【推荐】非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法
非结核性分枝杆菌病应该做哪些检查？
非结核性分枝杆菌病应该做哪些检查？*导读：本文向您详细介非结核性分枝杆菌病应该做哪些检查，常用的非结核性分枝杆菌病检查项目有哪些。
以及非结核性分枝杆菌病如何诊断鉴别，非结核性分枝杆菌病易混淆疾病等方面内容。
*非结核性分枝杆菌病常见检查：常见检查：胸部平片、真菌组织病理学、皮肤试验*一、检查1、细菌学检查对疑为NTM肺病患者可取痰液涂片作抗酸染色、痰液培养、支气管灌洗标本培养。
如抗酸染色阳性，应培养后鉴定。
如2～3次培养为同一种NTM，即可诊断。
对NTM脑膜炎、血源性播散性NTM患者可进行脑脊液、血液或骨髓培养。
污染是常见的，尤其是痰标本。
即使用自来水冲洗支气管镜或培养皿也可以产生污染而导致假阳性。
因此，明确诊断必须根据高度怀疑的临床症状和可信的微生物学检查。
2、分子生物学检查选用NTM的16S-23 SrDNA基因间隔区序列(IGS)的PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)分析，作NTM菌种鉴定，比形态学、生物化学常规方法鉴定更准确、快速与简便。
3、病理学检查对皮肤软组织NTM感染、NTM淋巴结炎可进行活组织病理检查。
在确保活组织无外源性污染的前提下，病变部位组织NTM培养阳性，即可做出NTM病的诊断。
4、Mantoux皮肤试验结核分枝杆菌与NTM有共同抗原，虽然PPD皮试可产生交叉反应，但仍有区别之处。
取结核分枝杆菌的PPD-T与NTM的PPD-NTM同时进行皮肤试验，NTM患者对PPD-T硬结直径一般不超过15mm。
如PPD-NTM皮试硬结直径比PPD-T皮试大5mm或25%以上，即可认为是NTM感染。
5、影像检查 X线胸片上病变多见于右上肺，显示浸润、空洞、结节、纤维干酪和广泛纤维收缩等多种病变。
空洞发生率高达80%，呈单发或多发。
*以上是对于非结核性分枝杆菌病应该做哪些检查方面内容的相关叙述，下面再来看看非结核性分枝杆菌病应该如何鉴别诊断，非结核性分枝杆菌病易混淆疾病。
非结核分枝杆菌病诊断与治疗专家共识
ＮＴＭ病呈明显上升的态势ⅢＩ。 四、ＮＴＭ病发病机制 ＮＴＭ通过呼吸道、胃肠道和皮肤等途径侵入人体后，其
致病过程与结核病相仿。开始，中性粒细胞捕捉并杀灭大部 分ＮＴＭ，残余的ＮＴＭ被巨噬细胞吞噬并在巨噬细胞内生长 繁殖，在溶酶体酶的作用下部分ＮＴＭ被溶解，其抗原产物及 其菌体成分被运送至局部的淋巴结，在此通过一系列途径激 活多种效应细胞，释放多种细胞因子，从而产生ＣＤ；Ｔ细胞 等介导的免疫反应和迟发型变态反应。ＣＤ？Ｔ细胞主要分 泌＇一干扰素和ＩＬ一１２等，激活中性粒细胞和巨噬细胞杀灭 ＮＴＭ Ｌ ａＪ。文献报道，人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染者ＣＤ；Ｔ 细胞降至５０×１０“／Ｌ以下时可发展为播散性ＮＴＭ病．而无 ＨＩＶ感染者发生播散性ＮＴＭ病与１一干扰素和【【Ｊ．１２合成与 反廊通路中某此基因突变有关”’”Ｊ。不少前炎症细胞因子， 如肿瘤坏死因子－ａ（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ．Ｏｔ，ＴＮＦ．ｄ）也参与 ＮＴＭ感染的免疫发病过程，ＴＮＦ一０【可激活其他细胞因子如 ＩＬ－１８、ＩＬ一１１３，从而吸引炎症细胞聚集在病变局部；ＴＮＦ—ｄ还 可上调黏附分子表达，增加同型和异型细胞间的黏附作用； 促进巨噬细胞活化，增强其吞噬作用；参与肉芽肿形成，从而 在ＮＴＭ感染中起保护作用；然而，ＴＮＦ一Ⅱ也可导致组织坏 死、空洞形成０１７］。ＴＮＦ一仪拮抗剂英夫利昔和可溶性受体依 那西普有可能使ＮＴＭ感染发展为活动性ＮＴＭ病¨…。
猿分枝杆菌 苏尔加分枝杆菌 ｊ重分枝杆菌 蟾分枝杆菌
注ｍ．为Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ的缩写
三、ＮＴＭ流行病学 ＮＴＭ广泛存在于水、土壤和灰尘等自然环境中，某些
万方数据
主堡笙焦塑蟹堕苤壹垫！！生！旦笙！ｉ鲞筮！塑垦！ｉ！』！！！！堡垦！业ｉ！望！！皇！型！！！！！；：！！！：！！：塑！：！
DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展
非结核分枝杆菌(nontuberculous Mycobacteria, NTM)系指除了结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌外的一大类分枝杆菌的总称。
NTM种类繁多,迄今已发现160余种,通常采用Runyon分类法(NTM在试管内的生长温度、速度、菌落形态和色素产生与光反应关系)将NTM分为光产色菌、暗产色菌、不产色菌及快速生长分枝杆菌4组[1]。
NTM广泛存在于自然环境中,主要通过水和土壤传播,极少数为致病菌,多数为条件致病菌,人通过环境接触感染NTM而患病[2-3]。
近期的研究显示,NTM的分离率由4.3%(1979年统计)上升至11.1%(2000年统计),再到21.0%(2010年统计)[4],这反映出我国的NTM病患者呈明显增多趋势。
NTM病与结核病的临床表现相似,多表现为全身中毒症状和局部损害,主要累及肺、淋巴结、皮肤及免疫受损患者,若能及时鉴定出菌种甚至亚种,可减少误诊,进而降低因误诊导致的不良后果[2,5]。
