高效液相色谱紫外法测定血清犬尿氨酸及色氨酸及其临床应用

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HPLC同时测定关节炎大鼠血清色氨酸和犬尿氨酸

过建立 AA 模型，检测正常和模型大鼠血清中 Trp 和 Kyn 含量变化，目前主要采用高效液相色谱法（ high performance liquid chromatography，HPLC）检测 Trp 和 Kyn 的含量［6 － 7］，在制备标准曲线等时对使用的血清进行了透析，此法可在同时测定 Trp 和 Kyn 的条件下，减少干扰因素。
安徽医科大学学报 Acta Universitatis Medicinalis Anhui 2019 Aug； 54（ 8）
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网络出版时间： 2019 － 7 － 15 18： 07 网络出版地址： http： / / kns． cnki． net / kcms / detail /34． 1065．Ｒ． 20190715． 0922． 030． html
1 材料与方法
1． 1 样本动物为健康雄性 SD 大鼠 20 只，合格证号：［SCXK（皖） 2017 － 001］，体质量（ 170 ± 20） g，购自安徽医科大学实验动物中心。样本的收集 AA 大鼠成模后处死取血于 15 ml 离心管中，静置 2 h 后，2 000 r / min 离心 20 min，取上清液，并于－ 20 ℃ 保存。 1． 2 仪器 Agilent1200 高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）； Sigma 3-30K 高速冷冻离心机（上海纳腾仪器有限公司）； AA-200DS 电子分析天平（美国 Denver 仪器公司）； Amicon Uitra-0. 5 超滤离心机（美国 Millipore 公司）。 1． 3 试剂 L-Trp（ WXBC4097V）、L-Kyn（ BCBT1074）购自德国 SIGMA-ALOＲICH，纯度 ≥ 98% ；冰醋酸（ 20170106 ）、醋酸钠（ 20170320 ）、高氯酸（ 20170204）均为分析纯，购自中国医药集团化学试剂有限公司。 1． 4 AA 大鼠模型的制备将大鼠随机分为两组，即对照组和模型组，每组 10 只。将 BCG 80 ℃ 水浴灭活 1 h，与经过高压灭菌的石蜡充分研磨，制成 10 mg / ml 完全弗氏佐剂（ complete freund adjuvant， CFA），于大鼠右后足跖皮内注射 CFA 0. 1 ml 致炎［8］，正常组用生理盐水同法注射。 1． 5 溶液的配制 1． 5． 1 储备液配制精密称取 L-Trp 对照品 40. 90 mg，L-Kyn 对照品 2. 08 mg，用体积百分比为 2. 5% 的高氯酸溶解，定容至 10 ml 容量瓶中，得浓度 20 000 μmol / L、1 000 μmol / L 对照品储备液，4 ℃ 保存，用时稀释。 1． 5． 2 流动相溶液配制精密称取醋酸钠 4. 922 8

高效液相色谱法快速测定血清中的芳香族氨基酸.

应用于基础研究和临床疾病的诊疗。
! 实验部分
!"! 仪器与试剂 *+,-./公司 $&011型高效液相色谱仪，包括：
231色谱泵，405紫外检测器，$&011数据处理系统； 67-89:-!!;2 进样器；<=;;11超声波发生器（上海必能信超声有限公司）；>?@@?"A 纯水器（>?@@?B8.-公司）；CD%%"30台式高速冷冻离心机（江苏太仓医疗器械厂）；EE";21 电子天平（F-GH-.IG/,.JK-G, &8KB+G:，’<E）；LM"N5E 旋涡混匀器（江苏新康仪器厂）；O?P7?B-,微量移液器（O?P7?.:8公司，Q+B+G）。
由于被分离组分中 $7-，C:.和 C.B的B" 值分别为2T40，2T55，2T0N，因此，通过调节流动相的 B# 值，使其低于组分的B" 值来抑制样品组分的离解，增加组分在固定相中的溶解度（# 值增大，!6 增加），从而达到分离的目的。本文通过改变流动相的
?@V8?:8;25；9,@<1
芳香族氨基酸包括苯丙氨酸（C;,）、酪氨酸（+V@）和色氨酸（+@8）等。其中苯丙氨酸、色氨酸是
人体必需氨基酸，在生命活动中起着极为重要的作用。芳香族氨基酸的代谢情况在肝、肾、神经精神疾病［%，!］等疾病诊断中有重大意义。因此定量分析血液中的芳香族氨基酸不仅在蛋白质化学和评价病人的营养状况方面十分重要，而且在多种疾病的诊断治疗和病因学研究上十分关键。
样品的收集：取研究对象空腹（上午0"N时）静脉血;K%，置于普通洁净试管内，采血后)1K?G内以)111.／K?G的速率离心分离血清（若不能及时检测则应置于Z)1 [冰箱内保存）。

液相色谱-质谱联用法同时测定大鼠血浆中色氨酸和犬尿氨酸

化学分析计量CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE第29卷，第4期2020年7月V ol. 29，No. 4Jul. 202067doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2020.04.015液相色谱–质谱联用法同时测定大鼠血浆中色氨酸和犬尿氨酸周资凯1，2，郑柳2，鲍益帆2，杨丽2，章志远2（1.南昌大学环境资源与化工学院，南昌　330031；　2.台州市台环环境检测科技有限公司，浙江台州　318020）摘要　建立液相色谱–质谱联用法同时测定大鼠血浆中色氨酸和犬尿氨酸的方法。

先利用活性碳吸附去除复杂基质，再以高氯酸、甲酸酸化沉淀，简单快速去除大量蛋白，然后以液相色谱–质谱联用法进行测定。

总分析时间小于4.00 min ，色氨酸和犬尿氨酸的质量浓度在0.500~1.000×104 μg ／L 范围内与色谱峰面积线性关系良好，检出限分别为0.147，0.148 μg ／L ，测定结果的相对标准偏差不大于4.7%（n =5），方样品加标回收率为99.2%～102.0%。

