sop无菌检查操作规程
sop无菌检查操作规程
sop无菌检查操作规程SOP无菌检查操作规程1. 目的本操作规程的目的是确保无菌检查操作的标准化和正确性，以保证无菌产品的质量和安全性。
2. 适用范围本操作规程适用于无菌产品的生产和质检过程中的无菌检查。
3. 责任与义务(1) 生产人员应确保在无菌检查操作中遵守本操作规程，并按照要求进行操作。
(2) 质检人员应按照本操作规程进行无菌检查，并确保检查准确性和可靠性。
(3) 监督人员应对生产和质检过程中的无菌检查进行监督，并及时发现和纠正操作不规范的情况。
4. 设备和试剂(1) 无菌工作台：具备净化和无菌过滤功能的工作台。
(2) 紫外线灯：用于灭菌工作台和无菌操作区域的紫外线照射。
(3) 无菌检查培养基：用于培养和检测无菌产品中的微生物。
(4) 无菌接种环：用于取样和转移样品至培养基。
5. 操作步骤5.1 环境准备(1) 打开无菌工作台并等待净化系统启动，确保工作台内部洁净无菌。
(2) 打开紫外线灯，照射工作台和操作区域20分钟，杀灭空气和表面的细菌。
(3) 把无菌检查培养基准备好，摆放在无菌工作台上。
5.2 样品准备(1) 取无菌接种环，焰烧消毒后待其冷却。
(2) 打开无菌产品包装，取出样品。
(3) 用消过毒的剪刀将样品切取一小块，果皮向内。
5.3 样品接种(1) 将取好的样品迅速转移到无菌工作台上的无菌检查培养基上。
(2) 将样品放在培养基的中央，轻轻压一下以确保样品与培养基接触。
(3) 焚烧消毒无菌接种环，接种环冷却后用它切取一部分培养基上样品。
5.4 培养(1) 将接种好的无菌检查培养基盖好，记录好样品的相关信息。
(2) 将培养基培养在恒温培养箱中，温度设置为适宜的培养温度。
(3) 根据培养基的类型，进行适当的培养时间。
5.5 结果判断(1) 在培养时间到达后，观察培养基上是否有细菌生长。
(2) 如果培养基上有细菌生长，表示样品不符合无菌要求。
(3) 如果培养基上没有细菌生长，表示样品符合无菌要求。
无菌检查法培养基的适用性检查
一、目的：建立无菌检查培养基适用性检查的标准操作规程，确保培养基的有效性。
二、适用范围：无菌检测用培养基适用性检查。
三、责任者：化验员、质监员、质控室主任、质保室主任。
四、程序：1 环境要求：无菌检查在洁净度100级单向流空气区域内进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。
单向流空气区与工作台面，必须进行洁净度验证。
2 培养基及其制备方法：培养基应适合需气菌、厌气菌或真菌的生长，均以115℃灭菌30分钟。
3 所有培养基均采用商品脱水培养基，临用时按使用说明配制，所用溶解用水均为纯化水，配制并分装好的培养基必须在当天(2小时内最佳)进行灭菌处理。
4 培养基的适用性检查无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基等应符合培养基的无菌无菌性检查及灵敏度检查要求。
5 培养基的无菌性检查每批制备好的培养基各随机抽取5支，营养琼脂培养基、需气菌、厌气菌培养基经30～35℃培养培养，霉菌培养基经20～25℃培养，培养14天，应无菌生长。
6 培养基灵敏度检查6.1 菌种培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌种的生物学特性。
1） 金黄色葡萄球菌[CMCC （B ）26 003]；2） 铜绿假单胞菌 [CMCC （B ）10 104]；3） 枯草芽孢杆菌 [CMCC （B ）63 501]；4） 生孢梭菌 [CMCC （B ）64 941]； 标 题 无菌检测培养基适用性检查规程编 码：SOP-CP-035-00 共 4 页 制 定 人审核人 批 准 人 生效日期 日 期 日 期日 期 修订日期起草部门 质控室 颁发部门 质保室 分发部门 质控室、质保室5）白色念珠菌[CMCC（F）98 001]；6）黑曲霉[CMCC（F）98 003]。
6.2 菌液制备接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物接种至硫乙醇酸盐培养基中，30～35℃培养18～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基中或改良马丁琼脂培养基上，23～28℃培养24～48小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成1ml含菌小于100CFU的菌悬液。
控制菌(大肠埃希菌)检查操作规程
