ATP生物荧光法在食品微生物检验上的应用
ATP生物发光技术在微生物检测中的应用
优点。对该 方法的历史发展 、 检测原理、 目标物提取 方法 、 用领域和最新研 究成果等做 重点介 绍， 应 并对 Ａ Ｐ生物发 Ｔ
光 法 的 应 用现 状 和 发展 方 向进 行 总 结 和展 望 。
通信作者 ： 尹建军（９６ ）男 ， 工程师 ， 从事食 品质量安 １６一 ， 高级 长期
全技术研发管理工作 。
专 题 论述
尹子波 等 ： Ｔ Ａ Ｐ生物发光技术在微 生物检 测中的应 用
，
２ ９ ＝＝ ２ ＝一
酸 （ Ｐ） Ｐ ｉ。该复合体被分子氧氧 化 ， 形成激发态 会很快被胞 内酶所 降解 ，不会对 活体微 生物的测 Ｔ 定产生影 响 。Ａ Ｐ这些特点 ， Ａ Ｐ生 物发光法成 为 Ｔ 使 Ｔ
较好 的活体微生物 的检测方法 。
１ 检测步 骤 － ３
然而， 提取剂 中的表面活性 剂或多或少都会 干扰
荧光 素一 荧光素酶系统 ， 造成微生 物 Ａ Ｐ检测值 的降 Ｔ 低 ，从 而 降 低 灵 敏 度 。 Ｌ ｎ ｉ． ｒｅ和 Ａ ｓｎ Ｊｈ ｕ ｄｎ Ａ ｎ ｎｏ ．ｏ ｎ
Ｋｅ ｒ ｓ ｙ ｗｏ ｄ ：ＡＴ ｉｌｍｉｅｃ ｎ ｅ ｕ ｉ ｒ ｌｃ ｅａｅ ｍｍｕ ｏ ｇ ｅｉ ｓ ｐ ｒｔ ｎ （ＭＳ） ｉｆｎ ｔ ｎ ｌ Ｐ ｂｏｕ ｎ ｓ ｅ ｃ ；ｌｃｆ ｉ ｕ ｉ ｒｓ ；ｉ ｅ ｎ－ ｆ ｎ ｍａｎ ｔ ｅ ａａｉ ｃ ｏ Ｉ ；ｂｏｕ ｃｉ ａ ｏ
Ｇ ｏｇｔ研究采用惰性 中和剂与 Ａ Ｐ提取剂相结合 的 ｅｒ ｅｑ Ｔ
Ａ Ｐ生物发 光法检测 微生物 的一般步骤 ： Ｔ 预先 制 作 样 品微生 物含量与 Ａ Ｐ 物发光值标准 曲线 ， 后 Ｔ生 然
ATP生物发光原理及应用研究
ATP生物发光原理及应用研究ATP生物发光是一种快速的微生物检测方法,具有灵敏、快速、简便、稳定等优点,本文就其原理、特点及在食品卫生、医药中的应用进行了综述。
[Abstract] As a fast detecting method of microorganism, ATP bioluminescence has the advantages of sensitivity, high-speed, convenience and stability and so on. The article summarizes its principles, characteristics and application to food hygiene and medicine.[Key words] ATP; Application; Bioluminescent theory生物发光(bioluminescence)在希腊语中表示活着的意思,在拉丁语中表示发光、发亮。
目前生物发光,应用最广最主要的是荧光素-荧光素酶反应发出的荧光,荧光素酶存在于萤火虫、水母和一些细菌中,它是生物体内产生的一种生物反应蛋白质[1]。
三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,简称ATP)是高能磷酸化合物。
ATP由一分子腺嘌呤、一分子核糖和三个相连的磷酸基团构成的核苷酸,其结构式见图1。
图1 三磷酸腺苷的结构式Fig.1 Adenosine triphosphateATP存在于所有的有机体中,极易被储存和利用,是活细胞新陈代谢能量的源泉,在化学反应中,主要是通过释放磷酸基团从而达到释放能量的目的。
1 ATP生物发光工作原理1963年McElroy[2]最先用荧光素酶-ATP检测法,其化学反应的结果是把化学能转化为光能。
1983年Moyer等提出细胞内源性的ATP含量可以反应活细胞的数量和活性。
其化学反应如下:ATP+D-Luciferin+O2→Oxyluciferin+AMP+PPi+O2+Light当细胞受损或死亡时,其ATP值迅速下降或消失,基于这一原理,检测细胞内的ATP含量,即可反应其细胞的存活状况,ATP浓度与活细胞数密切相关,ATP生物发光检测步骤包括:取样、样品ATP的提取、添加荧光素-荧光素酶、测定生物发光值、计算出ATP的浓度和活菌数量。
生物学发光检测法(ATP)解析
权威机构研究了1000个以上的样品，这种只需十几秒就能完
成检测的快速检测法所得实验结果90%以上与24-48小时标 准细菌培养法/平皿法所得结果一致 使细菌检查的工作量大幅度减轻，实现卫生监控的简捷化、 效率化，但只能用于细菌的定量分析，定性分析可用常规方 法进行培养检测。 应用于HACCP的关键环节监测，方便有效。