样品经–80℃冻融循环和室温放置120 h 内稳定性良好。

该方法优化了净化提纯前处理方式，与已报道的方法相比更加灵敏，绿色环保，可保持样本稳定，为需分析高通量生物基质样本的药物动力学相关工作提供一参考。

关键词　色氨酸；犬尿氨酸；代谢途径；液相色谱–质谱联用法；活性碳中图分类号：O657 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2020)04–0067–05Determination of tryptophan and kynurenine in rat plasma by liquid chromatography-mass spectrometryZHOU Zikai 1，2，ZHENG Liu 2，BAO Yifan 2，YANG Li 2，ZHANG Zhiyuan 2(1. School of resources environmental & chemical engineering, Nanchang University, Nanchang 330031, China ；2. Taizhou TaiHuan Environmental detection technology Co., Ltd., Taizhou 318020, China ）Abstract A method for simultaneous determination of tryptophan and kynurenine in rat plasma by liquid chromatography mass spectrometry was established. Firstly, the complex matrix was removed by activated carbon adsorption, then precipitated by perchloric acid and formic acid, then a large number of proteins were simply and rapidly removed, and then determined by liquid chromatography–mass spectrometry. The total analysis time was less than 4.00 min. The mass concentration of tryptophan and kynurenine was in the range of 0.500–1.000×104 μg ／L, which had a good linear relationship with the peak area, and the detection limits were 0.147, 0.148 μg ／L, respectively. The relative standard deviation was not more than 4.7% (n =5), the absolute recoveries were 99.2%–102.0%, The sample had good stability in –80℃ freeze–thaw cycle and room temperature for 120 h. Compared with the reported methods, this method is more sensitive, green and environmental friendly, and can keep the sample stable ，which provides a reference for the pharmacokinetics related to the analysis of a large number of biological matrix samples.Keywords tryptophan; kynurenine; metabolic pathway; liquid chromatography–mass spectrometry; activated charcoal通讯作者　周资凯，硕士，工程师，从事环境化学、分析化学、药物化学和纯化分离技术工作，E–mail:*****************收稿日期　2020–04–13引用格式　周资凯，郑柳，鲍益帆，等.液相色谱–质谱联用法同时测定大鼠血浆中色氨酸和犬尿氨酸［J ］.化学分析计量，2020，29(4): 67–71.ZHOU Z K ，ZHENG L ，BAO Y F, et al. Determination of tryptophan and kynurenine in rat plasma by liquid chromatography-mass spectrometry ［J ］. Chemical analysis and meterage ，2020，29(4): 67–71.人体中的色氨酸和犬尿氨酸代谢途径已被证实与许多疾病和失调有相关联性，如人类免疫缺陷病毒的感染、亨廷顿病、阿尔茨海默病和精神分裂症［1–2］。

高效液相色谱_荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸

收稿日期 : 2007206218 第一作者 :罗昔波 , 硕士研究生. E 2m a il: l20002721@ s ina. com. com. 通讯联系人 :唐爱国 ,教授 ,硕士生导师. Te l: ( 0731) 5292142, E 2m a il: a iguo tang@ yahoo. com. cn. 基金项目 :湖南省医药卫生科研计划课题 ( C2005019)和湖南省科技计划项目课题 ( 05S K3026)资助.
and c rea tin in e ( C r) ha d no in te rfe ring e ffec ts to the de te rm ina tio n of Kyn. The m e th od is of h igh a cc u rac y, ea sy op e ra tion, s a tis fac to ry re cove rie s and good rep ro duc ib ility, and ca n be us ed fo r rou tine a na lys is. Ke y w o rd s: h igh p e rfo rm a nce liqu id c h rom a tog rap hy ( H PLC ) ; f luo res cen ce de te c tion ( FLD ) ; kyn u ren ine; hum an s e rum
1 实验部分
1. 1 仪器与试剂高效液相色谱仪 , 包括 510 色谱泵、2475 型荧光检测器 (W a te rs 公司 ) 、HS 2000色谱数据工作站 (杭州英谱科技开发有限公司 ) 、R he odyne 7725 手动进样器 (带 20 μL 进样环 ) 。 0145 μm 滤膜及其抽滤器 (M illip o re 公司 ) ; M illi2Q 纯水器 (M illip o re 公司 ) ; TGLL 218台式高速冷冻离心机 (湖南湘仪离心机厂 ) ; AA 2250电子天平 (美国 ) ; N ich ip e t微量移液器 (日本 ) ; SB 2200型超声去气仪 (上海必信能有限公司 ) 。犬尿氨酸、苯丙氨酸 ( P he ) 、酪氨酸 ( Ty r) 、色氨酸、52羟色胺 ( 52H T ) 、犬尿喹啉酸和肌酐 ( C r)均购自 S igm a 公司 ; 乙腈、甲醇均为色谱纯 (美国 Ted ia 公司 ) ; 醋酸锌、冰醋酸等均为国产分析纯 ; 高氯酸为国产优级纯。配制试剂用水均为 M illi2Q 纯水器制备的超纯水。 1. 2 色谱条件色谱柱 : H yp e rs il C8柱 ( 300 m m ×610 m m , 10 μm ,大连依利特分析仪器有限公司 ) ; 流动相 : 0125 m o l /L 醋酸锌 250 m m o l /L 醋酸溶液 (含 3% ( v / v ) 乙腈 ) ; 流速 : 115 m L /m in; 激发光波长 365 nm , 发射光波长 480 nm ; 进样量 20μL; 室温下测定。 1. 3 试剂的配制 1. 3. 1 应用试剂的配制蛋白质沉淀剂 :用超纯水配制 510% ( v / v)的高氯酸溶液作血清蛋白质沉淀剂。流动相的配制 : 准确称取醋酸锌 , 加入冰醋酸、乙腈及水制成 0125 m o l /L 醋酸锌 250 m m o l /L 醋酸溶液 (含 3% ( v / v)乙腈 ) , 再用 0145 μm 微孔滤膜过滤 ,使用前超声脱气 30 m in。

