL4mL
Elution Buffer 2.5mL5mL10mL
使用说明书1份1份1份
【贮藏与有效期】
所有试剂室温保存,有效期为一年。
【操作步骤】请与我公司联系。
【经销商】深圳市易瑞生物技术有限公司
Shenzhen Bioeasy Biotechnologies Co., Ltd.
地址:深圳市宝安区西乡街道桃花源科技创新园11号研发中心邮编:518102
电话:**************************传真:*************
电子邮件:********************公司主页:。
Gel Extraction Spin Protocol(中文)
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琼脂糖凝胶回收操作步骤(离心柱型)●快速- - 用<10分钟从琼脂糖凝胶中回收DNA●可靠- - 优化的缓冲液保证了DNA纯度●优质- - 纯化DNA适于任何下游应用●安全- - 无需有机溶剂2.储存条件及稳定性◆自购买之日起,所有BNT胶回收试剂盒组分在22-25C下都能保质至少24个月。
请确保未使用时结合缓冲液瓶盖紧盖。
★如缓冲液中出现沉淀,于37℃温育即可溶解。
3.结合能力■每个HiBind DNA离心柱能结合多至~ 20 μg DNA■纯化次数基于琼脂糖凝胶浓度及DNA片段大小。
一般来说,<100bp的DNA片段或从>2%的琼脂糖凝胶中回收DNA需要附加的结合缓冲液以达到试剂盒预期的使用次数。
(结合缓冲液能单独购买,货号为Binding-200)。
4.开始回收前强烈建议在开始本操作之前熟悉整个操作步骤。
如果所有步骤都严格遵守,BNT胶回收试剂盒是简单、快捷、可靠的回收方法。
5.BNT胶回收操作步骤(离心柱型)使用者自备材料:▼50 - 55C水浴▼至少耐转速10,000g的微量离心管▼无核酸酶的1.5ml离心管▼无菌去离子水(或TE缓冲液)▼无水乙醇(96%-100%乙醇)▼保护性眼罩▼5M醋酸钠pH5.2⑴进行琼脂糖胶/ EB电泳分离不同DNA片段。
可使用所有类型或级别的琼脂糖。
强烈推荐使用新制TAE或TBE缓冲液作为电泳缓冲液。
不要重复使用电泳缓冲液,其pH会升高,降低回收得率。
⑵各条带分离到恰当位置时,用宽的干净锋利手术刀片仔细切下含有目的片段的琼脂糖胶,尽量切除DNA片段周围多余的琼脂糖胶以使凝胶体积最小。
⑶估计凝胶块体积,将其置于1.5ml微量离心管中称重。
假设凝胶密度为1g/ml,凝胶体积如下推算:质量为0.3g的凝胶块体积为0.3ml。
加入与凝胶等体积的结合缓冲液。
将混合物置于50-65℃7min,或直到凝胶完全溶解。
在溶解过程中每2-3min摇振以促进混合。
TaKaRa 凝胶回收说明书.