控制菌（大肠埃希菌）检查操作规程1.目的建立一个控制菌大肠埃希菌控制菌大肠埃希菌检查标准工作程序，规范QC控制菌大肠埃希菌检查人员的控制菌大肠埃希菌检查的操作。
2.范围适用于本公司的口服制剂完成内包后外包前的中间体和局部给药制剂产品的内包装材料的控制菌大肠埃希菌的检测。
3.责任者QC控制菌大肠埃希菌检查人员；质量管理部4.内容4.1检测准备4.1.1 QC人员接到控制菌大肠埃希菌检查的《工作进程计划单》后，核对《取样指令》，确定控制菌大肠埃希菌检查所需容器具、试液、培养基等项目和数量，执行微生物检查准备工作操作程序和培养基配制操作规程，进行控制菌大肠埃希菌检查前的准备工作。
4.1.2 为了保证被检品在取样后规定的时间内完成检验，取样前应准备好检验需要的各种器皿（清洗→干燥→包裹）、培养基和稀释剂等（配制→分装→包裹），并灭菌备用。
4.2 供试液的制备4.2.1 供试液供试液是指按照供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法将供试品制成供试验用的均匀液体。
4.2.2 供试液的制备根据供试品的理化特性与生物需特性，采取适宜的方法制备供试液。
如果使用了乳化剂、分散剂、中和剂和灭活剂，其用量应证明是有效的，并对微生物的生长和存活无影响性。
4.2.2.1 可溶性液体供试品取供试品10ml，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为供试液。
可溶性液体制剂可用混合的供试品原液作为供试液。
4.2.2.2 非水溶性液体供试品油剂可先加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀，然后再加0.9%无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100m，混匀，作为供试液。
4.2.2.3 水溶性固体、半固体或黏稠性供试品称取供试品10g，置PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml中，用匀浆仪或其他适宜方法，混匀，作为1：10供试液。
必要时可加适量的无菌聚山梨酯80，并置水浴中适当加温使供试品分散均匀。
4.2.2.4 非水溶性供试品取供试品5g(5m1)，加入含溶化的（温度不超过45℃）5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45℃pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，边加边搅拌，使其充分乳化，作为1:20供试液。
无菌检查(薄膜过滤法)SOP
无菌检查SOP（薄膜过滤法）1.目的为规范无菌检查方法及无菌检查全过程的操作，最大限度防止试验操作过程造成的污染，确保结果准确。
2.范围本SOP适用于生物制品的中间产品（包括原液、纯化产物、半成品、生产中的液体、辅料等）、成品的无菌检查。
只要供试品性状允许，应采用薄膜过滤法。
3.定义无菌检查法系用于检查药典要求无菌的生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。
若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。
4.职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行；4.2.QA、QC组长、质量管理部经理负责本规程的审核；4.3.质量总监负责批准本规程；4.4.QA负责本规程执行的监督。
5.引用标准《中华人民共和国药典》2020年版三部6.材料6.1.无菌检查用物品、物料要求：所有物品、物料进入无菌室前，均应经过高压蒸汽灭菌（121℃40分钟，放灭菌指示卡）或180℃干烤2小时或其它经过验证的方法消毒后传入无菌室；如不能用前者消毒方式消毒的物品，须经消毒液浸泡、擦拭后传入无菌室。
6.2.无菌检查环境要求：应在环境洁净度万级下的局部洁净度百级的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。
6.3.仪器、设备与设施集菌仪、显微镜、台式灭菌器、无菌试验室（万级）、超净工作台（万级背景下的局部百级）：每月环境检测（沉降菌、浮游菌、尘埃粒子）合格后，方可使用。
20-25℃培养房或培养箱、30-35℃培养房或培养箱。
6.4.试验用具：洁净工作服（洁净底服、十万级工作服、万级工作服、鞋套）、工作鞋、口罩及帽子；无菌医用手套或一次性乳胶医用手套：试验前及试验过程中用消毒液浸泡消毒；封闭式集菌培养器（双针头、三联及单针头、三联）：薄膜孔径不大于0.45μm，直径约为 50mm。