[INSERT AND DETECT]
将检测管放入ATP荧光检 测仪中，盖上盖子，倒 计 时开始并检测。
ATP检测反应原理
D-虫荧光素 荧光素酶 O2+Mg2+
氧化荧光素 PPi+AMP
AT P
荧 光 光 度 计 测 量
光（RLU ）
植物 微生物
细胞 数量
现场ATP检测的意义
ATP检测技术实验结果准确可靠，值得信赖。美国多个专业
当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些外资、
合资企业用于自检 2002年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCP实施 指南，鼓励食品加工企业引入ATP检测技术 2005年3月卫生部新出台《卫生监督机构建设指导意 见》，要求省、市、地配置
什么是ATP
ATP——三磷酸腺苷 【adenosine triphosphate， C10H16N5P3O13】存在于所有 生物体中，在细胞内主要作用 是提供能量 通过检测ATP ，可以间接地 证明生物体的存在
生物学发光检测法（ATP）
• 原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利 用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺 苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的 ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细 菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶 可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强 度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样 品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫 生状况
ATP生物荧光检测技术在特定快速微生物检测中的新应用
ATP生物荧光检测技术在特定快速微生物检测中的新应用作者：海净纳来源：《食品安全导刊》2012年第11期Micro-Snap是一项采用改良ATP生物荧光反应的快速检测系统，能够用来检测不同种类样本中的特定细菌。
这种新的生物荧光拭子（MicroSnap）通过配套使用一种新的低成本高灵敏光度计（Hygiena公司Ensure多功能监控系统），可检测出各种类型样品中的低水平特定细菌，最长7小时就能得到结果。
这项具有诸多优势的实用技术首批推出的是大肠菌群、肠杆菌和大肠杆菌检测拭子。
该技术后续将会用于更多其他指示菌和病原菌的快速检测。
一、背景ATP生物荧光技术在不同行业的成功应用已有30年历史。
它作为一种非特异性生物量监控系统已经成功用于各类食品、化妆品和医药品行业，而其中应用最广泛的就是卫生检测。
ATP生物荧光法的最主要应用就是通过对非特异性有机残留物的测定来对清洁和卫生状况做出快速、直接和客观的评价。
ATP检测在医疗卫生机构中感染的控制方面的应用新近得到了英国健康保护署（Health Protection Agency）的推荐。
它也被执法和稽查审计人员作为一种干预工具来评价卫生状况和查明问题所在区域。
二、技术Micro-Snap技术将新的试剂配方和ATP生物荧光反应与特异性酶底物偶联在一起，从而在保留高灵敏度的同时，第一次将ATP检测用于特定细菌测定。
特定细菌所具有的酶（如β-半乳糖苷酶和β-葡糖醛酸酶）在催化这些底物的过程中发出光子，这些光子能被一种新的高灵敏手持式光度计（Ensure多功能监控系统）检测到。
Micro-Snap检测拭子独特的配方和包装使得其操作简便易用，既可以在实验室使用，也可以在偏远地区或现场使用。
Micro-Snap拭子反应过程：ATP+特异性底物+荧光素酶—特异性诊断酶→光三、性能与传统方法相比，Micro-Snap生物荧光检测技术具有高特异性和灵敏度（见表1）。
样本中细菌数量越高检测时间越短，低数量的细菌（1～5个菌）检测时间也只需7小时左右（见表2）。
食品微生物快速检测常用方法-ATP生物发光法测菌落总数.