Code No. 9762 研究用TaKaRa MiniBEST AgaroseGel DNA Extraction Kit Ver.4.0说明书v201306Da目录内容页码●制品说明1 ●制品内容1 ●保存与运输1 ●使用前的准备事项1 ●操作方法1 ●使用例3 ●注意事项3 ●Q&A 4●制品说明本试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段的试剂盒。
试剂盒采用了独特的凝胶溶解Buffer,其具有较强的缓冲性能并含有pH指示剂,方便判断溶液的pH值是否适合与DNA制备膜结合,其溶胶能力很强,无需加热,在室温(15-25℃条件下即可快速溶解凝胶。
本试剂盒结合DNA制备膜技术,具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需20分钟便可完成。
使用本试剂盒每次可纯化得到多至20 μg以上的DNA片段(50 bp~20 kb,回收率高达50~80%,20~50 kb的DNA片段回收率略低。
经本试剂盒回收纯化的DNA片段纯度高,完整性好,可直接用于连接反应、PCR扩增、DNA测序等各种分子生物学实验。
●制品内容(50次量每次处理的胶块量约为300 mg(1%凝胶浓度时,本试剂盒可使用50次。
本试剂盒分试剂Set与Column Set两部分。
■试剂SetBuffer GM*1 50 mlBuffer WB*2 24 mlElution Buffer 2 ml ×2*1含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。
若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*2首次使用前,向Buffer WB中添加56 ml的100%乙醇。
■Column SetSpin Columns 50支Collection tubes 50支【试剂盒之外所需准备试剂】◆无水乙醇◆灭菌水或Tris-HCl(pH8.0◆ 3 M醋酸钠溶液(pH5.2●保存与运输1. 本试剂盒可以在室温下(15-25℃保存。
2. 本试剂盒于室温下(15-25℃运输。
DNA纯化回收试剂盒

DNA纯化回收试剂盒一、试剂盒内容溶液PC 25ml 100ml平衡液BL 30ml 120ml漂洗液PW 15ml 50ml洗脱缓冲液EB 15ml 30ml吸附柱CB2 50个200个收集管(2ml)50个200个说明书1份1份二、操作步骤(一)、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段1、柱平衡步骤:向吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管)加入500ul 平衡液BL,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
(请使用当天处理过的柱子)2、将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入赶紧的离心管中,称取重量。
3、向胶块中加入等倍体积溶液PC(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100ul,则加入100ulPC溶液),50℃水浴放置10分钟左右,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
(若胶块的体积过大,可事先将胶块切成碎块)4、将上一步所得溶液加入到一个吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CB2放回收集管中。
5、向吸附柱CB2中加入600ul漂洗液PW,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CB2放回收集管中。
6、重复步骤5.7、将吸附柱放入收集管中,12000rpm(~13400×g)离心2分钟,尽量出去漂洗液。
将吸附柱置于室温放置数分钟,彻底晾干。
8、将吸附柱CB2放入一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟。
12000rpm(~13400×g)离心2分钟,收集DNA溶液。
(二)、从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA1、柱平衡步骤:向吸附柱CB2中(吸附柱放入收集管)加入500ul 平衡液BL,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理

胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理胶回收DNA试剂盒是一种常用的分子生物学实验工具,用于从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA的方法。
其原理主要基于琼脂糖凝胶电泳的分离特性和DNA与硅胶膜亲和吸附的原理。
下面将详细介绍胶回收DNA试剂盒的原理和方法。
1.原理:1.1琼脂糖凝胶电泳分离:首先,将DNA样品与琼脂糖混合并加热使其溶解后,将混合物加入琼脂糖凝胶槽中,随后进行电泳。
由于琼脂糖具有分子筛的特性,DNA分子根据大小被分离在凝胶中的不同位置。
1.2硅胶膜吸附:电泳结束后,将琼脂糖凝胶取出,然后将硅胶膜放置在凝胶表面,使其与DNA分子接触。