高效液相色谱技术在氨基酸分析中的应用

高效液相色谱技术在氨基酸分析中的应用氨基酸是构成蛋白质的基本组成单元，其在生物体内具有重要的生理功能。

因此，对氨基酸的分析研究十分重要。

高效液相色谱技术（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）是一种现代化的色谱分析技术，通过对样品中的化合物进行分离和定量分析，广泛应用于各个领域。

在氨基酸分析中，HPLC技术的应用发挥了重要作用。

首先，HPLC技术在氨基酸分析中具有较高的灵敏度和分辨率。

通过选用合适的色谱柱和优化分析条件，HPLC可以对样品中的氨基酸进行有效的分离和检测。

同时，HPLC技术还具有较高的灵敏度，能够实现对微量氨基酸的定量分析。

这使得HPLC技术能够满足对氨基酸分析中高精度和高灵敏度的要求。

其次，HPLC技术在氨基酸分析中具有较强的选择性。

通过选择不同的色谱柱、流动相和检测方法等，可以实现对不同氨基酸的选择性分离。

这使得HPLC技术能够同时对多个氨基酸进行分析，为氨基酸组分的定量和鉴定提供了可靠的手段。

此外，HPLC技术还可以与其他检测方法（如质谱联用）相结合，进一步提高分析的选择性和准确性。

第三，HPLC技术在氨基酸分析中具有较高的分析效率和快速性。

相比于传统的氨基酸分析方法，HPLC技术具有分析速度快、样品处理简单等优点。

它可以通过自动进样系统实现对多个样品的同时分析，大大提高了分析效率。

同时，HPLC技术还可以借助软件进行数据处理和分析，进一步加快氨基酸的分析速度和结果解释。

最后，HPLC技术在氨基酸分析中还具有较强的应用前景和广泛的应用领域。

随着生物学、医学、化学等领域的发展，对氨基酸的研究需求越来越大。

HPLC技术作为一种灵活、高效的分析方法，与其他分析技术相结合，有望在氨基酸分析中发挥更大的作用。

例如，在食品行业中，HPLC技术可用于分析和监测食品中的氨基酸含量，保证食品的质量和安全。

在医学领域，HPLC技术可用于检测人体内的氨基酸水平，对疾病的诊断和治疗提供重要依据。

两种高效液相色谱法测定血清色氨酸的结果比较

两种高效液相色谱法测定血清色氨酸的结果比较柳兴其;王清平;唐爱国【期刊名称】《实用预防医学》【年(卷),期】2004()4【摘要】目的比较高效液相色谱 -紫外检测法 (HPLC -UV)与高效液相色谱 -荧光检测法 (HPLC -FLD)测定血清色氨酸的结果 ,了解这两种检测法测定结果之间的相关性。

方法用HPLC -UV和HPLC -FLD同时随机检测 40例临床血清标本的色氨酸含量 ,比较相关性。

用两法对同一混合血清标本各测定血清色氨酸含量 2 0次 ,比较两法精密度。

结果HPLC -UV测定同一份混合血清标本色氨酸含量为( 3 9.85± 1.69) μmol/l(X±S) ,HPLC -FLD测定值为( 4 0 .2 5± 1.0 6) μmol/l。

其浓度差值无显著性意义 (P >0 .0 5 )。

结论两法对 40例临床血清标本色氨酸测定结果一致性好。

【总页数】2页(P693-694)【关键词】氨基酸;高效液相色谱法;紫外检测;荧光检测【作者】柳兴其;王清平;唐爱国【作者单位】中南大学湘雅二医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R-33【相关文献】1.高效液相色谱法快速测定血清中的色氨酸 [J], 张秀玲;于玲;常丽2.高效液相色谱法同时测定血清色氨酸和犬尿氨酸浓度的方法建立及应用 [J], 张晓清;王猛;丁敏3.高效液相色谱法测定孕妇血清中色氨酸及其代谢产物Kynurenine [J], 徐雪梅;夏晓萍4.高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸 [J], 王瑞;唐爱国5.高效液相色谱法测定血清色氨酸 [J], 唐爱国;孟巧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸

３５ｍｉ，ｔｅｌａａｅｏｆｔｅｈｏｓｒｍ０８ｔ￣ｍｏｌ．ｎｈｉｒｒｎｇｈｅｍｔｄｗａｆｏ０．９ｏ４９ｎｅ／Ｌ，ａｈｅｄｅｅｔｏｎｌｍｉｎｄｔｔｃｉｉｔ
一
王瑞，唐爱国
中南大学湘雅二医院检验科，湖南长沙４０１）１０１
摘要：建立了一种能同时检测血清中的犬尿氨酸（ｙｕｅｉｅＫｎ和色氨酸（ｒｐｏｈｎＴｐ）ｋｎｒｎｎ，ｙ）ｔｙｔｐａ，ｒ的高效液相色谱－
ａｅｏｉｉ（Ｈ，ｃｔｎｔｌｐ３６）ａｌｗａｅｏ．／ｎ．Ｔｅｕｔａｉｌｔｄｔｃｏｓｏｅａｅｔｒｅｔａｆｏｒｔｆ１０ｍＬｍｉｈｌｖｏｅｅｅｔｒｗａｐｒｔｄａｒ
￣ｍｏ／Ｌ．Ｔｈｅｒｃｅｅｐｅｅｆｏｍ５５１ｌｅｏｖｒｓｏｆＴｒｗｒｉｒ９．％ｔ８＋７．ｔｎｔａｙａｎｅｄｙｖａａｏ９６％ｈｅｉｒｄａｎｄｉｔｒａｒ－ｉｔｏｎｅｅ１５ｉｓｗｒ．０％ａｄ２．％，ｒｓｃｉｌ．Ｔｈｅｍｅｈｏｓｓｍｐｌｎ６５ｅｐｅｔｖｅｙｔｄｉｉｅ，ｆｓ，ａｃａｅ，ａｄｓｉａｅａｔｃｕｒｔｎｕｔｂｌｆｒｒｕｔｅａｎｙｉ．ｏｏｉａｌｓｓｎ
（Ｌ－Ｖ）ｔｅｌｙｄａＳｍｍｅｒｈｅｄＲ－８ｃｌｍｎ（５ＨＰＣＵ＋ＩｍｐｏｅｙｔＳｉｌＰＣ１ｏｕｙ１０ｍｍ．ｘ３９ｍｍｄ，ｍ）ｉ．５ｉ．ｘａｄａｍｏｉｈｓｆ１ｎｂｌｐａｅｏｍｍｏ／ｏｉｍｃｔｔ－ｃｔｃｄｓｌｔｎｃｎａｎｎ，％（／）ｅ５ｌＬｓｄｕａｅａｅａｅｉａｉｏｕｉｏｔｉｉｇ２７ｖｖｃｏ