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目录页
一
ATP生物发光法检测原理
二
ATP生物发光法检测过程
—
食品营养与检光法检测原理
一
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ATP存在于包括微生物在内的一切活细胞内，ATP生 物发光法是利用ATP与荧光素酶系统接触时的发光现象 建立起来一种检测方法。 各生长期的微生物均有较恒定水平的ATP含量，微生 物死亡后，ATP将很快被分解掉。因此，提取细菌的 ATP，利用生物发光法测出ATP含量后，即可推算出样 品中的含菌量，ATP浓度与活细胞数密切相关。
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食品营养与检测专业教 学资源库
— 2—
谢 谢
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︵
ATP 生 物 发 光 法 测 菌 落 总 数
操作步骤 指示菌ATP的提取：TCA法和加热煮沸法 ATP的检测： 先用标准ATP试剂作一条标准曲线。测 量得到样品的相对发光值。 测定样品发光值,与标准曲线对比，得到 样品中的ATP含量, ATP含量可以转化为微生 物的浓度。
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试剂
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过渡页
ATP生物发光法检测过程
一
1.设备和试剂
2.操作步骤
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︵
ATP 生 物 发 光 法 测 菌 落 总 数
• 设备和试剂 ATP荧光仪：包括样品过滤膜、ATP一生物荧 光反应器、荧光增强及数据处理系统。 试剂：荧光素-荧光酶试剂 、ATP提取液 、标 准ATP试剂
atp荧光检测仪原理及应用
atp荧光检测仪原理及应用
ATP荧光检测仪是一种基于生物技术的检测设备，用于快速检测水、食品、环境等样品中的微生物污染水平。
ATP是细胞内能量转移和转化的关键分子，因此可以通过测量ATP的含量来确定样品中微生物的数量。
ATP荧光检测仪的工作原理是将样品中的ATP与荧光素结合形成荧光素-ATP复合物，然后测量该复合物的荧光强度，从而推算出ATP的含量。
ATP荧光检测仪广泛应用于食品加工厂、医院、水处理厂、饮料厂等各个领域。
在食品加工厂中，ATP荧光检测仪可以用于检测食品加工过程中的细菌污染，及时发现并消除污染源。
在医院中，ATP荧光检测仪常用于检测医疗器械和手术室的清洁情况，确保消毒工作的有效性。
在水处理厂中，ATP荧光检测仪可以用于检测水中微生物的污染水平，指导加药和消毒。
除了ATP荧光检测仪，还有其他生物技术检测设备，如PCR检测仪、生物芯片等。
这些检测设备的出现，极大地提高了生物技术的应用效率和准确度，有助于保障人类健康和生产安全。
- 1 -。
ATP生物发光技术在食品中的研究
竺 三 三 ！ 竺 些 至 錾Ｎ Ａ Ｄ ＋ ＋Ｆ Ｍ Ｎ Ｈ
ＦＭ Ｎ Ｈ： 十 ０ 士 ＲＣＨＯ ｍ Ｗ￣ ｔ ｔ ｌ １
． ． ＦＭ Ｎ ＋
ＲＣ ｏ ｏＨ＋ 疆 Ｏ＋ 光 （ ＾ 一４ ９ ０ ｉ ｒ ｍ）
目前 ， 已知细 菌 荧 光素 酶 是 分 子量 为 ７ ７ ＫＤａ不均 一的二聚体酶，它 由分子量分别 为４ ０和 ３ ７ ＫＤａ的 ａ和 １ ３ 两个亚单位组成 ，Ⅱ 和 Ｂ亚单位是 由Ｌ ｕ ｘ 操 纵子中相邻近 的 Ｌ ｕ ｘ Ａ 和 Ｌ ｕ ｘ Ｂ基 因编码－ ２ 】 Ｉ现 已能将 Ｌ ｕ ｘ Ａ Ｂ 基因 提取重 组到大肠 埃希 氏菌等 菌体 内，使 这些 菌具有表达细菌荧光素酶的能力 。
国） ｉ Ｌ ｕ ｍ ｉ ｎ ｏ ｍｅ ｔ ｅ ｒ １ ２ ５ ０ 型（ 瑞典 Ｌ ＫＢ 厂 ） ； Ｐ ｈ ｏ ｔ ｏ ｎ － Ｃ ｏ ｕ ｎ ｔ ｅ ｒ 、ＴＤ ４ ０ ０ ０发光光度 计（ 日本）
等。
２生 物发光技术在 食品上的研究