由于硅胶膜具有强烈的亲和吸附性,它能够有效地吸附DNA分子。
1.3洗脱纯化:在硅胶膜上吸附的DNA分子可以通过洗脱的方式从硅胶膜上释放出来。
一般情况下,通过使用适当的缓冲液可以将DNA洗脱出来,得到纯化的DNA样品。
2.方法:2.1样品制备:将待分离和纯化的DNA样品进行适当的制备处理,如酶切产生的片段、PCR扩增产生的产物等。
根据需要,可以使用酶切缓冲液、PCR停止液等添加剂来优化样品的制备。
2.2琼脂糖电泳:将样品加入琼脂糖凝胶槽中,通过电泳操作进行DNA分离。
根据需要,使用适当的电泳缓冲液和电泳条件来获得所需的分离效果。
2.3硅胶膜吸附:电泳结束后,取出琼脂糖凝胶,将硅胶膜放置在凝胶表面,使其与DNA分子接触。
根据实验要求,可以根据需要对硅胶膜进行预处理,如加热、孵育等。
2.4洗脱纯化:通过使用适当的洗脱缓冲液,将硅胶膜上吸附的DNA 洗脱出来。
通常,洗脱缓冲液中包含盐和其他成分,以提高DNA的纯度和回收率。
2.5最终保存:将洗脱的DNA样品进行适当的保存和处理。
根据实验需求,可以进行浓缩、冻干或直接用于后续实验。
总结:胶回收DNA试剂盒通过利用琼脂糖凝胶电泳分离DNA,并利用硅胶膜的亲和吸附性,实现了从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA的目的。
这种方法简便易行,能够在短时间内获得高质量的DNA样品,广泛应用于分子生物学研究和实验室应用中。
凝胶DNA回收试剂盒说明书

凝胶DNA 回收试剂盒说明书产品组成凝胶DNA回收试剂盒Cat. No. 5次样品200100550次制备2001050250次制备2001250核酸纯化柱2 ml离心管1.5 ml离心管Buffer GBuffer WSBuffer WG(浓缩液)Buffer TE说明书5个5个5个3 ml3 ml2.4 ml0.5 ml1份50个50个50个30 ml30 ml24 ml5 ml1份50个×550个×550个×5150 ml150 ml72 ml ×225 ml1份产品储存与有效期产品如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品储存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上。
技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部:e-mail: *******************,电话:400-0099-857。
产品介绍本试剂盒采用了柱纯化的原理,适合从多至400mg琼脂糖凝胶中回收DNA (70bp-10kb),回收率为70~85%。
溶胶试剂为不含碘化钠的温和溶解液,确保回收的DNA 保持片断完整性和高生物学活性,回收的DNA可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品1.无水乙醇2.1.5ml离心管、移液器及吸头3.一次性手套、纸巾及防护用品4.台式小量离心机(可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子)使用前准备1)如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。
2)根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WG中加入无水乙醇,并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。
3)将水浴锅的温度设置为50°C。
4)可能需要使用3 M 醋酸钠(pH 5.0)及异丙醇。
操作步骤1)在紫外灯下将含有DNA片段的琼脂糖凝胶切下,转移到一个自备的1.5 ml 离心管中。
* 尽量减少多余的凝胶体积,可缩短溶胶时间。
BioLabs胶回收试剂盒说明书

BioLabs胶回收试剂盒说明书胶回收试剂盒说明书(生工)SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒产品编号:SK8131、SK8132包装规格:50次、100次试剂盒组成组分SK8131,50次SK8132,100次纯化套件(吸附柱+收集管)50套100套Buffer B2 30 ml 60 mlWah Solution 12 ml 24 mlElution Buffer 5 ml 10 ml操作手册1份1份保存方法及注意事项本试剂盒在室温(15,25°C)干燥保存,有效期见包装。
Buffer B2中含有刺激性的化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。
沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
产品介绍本试剂盒适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100 bp,10 kb的DNA片段,回收效率可达80%。
该试剂盒采用特殊的吸附膜,能够有选择性地吸附核酸分子,去除其他杂质,得到高质量的DNA回收产物。
本试剂盒采用的膜结合液中不含有干扰酶活性的碘化钠,所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。
本试剂盒具有以下特点:1、适用范围广,回收效率高,对于100 bp,10 kb之间的DNA片段回收效率在80%以上。
2、操作简单快速,整个回收过程仅须15分钟左右。
