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应使用与固定液中的乙醇浓度相近或略低的乙醇洗涤。 （3）特殊固定液的洗涤方法:略
（二）脱水
定义：将组织内的水分用某些化学试剂置换出来的过程称为脱水。
1.脱水的目的 组织块经固定和洗涤后，含有大量的水分，而水与苯、二甲苯等透
明剂不混溶，故组织在透明前必须用能与透明剂相混溶的脱水剂 （如乙醇），把组织内的水分置换出来，为下一步的透明做准备。
三、洗涤、脱水、透明
（一）洗涤
定义：用水或乙醇等将组织经过固定处理后，与组织结合的固定液及 沉淀物清洗掉的过程，称为洗涤。
1.洗涤目的 除去未与组织结合的固定液及沉淀物。 2.洗涤的方法 （1）含水固定液的洗涤方法：常用的含水固定液是甲醇溶液，用自
来水冲洗即可。 （2）含乙醇固定液的洗涤方法：一般不需要洗涤，如果需要洗涤，
病理检验技术
12级检验（1）班01号
学号：2012130801001
姓名：蔡枝奇
第六章 组织制片技术
第一节 组织块的处理 一、取材 二、固定和固定液 三、洗涤、脱水、透明 四、浸蜡、包埋
第二节 切片机具与切片 一、切片机 二、切片刀 三、磨刀与被刀 四、切片
学习目标
1.了解常用组织切片的种类 2.熟悉组织切片制作的基本程序 3.掌握常用固定液的配置和应用 4.熟练进行洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、
（1）中性甲醇液 可作常规固定液或标本保存液，脂肪染色此液固定。
（2）乙醇-醋酸-甲醇液（AAF液） 其特点是固定快速，对脂质、糖类、蛋白质等物质有很好的固定作用，
避免了三种固定液单独使用引起的组织收缩或膨胀，是一种优良的混 合固定液。
（3）乙醇-甲醛液（AF液）
适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
3.浸蜡方法 石蜡是最常用的浸蜡剂，，所以主要通过石蜡的浸蜡方法，以掌握浸
蜡方法。
石蜡浸蜡方法
石蜡有高熔点和低熔点之分，一般使用的是熔点为56℃以上的石蜡。要显示 酶和保存抗原活性性时，则需使用熔点为54℃以下的石蜡。常规制片普通用 熔点为56~58℃旳石蜡。
处理步骤 操作步骤 处理时间/h
固定后的组织不必经低浓度逐级乙醇脱水，可直接移入95%乙醇脱水， 也不用水洗，缩短了脱水时间。
配方： 95%或乙醇脱色 90mL
40%甲醛
10mL
（4）Bouin液
是一种常规用于活检标本固定的良好固定液，适用于大多数组织的固 定，尤其适用于结缔组织染色。
（5）Zenker液
适用于一般组织固定，胞核和胞质染色均清晰，对免疫球蛋白染色最 好，也可用于病毒包涵体、某些肿瘤标本的固定。
Hale Waihona Puke 、浸蜡和包埋 （一）浸蜡（透蜡） 定义：通过透明的组织块在融化的石蜡中浸渍，使组织块中的透明剂
被完全置换出来的过程。
1.浸蜡的目的 用石蜡等支持物去置换、替代组织中的透明剂，使组 织具有一定硬度，有利切片。
2.浸透剂的种类 常用的浸透剂有石蜡、明胶、火棉胶、树脂、碳蜡 等，它们既是浸透剂又是包埋剂。
组织块大小 <2mm
浸 石蜡I
0.5
蜡
石蜡II
1
2~4mm 1.5
4~6mm 2
2
3
石蜡III
1
2
3
（二）包埋
定义：用石蜡或其他包埋剂将组织包成一定形状，使其具有一定的硬 度和韧度，便于切成薄片的过程，称为包埋。
2.常用的脱水剂 脱水剂能同时以任何比例雨水和头，透明剂混合。常用的有：乙醇、
正丁醇、丙酮等，其中乙醇最常用。
3.脱水的方法 一般把脱水剂配成各种浓度，自低到高浓度依次进行使组织中所含水
分依次减少直致被脱水剂取代。
4.自动脱水机
（三）透明
定义：用某些化学试剂（如二甲苯等）将组织中的脱水剂置换出来， 以利于浸蜡和包埋，因组织块浸入这些试剂后常呈半透明状，故称透 明（或煤浸）。所使用的化学试剂称为透明剂。