不同种类NTM感染采用的治疗方案亦不同,因此,明确NTM 是否感染及鉴定出准确的亚种是拟定最佳诊疗方案的关键。
NTM的实验室检测方法主要是传统细菌学检测和分子生物学检测,传统检测方法(培养基培养后辅以生化试验)因简单、试剂价格合理且易于推广而被沿用至今,但其耗时长、阳性率低、污染大且缺乏可重复性,不能准确、及时地为临床诊断提供参考[6]。
随着分子生物学技术的迅速发展,利用NTM同源DNA序列中的特异性可以鉴定其菌种甚至亚种,这为临床诊DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展陈培幸韶关学院医学院,广东韶关512005[摘要]非结核分枝杆菌(NTM)感染的患者数量逐年增加,同时,NTM新的亚种不断被发现,这导致其检测鉴定难度也随之增加。
迄今发现的菌种已有160余种,而传统检测方法(培养基培养后辅以生化试验)不能准确、及时地为临床诊断提供参考。
随着分子生物学技术的迅速发展,利用NTM同源DNA序列中的特异性(如16S核糖体DNA、核糖体蛋白S1、转录间区序列1、热休克蛋白65、rpo B等)可以快速鉴定菌种。
DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展
DNA测序鉴定非结核分枝杆菌的研究进展1. 引言1.1 背景介绍非结核分枝杆菌是一种常见的细菌，是导致一些肺部感染的主要病原体之一。
由于非结核分枝杆菌的增殖速度较慢，疾病的发展进程也较缓慢，因此经常导致诊断和治疗上的困难。
传统的检测方法包括培养和荧光染色技术，然而这些方法存在耗时长、操作复杂、准确性不高等缺点。
随着DNA测序技术的快速发展，研究人员开始将其应用于非结核分枝杆菌的鉴定和诊断。
DNA测序技术可以准确快速地鉴定非结核分枝杆菌的种类和亚种，有望解决传统方法的局限性。
DNA测序技术还可以帮助研究人员了解非结核分枝杆菌的耐药性、毒力和传播途径，为疾病的控制和预防提供重要的参考。
开展DNA测序技术在非结核分枝杆菌研究中的应用具有重要的意义和价值。
1.2 研究意义研究意义：非结核分枝杆菌是导致结核病以外的各种疾病的病原体，其种类繁多且耐药性强，给公共卫生和临床诊断治疗带来了很大挑战。
传统的分枝杆菌鉴定方法繁琐且耗时，往往不能满足快速、准确的检测需求。
而DNA测序技术的出现为非结核分枝杆菌的快速鉴定提供了新的可能性，具有高度的准确性和灵敏度。
通过对非结核分枝杆菌基因组进行测序分析，可以更准确地确定其种属和毒力基因，为疾病的防控和治疗提供重要的依据。
深入研究DNA测序技术在非结核分枝杆菌鉴定中的应用及其优势与局限性，对于提高疾病的早期诊断和治疗效果具有重要的意义。
本文旨在系统总结目前相关研究进展，分析影响因素，并展望未来研究的发展方向，以期为该领域的进一步探索提供参考。
2. 正文2.1 DNA测序技术在非结核分枝杆菌鉴定中的应用DNA测序技术已经成为非结核分枝杆菌鉴定领域中一种非常有效的工具。
通过DNA测序技术，可以准确地确定非结核分枝杆菌的物种和亚型。
在传统方法中，分枝杆菌的鉴定主要依赖于生化试剂盒检测和细菌培养，这些方法存在着较高的误差率和耗时较长的缺点。
而DNA测序技术则可以准确且快速地对非结核分枝杆菌进行鉴定，提高了鉴定的准确性和效率。
非结核分枝杆菌病 诊断与处理详细讲解
非结核分枝杆菌病诊断与处理详细讲解非结核分枝杆菌病（Non-Tuberculosis Mycobacterium，简称NTM），是由非结核分枝杆菌引起的一类感染性疾病。
与结核病不同，NTM病往往在免疫功能低下的个体中发生。
NTM病病程相对较长，症状多样，通常不会自愈。
如果不及时进行诊断和治疗，将对患者的健康产生严重影响。
本文将详细讲解NTM病的诊断与处理。
一、诊断NTM病的诊断主要依靠以下几个方面：病史调查、临床表现分析、实验室检查以及影像学检查等。
1. 病史调查：患者的个人病史对于NTM病的诊断非常重要。
医生需要了解患者的基本信息、既往病史以及可能的风险因素，例如是否有免疫功能低下等。
2. 临床表现分析：NTM病的临床表现多样，常见的症状包括咳嗽、咳痰、乏力、发热等。
这些症状不容忽视，特别是对于长期咳嗽伴有咳痰的患者。
医生需要结合患者的具体表现来判断是否需要进行NTM病的进一步检查。
3. 实验室检查：实验室检查是确定NTM病诊断的重要手段之一。
目前常见的实验室检查方法有痰液培养、DNA检测、中和试验等。
其中痰液培养是最常用的检查方法，可以通过培养痰液样本中的分枝杆菌来确定是否感染NTM。
此外，DNA检测和中和试验也可以用来确认NTM病的诊断。
4. 影像学检查：影像学检查在NTM病的诊断中起到重要的辅助作用。
常见的影像学检查方法有X线胸片、胸部CT等。
NTM病在影像学上通常表现为肺部或其他器官的结节、空洞、磨玻璃样阴影等。
医生可以通过影像学检查来确定病变的范围和程度，为进一步治疗提供依据。
二、处理NTM病的处理主要包括药物治疗、免疫调节治疗以及手术治疗等。
具体处理方案应根据患者的具体情况来制定。
1. 药物治疗：药物治疗是NTM病的主要治疗方法。
常用的抗生素有环丙沙星、利福平、乙胺丁醇、吡嗪酮等。
治疗方案应根据病原菌的类型、感染部位、药敏试验结果以及患者的肝肾功能等因素来确定。
药物治疗一般需要长期进行，通常持续数月甚至数年。
非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法课件