根据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质。
手部微生物监测标准操作规程
一、适用范围1．评价医务人员洗手、卫生手消毒、外科手消毒的效果。
2．怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时.二、监测时机在接触患者前或进行诊疗活动前采样.三、采集方法i．被检人洗手或手消毒后，在接触患者前或进行诊疗活动前采样。
2．被检人将双手伸出,五指并拢。
3。
检查者取2支无菌棉拭子，并浸于含相应中和剂的无菌洗脱液中。
4．取_支棉拭子在一只手手指曲面，从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2),并随之转动采样棉拭予；按同样方法用另一支棉拭予涂擦另一只手。
5．剪去操作者手接触部位，将2支棉拭子投入10ral含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。
四、标本检测（一）带菌量检测(平皿倾注法)1．将采样管在混匀器上震荡20s或用力振打80次左右。
2．将无菌吸管分别吸取lmJ待检样品接种于2个直径为90mm无菌平皿中。
3．再加入已熔化的45—48℃的营养琼脂15．18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固。
4．将平皿置于(36±1)℃温箱培养48h，计数菌落数。
5．计算公式：细菌总数(cfu／cm2）=平板上菌落数×稀释倍数／60(cm2)（二）细菌种类鉴定1．将无菌增菌肉汤培养液试管置于（36±1)℃温箱培养24—48h。
2．若无菌增菌肉汤培养液试管浑浊,应根据实际情况选择血平板、中国蓝平板、双S平板、麦康凯平板或各种商用快速筛选平板进行细菌接种。
3．接种后将平板置于(36±1）℃温箱培养24—48h,挑取可疑菌落进行微生物学鉴定,必要时做药敏。
六、注意事项1．结果判定：卫生手消毒后细菌总数应≤10cfu／cm2；外科手消毒细菌总数应≤5cfu／cm2。
2．应根据所用方法,选择含相应中和剂的无菌洗脱液.3．倾注时温度必须控制在45—48℃，温度过高可致细菌死亡，过低则影响倾注效果。
4，当怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时,监测目的在于考察实际工作中医务人员手卫生状况，虽然同样在接触患者前或进行诊疗活动前采样,但医务人员不一定进行了手卫生。
无菌检验标准操作规程(SOP)
目的：制定无菌检验标准操作规程，确保检验操作正确。
范围：本标准适用于本公司大容量注射剂无菌检验操作。
责任者：质管部、化验室主任、QC佥验员内容：1、标准依据：《中国药典》2015年版二部附录XI H。
2、简述：无菌检查方法系用于检查药品是否无菌的一种方法。
检查项目包括需气菌、厌气菌及真菌检查。
若供试品符合该项检查方法的有关规定，仅表明了在该检验条件下未发现微生物污染。
3、环境要求：该项检查应在环境洁净度万级（C级）背景下的局部百级（A级）的单向流区域内或隔离系统中进行。
其全过程必须严格遵守无菌操作。
防止微生物污染，但所采取的措施不得影响供试品中微生物的检出。
操作前环境洁净度应经验证。
日常检验需对试验环境进行监控。
5、方法验证：进行该项检查前应按照《无菌检查方法验证规程》确认该方法的适用性。
4、人员要求：无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术培训。
6检验数量及检验量：6.1、接种每种培养基所需的最少检验数量：2%或10个（取较少者），供试品无菌检查若采用薄膜过滤法，应增加1/2的最小检验数量作阳性对照用；若采用直接过滤法，应增加供试品无菌检查时每个培养基容器接种的样品量作阳性对照用。
6.2、每支供试品接入每种培养基的最少量：半量（100ml w V< 200ml），采用薄膜过滤法时，检验量应不少于直接接种的供试品总接种量，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。
7、细菌培养温度为30〜35C,真菌培养温度为23〜28C。
8、仪器用具：垂直层流超净工作台、生化培养箱、电热恒温水浴箱、显微镜、离心机、双碟、试管、三角瓶、刻度离心管、注射器（针头）、剪刀、镊子、注射器盒、75%酒精棉球、紫外光灯365nm真空泵、一次性使用集菌培养器。
9、消毒剂配制：9.1、75%乙醇溶液（配制酒精棉球用）。
9.2、0.2 %新洁尔灭溶液（配制消毒棉球用）。
9.3、2%来苏尔溶液（配制消毒棉球用）。