3、洗脱效率高,洗脱体积最小可低至15μl。
快速操作流程(胶回收)1、准备工作。
a。
检查Wah Solution 中是否已经加入乙醇。
b。
检查Buffer B2是否出现沉淀。
c。
将水浴锅调至55°C 2、从琼脂糖凝胶中割下含目标片段的胶块,称重。
3、加入胶块重量3-6倍的Buffer B2,50°C 水浴5-10分钟溶胶。
4、(选做)对于 < 500 bp 的片段,加入1、3 Buffer B2体积的异丙醇。
5、将溶胶液移入吸附柱中,8,000 g 离心30秒。
凝胶DNA回收试剂盒使用说明
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DNA凝胶回收试剂盒50TCat#:GV-GX-50本试剂盒可从各种浓度琼脂糖凝胶中回收DNA片段,不含盐、蛋白质、RNA等杂质。
500bp以上片段,回收率80%以上,200bp~500bp回收率70%以上,100bp~200bp回收率60%。
可回收单链、双链DNA 片段以及环状质粒DNA。
本试剂盒采用一种独特的平衡液处理吸附膜,该试剂能够激活硅基质膜,改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,专一吸附DNA的作用,同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。
1试剂盒组成、储存、稳定性成分规格注意事项Buffer GA60mlBuffer BL12mlWash buffer13ml使用前加入52ml无水乙醇Elution4ml离心柱50个单个最大吸附量20μg1.5ml离心管50个说明书1份Buffer GA:溶胶液。
室温密闭贮存。
若出现沉淀,应于65℃温浴溶解并冷却至室温后再使用。
Buffer BL:平衡液,平衡液的加入能够激活硅基质膜,改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,专一吸附DNA的作用,同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。
Wash buffer:去盐液。
使用前,第一次使用前根据瓶上指定的体积加入无水乙醇,混合均匀,室温密闭贮存。
Elution:10mM Tris-HCl,pH8.0。
室温密闭贮存。
二、注意事项1:将洗脱液或双蒸水加热至65℃,有利于提高洗脱效率2:DNA呈酸性,建议在10mM Tris-HCl,pH8.0洗脱液中保存3:用平衡液处理过的柱子最好当天使用,放置时间过长会影响效果4:在步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短溶胶时间(线型DNA长时间暴露在高温条件下易水解),从而提高回收率。
勿将含有DNA的凝胶长时间暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA造成的损伤。
三、实验前试剂准备Wash buffer第一次使用前加入52ml无水乙醇。
从琼脂糖凝胶中回收DNA
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7. 加入DR-1 Buffer的1/2体积量的DR-II Buffer,均匀混合。 注:当分离小于400bp的DNA片段时, 应在此溶液中再加入终浓度为20%的 异丙醇。 8. 将试剂盒中的Spin Column安置于 Collection Tube上。 9. 将步骤7的溶液转移至Spin Column中, 12,000rpm离心1分钟,弃滤液。 注:如将滤液再加入Spin Column中离 心一次,可以提高DNA回收率。
五、实验结果与讨论
1. 实验结果 2. 讨论
附I: TaKaRa Agrose Gel DNA Purification Kit Ver2.0回收DNA 的操作步骤
1. 使用TAE或TBE缓冲液制作琼脂糖 凝胶,然后对目的DNA进行琼脂糖 凝胶电泳。 2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼 脂糖凝胶。应注意尽量切除不含目 的DNA部分的凝胶,尽量减少凝胶 体积,提高DNA回收率。 注: 切胶时不要将DNA长时间暴露 于紫外灯下,以防DNA损失。
五、注意事项
切胶时不要将DNA长时间暴露于紫外灯下, 以防DNA损失。 胶块一定要充分融化,否则会严重影响 DNA的回收率。 混合振荡操作不要过于剧烈。 灭菌蒸馏水或Elution Buffer加热至60゜C 使用时有利于提高洗脱效率。 DNA需长期保存时,建议使用Elution Buffer。 纯化的DNA用于序列分析时,最好使用灭 菌的双蒸水进行DNA的洗脱。
10.将500µ L的Rinse A加入Spin Column 中, 12,000rpm离心30秒,弃滤液。 11.将700µL的Rinse B加入Spin Column 中,12,000rpm离心30秒,弃滤液。 12.重复步骤11。 13.将Spin Column安置于新的1.5mL的离 心管上,在Spin Column膜的中央处加 入25µ L的灭菌蒸馏水或Elution Buffer, 室温静置1分钟。 注:把灭菌蒸馏 水或Elution Buffer加热至60゜C使用 时有利于提高洗脱效率。 14.12,000rpm离心1分钟洗脱DNA。
琼脂糖凝胶 dna 回收试剂盒说明书

琼脂糖凝胶货号:D1200规格:50T/100T保存:常温干燥保存,复检期为一年。