3
分子生物学方法
该方法准确度高、速度快，但需要昂贵的仪器 和试剂，且操作复杂。
实验数据的处理方式
数据分析
利用统计学方法和计算机技术对 实验数据进行处理和分析，以获 得更准确的鉴定结果。
数据标准化
将实验数据进行标准化处理，以 消除误差和偏差，提高数据质量 。
数据可视化
将实验数据进行可视化处理，以 直观地展示数据变化趋势和结果 ，方便实验人员分析和比较。
双向电泳鉴定
总结词
双向电泳是一种分离蛋白质混合物的方法，通过在两个方向上对蛋白质进行 电泳分离，从而获得蛋白质的详细信息。
详细描述
在双向电泳中，蛋白质首先在第一个方向上进行电泳分离，然后在第二个方 向上进行电泳分离。这样可以获得蛋白质的详细信息，如分子量、等电点、 糖基化等，从而进行蛋白质鉴定。
蛋白质芯片鉴定
THANKS
基因芯片鉴定具有高灵敏度、高特异性、可重复性好等优 点，适用于临床和环境样本中多种细菌的鉴定。
04
蛋白质分析鉴定方法
质谱鉴定
总结词
质谱鉴定是一种常用于蛋白质分析的方法，通过将蛋白质离 子化并将其引入质谱中进行测量，从而获得蛋白质的结构和 相对分子质量等信息。
详细描述
质谱鉴定的原理是将蛋白质分子电离并使其进入磁场或电场 中运动，根据其质量和电荷比值的不同，形成不同的离子峰 。通过对离子峰的分析，可以获得蛋白质的结构和相对分子 质量等信息，从而进行蛋白质鉴定。
05
比较分析鉴定方法
进化树比较鉴定
总结词
同源性分析、遗传距离分析、系统发生树构建
详细描述
通过序列比对，找出非结核分枝杆菌菌种间的遗传差异，构建进化树，根据 菌种在进化树上的亲缘关系进行鉴定
非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法课件
基于表型特征的鉴定方法传统生物学鉴定法基于菌落形态、染色特性、生化反应等表型特征进行鉴定鉴定时间长，主观误差较大自动化仪器鉴定法基于自动化仪器检测进行菌种鉴定，提高准确性和效率仪器成本高，普及程度有限基于分子生物学的鉴定方法基于基因序列的鉴定法对菌种进行基因序列分析，比对已知基因型，确定菌种分类准确度高，可检测未知菌种基于基因芯片的鉴定法利用基因芯片技术检测菌种的特异性和基因表达情况快速简便，可检测多种菌种
xx年xx月xx日
非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法课件
CATALOGUE
目录
绪论基础知识非结核分枝杆菌的分离与培养生理生化鉴定分子生物学鉴定临床意义与防治策略复习与思考
绪论
01
1
课程背景
2
3
非结核分枝杆菌（NTM）的感染病例逐年增加
NTM对常用抗结核药物产生多重耐药性，治疗难度大
菌种鉴定对于诊断NTM感染、指导治疗和防控传播具有重要意义
诊断和治疗
02
提高诊断准确性，及时采集标本进行培养、分离、药敏试验等；根据药敏试验结果选择敏感抗生素治疗，并密切监测病情变化。
耐药性监测
03
建立耐药性监测系统，及时发现和隔离耐药菌株，控制耐药性的传播。
疫苗研究
研究新型疫苗，提高疫苗的保护效果和覆盖面。
耐药性机制
深入研究耐药性产生和传播机制，为耐药性的防控提供理论依据。
非结核分枝杆菌的分布
广泛存在于自然环境中，如土壤、水源、动物等。
非结核分枝杆菌的种类与分布
菌种鉴定基本流程
通过培养基分离纯培养物。
菌种分离
初步鉴定
生理生化鉴定
分子生物学鉴定
根据菌落特征、细胞形态等初步判断菌种类型。
进行一系列生理生化实验，如氧化酶试验、硝酸盐还原试验等，进一步确定菌种类型。
非结核分枝杆菌的实验室鉴定方法学进展
侵犯人体肺脏 、 淋 巴结 、 骨骼 、 关节 、 皮 肤 和 软 组 织 等组 织 器 官 ， 并 可 引起 全 身 播 散 性 疾 病 。 近 年 来 ， 由 于 ＡＩ Ｄ Ｓ患 者 、 长 期 使
ｍＩ 为 实验 界 限浓 度 ， 并辅以 ２ ８℃ 生 长 试 验 ， 耐 ６ ８ ℃热 触 酶 试
１ ． ２ ． １ Ｐ Ｃ Ｒ － 寡核苷酸探 针阵列技术
Ｐ Ｃ Ｒ 一 寡 核 苷 酸 探 针 阵
列 技 术 借 助 反 向 斑 点 杂 交 核 酸 分 子 杂 交 配 对 的 特 性 对 ＤＮ Ａ 样 品的 序 列 信 息 进 行 分 析 。 梁 建 琴 等 Ⅲ ７ 先 通过 Ｐ Ｃ Ｒ — Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ初 步分析 鉴定 ２ ５ ３株 分 枝 杆 菌 临 床 分 离 株 ， 再根据 １ ６ Ｓ ｒ ＲＮ Ａ Ｐ Ｃ Ｒ 一 寡核苷酸探针 与待测菌 株生物 素标记 的 １ ６ Ｓ ｒ Ｒ ＮＡ 基 因
非结核分枝杆菌 （ ＮＴ Ｍ） 是指 除结核 分枝杆 菌复合 群 （ 人
型、 牛型 、 非 洲 和 田 鼠分 枝 杆 菌 ） 及 麻 风 分 枝 杆 菌 以外 的 其 他 分 枝 杆菌， 是一种 条件 致病 菌 ， 极 易 导 致 院 内感 染 。 Ｎ ＴＭ 可 以