２． １在农药 残留检 测中的应用 有机 磷农药 包括杀虫 剂、杀菌剂和 除草 剂 。由于有机磷农药具有药效高 、 品种多、 防 治 对 象 多等 优 点 ，在 我 国 农 业 生 产 中 曾 大 量使 用 。 但 有 机 磷 农 药 中 的大 多数 品种 属 于 高毒性， 长期 大量使用 不但会对环境造成严 重影响， 且 人 们 在 食 用 高残 留 的水 果 蔬 菜 时 会 发生急性 中毒或慢性 中毒，危害 食用者的 身体健康 。对此 ，袁 东星等口 ］ 探讨 了采用发光 细菌对 甲胺磷 、水胺硫 磷、氧化乐 果、敌敌 畏、辛硫磷 、 甲基异柳 磷等六种常用 有机磷 农药 的检测 通过发光细菌对蔬菜中 以上六 种有机磷农药 响应情况 的分析表 明， 随着试 样中有机磷农 药浓度 的增加，发光 细菌的发 光强度 降低 ，发光 强度与农药浓度呈负相关 。 发光细菌检 测法的最小检 出浓度 为 ３ ｍｇ ／ Ｌ。 尽管发光强度 与农药浓 度没有严格 的线形关 系， 但 已经足 以满足现场快速检测 中的半定 量要求。该方法的优 点是 快速 、简便 、灵敏 、 价廉 ，适用 于现场 ，是 检测蔬菜 中有机磷农 药残留的一种 快速有效 、价廉 的方 法，且稍 加 改 进 后 便 可 应 用 于 蔬 菜 以 外 的农 产 品 如 水 果 、稻 米 中 的毒 物 检 测 。 ２ ． ２利用发 光细菌对 重金属进 行毒性检
生物学发光检测法(ATP)
目
CONTENCT
录
• 引言 • ATP发光检测法的基本原理 • ATP发光检测法在生物学研究中的
应用 • ATP发光检测法的实验方法与技术 • ATP发光检测法的数据分析与解读 • ATP发光检测法的发展趋势与挑战
01
引言
目的和背景
研究目的
通过生物学发光检测法（ATP）快速、准确地检测和评估生物样本中 的活性细胞数量及其代谢状态。
ATP纯化
通过离心、过滤或层析等方法 去除提取液中的杂质和干扰物 质，以获得纯净的ATP溶液。
ATP定量
利用标准曲线法或比色法等方 法对提取的ATP进行定量，以 确定其浓度。
发光反应条件优化与信号检测
发光反应条件
优化反应体系中各组分的浓度和比例， 如荧光素、荧光素酶和ATP等，以获 得最佳的发光效果。
• 高通量筛选
适用于高通量药物筛选和细胞毒性评价，提高研究效率。
• 临床应用
可用于评估肿瘤细胞对药物的敏感性、预测疾病预后等， 为个性化医疗提供依据。
• 环境监测
可用于检测水体、土壤等环境中的微生物活性，评估环境 质量及生态毒性。
02
ATP发光检测法的基本原理
ATP与生物发光的关系
ATP（腺苷三磷酸）是生物体内能量传递的重要分子， 广泛存在于所有活细胞中。
生物发光现象与ATP水平密切相关，ATP浓度越高， 发光强度越大。
通过测量生物体内的发光强度，可以间接反映ATP含 量，从而评估细胞的活性、微生物污染程度等。
ATP发光检测法的反应机制
ATP与荧光素酶（Luciferase） 反应，生成氧化荧光素 （Oxyluciferin）并释放能量。
释放的能量激发荧光素 （Luciferin），使其从基态跃 迁到激发态。
食品微生物检验中ATP发光法应用
浅析食品微生物检验中ATP发光法的应用摘要：本文就atp生物发光法的检测原理、检测步骤、特点、检测的影响因素及在食品工业中的应用进行了综述，并提出了目前atp生物发光法检测中存在的问题。
关键词：atp 生物发光法；荧光素；提取剂；温度；检验1 atp 的理化性质1.1 atp广泛存在于各种活的生物体中,活的菌体中也含有atp。
细菌死亡后,在细胞内酶的作用下,atp将很快被分解掉。
atp是高能磷酸化合物的典型代表。
atp 是由一分子腺嘌呤、一分子核糖和三个相连的磷酸基团构成的核苷酸，其分子结构式如图1所示。
图1 atp分子结构式1.2 atp有两个高能磷酸键，一个低能磷酸键。
每个高能磷酸键水解时，可产生30．54kj／mol的能量。
atp是细胞内特殊的自由能载体，广泛地存在于细胞内，如细胞核、细胞溶胶、线粒体等。
易水解，且水解时可释放出大量的能量，但水解易受细胞内环境的ph、mg2+浓度等的影响。
2 atp生物发光法检测的原理及一般步骤2.1 atp普遍存在于所有活的生物体中，被用来贮存和传递化学能，称作为“能量货币”。
当生物体死亡后，在细胞内酶的作用下，atp很快被分解掉。
因此，测定样品中的atp浓度，即可推算出活菌数。
atp生物发光技术产生于20世纪70 年代中期。
1983年，moyer 等最早提出细胞内源性atp的含量可以反映细胞的活性和活细胞的数量。
同年gronroos等也证实该技术是一种可靠、灵敏度高的确定细胞活性度的检测方法。
mcelroy[最先引入荧光素酶．atp检测法，其反应机理为：在mg2+存在下，萤火虫荧光素酶以d-荧光素酶、atp、o2为底物，将化学能转化为光d-荧光素+atp+o2 oxy-荧光素+amp+ppi+h2o能，发出光量子，其发光强度(i)与atp浓度(catp)符合下列函数关系。
式中，imax为最大发光强度；km为1×1o-4。
由上式可知，当catp远小于km时，i正比于样品中的catp。
atp检测微生物的数值判定
atp检测微生物的数值判定ATP（adenosine triphosphate）是一种能量分子，也是所有活细胞的共有生物标志物。