试剂盒内容:产品说明:本试剂盒采用可以高效、专一结合的DNA硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。
可回收100bp-10kb大小的片段,回收率大于80%(小于100bp和大于100kb的DNA片段回收率为30-50%)。
使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。
注意事项:在使用本试剂盒前请阅读此注意事项。
1.电泳前最好更换成新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2.如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
3.切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
4.回收小于100bp和大于100kb的DNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
5.回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
6.如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤:(使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。
)1、琼脂糖凝胶电泳后,将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入干净的离心管中,称取重量。
2、向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100ul,则加入300ul溶胶液),50-55℃水浴放置10min,期间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
注意:溶胶时,如果溶胶液变为红色(正常情况下为淡黄色),可向含有DNA的胶溶液中加入10-30ul 3M醋酸钠(pH5.2)将胶溶液调为淡黄色,否则将会影响DNA与吸附柱的结合,影响回收效率。
3、将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
试剂盒使用说明
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*质粒小量提取试剂盒产品说明:■本产品采用经典的硅胶膜及碱裂法技术,硅胶膜柱可以在高盐、低pH值情况下高效可逆的结合DNA, 而蛋白及其它杂质不被结合而被除去,被结合的核酸在低盐、高pH值情况下可被洗脱出来.该试剂盒具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需半个小时便可完成。
使用本试剂盒可从1~5 ml的过夜培养的菌液中纯化得到1~40μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8~2.0),此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。
试剂盒组成:产品编号GS001-1 GS001-2 GS001-3试剂盒组成纯化次数50次100次200次RNaseA(10mg/ml)150μl 300μl 600μl溶液Ⅰ15ml 30ml 60ml溶液Ⅱ15ml 30ml 60ml溶液Ⅲ20ml 40ml 80ml溶液PB 30ml 50ml 100ml溶液W 30ml 2×30ml3×40ml溶液Eluent 5ml 10ml 20mlDNA纯化柱50个100个200个溶液W初次使用前用无水乙醇按1:1.5稀释,即含60%乙醇。
用途:提取用于酶切、转化、测序、PCR等试验用质粒。
保存:初次使用本试剂盒时,请将RNase A全部加入到溶液Ⅰ中,均匀混合后4℃保存。
溶液Ⅱ:室温保存,若出现沉淀,请于37℃保温溶解,待恢复至室温后使用。
其他试剂:室温保存。
操作步骤:1.用1.5 ml离心管收集1.5-5ml菌液,12000rpm离心60秒,弃上清。
(应根据所培养的菌液的浓度确定收集的菌液量)2. 加入250µl溶液Ⅰ/RNase A混合液,漩涡振荡使菌液完全重新悬浮。
(菌液重新悬浮对于获得高产量是非常重要的,为使RNA被RNase A充分降解,让悬浮菌液静置1-2分钟3. 250µl溶液Ⅱ,温和反复颠倒混匀4-10次,室温放置1-2分钟,以获得澄清的裂解液。
琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书
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杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://AidQuick Gel Extraction Kit琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒目录号:DR01❖适用范围:适用于琼脂糖凝胶DNA回收❖试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(DR0101)100次(DR0102)200次(DR0103)平衡液室温5ml 10ml 20ml 溶胶液DD 室温50 ml 50ml×2 200 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 15 ml吸附柱EC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