菌株和 １ ６ 株分枝杆菌临床分离菌株 １ ６ Ｓ － ２ ３ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ Ｉ Ｔ Ｓ测 序 ， 利用 １ ６ Ｓ － ２ ３ Ｓ ｒ ＤＮ Ａ 内转 录间 隔 区 序 列 既有 高度 保 守 的属 特 异 性 序 列 又有 高度 可变 的种 特 异 性 序 列 的 特点 ， 设 计 种 特异 性 引物 ， 并 以此 序 列 为 靶 基 因 ， 经Ｐ Ｃ Ｒ 扩增 后 形 成 ３ 末 端带 有 荧光标 记 的相 差 一 个 碱 基 的不 同 长 度 的 产 物 ， 由于 １ ６ Ｓ － ２ ３ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ Ｉ ＴＳ序 列 长 度较 短 ， Ｐ Ｃ Ｒ扩 增 产 物 一 次 测 序 可 获 得 全序列 ， 含有足够信息 ， 再 构 建 分 枝 杆 菌菌 种 聚类 分 析 树 状 谱 ， 进行核苷酸序列分析 ， 即 可 鉴 别 ＭＴ Ｂ 与 ＮＴ Ｍ 。直 接 测 序 法 操 作 易 于 标 准 化 与 自动 化 ； 利用 对 １ ６ Ｓ － ２ ３ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ Ｉ Ｔ Ｓ序 列 的
非结核分枝杆菌肺病临床分离株的菌种鉴定及临床特征分析
.172-微F物与感染Journal ofMicrobss and I n fctons#June25,2020,15(6)：172-178http："i .cddoi：10.6969/j.issn.16736184.2020.06.006•论著•非结核分枝杆菌肺病临床分离株的菌种鉴定及临床特征分析张宇晔，侯东妮，王苏珍,周春妹，宋元林,李华茵复旦大学附属中山医院呼吸与危重症医学科，上海200032摘要:为探究非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)肺病临床分离株的菌种分布及临床特征，对2017年5月一2018年10月就诊于复旦大学附属中山医院的90例NTM肺病患者的样本进行分析*采用快速全自动分枝杆菌培养和药物敏感检测系统(BACTEC MGIT960System)或改良罗氏培养法对90例患者的采集样本进行培养，利用基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)进行菌种鉴定，并回顾性分析所收集的90例患者的临床资料。
结果NTM菌种鉴定为9种，其中慢速生长分枝杆菌65例，以胞内分枝杆菌(54.4%,49/90)占多数;快速生长分枝杆菌25例，以脓肿分枝杆菌(22.2%,20/90)占多数*90例患者中确诊67例、疑似23例*确诊患者中少见菌种所占比例较低(6.0%s26.1%,P=0.016)。
确诊与疑似患者在临床表现方面未见显著差异，但确诊患者有抗NTM治疗史的比例显著高于疑似患者(85.1%qs 4.6%,P<0.001)*确诊患者中，快速生长NTM肺病患者既往抗结核治疗史的比例显著高于慢速生长组(52.9%qs24.0%,P=0.036)*本研究结果为NTM肺病的临床诊治提供了数据参考*关键词:非结核分枝杆菌;肺病;基质辅助激光解析电离飞行时间质谱;菌种鉴定;临床特征中图分类号：R378.91文献标识码：AIdentification and clinical analysis of nontuberculous mycobacteria lung diseaseZHANG Yuye,HOU Dongni,WANG Suzhen,ZHOU Chunmei,SONG Yuanlin,LIHuayinDepartment of Respiratory and Critical Care Medicine,Zhongshan Hospital,Fudan University,Shanghai200032,ChinaAbstract：To analyzethestrain distribution and clinical characteristics of nontuberculous mycobacteria(NTM)lung diseasein Shanghai a total of90samples from patients with NTM lung diseasefrom ZhongshanHospital FudanUniversityfrom May2017to October2018were cultured by rapid automated mycobacterialcultureanddrugsensitivedetectionsystem(BACTEC MGIT960System)ormodifiedRocheculture method and identified by matrxc assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry基金项目：上海市重中之重临床重点学科建设项目(2017ZZ02016)，上海市公共卫生三年行动计划重点学科建设项目(15GWZK0102)通信作者:李华茵Correspondence to：LI Huayin E-mail：************************.cn张宇晔，等：非结核分枝杆菌肺病临床分离株的菌种鉴定及临床特征分析・173・(MALDI-TOF MS".The clinical data of patients were retrospectively collected.NTM stiains wereidentified as9species .65cases were slow-growth NTM,most of which were Mycobacterium