ATP检测方法通过测量样品中的ATP浓度来间接评估微生物的存在和水平。
由于该方法快速、敏感且易于操作，因此被广泛用于食品、饮用水、医疗器械、环境卫生等领域的微生物检测。
在ATP检测中，首先需要采集样品，如表面拭子、水样、食品样品等。
接下来，将采集到的样品通过特殊处理使微生物细胞破裂，并释放出ATP分子。
然后，通过ATP检测仪器对样品中的ATP进行快速测量，得到ATP的数值。
ATP检测结果的数值判定通常可分为三个区间，即高、中、低三个级别。
根据ATP数值判定结果，我们可以做出以下评估：1. 高水平：当ATP检测结果为高水平时，说明样品中存在较多的微生物。
这可能表示样品受到了严重的污染，需要立即采取措施进行清洁和消毒。
2. 中水平：当ATP检测结果为中水平时，说明样品中含有一定数量的微生物。
尽管微生物的水平可能还在可接受范围内，但这也意味着有必要加强卫生措施以减少微生物的存在。
3. 低水平：当ATP检测结果为低水平时，说明样品中微生物的水平较低。
这表明卫生措施相对较好，但仍需继续维护和改进以确保微生物的最小存在。
需要注意的是，ATP检测方法仅适用于活细胞的检测，无法区分不同类型的微生物。
因此，在根据ATP检测结果判定微生物水平时，还需要结合其他方法和背景知识，以确定具体的微生物类型和相关风险。
对于不同的应用领域，ATP检测结果的数值判定标准可能会有所差异。
在实际应用中，应根据相关标准和指导文件，结合实际情况进行判定和处理。
总而言之，ATP检测方法是一种快速、敏感且易于操作的微生物检测方法，能够通过测量样品中的ATP浓度来评估微生物的水平。
通过对ATP检测结果的数值判定，可以指导我们采取相应的措施来控制和管理微生物的存在，从而保障公共卫生和产品质量。
生物学发光检测法(ATP)
———
———
———
使用方法----第一步
【SWAB】
1
球管 吸阀 棉拭棒
拭抹表面以获取标本,如需获 得清洗水溶液标本，则将棉拭 子浸入水中3到4秒钟。
棉拭子 检测管
———
使用方法----第二步
[SNAP AND SQUEEZE]
将拭子插入检测管，用拇 指和中指捏住球管，轻挤球管 两次，挤出球管内液体。
2
———
ATP检测技术实验结果准确可靠，值得信赖。美国多个专业 权威机构研究了1000个以上的样品，这种只需十几秒就能完 成检测的快速检测法所得实验结果90%以上与24-48小时标 准细菌培养法/平皿法所得结果一致
使细菌检查的工作量大幅度减轻，实现卫生监控的简捷化、 效率化，但只能用于细菌的定量分析，定性分析可用常规方 法进行培养检测。
通过检测ATP ，可以间接地 证明生物体的存在
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生物学发光检测法（ATP）
• 原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利 用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺 苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的 ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细 菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶 可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强 度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样 品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫 生状况
食品快速检测
生物学发光检测法（ATP）
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ATP检测技术应用（国外）
20世纪80年代，英国首先研制出便携式ATP检测仪 随后在欧洲、美国、日本展开应用 应用范围涉及食品加工、超市、饮食、医药等行业 检测内容包括微生物和食品残渣
ATP荧光法在食品安全中的应用
在 奥运 场馆 开 展 了食 品卫 生Ａ Ｔ Ｐ 荧 光检 ￣ Ｊ １ ９ ２ ２ 次， 黎 新宇ｌ ５ ｌ 等 人 对奥 运食 品Ａ Ｔ Ｐ检 测与 人 群 症状 监 测 结 果 相关 性研 究 ，数据 分析 发现 腹泻 发热 等症 状 的 出 现 与Ａ Ｔ Ｐ 检 测值 两 者之 间呈 明显 的正 相关 性 。这 说 明， 虽 然该方 法 不能精 确｛ ９ ＝ １ ０ 定食 品中微生 物 含量 ， 但 其 结果 仍具 有 重要 的卫 生学意 义 。 Ａ Ｔ Ｐ 发 光 法 也 可 以 用 于 餐具 消 毒 效 果 检 测 ， 以 及冷 荤 间工 作 人员 手部 消毒 洁净 度 检测 ｌ ６ ｌ ， 在 奥运 期