高效液相色谱法测定细胞培养液中色氨酸和犬尿氨酸含量研究报告

高效液相色谱法测定细胞培养液中色氨酸和犬尿氨酸含量研究
报告
黄文娟;刁娟娟
【期刊名称】《新疆中医药》
【年(卷),期】2015(033)003
【摘要】目的建立色氨酸和犬尿氨酸含量测定的方法.方法采用高效液相色谱-紫1外法同时测定细胞培养液中的色氨酸和犬尿氨酸含量.结果及结论经测定,犬尿氨酸在2.01～31.52mol/L范围内线性关系良好(Y=18.175X-27.361 r=0.998 3),色氨酸在2.44～97.5 1mol/范围内线性关系良好(Y=13.923X-5.3782 r=0.999 5),方法学考察专属性、回收率、精密度、稳定性良好,可用于色氨酸和犬尿氨酸的测定.【总页数】3页(P39-41)
【作者】黄文娟;刁娟娟
【作者单位】新疆医科大学附属中医医院,新疆乌鲁木齐830000;新疆医科大学药学院,新疆乌鲁木齐830011
【正文语种】中文
【相关文献】
1.高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸 [J], 王瑞;唐爱国
2.高效液相色谱法测定体外培养NB4、HL60细胞内及培养液中紫杉醇含量 [J], 梁月琴;董方霆;等
3.LC-MS/MS法测定小鼠肿瘤中犬尿氨酸和色氨酸的含量 [J], 王湛博;刘健;程亚楠;段晓辉;杨勇;尤淋君
4.LC-MS/MS法测定小鼠肿瘤中犬尿氨酸和色氨酸的含量 [J], 王湛博;刘健;程亚楠;段晓辉;杨勇;尤淋君;
5.瘤胃保护性色氨酸饲粮中添加亚叶酸钙对绵羊血浆色氨酸、犬尿氨酸和褪黑素含量的影响 [J], 王根;陈晖;赵芳;高超;赵国栋;李晓斌;马晨;杨开伦
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高效液相色谱法同时测定血清色氨酸和犬尿氨酸浓度的方法建立及应用

ｍｉｏｐｎｆｒＴｒ．Ｔｈｉｅｒｒｎｅｆｔｅｍｅｈｄｗｅｅｆｏ００３ｔ１￣ｌＬｆｒＫｙｎ．５ｏｅｌａａｇｓｏｈｔｏｒｒｍ．８ｏ２ｔ／ｏｎａｄ２６０ｔｎｍｏ６８００￣ｌＬｆｒＴｒ７．０ｔ／ｏｐ，ｔｅｄｔｃｉｎｌｔｒ．２ｔｌＬｆｒＫｙｎ．５ｔｌＬｆｒＴｒｍｏｈｅｅｔｉｓｗｅｅ００８￣ｏｍｉｍｏ／ｏｎａｄ００３￣ｍｏ／ｏｐ，
文献标识码：Ａ文章编号：６３４３（０７０ — ０ — ３１７ — １０２０）２１３０
【键词】色谱法，压液相；色氨酸；犬尿氨酸关高
中图分类号：４６１２Ｒ４．１
Ｓｉｕｌａｏｓｄｔｒｉｔｏｆｔｙｐｏｍｔｎｅｕｅｅｍｎａｉｎｏｒｔｐｈａａｙｎｎｄｋｎｕｒｎｉｅｉｅｕｙｈｇｅｆｒｎｃｉｉｈｒｍａｅｎｎｓｒｍｂｉｈｐｒｏｍａｅｌｑｕｄｃｏ —
ｍｍ，５ｕｍ）ａｄｄｔｃｅｔ３０ｎｆｒＫｙｎ７ｍｏｐｎｅｅｔｄａ６ｍｏｎａｄ２８ｎｆｒＴｒ．Ｔｈｌｗａｅｗａ．／ｉｎｅｆｏｒｔｓ０８ｍｌｍｎａｄ
ｔｅｃｌｍｎｔｍｐｒｔｒｓｋｐｔ２ｈｏｕｅｅａｕｅｗａｅｔａ５℃ ．ｓｌＴｈｅｅｔｎｔｓｗｅｅ３３ｒｉｏｎａｄ５２Ｒｅｕｔｓｅｒｔｎｉｉｒ．ｎｆｒＫｙｎ．ｏｍｅａ