intracellulare(54.4%,49/90) ；25cases were rapid-growth NTM,most of which were Mycobacterium abscessus(22.2%,20/90).67cases were confirmed,23were suspected.The proportion of rare NTM in the confirmed patientswas lower(6.0%s26.1%,P=0.016).There was no significant dfference in clinical manifestations betweenconfirmed and suspected patients#butthe proportion of confirmed patients with anti-NTMtreatment history was sign辻icantly higher than that of suspected patients(85.1%s4.3%,P<0.001). Amongtheconfirmedpatients,theproportionofpatientswithrapid-growth NTM lung disease who hadprevious anti-tuberculosis treatment was significantly higher than that of the slow-growth group(52.9%Qs24.0%,P=0.036).The results of this study provide a data reference for the clinical diagnosis and treatmentofNTMlungdisease.Keywords:Nontuberculous mycobacteria+Lung disease；Matrix assisted laser desorption/ionization time offlightma s spectrometry+Strainidentification+Clinicalcharacteristics非结核分枝杆菌（nontuberculous mycobacteria, NTM）是指分枝杆菌属中除结核分枝杆菌复合群（mycobacterium tuberculosis complex,MTBC）及麻风分枝杆菌以外其他分枝杆菌的统称，广泛存在于环境中，可造成人类的机会性感染：1]o NTM主要侵犯患者肺部，也常累及淋巴结、骨骼、关节、皮肤、软组织等，严重时还可引起全身播散性疾病2*近年来，受气候、环境、检测手段、人口老龄化、免疫抑制宿主增多等因素影响，全球NTM感染呈快速增多趋势临床上，NTM的早期诊断较为困难5,参照《2012年中国非结核分枝杆菌病诊断与治疗专家共识》（以下简称《中国专家共识》）2, NTM肺病的诊断需结合临床症状、影像学标准及分枝杆菌培养结果*本研究纳入了确诊与疑似NTM肺病患者共90例，利用基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption/ ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS）对临床分离的NTM菌株进行菌种鉴定，并回顾性分析NTM肺病的菌种分布及其临床特征,以期为NTM肺病的诊治提供参考。
非结核分枝杆菌相关实验室检查及其结果解读
非结核分枝杆菌相关实验室检查及其结
果解读
非结核分枝杆菌是对人体有害的一种细菌，它能够引起许多严重的健康问题，因此它的检测和监测是至关重要的。
为此，实验室检查是一种有效的方法，可以帮助确定非结核分枝杆菌的存在，以及它们对人体的影响程度。
非结核分枝杆菌的实验室检查主要包括细菌培养、分子诊断和肝功能测定等多种检查方法。
细菌培养是一种常用的诊断方法，其目的是在适宜的环境中培养非结核分枝杆菌，以及确定其致病能力。
分子诊断是一种快速、准确、可靠的检测方法，可以确定非结核分枝杆菌的存在，并进一步分析其基因组特征。
肝功能测定是用于评估慢性非结核分枝杆菌感染的一种方法，其主要依据是检测患者血清中的肝功能指标，如谷丙转氨酶、谷草转氨酶等。
实验室检查结果的解读取决于非结核分枝杆菌的类型和数量，以及患者的病情。
如果实验室检查结果显示非结核分枝杆菌的存在，则应根据细菌培养结果确定其种类和数量，了解其致病能力，并进一步检测患者的肝功能等指标，以综合判断患者的病情。
如果实验室检查结果不显示非结核分枝杆菌的存在，则可能是由于患者未感染非结核分枝杆菌，或者患者已经感染，但是细菌量太少，无法被检测出来。
总之，非结核分枝杆菌的实验室检查是一种有效的检测方法，可以帮助确定其存在，以及它们对人体的影响程度。
实验室检查结果的解读取决于非结核分枝杆菌的类型和数量，以及患者的病情，因此应
根据实验室检查结果合理判断患者的病情，采取有效的治疗措施。
非结核分枝杆菌的菌种鉴定方法课件
非结核分枝杆菌根据基因型特征可以分为不同的基因型，如Mycobacterium avium complex (MAC)、Mycobacterium ulcerans等。
非结核分枝杆菌的分布情况
自然环境
非结核分枝杆菌广泛分布于自然环境中，如土壤、水源、动 物等。
人类感染
非结核分枝杆菌是导致人类疾病的重要病原体之一，主要引 起肺部感染和淋巴结炎等。