制剂车间无菌区清洁消毒的标准操作规程
1 目的：为保证制剂车间无菌区及各部位的清洁消毒质量，特制定此标准操作规程。
2 适用范围：本文件适用于制剂车间无菌区各部位的清洁消毒。
3 责任人：所有负责制剂车间无菌区各部位清洁消毒的人员负责执行本文件。
4 规程4.1 清洁顺序在整个区域“由里往外往外退出式”进行清洁消毒，即先灌装间，接着轧盖间、过滤间、净物存放间、工具间，然后暂存间、物流气闸、走廊，更衣间、换鞋间，最后轧盖间外的气闸、脱衣间的顺序。
在同一房间内，遵循“从上往下”的顺序，即先顶棚、高效空气过滤器扩散板、A/B级层流罩龙骨、有机玻璃防护隔断、PVC软帘、灯具、应急灯，接着墙面、门、台面、温湿度计、钟、电话、传递窗、挂衣钩、穿衣镜、丹尼尔自动杀菌净手器、侧回风口、暂存柜、废物箱，最后地面。
4.2 所用洁具及清洁剂、消毒剂的种类洁具为经高压灭菌后的洁净区专用抹布、拖把等；清洁剂为经过滤除菌后的注射用水；消毒剂为《消毒剂的管理规程》中所规定的2种杀菌去污剂和1种消毒剂。
4.3 清洁用具的处理4.3.1 清洁消毒之前的处理按《制剂车间无菌区人员进出的标准操作规程》进入该区域的暂存间，将经高压除菌后的各标识对应的洁净区专用抹布及拖把等从挂钩上一一拿下来，用经过滤除菌后的消毒剂浸泡5分钟，到时后取出，并尽量拧干，用以对该区域内的各部分进行消毒擦拭，待消毒剂在物品表面停留10分钟后，用经过滤除菌后的注射用水润湿的洁具再对该区域内的各部分擦拭一遍。
4.3.2 清洁消毒之后的处理洁具跟随清洁消毒人员从最后消毒的更衣间、换鞋间逐步退出制剂车间无菌区，经过C级物流通道传入C级区的洁具间，然后按照《清洁工具清洁消毒的标准操作规程》处理。
4.4 清洁消毒方法整个区域关闭通风，把装有符合消毒剂管理程序的相应消毒剂的喷雾瓶接到喷雾器上，对该区域内的各部分进行喷雾，喷雾完后保持20分钟，再进行清洁消毒。
4.4.1 顶棚的清洁消毒擦拭顺序为从内向外，擦拭方向为从左向右直至将顶棚擦拭干净，不要有遗漏的地方。
无菌线COP、SOP 操作作业指导书
无菌线COP、SOP 操作作业指导书1.目的使操作员了解本岗位工作程序，熟悉生产设备，各操作员分工明确，细化操作步骤，确保生产正常进行。
2.适用范围适用于公司的所有灌装机操作员。
3.职责3.1 灌装机操作员，按此规范操作执行作业。
3.2 QC负责品质检查。
3.3 领班及QC主任负责监督和审核。
4.定义无5.程序5.1 操作前准备5.1.1 检查软水，压缩空气，蒸气的到位情况，（软水压力不低于 3bar,压缩空气不低于 6bar,蒸汽压力不低于 8bar）。
5.1.2 检查控制电源动力电的状况，到位则打开设备。
检查主机控制面板上是否有报警信号，如有，排除报警，复位。
5.2 生产中操作5.2.1 内喷的混合物是由 RO 水配比 OA150 及 ABF 加之以蒸汽以水雾状形式喷出，浓度要求在2520~3360ppm 范围内，外喷及盖槽消毒的混合物是由KF系统供给的无菌水配比 OA150，外喷还需添加 ABF，外喷浓度 1350~1800ppm，喷淋于瓶身，盖槽浓度 1080~1440ppm，浸泡瓶盖消毒。
内喷的配比在 Tank2 完成，外喷的配比在回收罐完成，盖槽的配比在 Tank1完成。
5.2.2 必须保证化学品站的 OA150 量及 ABF 量足够用。
并且配合浓度显示仪对其中 PAA 的浓度进行滴定，并对显示仪做出修正（当滴定浓度与显示浓度差值超过 100ppm 时，以滴定浓度为准）。
如发生浓度超出要求浓度时，需进行相应调整，例如进入操作屏更改设定值或调整水阀等，并做好相应记录。
5.2.3 生产中如出现任何报警，均需及时做出处理，并看是否有影响到产品品质的可能。
5.3 生产结束后操作5.3.1 需要进行 COP 的操作， COP分为酸性COP及碱性 COP，碱性 COP 每次生产结束后均需做一次，而酸性COP一周做一次即可。
COP的进行方式为在线添加，将 T-200（或 T-500）无菌水进行混合。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程标题：无菌实验室操作规程引言概述：无菌实验室是进行微生物实验和培养的重要场所，严格的操作规程能够确保实验结果的准确性和可靠性。
本文将详细介绍无菌实验室操作规程，帮助实验人员正确操作，避免污染和误操作。
一、实验室准备1.1 确保实验室环境无菌：实验室内应经常进行消毒，保持空气清洁，避免微生物污染。
1.2 准备实验材料：提前准备好所需的培养基、试剂和器具，确保其无菌。
1.3 检查设备状态：检查培养箱、平台振荡器等设备是否正常运转，确保实验顺利进行。