使用前应该恢复到室温。
2.储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖产品介绍:在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
❖产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.溶胶液加酚红调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
凝胶DNA回收试剂盒使用说明
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凝胶DNA回收试剂盒使用说明一、试剂盒组成1.碱性ELUTION缓冲液:用于回收DNA片段。
2.DNA绑定胶柱:用于吸附DNA片段。
3.洗涤缓冲液:用于去除琼脂糖凝胶残渣和其他杂质。
4.电子式试剂盒设备:用于快速洗脱DNA片段。
二、凝胶DNA回收试剂盒使用步骤1.准备工作:a.将碱性ELUTION缓冲液加热至65℃,并保存在试剂盒中。
b.手套和面具是使用过程中必需的,以确保实验环境的干净。
c.严格遵守实验室的安全操作规程。
2.凝胶切割:a. 切割需回收的DNA片段:将琼脂糖凝胶切割为片段大小约为50-5000 bp的目标DNA。
b.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入微量离心管中,注意不要弄混不同大小的DNA片段。
c.记录每个DNA片段的位置和大小。
3.DNA回收:a.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入DNA绑定胶柱中。
b.将绑定胶柱放入收集管中,通过离心将DNA片段吸附到胶柱上。
c.倒掉废液,并使用洗涤缓冲液洗脱胶柱上的残驻琼脂糖凝胶和其他杂质。
重复此步骤1-2次以确保彻底洗脱。
4.DNA洗脱:a.将洗柱放回空的收集管中。
b.加入预热的碱性ELUTION缓冲液(65℃),封闭试管盖,并放入电子式试剂盒设备中。
c.按照设备操作说明进行启动,并设置相应的洗脱温度和时间。
d.在洗脱完成后,将洗脱液转移到新的离心管中。
可以使用适当的方法(如乙醇沉淀或其他纯化方法)进一步纯化DNA。
5.质量检测:a.使用电泳进行质量检测,以确认回收的DNA片段大小和纯度。
b.如果需要,可以定量将DNA溶液保存在冰箱中以备后续实验使用。
三、注意事项1.使用前确保熟悉试剂盒的组成和使用步骤。
2.使用过程中务必佩戴手套和面具,确保操作环境的洁净。
3.严格按照试剂盒的说明进行操作,并遵循实验室的安全操作规程。
4.需要注意的是,琼脂糖凝胶切割和回收过程极易受到外源DNA污染,因此要确保实验环境的洁净,并尽量避免不必要的接触。
5.回收的DNA片段应尽快进行下一步的实验处理,以避免DNA降解和污染。
DNA凝胶回收试剂盒

产品简介:碧云天2005年底最新推出的DNA凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit),是世界上最先进的DNA凝胶回收试剂盒之一。
本产品采用了融胶液,可以使琼脂糖凝胶完全融化。
同时采用了一种新型的离子交换柱,在特定条件下,使DNA能在离心过柱的瞬间,结合到DNA纯化柱上,在一定条件下又能将DNA充分洗脱,从而实现DNA的快速纯化。
无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,通常12个样品只需不足20分钟即可完成。
DNA纯化柱的容量约为15微克。
适用于PCR反应后去除引物,酶,矿物油,甘油,盐等杂质;也同样适用于酶切,连接,磷酸化,补平或切平,随机引物等反应后的DNA纯化。
所得的DNA可直接用于酶切,连接,转化细菌,测序,PCR,杂交等后续操作。
本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA。
长至30个碱基的引物均可被完全去除。
DNA回收效率通常为60-90%。
接近100bp或10kb的DNA片断回收效率要略低一些,大于10kb的DNA回收效率迅速下降。
另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。
每个试剂盒足够用于50个平均重量不超过400微克的凝胶样品。
包装清单:保存条件:室温保存,一年有效。
注意事项:第一次使用前在溶液II (洗涤液)中加入39ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
溶液I对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。
本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。
所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:1. 切胶回收后,称重,将胶切碎或在离心管内用1ml枪头捣碎。
2. 加入等体积的溶液I(如胶为100mg,则加100微升溶液I),vortex或颠倒混匀。
3. 50-60℃水浴加热约10分钟至胶全融,期间,需vortex或颠倒混匀3-4次,以加速凝胶融解。