一
２ ２一
第 １ ８卷 第 ４期
李力军， 等． Ａ Ｔ Ｐ荧光法在食品安全中的应用
监督等领域 ， 但 受 多种 因素影响 ， 其准确度 有待提 高。 结论
必将广泛应 用于越 来越 多的食 品领 域。 关键 词 Ａ Ｔ Ｐ 荧光法 食品安全 快速检 测
技 术在食 品安全领域的应 用 ， 并讨论影 响其准确度的 多种 因素 。 结果
该方 法快速 简便 ， 经过 不断的 完善和发展 ，
中 图分 类号
Ｒ１ ５ ５ ． ５ 文献标 识码
Ｂ ｄ ｏ ｉ １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ８ — ５ ７ ７ ７ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ４ ． ０ ０ ７
Ａ Ｔ Ｐ是 三磷 酸腺苷 （ ａ ｄ ｅ ｎ ｏ ｓ ｉ ｎ ｅ ｔ ｒ ｉ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ａ ｔ ｅ １ 的简
需 要４ ８ ／ ］ ， Ｉ １ ￣ ， ， 给厂家 在库存 、 生 产销 售方 面 造成 很 多 不便。 伍 季 等人 的研 究 显示 ， Ａ Ｔ Ｐ 发 光 法可 以应 用 于 啤酒 中细菌 总数 的快速 测定 ， 与 国标 法相 比 ， 检测
生物学发光检测法(ATP)
生物学发光检测法（ATP）
ATP检测技术应用（国外）
20世纪80年代，英国首先研制出便携式ATP检测仪 随后在欧洲、美国、日本展开应用 应用范围涉及食品加工、超市、饮食、医药等行业 检测内容包括微生物和食品残渣
检测技术应用（国内）
20世纪末，ATP检测技术被引进我国
当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些外资、
合资企业用于自检
2002年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCP实施指南， 鼓励食品加工企业引入ATP检测技术
2005年3月卫生部新出台《卫生监督机构建设指导意见》， 要求省、市、地配置
什么是ATP
ATP——三磷酸腺苷 【adenosine triphosphate， C10H16N5P3O13】存在于所有生物 体中，在细胞内主要作用是提 供能量 通过检测ATP ，可以间接地证 明生物体的存在
生物学发光检测法（ATP）
• 原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利 用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺 苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的 ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细 菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶 可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强 度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样 品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫 生状况
[INSERT AND DETECT]
将检测管放入ATP荧光 检测仪中，盖上盖子，倒 计 时开始并检测。
ATP检பைடு நூலகம்反应原理
D-虫荧光素 荧光素酶 O2+Mg2+
氧化荧光素 PPi+AMP
ATP
光（RLU）
植物 微生物
生物学发光检测法ATP
拭抹表面以获取标本,如需获得清洗水溶液标本，则将棉拭子浸入水中3到4秒钟。
1
使用方法----第二步 [SNAP AND SQUEEZE]
将拭子插入检测管，用拇指和中指捏住球管，轻挤球管两次，挤出球管内液体。
2
使用方法----第三步 [INSERT AND DETECT]
ATP检测技术应用（国外）
20世纪80年代，英国首先研制出便携式ATP检测仪 随后在欧洲、美国、日本展开应用 应用范围涉及食品加工、超市、饮食、医药等行业 检测内容包括微生物和食品残渣
检测技术应用（国内）