（三）常用固定液
1.单纯固定液 是指有一种化学物质组成的固定液。此类固定液包括：重铬酸钾、苦
味酸、丙酮、氯化汞、铬酸、锇酸等。
常用的有： 甲醛（福尔马林）、乙醇、乙酸（冰醋酸、醋酸)
2.混合固定液
是指由多种化学物质混合组成的固定液。实际工作上多用混合固定液， 其固定效果明显优于单纯固定液。
（四）固定的注意事项
1.及时固定 取材后立即将组织块放入固定液中 2.固定容器宜大 3.固定液应足量 4.防止组织变形 5.确定恰当的固定时间 固定时间应依据组织块的大小、厚度以及固定液的种类、环境温度而
定。组织块大小为（1.0~1.5cm）×1cm×（0.2~0.3cm）时，固定 时间以12~24h为宜。
1.透明目的
2.常用的透明剂 可使用的较多，有苯、甲苯、二甲苯（最常用）、三氯甲烷、汽油、
香柏油（透明时间长达24h，所以不常用）等，多数透明剂对人体有 害，使用时应注意防护。
3.常用透明方法 将脱水后的组织块先用乙醇-二甲苯混合液处理或直接浸入透明剂中，
置换透明剂2~3次既能达到透明目的。
切片、封片等操作
第一节 组织块的处理
一、取材
定义：按照病理检查的目的和要求，切取适当大小和数量的组织块， 用于制作组织切片的过程，称为取材
（一）取材的配合
病理检验技术员取材时的职责是：配合病理医师对病变组织进行肉眼 检查，准确记录病理医生检查时描述的病理改变，按照病理检验的需 要，选择和确定取材的部位和块数。病理检验技术人员要及时对切取 的组织进行编号或标记，并在病理检单上做好记录，以便病理医生镜 检时查对。取材后的标本应加足固定液，按编号存放，以备复查之用。
（二）注意事项
1.避免组织结构变形 切取组织的刀、剪应锋利，刀体宜薄，并有足够的长度。 2.组织块大小适当 通常切取的组织块厚约0.2~0.3cm，大小以1.0~1.5cm×1.0~1.5cm为宜。 3.及时取材 4.标明包埋方向 5.染色、包裹小标本 6.充分暴露病灶 取材应避免过多的坏死组织或凝血块 7.确定取材部位 8.清除多余组织 9.重复取材 10.认真核对
（二）脱水
定义：将组织内的水分用某些化学试剂置换出来的过程称为脱水。
1.脱水的目的 组织块经固定和洗涤后，含有大量的水分，而水与苯、二甲苯等透
明剂不混溶，故组织在透明前必须用能与透明剂相混溶的脱水剂 （如乙醇），把组织内的水分置换出来，为下一步的透明做准备。
三、洗涤、脱水、透明
（一）洗涤
定义：用水或乙醇等将组织经过固定处理后，与组织结合的固定液及 沉淀物清洗掉的过程，称为洗涤。
1.洗涤目的 除去未与组织结合的固定液及沉淀物。 2.洗涤的方法 （1）含水固定液的洗涤方法：常用的含水固定液是甲醇溶液，用自
来水冲洗即可。 （2）含乙醇固定液的洗涤方法：一般不需要洗涤，如果需要洗涤，
病理检验技术
12级检验（1）班01号
学号：2012130801001
姓名：蔡枝奇
第六章 组织制片技术
第一节 组织块的处理 一、取材 二、固定和固定液 三、洗涤、脱水、透明 四、浸蜡、包埋
第二节 切片机具与切片 一、切片机 二、切片刀 三、磨刀与被刀 四、切片
学习目标
1.了解常用组织切片的种类 2.熟悉组织切片制作的基本程序 3.掌握常用固定液的配置和应用 4.熟练进行洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、
（1）中性甲醇液 可作常规固定液或标本保存液，脂肪染色此液固定。
（2）乙醇-醋酸-甲醇液（AAF液） 其特点是固定快速，对脂质、糖类、蛋白质等物质有很好的固定作用，
避免了三种固定液单独使用引起的组织收缩或膨胀，是一种优良的混 合固定液。
（3）乙醇-甲醛液（AF液）
适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
3.浸蜡方法 石蜡是最常用的浸蜡剂，，所以主要通过石蜡的浸蜡方法，以掌握浸
蜡方法。
石蜡浸蜡方法