通过药敏试验检测非结核分枝杆菌对不同药物 的敏感程度。
耐药表型特征
研究非结核分枝杆菌耐药表型的特征，如生长 速度、菌落形态等。
耐药性表型与基因型关系
3
探讨非结核分枝杆菌耐药性表型与基因型之间 的关系。
耐药性基因检测
耐药基因筛选
01
通过基因测序技术筛选非结核分枝杆菌的耐药基因。
耐药基因功能与作用机制
非结核分枝杆菌的菌种鉴定 方法课件
2023-11-06
目 录
• 引言 • 非结核分枝杆菌的分类与分布 • 菌种鉴定方法 • 菌种耐药性分析 • 菌种感染的防控策略 • 研究展望与未来发展趋势
01
引言
背景介绍
非结核分枝杆菌（Non-tuberculous Mycobacteria，简称NTM）是一类 在环境中广泛存在的微生物，与结核
非结核分枝杆菌感染防控的未来发展方向
加强感染控制
通过加强医院感染控制 措施，减少患者之间的 传播。
开发新药物
研究新的抗结核药物， 解决非结核分枝杆菌的 耐药性问题。
疫苗研发
加快非结核分枝杆菌疫 苗的研发，提高预防感 染的能力。
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THANKS
非结核分枝杆菌的感染症状
01
02
菌道系列一：非结核分枝杆菌
菌道系列一：非结核分枝杆菌感染性疾病是当今世界严重威胁人类健康的重大疾病。
基于NGS的宏基因组学检测（metagenomic NGS, mNGS）对病原体的覆盖极其全面，不需要微生物培养，不需要根据经验进行预设，可以检测耐药突变和毒力基因，为急危重症和未明原因感染的临床诊治提供了全新的思路和解决方案。
前不久宝藤医学为大家分享了PPmeta®-感染宏基因组检测案例，详细介绍了mNGS在感染性疾病中的应用；为了让大家更好的了解临床病原微生物知识，宝藤医学特开设《菌道系列》专栏，和大家一起说感染话菌道。
非结核分枝杆菌(nolq-tuberculous Mycobacteria，NTM)可引起身体各部位的疾病，但以肺部感染最为常见，约占NTM感染的90%，其他相对较常见的受累部位包括淋巴结、皮肤软组织、骨以及全身播散性病变，但也有中枢神经系统、角膜和耳部感染的个案报道。
一细菌特点非结核分枝杆菌(nolq-tuberculous Mycobacteria，NTM)，是指除结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculosis complex，MTC)和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。
NTM的细菌学特点与结核分枝杆菌(MTB)类似，属于需氧菌，细胞壁富含脂质使其具备抗酸染色的特点，NTM在环境中普遍存在，以土壤和水中最为常见，水源性NTM与人类感染的关系最为密切。
二流行病学我国尚缺乏全国性数据，现有的关于NTM的流行病学研究结果显示，我国NTM感染呈现南方多于北方、气候温和地区多于气候寒冷地区、沿海地区多于内陆地区的特点，如以东部沿海地区报道为例，山东为1.37%，江苏为3.37%，上海为5.9%，福建为10.2%，广东为19.3%。
三不同部位感染NTM情况肺部NTM感染最常见的菌种包括MAC、脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和蟾蜍分枝杆菌。
NTM 引起的肺外感染以淋巴结炎最为常见，尤其是6个月至2岁的儿童，最常见的致病菌为MAC，其次为瘰疬分枝杆菌和玛尔摩分枝杆菌；NTM引起的骨关节病变较为罕见，且MAC、苏尔加、偶然、蟾蜍、海等分枝杆菌可能较为常见。
应用多重PCR方法快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌_孟祥红
临床检验应用多重PC R方法快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌孟祥红 匡铁吉 董梅【摘要】 目的 探讨应用多重PCR技术快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌的可靠性。
方法 根据结核分枝杆菌种的MT P40基因序列(396bp),分枝杆菌属的32kD基因序列(506bp),结核分枝杆菌复合体群的IS6110序列(984bp),采用3对特异性引物(PT1,P T2;M T1,M T2;IS5,IS6)在同一反应体系和条件下对92株结核杆菌临床分离株和5株非结核分枝杆菌临床分离株进行扩增,并与标准菌株进行比较。
结果 92株结核分枝杆菌临床分离株中,90株扩增出与结核分枝杆菌H37RV标准株相同的396bp、506bp、984bp3条DNA片段,敏感性达97.8%,特异性为100%;5株非结核分枝杆菌临床分离株均扩增出506bp DNA片段,敏感性达100%,特异性为100%。
结论 应用多重PCR方法,对结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌进行鉴定,结果快速、准确、可靠,为临床结核病与非结核分枝杆菌病的快速诊断提供了有效的手段,具有很好的临床应用价值。