二、个人操作规范2.1 穿戴实验服和手套：进入实验室前需穿戴干净的实验服和手套，避免外部微生物污染。
2.2 洗手消毒：进入实验室后，及时洗手并进行消毒，避免手部细菌污染实验物品。
2.3 避免交叉污染：每次操作前应更换手套，避免不同实验之间的交叉污染。
三、培养基制备3.1 精确称量：按照配方准确称量培养基成分，确保培养基质量准确。
3.2 消毒处理：将配制好的培养基装入试管或培养皿中，进行高温高压消毒处理，杀灭其中的微生物。
3.3 冷却保存：待培养基冷却后，放置在无菌条件下保存，避免污染。
四、微生物接种4.1 操作迅速：在无菌条件下，迅速将微生物接种到培养基上，避免空气中的细菌污染。
4.2 合理布局：将接种好的培养皿放置在培养箱中，合理布局，避免交叉污染。
4.3 注意观察：定期观察培养皿内微生物的生长情况，及时调整培养条件。
五、实验室清洁5.1 定期消毒：实验室设备和台面等应定期进行消毒，避免细菌滋生。
5.2 清洁整理：实验结束后，及时清洁实验台面和设备，保持整洁。
5.3 废弃物处理：实验后的培养皿、试管等废弃物应按规定进行处理，避免细菌外泄。
结论：无菌实验室操作规程对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用，实验人员应严格按照规程操作，确保实验过程的无菌性和准确性。
医院感染预防与控制(标准操作规程sop)
医院感染预防与控制(标准操作规程sop)1 、无菌物品储存与发放管理一、储存 1、灭菌后物品应分类、分架存放在无菌物品存放区。
一次性使用无菌物品应去除外包装后，进入无菌物品存放区。
2、物品存放架或柜应距地面高度为 20-25cm，离墙 5-10cm，距天花板 50cm。
宜使用开放式的物架。
3、物品放置应固定，设置标识。
接触无菌物品前应洗手或手消毒。
4、消毒后直接使用的物品应干燥、包装后专架存放。
5、有效期：（1）无菌物品存放区达到相应环境标准时（相对湿度＜70%，温度＜24℃），使用纺织品材料包装的无菌物品有效期宜为 14 天；未达到环境标准时，有效期宜为 7 天。
（2）医用一次性纸袋包装的无菌物品，有效期宜为 1 个月；使用一次性医用皱纹纸、无纺布、纸塑袋以及硬质容器包装的无菌物品，有效期宜为 6 个月。
二、发放 1、应遵循先进先出的原则。
2、应确认无菌物品的有效性，不得发出散包、湿包、落地包、不洁包、失效及标识不明确、灭菌不合格的包。
植入物及植入性手术器械应在生物监测合格后，方可发放。
1/ 33、发放记录应具有可追溯性，应记录一次性使用无菌物品出库日期、名称、规格、数量、生产厂家、生产批号、灭菌日期、失效日期等。
4、运送无菌物品的器具使用后，应清洁处理，干燥存放。
2 、无菌物品下送标准操作规程一、准备 1、操作者：穿工作服，做好手卫生。
2、用物：物品发放清单、无菌物品下送车、快速手消毒剂。
二、操作 1、操作过程中，应遵守手卫生操作规程。
2、检查无菌物品质量，核对领用科室及无菌物品名称规格、数量等，发现不合格的物品及时更换。
核对完毕将无菌物品放至无菌物品下送车，按下送顺序合理放置。
3、无菌物品下送车不得进入污染电梯及污染区域，运输过程中保持下送车的密闭性。
到达科室后卫生手消毒，与科室护士核对无菌物品质量、名称、规格、数量等，并双方签名备查。
4、运送无菌物品的器具使用后，应清洁处理，干燥存放。
3 、急诊科医院感染管理一、建筑布局 1、应设单独出入口、医疗区和支持区。
无菌检查法标准操作程序
1目的建立一个无菌检查法标准操作程序，保证实验的准确性、可靠性。
2范围适用于原料、辅料及成品的无菌检查。
3职责微生物检验员遵照执行。
4内容无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。
若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。
无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。
单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。
隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。
日常检验还需对试验环境进行监控。
4.1 培养基硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌的培养；胰酪大豆胨液体培养基用于真菌和需氧菌的培养。
4.1.1 培养基的制备及培养条件培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基或成品培养基。