石蜡有高熔点和低熔点之分，一般使用的是熔点为56℃以上的石蜡。要显示 酶和保存抗原活性性时，则需使用熔点为54℃以下的石蜡。常规制片普通用 熔点为56~58℃旳石蜡。
处理步骤 操作步骤 处理时间/h
固定后的组织不必经低浓度逐级乙醇脱水，可直接移入95%乙醇脱水， 也不用水洗，缩短了脱水时间。
配方： 95%或乙醇脱色 90mL
40%甲醛
10mL
（4）Bouin液
是一种常规用于活检标本固定的良好固定液，适用于大多数组织的固 定，尤其适用于结缔组织染色。
（5）Zenker液
适用于一般组织固定，胞核和胞质染色均清晰，对免疫球蛋白染色最 好，也可用于病毒包涵体、某些肿瘤标本的固定。
Hale Waihona Puke 、浸蜡和包埋 （一）浸蜡（透蜡） 定义：通过透明的组织块在融化的石蜡中浸渍，使组织块中的透明剂
被完全置换出来的过程。
1.浸蜡的目的 用石蜡等支持物去置换、替代组织中的透明剂，使组 织具有一定硬度，有利切片。
2.浸透剂的种类 常用的浸透剂有石蜡、明胶、火棉胶、树脂、碳蜡 等，它们既是浸透剂又是包埋剂。
组织块大小 <2mm
浸 石蜡I
0.5
蜡
石蜡II
1
2~4mm 1.5
4~6mm 2
2
3
石蜡III
1
2
3
（二）包埋
定义：用石蜡或其他包埋剂将组织包成一定形状，使其具有一定的硬 度和韧度，便于切成薄片的过程，称为包埋。
2.常用的脱水剂 脱水剂能同时以任何比例雨水和头，透明剂混合。常用的有：乙醇、
正丁醇、丙酮等，其中乙醇最常用。
3.脱水的方法 一般把脱水剂配成各种浓度，自低到高浓度依次进行使组织中所含水
分依次减少直致被脱水剂取代。
4.自动脱水机
（三）透明
定义：用某些化学试剂（如二甲苯等）将组织中的脱水剂置换出来， 以利于浸蜡和包埋，因组织块浸入这些试剂后常呈半透明状，故称透 明（或煤浸）。所使用的化学试剂称为透明剂。
（三）常用固定液
1.单纯固定液 是指有一种化学物质组成的固定液。此类固定液包括：重铬酸钾、苦
味酸、丙酮、氯化汞、铬酸、锇酸等。
常用的有： 甲醛（福尔马林）、乙醇、乙酸（冰醋酸、醋酸)
2.混合固定液
是指由多种化学物质混合组成的固定液。实际工作上多用混合固定液， 其固定效果明显优于单纯固定液。
（四）固定的注意事项
1.及时固定 取材后立即将组织块放入固定液中 2.固定容器宜大 3.固定液应足量 4.防止组织变形 5.确定恰当的固定时间 固定时间应依据组织块的大小、厚度以及固定液的种类、环境温度而
定。组织块大小为（1.0~1.5cm）×1cm×（0.2~0.3cm）时，固定 时间以12~24h为宜。
1.透明目的
2.常用的透明剂 可使用的较多，有苯、甲苯、二甲苯（最常用）、三氯甲烷、汽油、
香柏油（透明时间长达24h，所以不常用）等，多数透明剂对人体有 害，使用时应注意防护。
3.常用透明方法 将脱水后的组织块先用乙醇-二甲苯混合液处理或直接浸入透明剂中，
置换透明剂2~3次既能达到透明目的。
切片、封片等操作
第一节 组织块的处理
一、取材
定义：按照病理检查的目的和要求，切取适当大小和数量的组织块， 用于制作组织切片的过程，称为取材
（一）取材的配合
病理检验技术员取材时的职责是：配合病理医师对病变组织进行肉眼 检查，准确记录病理医生检查时描述的病理改变，按照病理检验的需 要，选择和确定取材的部位和块数。病理检验技术人员要及时对切取 的组织进行编号或标记，并在病理检单上做好记录，以便病理医生镜 检时查对。取材后的标本应加足固定液，按编号存放，以备复查之用。
（二）注意事项
1.避免组织结构变形 切取组织的刀、剪应锋利，刀体宜薄，并有足够的长度。 2.组织块大小适当 通常切取的组织块厚约0.2~0.3cm，大小以1.0~1.5cm×1.0~1.5cm为宜。 3.及时取材 4.标明包埋方向 5.染色、包裹小标本 6.充分暴露病灶 取材应避免过多的坏死组织或凝血块 7.确定取材部位 8.清除多余组织 9.重复取材 10.认真核对