20世纪末，ATP检测技术被引进我国 当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些外资、合资企业用于自检 2002年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCP实施指南，鼓励食品加工企业引入ATP检测技术 2005年3月卫生部新出台《卫生监督机构建设指导意见》，要求省、市、地配置
什么是ATP
ATP——三磷酸腺苷【adenosine triphosphate，C10H16N5P3O13】存在于所有生物体中，在细胞内主要作用是提供能量 通过检测ATP ，可以间接地证明生物体的存在
生物学发光检测法（ATP）
原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫生状况
将检测管放入ATP荧光检测仪中，盖上盖子，倒 计 时开始并检测。
ATP检测反应原理
快速方法在食品微生物检测中的应用
快速方法在食品微生物检测中的应用作者：张群曹丙蕾来源：《食品界》2019年第02期免疫检测技术在食品微生物检测中的应用ATP发光检测技术。
ATP荧光仪作为快速检测，实现初筛的目的还是很方便的。
一分钟内检测出结果，且操作方便。
另外，ATP荧光仪是检测ATP分子和有机分子的含量，这些分子通常存在的对象是对环境卫生会造成污染的。
所以可以说ATP荧光仪的读数直接反映的是环境卫生的一个污染程度的指标。
对于食品的检测，ATP荧光仪的检测完全能达到要求，而且几乎不会受到干扰。
使用时制定一个符合自己实际情况的上下限值，以后可以直接根据这个值来进行合格与否的判断：在下限值以内，产品是OK的，可以放心发货；在上限值以外，产品很危险；在上下限值中间，产品可能有危险。
对于危险的产品需用标准方法加以验证。
目前，荧光反应法被广发应用于食品加工条件的快速评价和食品中为神武的快速检测中，而且荧光光度计是便携式的，使用起来更加方便，比較适合现场的检测，而且不仅可以检测到微笑的污染物，更能够检测到食品加工设备以及其表面的清洁程度。
乳胶凝集反应。
乳胶凝集法可用于猪圆环病毒，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，麻疹病毒抗体的快速检测。
乳胶凝集反应的方法，具有高灵敏度，强特异性和检测成本比较低的主要特点。
更重要的是，在实际的应用上面，工作人员操作起来也比较方便，检测的耗时也比较短。
是一种结果稳定，简单快速的检测方法。
此方法能够充分利用化学实验的优势，借助更直观的试验表现，更快速的找到会危害到人体健康的食品微生物群。
分子生物学技术在食品微生物检测中的应用PCR技术。
PCR是一种体外DNA 扩增技术，是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下，PCR技术（聚合酶链式反应）由变性- -退火（复性）- -延伸三个基本反应步骤构成，是依赖于DNA聚合酶的酶促合反应，在PCR理论的基础上，如果需要检测的食品中出现有一个分子的微生物，那么在短时间内，PCR技术就可以检测到。
atp检测判定标准公共卫生
atp检测判定标准公共卫生全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：ATP检测是一种快速、简便、灵敏度高的指示性检测方法，广泛应用于公共卫生领域。
ATP（adenosine triphosphate）是所有活细胞的基本能量分子，检测其含量可以快速反映样品中细菌、霉菌和真菌等微生物的数量，从而评估环境卫生状况。
在公共卫生领域，ATP检测广泛应用于食品安全、餐饮卫生、医疗卫生、居民卫生等方面。
通过ATP检测可以快速判断食品或环境样品中是否存在微生物污染，及时采取相应的卫生措施，保障公众健康。
在食品安全方面，ATP检测被广泛应用于餐饮行业和食品加工企业。
通过检测食品表面、工作台面、厨房设备等部位的ATP含量，可以及时发现食品卫生隐患，提高食品安全水平，减少食源性疾病的发生。
在医疗卫生领域，ATP检测被用于医院环境清洁监测、手术室消毒效果评估等方面。
通过检测医院表面、器械、手术室等部位的ATP 含量，可以评估清洁和消毒措施的有效性，减少医院感染的风险，保障患者安全。
在居民卫生方面，ATP检测可用于评估家庭卫生习惯和清洁用品的效果。
通过检测家庭表面、卫生间、厨房等地方的ATP含量，可以帮助居民改善卫生习惯，减少细菌滋生，提高家庭卫生水平。
ATP检测在公共卫生领域的应用有明显的优势。
ATP检测方法简便、快速，只需几分钟即可得到结果，大大提高了工作效率。
ATP检测具有较高的灵敏度和准确性，可以在微生物数量较低的情况下及时发现问题，避免疾病传播。