配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。
制备好的培养基应保存在2〜25°C、避光的环境，若保存于非密闭容器中，一般在3 周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。
4.1.1.1 硫乙酵酸盐流体培养基胰酪胨15. 0g 氯化钠 2. 5g酵母浸出粉 5. 0g 新配制的0. 1 % 刃天无水葡萄糖 5.0g 青溶液 1.0mlL-胱氨酸0. 5g 琼脂0. 75g硫乙醇酸钠0.5g 水1000ml(或硫乙醇酸）（0.3ml)除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节p H 为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节p H , 使灭菌后在25℃的p H 值为7.1 土0.2。
分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色)不超过培养基深度的1/2。
无菌试验规程
大型无菌试验标准操作规程一. 目的：验证UHT杀菌机、无菌罐、灌装机等设备处理过的物料所达到的商业无菌的质量要求。
二. 范围：UHT杀菌机、无菌罐、无菌灌装机三. 参考资料：Tetrapak 无菌测试手册四. 定义AQL Acceptable quality level的简称，可接受产品质量水平QACP Quality assurance control point 的简称，解释为质量保障控制点。
SOP Standard operational procedure 的简称,解释为标准操作规程。
五. 程序、内容A）超高温杀菌机+无菌灌装机测试1. 测试产品品种：必须是白奶、花色奶类的中性产品，不可以是酸性或乳饮料类产品。
2．测试试验过程：总共做3批保温试验第1批:杀菌机、灌装机分别在清洗、升温形成无菌环境后，杀菌机进料灌装机灌注生产完成第1批保温试验。
第2批:在完成第1批保温试验后可以连续让杀菌机、灌装机分别在清洗、升温，杀菌机进料灌装机灌注生产完成第2批保温试验。
第3批:在完成第2批保温试验后必须间隔24小时后方可进行第3批试验，待满足间隔时间规定后让杀菌机、灌装机分别在清洗、升温，杀菌机进料灌装机灌注生产，完成试验要求生产的数量。
3 试验数量基于90%的可信度上：必须做够3批保温试验产品，必须每批每台灌装机生产≥2400包基于95%的可信度上：必须做够3批保温试验产品，必须每批每台灌装机生产≥3500包4 试验评判：每台灌装机每批保温试验产品的坏包数不超过1包，否则判定此批保温试验不合格，判定此批保温试验不合格需要重新再做一批。
B）超高温杀菌机+无菌罐+无菌灌装机测试1．测试产品品种：必须是白奶、花色奶类的中性产品，不可以是酸性或乳饮料类产品。
2 测试试验过程：第1批和第2批:杀菌机、无菌罐、灌装机分别在清洗、升温，杀菌机先进第1批料液并直接向灌装机供料，待灌装机将第1批保温试验生产完毕后，灌装机停机进行中间清洗，第1批保温实验完成。
医疗器械无菌检查SOP
医疗器械无菌检查SOP1、目的：制定本司所有产品无菌检查操作规程。
2、范围：适用于本公司产品无菌检查。
3、职责：检验员负责实施，质量部经理监督实施。
4、内容4.1 操作要求4.1.1 与供试液接触的所有器具应采用可靠地灭菌方法，置压力蒸汽锅内121℃， 30min 。
或置电热干燥箱内160℃，2h。
4.1.2 超净工作台应符合局部洁净度100单向流空气区域要求。
无菌室在消毒处理完毕后，应检查空气中的菌落数，方法如下：取培养皿，无菌操作注入融化的培养基约20ml，在35℃培养48h证明无菌后取3支培养皿在超净工作台平均位置上打开上盖，暴漏30min后置35℃培养48h后取出检查，3支培养皿上生长的菌落数平均不应超过一个。
4.1.3 无菌检查过程中应检查空气中的菌落数，方法同 4.1.2.在试验开时打开培养皿盖，至试验结束后盖好置35℃，培养培养48h，结果应符合4.1.2要求。
4.2 培养基配制4.2.1 硫乙醇酸盐流体培养基：称取硫乙醇酸盐流体培养基29.3g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热至沸腾完全溶解，分装试管.121℃高压蒸汽灭菌15min。
4.2.2 改良马丁培养基:称取改良马丁培养基28.5g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管，115℃，蒸汽灭菌30min。