若果胶碎片较小,3-5分钟即可全融;凝胶碎片较大则需较长时间,胶全融后至少再在50-60℃水浴加热2分钟。
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凝胶DNA 回收试剂盒说明书产品组成
凝胶DNA回收试剂盒Cat. No. 5次样品
2001005
50次制备
2001050
250次制备
2001250
核酸纯化柱
2 ml离心管
1.5 ml离心管
Buffer G
Buffer WS
Buffer WG(浓缩液)Buffer TE
说明书5个
5个
5个
3 ml
3 ml
2.4 ml
0.5 ml
1份
50个
50个
50个
30 ml
30 ml
24 ml
5 ml
1份
50个×5
50个×5
50个×5
150 ml
150 ml
72 ml ×2
25 ml
1份
产品储存与有效期
产品如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品储存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上。
技术支持
杭州新景生物试剂开发有限公司研发部:e-mail: *******************,电话:400-0099-857。
产品介绍
本试剂盒采用了柱纯化的原理,适合从多至400mg琼脂糖凝胶中回收DNA (70bp-10kb),回收率为70~85%。
溶胶试剂为不含碘化钠的温和溶解液,确保回收的DNA 保持片断完整性和高生物学活性,回收的DNA可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品
1.无水乙醇
2.1.5ml离心管、移液器及吸头
3.一次性手套、纸巾及防护用品
4.台式小量离心机(可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子)
使用前准备
1)如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。
2)根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WG中加入无水乙醇,并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。
3)将水浴锅的温度设置为50°C。
4)可能需要使用3 M 醋酸钠(pH 5.0)及异丙醇。
操作步骤
1)在紫外灯下将含有DNA片段的琼脂糖凝胶切下,转移到一个自备的1.5 ml 离心管中。
* 尽量减少多余的凝胶体积,可缩短溶胶时间。
2)称量切下的凝胶重量,加入3倍体积的Buffer G(每1mg凝胶换算为1µl凝胶体积)。
* 比如100mg凝胶应加入300 µl BufferG。
* 如果凝胶浓度大于2%,应加入6倍体积的BufferG。
3)将装有凝胶的离心管50°C水浴直至凝胶完全溶解(大约5-10分钟)。
* 溶胶的过程中每隔2-3分钟翻转一次离心管以帮助凝胶溶解,并观察凝胶是否彻底溶解。
* BufferG 中所添加的染料可帮助观察凝胶是否彻底溶解,同时可指示pH值,溶胶时如果溶液呈紫红色,则应加入10 µl 3 M 醋酸钠(pH 5.0)使溶液恢复至原来的颜色,否则将影响DNA结合到纯化柱上。
4)加入1倍凝胶体积的异丙醇,混合均匀。
* 如果回收的DNA片段在500bp~4kb之间,可省略本步骤。
* 比如从100 mg凝胶中回收DNA,应加入100 µl异丙醇。
* 如果从大于2%的凝胶中回收DNA,则应加入2倍凝胶体积的异丙醇。
5)将溶胶液转移到核酸纯化柱中(核酸纯化柱置于2ml 离心管中),12000 rpm 离心30秒。
* 如果溶胶液体积大于750 µl(相当于从250 mg凝胶中回收DNA),应分两次离心过柱。
6)弃2ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2ml 离心管中,加入500 µl Buffer WS, 盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
* 滤液无须彻底弃尽,如果要避免粘附在离心管管口的滤液对离心机的污染,可将2ml 离心管在纸巾上倒扣拍击一次。
7)弃2ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2ml 离心管中,加入700 µl Buffer WG, 盖上管盖,12000 rpm 离心30秒。
重复步骤7)一次。
* 确认在Buffer WG中已经加入无水乙醇。
* 两次洗涤Buffer WG洗涤能更有效地降低纯化柱上盐分的残留,请勿省略。
8)弃2ml 离心管中的滤液,将核酸纯化柱置回到2ml 离心管中,14000 rpm 离心1分钟。
* 如果离心机的离心速度达不到14000 rpm,则用最高速离心2分钟。
* 请勿省略该步骤,否则可能因所纯化的核酸中混有乙醇而影响后续的实验效果。
9)弃2ml 离心管,将核酸纯化柱置于一个洁净的1.5 ml 离心管(试剂盒提供)中,在纯化柱的膜中央加入25-30 µl Buffer TE,盖上管盖,室温静置1分钟,12000 rpm 离心30秒洗脱DNA。
* 也可用去离子水洗脱DNA,但应确保所使用的去离子水的pH 在7.0-8.5,否则将影响DNA的洗脱效率。
10)弃纯化柱,洗脱的DNA可立即用于各种分子生物学实验;或者将DNA储存于-20 ℃备用。