高效液相色谱——紫外、荧光双检测器同时测定人尿中犬尿氨酸和犬尿喹啉酸

高效液相色谱——紫外、荧光双检测器同时测定人尿中犬尿氨酸和犬尿喹啉酸赵建幸;罗雪美;詹一鸣;陈波;朱鼎良【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2009(024)009【摘要】目的建立高效液相色谱(HPLC)同时测定人尿中犬尿氨酸(KYN)和犬尿喹啉酸(KYNA)方法.用KYNA/KYN比值评价人体犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)活性.方法采用HPLC测定KYN、KYNA,分析柱为安捷伦HC C18反相色谱柱;流动相为10 mmol/L乙酸钠-乙酸缓冲液:7%乙腈=93:7;流速1 mL/min;检测器波长:紫外365 nm,荧光344 am(激发)/398 mm(发射).结果 KYN和KYNA保留时间分别为6.9和11.5 min.水溶液标准与标准加入工作曲线斜率差异无统计学意义(KYN:P=0.406 8;KYNA:P=0.646 2).KYN和KYNA的平均回收率分别为98.74%±7.53%、95.17%±8.17%;稳定性试验的变异系数(CV)分别为3.35%和0.88%;精密度CV分别为2.73%和2.79%;最低检测限分别为0.4和0.2μmol/L.30份健康成年人尿样的KYNA/KYN比值为2.45±1.54.尿中KYNA与KYN含量呈正相关关系(r2=0.375 8,P＜0.001).结论测定方法灵敏、准确、稳定.KYNA/KYN比值评测KAT活性具有简便、实用等特点,可用于相关疾病的临床辅助诊断和基础研究.【总页数】4页(P659-662)【作者】赵建幸;罗雪美;詹一鸣;陈波;朱鼎良【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.高效液相色谱紫外荧光双检测器测定蔬菜中的克百威 [J], 张燕;闫磊;高文瑞;戴洋洋2.帕金森病患者血清中犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及色氨酸的测定及临床意义 [J], 唐亚梅;张付峰;刘勇;常丹丹;任亚萍3.高效液相色谱-荧光检测法同时测定血清中的犬尿氨酸和犬尿喹啉酸 [J], 肖乐东;唐爱国;莫喜明;罗昔波;皮兰敢4.高效液相色谱仪联荧光检测器法测定尿3-甲氧,4-羟基苦杏仁酸 [J], 钟友工;周康;诸骏仁5.犬尿氨酸氨基转移酶和犬尿喹啉酸在自发性高血压大鼠中的变化 [J], 李宁宁;肖冰;张怡;朱鼎良;高平进因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸

４
移液器（日本）Ｂ２０型超声去气仪（海酸、苯丙氨酸（ｈ）酪氨酸（ｙ）色氨Ｐｅ、Ｔｒ、
酸、－色胺（－Ｔ）犬尿喹啉酸和肌酐（ｒ均购５羟５Ｈ、Ｃ）
分析。１５犬尿氨酸的定性定量分析．
１实验部分
１１仪器与试剂．
高效液相色谱仪，括５０色谱泵、４５型荧包１２７光检测器（ｔｒＷａｅｓ公司）Ｈ００色谱数据工作站、Ｓ２０
维普资讯
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第１期
罗昔波，高效液相色谱～等：荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸
。１・６
人体血液中Ｋｎ的含量较低，内外一般采用ｙ国
ＨＬ进行检测。因为Ｋｎ在２５ｎ、４ｍ和ＰＣｙ２ｍ２５ｎ
自Ｓｇｉｍａ公司；乙腈、甲醇均为色谱纯（国Ｔｄａ美ｅｉ公司）醋酸锌、醋酸等均为国产分析纯；氯酸；冰高为国产优级纯。配制试剂用水均为Ｍｉｉ纯水器ｌ．ｌＱ
制备的超纯水。１２色谱条件．色谱柱：ｙｅｓｌ８柱（０ＨｐｒｉＣ３０ｍｍ．Ｘ６０ｍｍ，０１
醋酸锌有显著增强犬尿喹啉酸（ＹＡ）光强度的ＫＮ荧
准确称取Ｋｎｌ．，２５（／）ｙ０８ｍｇ用．％ｖｖ高氯酸溶液溶解并稀释至ｌ．００ｍＬ混匀，成ｌ６，制０９

基于HPLC的标准加入法同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸

基于HPLC的标准加入法同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸陈月;康宏艳;胡楠;杨青;郁韵秋【摘要】目的建立一种同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸浓度的高效液相色谱(HPLC)法,用于评价小鼠给予IDO抑制剂后体内IDO活性.方法血清用6％高氯酸沉淀蛋白法处理,离心后取上清进样,采用标准加入法定量.选用ThermoHypersil GOLD色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为乙腈-醋酸钠(15mmol/L,冰醋酸调pH至4.0),流速1.1 mL/min,柱温30℃,犬尿氨酸和色氨酸的紫外检测波长分别为360 nm和280 nm.结果犬尿氨酸保留时间为6.10 min,线性范围为0.25～10 μ mol/L,检测限为0.09 μmol/L;色氨酸保留时间10.12 min,线性范围为25～1 000 μmol/L,检测限为0.25μmol/L.精密度、回收率及稳定性等均符合生物样品定量分析方法验证指导原则的要求,并成功应用于62只小鼠血清犬尿氨酸和色氨酸浓度的测定.结论建立了一种简单、快速、准确的HPLC分析方法,采用标准加入定量方式,可同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸血药浓度,并成功应用于实际生物样本的测定.【期刊名称】《复旦学报（医学版）》【年(卷),期】2016(043)006【总页数】6页(P704-709)【关键词】犬尿氨酸;色氨酸;HPLC;血清;标准加入法;小鼠【作者】陈月;康宏艳;胡楠;杨青;郁韵秋【作者单位】复旦大学药学院药物分析教研室上海201203;复旦大学药学院药物分析教研室上海201203;复旦大学生命科学学院生物化学与分子生物学系上海200438;复旦大学生命科学学院生物化学与分子生物学系上海200438;复旦大学药学院药物分析教研室上海201203【正文语种】中文【中图分类】R917色氨酸(tryptophan,Trp)是哺乳类动物合成必需的氨基酸之一,也是构成蛋白质的重要成分,还可以在肝、肾等组织中代谢成为生物活性分子。