4.2.3 营养琼脂培养基：称取营养琼脂培养基32.0g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角锥形瓶，121℃，高压灭菌15min。
4.2.4 营养肉汤培养基：称取营养肉汤培养基18.0g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热至蒸汽灭菌15min，冷却至常温，备用。
4.3 培养基适用性检查4.3.1 无菌性检查：每批培养基随即抽取不少于10支。
5支置35℃，另5支置25℃培养14天，均应无菌生长。
4.3.2 灵敏度检查：培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5 代，（从菌种冷冻中心获取得的冷冻干燥菌种为第0代），试验菌应采用适宜的菌种保存技术进行保存，以保证菌株的生物学特性。
SOP-ZS-SQ-018 无菌隔离器清洁标准操作规程
目的建立无菌隔离器清洁标准操作规程，使操作人员对设备的清洁操作标准化、规范化，保证设备卫生符合工艺要求，同时防止生产过程中的污染与交叉污染。
范围适用于无菌隔离器的清洁操作。
责任灌装岗位班长负责本规程的起草、修订，设备部负责人及质量保证部部长负责本规程的审核。
质量负责人负责本规程的批准。
灌装岗位人员、轧盖岗位人员落实，QA人员、及车间主任监督实施情况。
内容1 清洁周期1.1 每班/每批：使用后对设备外表面进行清洁、消毒。
1.2 超过有效期：对设备内部及外表面进行清洁、消毒。
1.3 设备维修保养后：对维修部位进行清洁且对外部消毒。
2 清洁地点：胶塞、铝盖存放室（ZS-B008）3 清洁工具：洁净布、清洁盆、镊子4 清洁剂、消毒剂及配制方法。
4.1 清洁剂名称：注射用水。
4.2 消毒剂：75%乙醇。
4.3 消毒剂的使用：设备内外表面、及附属部件用75%乙醇。
4.4 消毒剂配制方法：见《清洁剂、消毒剂及试剂配制标准操作规程》[SOP-SC-QT-005]。
5 清洁方法及清洁内容5.1 改填“设备状态标识”5.1.1 在设备状态标识的“清洁中”划√，将标识中“正常”、“运行”、“已清洁”、“完好”的√划成√。
“清洁结束时间”、“有效期至”项划删除线。
5.2 将白色洁净布放在清洁盆中，分别用注射用水和75%乙醇浸湿，拧至不滴液后统一使用。
5.3 每班/每批的清洁：5.3.1 每班/每批结束后，用75%乙醇润湿的洁净布擦拭设备内表面两遍。
洁净布应沿同一方向擦拭两遍，本道擦痕应覆盖上一道擦痕的1/4，不允许漏擦。
5.3.2 每班/每批结束后，用75%乙醇润湿的洁净布擦拭设备外表面两遍。
洁净布应沿同一方向擦拭两遍，本道擦痕应覆盖上一道擦痕的1/4，不允许漏擦。
5.3.3 对不易清洁的地方，可用镊子夹住洁净布清洁消毒。
5.3.4 使用前打开紫外灯照射30分钟。
5.4 超过有效期：清洁同每日清洁。
5.5 设备维修后，设备小修后：对维修部位用75%乙醇润湿的洁净布擦拭两遍。
无菌检查标准操作规程
范围：无菌检查法包括直接接种法和薄膜过滤法。
前者适用于非抗菌作用的供试品，后者适用于有抗菌作用的或大容量的供试品。
职责：检验室对本规程的实施负责正文：1.操作前准备1.1试验设备、仪器用具1.1.1开放式滤器、真空泵、抽滤瓶1.1.2恒温培养箱(30℃~35℃)、生化培养箱(20℃~25℃)恒温水浴1.1.3高压蒸汽灭菌器、电热恒温干燥箱(250℃)1.1.4显微镜1.1.5玻璃器皿：试管、锥形瓶、量筒、培养皿(φ90mm)、刻度吸管(1、5、10ml)、注射器(5、10、20、30ml)、针头——洗净、晾干，用牛皮纸包扎严密，121℃蒸汽灭菌30分钟。
1.1.6手术镊、剪——160℃～180℃干烤2h。
1.2供试品等的处理供试品试验用盘、试管架等进入无菌室之前用消毒剂擦试。
1.3按无菌衣服的着装程序穿戴好无菌衣、帽、鞋。
2.检查2.1直接接种法2.1.1供试品的制备，按规定量取供试品混合。
2.1.2接种——取备妥的供试品，以无菌操作将该供试品分别接种于需、厌气菌培养基6管，其中1管接种金黄色葡萄球菌对照用菌液1ml作阳性对照，另接种于真菌培养基与5管，轻轻摇动，使供试品与培养基混合。
2.1.3培养——需、厌气菌培养基管置30-35℃培养箱中培养7日、真菌培养基管置20-25℃培养箱中培养7日，在培养期间应观察并记录是否有菌生长，阳性对照管在24小时内应有菌生长，如在加入供试品后，培养基出现浑浊，培养7天后，不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中或斜面培养基上继续培养，细菌培养2日真菌培养3日，观察是否再出现浑浊或斜面有无菌生长，或用接种环取培养液涂片、染色，用显微镜观察是否有菌。