【关键词】 多重PCR;结核分枝杆菌;非结核分枝杆菌;鉴定 【中国图书资料分类号】 R378.911A pplication of multiple x PC R in rapid identification of Mycobacterium tuberculosis and non-tu be rculosis MycobacteriaMeng Xianghong,Kuang Tieji,Dong Mei.Second Affiliated Hospital,General Hospital of PLA,Beijing 100091,China【A bstract】 Objectiv e To investigate the feasibility of multiplex PCR for rapid identificatio n of Myco bacterium tub erculosis and non-tuberculo sis Mycob acteria.M ethods Acco rd ing to M TP40gene sequence of Myco bacterium tu berculosis,32kD gene sequence of Mycobac-terium and IS6110insertion sequence gene sequence of Myco bacterium tub erculosis complex,three specific pairs of primers(PT1-PT2, MT1-M T2and IS5-IS6)for Mycob acterium were designed,and the target DNA for M T P40,32kD and IS6110was396bp,506bp and 984bp,respectively.T he genome of92Mycobacterium tuberculosis clinically isolated strains and5non-tuberculosis Mycob acteria clinical strains were amplified in the same system,and the results were compared with reference strains.Results Among92clinical strains of My-cobacterium tu berculosis,the DN A fragments of396bp,506bp and984bp were found in90Mycobacterium tu berculosis clinical strains,as well as in the reference strain H37Rv;the sensitivity of multiplex PCR for My co bacterium tu berculosis was97.8%,and the specificity was 100.0%.T he DNA fragments of506bp were all found in5non-tuberculosis Myco bacteria clinical strains,the sensitivity and specificity fo r non-tuberculosis My co bacterium were both100.0%.Co nclusion The multiplex PCR is a rapid,sensitive and specific method for identifi-cation of My co bacterium tub erculosis and non-tuberculosis Myco bacteria,and it may provide an effective way fo r clinical diag nosis of Myco-bacterium tub erculosis and non-tuberculosis Mycob acteria,therefore useful in clinical application. 【Key words】 multiplex PCR;Myco bacteria tub erculosis;non-tuberculosis Mycobacteria;identification 近年来,非结核分枝杆菌感染人数有所增加[1],其临床症状和X线表现与结核相似,难以鉴别,而且多数非结核分枝杆菌对抗结核药物有天然耐药性,因此正确鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌对于疾病诊断和治疗至关重要[2]。
非结核分枝杆菌的实验室鉴定方法学进展
非结核分枝杆菌的实验室鉴定方法学进展
李地灵
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2013(034)014
【摘要】非结核分枝杆菌（NTM）是指除结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲和田鼠分枝杆菌）及麻风分枝杆菌以外的其他分枝杆菌,是一种条件致病菌,极易导致院内感染。
NTM可以侵犯人体肺脏、淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等组织器官,并可引起全身播散性疾病。
近年来,由于AIDS患者、
【总页数】3页(P1840-1842)