在线衍生—高效液相色谱法同时测定血浆色氨酸及其代谢物

在线衍生—高效液相色谱法同时测定血浆色氨酸及其代谢物目的：1.建立一种在线衍生高效液相色谱紫外-荧光法同时测定血浆中色氨酸（tryptophan，Trp），犬尿氨酸（kynurenine，Kyn），5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindole acetic acid，5-Hiaa)和犬尿喹啉酸（kynurenic acid，Kyna)的浓度。

2.用所建立的方法测定正常孕妇，糖尿病患者，肝硬化患者和健康对照组血浆中Trp，Kyn，5-Hiaa和Kyna的含量，从而更全面地了解人体内不同生理和病理状态下Trp代谢情况。

方法：1.采用Hypersil C18柱（250mm×4.0mm；5μm）分离，以3-硝基酪氨酸（3-N-Tyr）为内标（IS）。

流动相为250mmol／L醋酸锌溶液（pH5.5）-乙腈（95:5，v／v）；流速0.8ml/min；柱温30℃；进样量：50μL；紫外检测波长程序：0.00~13.00min，360nm；13.01~17.00min，302nm。

荧光检测波长程序：0.00~10.00min，激发光波长（Ex）和发射光波长（Em）分别为278nm和343nm；10.01~14.00min，Ex和Em分别为244nm和400nm；14.01~17.00min，Ex和Em分别为302nm和400nm；分析时间18min。

2.利用该方法测定糖尿病患者（n=101），正常孕妇（n=70），肝硬化患者（n=68）和健康对照组血浆（n=54）中Trp，Kyn，5-Hiaa和Kyna的含量。

结果：1.5-Hiaa，Kyn，3-N-Tyr，Kyna和Trp保留时间分别为6.7，9.0，11.4，13.5，16.1min。

5-Hiaa，Kyn，Kyna和Trp线性范围分别为：3.27~104.60nmol ／L，0.32~15.36μmol／L，14.0~464.8nmol／L和2.5~320.0μmol／L，最低检测限分别为：1.22nmol／L，0.048μmol／L，1.29nmol／L和0.54μmol／L。

高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸

! 第"期
王 ! 瑞，等：高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸
・ )#)・
相关， !"# 与 $%& 在血清中的含量之比是反映人体内免疫状态的敏感指标。因此，定量分析血清中的 !"# 和 $%& 可为相关疾患的诊断治疗和基础研究提供重要依据。 ! ! 目前，国内外科研人员主要应用高效液相色谱法检测 !"# 和 $%& 。由于 !"# 本身不能产生荧光，（ ()*+’,*- ）一般采用高效液相色谱 ’ 荧光检测法柱后衍生法
=.’O6140"84 ，MPD ）的催化下合成重要的中间代谢。当机体处于细产物犬尿氨酸（ 9602#40.04 ，:60 ）胞免疫激活状态时， 3 细胞释放的 !+ 干扰素可活化多种细胞中的 MPD 。研究表明， :60 、 3#; 与肾脏疾病、神经精神疾病、异常妊娠等［ & ’ $ ］的发生发展密切
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高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸
王 ) 瑞， ) 唐爱国
（中南大学湘雅二医院检验科，湖南长沙 %&""&& ）摘要：建立了一种能同时检测血清中的犬尿氨酸（ 9602#40.04 ， :60 ）和色氨酸（ 5#6;5’;%"0 ， 3#; ）的高效液相色谱+ 紫外检测法。采用的色谱柱为 <6--45#6 <%.4(= >?+7&- 柱（ &(" -- . $/ * -- ./ =/ ， ( !-），流动相为 &( --’( @ A 乙酸钠 + 乙酸溶液（含 !/ + B 乙腈， ;C $/ # ），流速为 &/ " -A @ -.0 ，紫外检测波长为 !!( 0- 。血清标本经 (/ " B （体积 :60 保留时间为 $/ ( -.0 ，线性范围分数）高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液直接进样分析测定。研究结果表明，为 "/ "*- ’ %* ! -’( @ A ，最低检出浓度为 "/ "! ! -’( @ A ，回收率为 *"/ -! B ’ *$/ %( B ； 3#; 保留时间为 -/ & -.0 ，线性最低检出浓度为 "/ !" ! -’( @ A ，回收率为 *(/ (& B ’ *-/ #+ B 。 :60 和 3#; 日内、日间测定范围为 %/ * ’ %*" ! -’( @ A ，的相对标准偏差均小于 % B ，苯丙氨酸、酪氨酸、 ( + 羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对该法均无干扰。该方法简便、快速、稳定、可行，可应用于临床和科研工作。关键词：高效液相色谱法；紫外检测；色氨酸；犬尿氨酸；血清中图分类号： D#(-) ) 文献标识码： E ) ) 文章编号： &""" +-+&$ （ !""# ） "! +"&%" +"%) ) 栏目类别：研究论文

犬尿氨酸(Kyn)检测

犬尿氨酸（Kyn）检测
犬尿氨酸（Kynurenine, Kyn），古武弥四郎、岩尾次郎在饲以色氨酸的兔尿中
发现L-型犬尿氨酸，证明是色氨酸的代谢中间产物。

在动物体内变为犬尿喹啉酸，另外经过3-羟犬尿酸变为黄尼烯酸、烟酸等，还经过乙酰CoA而完全分解。

果蝇或蚕等昆虫的眼和卵的出现、色素作用物质（V+物质）与犬尿氨酸是同一
物质。

研究人员认为它与尿色素和尿色素原等动物的正常尿色素（黄色）的发
色团有密切的关系。

迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)法，可高效、精准的检测L-犬尿氨酸的含量变化。

此外，我们还提供其他氨基酸及其代谢物检测
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HPLC和LC-MS测定L-犬尿氨酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报
告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. L-犬尿氨酸含量信息
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LC-MS氨基酸测定项目样本报告，点击查看>。