ATP检测无需复杂的实验设备和技术，操作简单易学，非专业人员也可以轻松使用。
在ATP检测应用中，需要制定一套科学的判定标准，以确保检测结果的可靠性和准确性。
在公共卫生领域，ATP检测可以根据不同的行业和环境制定相应的检测判定标准，以满足不同领域的需求。
对于食品安全领域，可以根据食品种类、使用环境等因素制定ATP检测判定标准。
对于生鲜食材和易腐食品，ATP含量应低于一定数值才能正常销售和食用。
atp生物发光法的应用
atp生物发光法的应用
ATP生物发光法是一种用于检测生物体内ATP含量的技术，其应用广泛，包括但不限于以下几个方面：
1. 微生物检测：ATP生物发光法可以用于检测食品、医疗和废水处理等行业的微生物数量。
其原理是在有氧环境中，荧光素在荧光素酶催化和ATP作用下生成氧化荧光素，氧化荧光素发出光子，光子数量可换算成ATP的量。
2. 食品工业：ATP生物发光法可被用于检测肉类食品中细菌污染情况。
研究表明，这种方法与标准的细菌培养菌落计数法相比，具有良好的相关性。
此外，ATP生物发光法还可用于乳制品中乳酸菌的测定、啤酒中菌落总数测定、调味品及脱水蔬菜的细菌学测定等。
3. 环保行业：ATP生物发光法也可被用于废水处理过程中的微生物检测，以监测和优化废水处理的效果。
4. 医疗领域：ATP生物发光法可以用于检测和监测医疗环境中的微生物，如手术室、ICU病房等，以确保患者安全。
总的来说，ATP生物发光法是一种快速、准确、非破坏性的检测方法，可用于各种需要检测微生物含量的场合。
1。
ATP荧光传感器在食品中的应用
食品研究与开发
Ｆ ｏ ｓａ ｃ ｄ Ｄｅ ｅｏ ｍｅ ｔ ｏ ｄ Ｒｅｅ ｒ ｈＡｎ ｖ ｌｐ ｎ
２１ ０ １年 ５月
第３ ２卷第 ５期
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吴 巨贤 ， 石晓艳 王焰红 黄和 ‘。 明 １ ， ， ・ 王小 ， ４ （． 东海洋大学 食 品科技学 院 ， １ 广 广东 湛江 ５ ４ ０ ；． 北农 业大学 农学 院 ， 江 哈尔滨 １０ ０ ；． ２０８２ 东 黑龙 ５ ０ ０ ３ 珠海元 朗 食 品有限公 司工程技术研发 中心 ， 广东 珠海 ５ ９０ ；． １０ ０ ４ 广东省华海糖业 发展有 限公 司 ， 广东 湛江 ５ ４ ３ ） ２ １２
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作者简介 ： 巨贤（９３ ）男 （ ）助理工程师 ， 吴 １８一 ， 汉 ， 硕士研究生 ， 主要从事食品科技在传统焙烤食品的研究 和技术 战略研究 。
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atp荧光法微生物检测原理
atp荧光法微生物检测原理在实验室里，微生物检测是一项既严谨又细致的工作。
今天，咱们就聊聊那个在微生物检测中大显身手的小伙伴——ATP荧光法。
这方法，简单来说，就是利用ATP（三磷酸腺苷）的特性来检测微生物的存在。
首先，得知道ATP是啥。
ATP是细胞内的一种能量货币，几乎所有生物体内的细胞都离不开它。
微生物也不例外，它们体内含有ATP。
所以，通过检测样本中的ATP含量，就能间接知道微生物的数量。
ATP荧光法检测的原理，其实挺巧妙的。
它用到了一种特殊的酶——荧光素酶。
这酶有个神奇的本事，能和ATP以及荧光素发生反应，产生光。
这光虽然微弱，但通过专门的仪器一照，就能被检测出来。
操作起来，步骤也不复杂。
首先，取样。
不管是水样、食品还是其他需要检测的样本，都得先取一小部分。
然后，加入一种特殊的溶液，这溶液里含有荧光素酶和荧光素。
接下来，就是等待反应了。
如果样本中含有ATP，那么荧光素酶就会和ATP、荧光素起反应，发出光来。
这光，虽然肉眼看不见，但通过荧光检测仪一测，就能得到一个数值。
这个数值，就代表了样本中ATP的含量。
因为ATP和微生物数量是成正比的，所以，通过这个数值，就能推算出样本中微生物的数量了。
这个方法的优点是快速、灵敏。
从取样到出结果，往往只需要几分钟的时间。
这对于需要快速检测微生物的场合，比如食品加工、医疗环境监控等，简直是太有用了。
当然，任何方法都不是完美的。
ATP荧光法也有它的局限性。
比如，它不能区分微生物的种类，只能告诉你微生物的总量。
而且，样本中如果含有其他物质，比如清洁剂残留，也可能会干扰检测结果。
不过，总的来说，ATP荧光法在微生物检测领域还是挺受欢迎的。
它让微生物检测变得简单快捷，大大提高了工作效率。
而且，随着技术的不断进步，这个方法也在不断地完善和优化，未来在微生物检测中的应用前景，肯定是非常广阔的。
说到底，无论是哪种检测方法，目的都是为了确保我们的生活环境更安全、更卫生。