【作者】李地灵
【作者单位】同济大学医学院附属上海市肺科医院检验科,上海200433
【正文语种】中文
【相关文献】
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5.儿童非结核分枝杆菌病的诊断和治疗进展
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非结核性分支杆菌的致病性及其鉴定方法
非结核性分支杆菌的致病性及其鉴定方法陈菲菲;王春芳;钱爱东【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2013(040)001【摘要】Nontuberculous Mycobacteria belonged to the Mycobacterium of Mycobacteriaceae of the Actinomycetales, the nontuberculous Mycobacteria distributed widely and could infect domestic animals and humans. In recent years, an increasing number of nontuberculous Mycobacteria disease had been discovered and reported, it had caused the researchers's attention and interest. Because the nontuberculous Mycobacteria and Mycobacteria tuberculosis were similar in clinical manifestations, they were difficult for diagnosis. This paper expounded the pathogenicity of nontuberculous Mycobacteria from three aspects, susceptible population, infected part, growth in terms of infection and chronic, and illustrated their clinical symptoms, then compared several analysis and identified methods such as traditional method, phage analysis, polymerase chain reaction technology and nucleic acid probes. It supported that when the clinical characterization was similar, not only using traditional method for identification,but also using multiple separation method for combination of separation identification. It could reduce time and save cost, and we should continue to research and develop new analysis and identify methods.%非结核性分支杆菌属于放线菌目,分支杆菌科,分支杆菌属,其分布广泛,可传染家畜及人类.近年来随着越来越多的非结核性分支杆菌疾病被发现并报道出来,已经引起人们的广泛关注和学者的研究兴趣.由于非结核性分支杆菌其临床表现与结核性分支杆菌极为相似,诊断起来有一定的困难.根据国内外近几年的报道,对非结核性分支杆菌从易感人群、感染部位及长期慢性生长等角度综述其致病性,举例说明其临床症状,再总结比较了传统分析鉴定法、噬菌体分析法、聚合酶链式反应技术和核酸探针等几种非结核性分支杆菌的鉴定方法,建议在临床表征相似时,不仅仅采用传统方法进行分离鉴定,应该采用多种分离方法相结合来进行细菌的分离鉴定,减少时间,节约成本,同时继续研发新的分类方法.【总页数】3页(P169-171)【作者】陈菲菲;王春芳;钱爱东【作者单位】吉林农业大学生命科学学院,吉林长春 130118;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春 130118;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春 130118【正文语种】中文【中图分类】S852.6【相关文献】1.非结核分支杆菌的致病性与鉴定技术的研究进展 [J], 庄玉辉2.采用16SrRNA序列分析方法鉴定第四次全国结核病流调的非结核分支杆菌 [J], 李卫民;王苏民;张旭霞;姜广路;田苗;端木宏谨3.非结核性分支杆菌皮肤感染63例临床分析 [J], 储旭东;林钢;尹洪波;崔业江;李健;屠聿修;殷凯生;童明庆;刘再鹏;薛建辉4.非结核性分支杆菌病（附一例报告） [J], 张乃珍;杨雁英5.手术切除和抗生素治疗对儿童非结核性分支杆菌感染所致颈淋巴腺炎的疗效比较[J], 姚瑜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。