高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中的色氨酸及其代谢物

高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中的色氨酸及其代谢物甄乾娜;黄小兰;张晓清;班艳娜;丁敏【摘要】A high performance liquid chromatographic (HPLC) method with programmed wavelength ultraviolet (UV) detection was established to simultaneously determine tryptophan (Trp) and its key metabolites kynurenine (Kyn) and 5-hydroxytryptamine (5-HT). A BDSHypersil-C8 column (150 mm ×4. 6 mm, 5 μm) was used for the analysis at 25 ℃. The separation was carried out with the mobile phase consisting of 10 mmol/L sodium acetate-acetic acid ( pH 4. 5 ) and acetonitrile (94: 6, v/v) using theophylline as internal standard (IS) at a flow rate of 0. 6 mL/min. The eluates were monitored by the programmed wavelength UV detection at 360 nm for Kyn and IS, 220 nm for 5-HT and 302 nm for Trp. The mean recoveries were in the range of 87％ to 113％. The linearities were from 3.97 to 400 μmol/L for Trp, 0. 421 to 20. 2 μmol/L for Kyn and 4. 36 to 980.5 nmol/L for 5-HT. The detection limits were 0. 134 μmol/L for Trp, 0. 016 μmol/L for Kyn and 2.03 nmol/L for 5-HT. Fifteen plasma samples of patients with depression and fifteen plasma samples of healthy controls were tested, and the results demonstrated that the metabolism of Trp in the plasma from the depression group was significantly different from that of the control group.%建立了一种高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中色氨酸(Trp)及其主要代谢产物犬尿氨酸(Kyn)和5-羟色胺(5-HT).以茶碱为内标(IS),采用BDS-Hypersil-C8柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)分离.流动相为10mmol/L醋酸钠缓冲液(pH 4.5)-乙腈(94:6,v/v),流速为0.6 mL/min;柱温为25℃;紫外检测波长设定:Kyn和IS为360 nm,5-HT为220 nm,Trp为302 nm.3种物质的平均回收率为87%～113%;线性范围分别为3.97～400μmol/L(Trp),0.421～20.2 μmol/L(Kyn),4.36～980 nmol/L(5-HT);检出限分别为0.134 μmol/L(Trp),0.0160 μmol/L(Kyn),2.03 nmol/L(5-HT).利用该方法对15例抑郁症患者和15例健康志愿者的血浆进行测定,结果表明两组间Trp的代谢存在显著的差异.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2011(029)005【总页数】4页(P435-438)【关键词】高效液相色谱法;色氨酸;犬尿氨酸;5-羟色胺;血浆【作者】甄乾娜;黄小兰;张晓清;班艳娜;丁敏【作者单位】重庆医科大学医学检验系,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学神经科学研究中心,医学心理学教研室,重庆,400016;重庆医科大学医学检验系,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学医学检验系,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学医学检验系,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】O658色氨酸(tryptophan，Trp)是人体必需氨基酸之一，其代谢主要通过两条途径:一是在羟化酶的作用下生成5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)，一是经双加氧酶的作用生成N-甲酰犬尿氨酸，然后转变为犬尿氨酸(kynurenine，Kyn)［1］。

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ａｎｄ
ＫＴｒａｔｉｏｉｎｓｅｒｕｍｖａｌｕｅｓｏｆｈｅａｌｔｈｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｓｅｒｕｍｋｙｎｕｒｅｎｉｎｅ
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ｍｍｏｌ／Ｌ
ｔｈｅ
ｓｏｄｉｕｍａｃｅｔａｔｅ－ａｃｅｔｉｃａｃｉｄｓｏｌｕｔｉｏｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅａｔ
ａ
２．７％（ｖ／ｖ）ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅａｓ
ｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１．０ｍｌ／ｍｉｎ．Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔｄｅｔｅｃｔｏｒｗｏｒｋｅｄａｔ
２２５ｎｍ．Ｔｈｅｔｏｔａｌａｓｓａｙｔｉｍｅｏｆｓｅｒｕｍｗａｓｗｉｔｈｉｎ１０ｍｉｎｕｔｅｓ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆ
ｓｅｒｕｍｂｙ
ｒｅｖｅｒｓｅ
ｋｙｎｕｒｅｎｉｎｅ（ＫＶＮ）ａｎｄｔｒｙｔｏｐｈａｎ（ｎ冲）ｉｎ
２．ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅＫＹＮ
ｐｈａｓｅｈｉｇｈ
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ（ＨＰＬＣ．ＵＶｌ．ａｎｄ
量显著升高、ＴＲＰ含量显著降低，且ＣＲＹ组血清ＫＹＮ和ＴＲＰ含量
与肾功能状态、某些血液学参数有一定相关性；尿毒症患者血液透析治疗后血清ＫＹＮ含量显著降低，ＴＲＰ无明显变化。结论：１．本文建立的ＨＰＬＣ－－ＵＶ法可同时测定血清ＫＹＮ和
ＴＲＰ，方法简单、快速、灵敏、特异、准确，适宜于临床与科研工作。所建立的血清ＫＹＮ含量和ＫＴ比值范围可为相关疾病和基础研究工作提供参考依据。２．ＣＲＦ患者外周血存在较为严重的犬尿氨酸代谢紊乱，且与肾功
ｇｌｏｍｅｒｕｌｌｕｒｅ（ＣＲＦ）．
ｆｌｕｉｄｏｆｓｅｒｕｍｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｄｗｉｔｈｐｅｒｃｈｌｏｒｉｃａｃｉｄｗａｓ
ａ
Ｍｅｔｈｏｄｓ：
１．Ｓｕｐｅｍａｔａｎｔ
ｉｓｏｃｒａｔｉｃａｌｌｙｅｌｕｔｅｄｕｓｉｎｇ
ｂａｓｅ—ｄｅａｃｔｉｖａｔｅｄＣ１８ｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈ１５
能水平及ＣＲＹ的某些临床症状密切相关，血液透析可显著改善尿毒
症患者外周血犬尿氨酸的代谢失衡。
ＩＪ
中文摘要
关键词：高效液相色谱法，犬尿氨酸，色氨酸，慢性肾功能衰竭，慢性。肾小球肾炎，尿毒症，血液透析
硕士学位论文
英文摘要
ＡＢＳＴＲＡＣＴ
ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ：
１．Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈ
ａ
ｓｉｍｐｌｅａｎｄｒａｐｉｄｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ
结果：１．血清标本内的ＫＹＮ和ＴＲＰ均分离良好，保留时间分别为３．５０和８．１０分钟。ＫＹＮ线性范围为０．０９８～４９１ａｍｏｌ／Ｌ，最低检测浓度为０．０２肛ｍｏｌ／Ｌ；平均回收率为９６．０２％，日内ＣＶ为２．３７％，日间ＣＶ为３．６６％。ＴＩ冲的线性范围为４．９～４９０ｕｍｏｌ／Ｌ。最低检测限为０．２０｝．ｔｍｏｌ／Ｌ，平均回收率为９９．２９％，日内ＣＶ为１．５０％，日间ＣＶ为
Ｓｈｉｅｌｄ
Ｃ１８色
谱柱（１５０ｍｍ×３．９ｍｍｉ．ｄ．，５９ｍ）分离：流动相为１５ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸钠一乙酸（含２．７％乙腈，ｐＨ３．６）溶液；流速１．０ｍｌ／ｍｉｍ紫外检测波长２２５ｎｍ；室温下测定；１０分钟内完成分析测定。ＫＹＮ和ＴＲＰ峰采用峰保留值比较法和叠加法定性分析，用外标法测峰面积进行定量分析。同时探讨了检测波长、流动相种类、流动相中有机相的比例以及蛋白沉淀剂等因素对分离度和灵敏度的影响，考察了其它５种氨基酸、多巴胺类物质对待测组分的可能干扰。２．测定健康成人（ｎ＝８６例）血清ＫＹＮ和ＴＲＰ含量，并计算ＫＴ比值，以９５％可信限界定相应参数的范围。３．测定慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）患者（ｎ＝３５例）、慢性肾小球。肾炎（ＣＧ）患者（ｎ＝３０例）血清ＫＹＮ、ＴＲＰ、肌酐（Ｃｒ）、尿素（Ｕｒ）及其它相关血液学参数，探讨慢性。肾病患者不同阶段血清ＫＹＮ和ＴＲＰ含量变化及其在相关肾病的鉴别诊断、治疗监测等方面的意义。同时测定尿毒症血液透析患者在接受血液透析前、后血清ＫＹＮ和ＴＲＰ含量变化，探讨血液透析在纠正尿毒症患者外周血犬尿氨酸代谢失衡中的价值。
中文摘要
摘要
目的：１．建立一种简单、快速的反相高效液相色谱一紫外检测
法（｝玎，ＬＣ—ｕｖ）测定血清中的犬尿氨酸（ＫＹＮ）和色氨酸（ＴＲＰ）。２．用该方法建立正常人血清ＫＹＮ含量和ＫＴ比值（ＫＹＮ／ＴＲＰ）参考值范围，并初步探讨测定血清ＫＹＮ和ＴＲＰ含量在慢性肾功能衰竭、慢性肾小球肾炎等疾病中的临床意义。方法：１．血清标本与等量５％（Ｖ／Ｖ）高氯酸溶液混合处理去除蛋白后离心取上清液２０９ｌ直接进样分析。用Ｓｙｍｍｅｔｒｙ
ｖａｒｉｏｕｓａｓｐｅｃｔｓｏｐｔｉｍａｌａｓｓａｙ
ｏｎ
ｏｐｅｒａｔｉｏｎ
ａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ａｓ
ｗｅｒｅｅｘａｍｉｎｅｄｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ，ｔｈｅ
ｔｏ
ｅｓｔａｂｌｉｓｈ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｓｕｃｈ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ｃｏｎｔｅｎｔｏｆ
ｏｒｇａｎｉｃｓｏｌｖｅｎｔｉｎｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ｐｒｅｃｉｐｉｔａｎｔｓａｎｄｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅ．２．ＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｓｅｒｕｍＫＹＮｂｙａｎｄＴＲＰｉｎｈｅａｌｔｈｙｃｏｎｔｒｏｌｓ
２．６５％。其它氨基酸如苯丙氨酸（Ｐ咖）、酪氨酸（ＴＹＲ）、犬尿喹啉
酸（ＫＹＮＡ）不Ｉ－－些含有苯环结构的生物活性物质如５。羟色胺（５．ＨＴ），肌酐（Ｃｒ）在本文的色谱条件下对ＫＹＮ和ＴＲＰ的测定均无干扰。２．８６例健康成人血清ＫＹＮ浓度为０．３６４～３．０２２１ａｍｏｌ／Ｌ，ＴＲＰ浓度为３４．６４２４６２．２７０ｐ．ｍｏｌ／Ｌ，ＫＴ比值为１１．００８～４７．５２８。不同年龄组之间，血清ＫＹＮ、ＴＲＰ含量及ＫＴ比值差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；性别之间，血清ＫＹＮ、ＴＲＰ含量及ＫＴ比值差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。３．与正常对照组相比，ＣＲＦ组、ＣＧ组患者血清ＫＹＮ含量显著升高、ＴＲＰ含量显著降低；与ＣＧ组相比，ＣＲＹ组患者血清ＫＹＮ含