——有轻微抑菌性的供试品可加入扩大量的每种培养基中，使供试品稀释至不含抑菌活性的。
2.2薄膜过滤法2.2.1抽滤——按该药品项下规定的方法处理后，加入0.9%无菌氯化钠溶液或其他适宜的溶液至少100ml的适当容积的容器中混合后，通过装有孔径不大于0.45μm的薄膜过滤器，然后用0.9%无菌氯化钠溶液或其他适宜的溶液冲洗滤膜至阳性对照菌正常生长为度。
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1.目的：建立无菌检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。
2.范围：适用于本厂质监科化验室对本厂生产的注射剂进行无菌检查。
3.责任：化验员有责任按本操作规程操作，并对检验结果负责。
4.定义：无菌检查法系指检查药品是否无菌的一种方法。
5.内容：5.1无菌操作设备：无菌操作室或超净工作台，无菌衣、口罩、帽子、消毒鞋、酒精灯等。
5.1.1无菌室分无菌操作室和缓冲间。
在缓冲间内应有洗手盆、干手器、无菌衣放置架及挂钩、拖鞋等。
无菌操作室应具有空气除菌过滤的层流装置，局部洁净度100级超净工作台。
缓冲间及操作室内均设置能达到空气消毒的紫外光灯和照明灯，操作室或工作台应保持空气正压。
5.1.2无菌室应每周和每次操作前用0.1％新洁尔灭或2％甲酚液擦拭操作台及可能污染的死角，开动无菌空气过滤器及紫外光灯杀菌1小时。
在每次操作完毕，同样用2％甲酚或0.1％新洁尔灭溶液擦拭工作台面，用紫外光灯杀菌半小时。
5.1.3无菌室的无菌程度检查：无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数。
取直径90mm双碟，在接种室内点燃酒精灯，在酒精灯旁，以无菌操作，将双碟半开注入溶化的营养琼脂培养基约20ml，制成平板：在35-37℃预培养48小时，证明无菌后将3个平板以无菌方式带入无菌操作间的洁净区域左、中、右各放1个；打开碟盖扣置，平板在空气中暴露30分钟后将盖盖好，置35-37℃培养48小时，取出检查，3个平板上生长的菌落数相加总数不得超过10个。
无菌操作台面或超净工作台应定期请有关部门检测其洁净度，应达到100 级（一般用尘埃粒子计数仪），检测尘埃粒径≤5μm的粒数不得超过3.5个／升；空气流量应控制在0.75-1.0m3/s；细菌菌落数平均<1个，可根据无菌状况定期置换过滤器。
5.1.4无菌室内应准备好盛有消毒用5％甲酚的玻璃缸、酒精灯、火柴、镊子、75％酒精棉及拖鞋等。
5.2仪器、用具：5.2.1真空泵、恒温培养箱、生物显微镜、托盘天平（精度0.1g）、抽滤瓶（500ml）、三角瓶（100、500 ml）、移液管（1、10ml）、注射器（要求规格）、试管、双碟（9cm）、注射针、镊子、剪刀、白金耳、橡皮管、纱布、棉花（原棉）、不锈钢吸管筒、接种环、微孔滤膜（直径约5cm），孔径应在0.45±0.02μm )载玻片、洒精灯、取样勺、吸耳球、喷雾瓶。
5.2.2用具的包扎：5.2.2.1移液管在移液管上端管内,松松地塞进少许原棉,然后放入不锈钢灭菌筒内。
5.2.2.2试管在管口塞上纱布棉塞。
5.2.2.3无菌衣、裤、帽、口罩将洗净的衣裤、帽子、口罩配套后装入布袋，扎紧袋口，再用牛皮纸包好。
5.2.2.4注射器洗涤干净的注射器及注射针头装配好后，放入垫有纱布的带盖容器内（饭盒）一层层放好，上面盖上纱布，然后盖上容器的盖子，用牛皮纸包好。
5.2.2.5滤器将检验合格后微孔滤膜先有水中浸泡湿润，取出后固定在细菌过滤器的滤板上，滤板下、滤膜上均用耐高温垫圈垫好，上好滤器。
在灭菌前滤器的螺勿拧太紧，滤器上口用8层纱布及牛皮纸包扎，装妥后放入容器内，再将盛滤器的容器盖好盖子，用牛皮纸包扎。
5.2.3用具的灭菌：将包扎好的用具，在121±0.5℃蒸汽灭菌柜中灭菌30分钟，物品取出时切勿立即置冷处，以免急速冷却灭菌物品内蒸汽冷凝造成负压，易致染菌，应置温箱或或加温烘干。
5.3培养基、试剂：5.3.1一般采用商品干燥培养基，临用时按照使用说明书进行配制，需注意培养基的pH值应符合规定，否则必须校正后，灭菌使用。
使用前，按要求分装灭菌好的细菌培养基须经30-35℃培养48小时，真菌培养基须经20-25℃培养72小时，证明无菌生长后方可使用。
制备的需气菌、厌气菌培养基应半个月内用完，在供试品接种前，培养基指示剂氧化层的颜色不得超过培养基深度约1/5，否则须经水浴煮沸加热，只限加热一次。
5.3.2革兰氏碘液：先用3-5ml蒸馏水溶解2.0g碘化钾，再加入1.0g碘片，搅拌溶解后，加蒸馏水稀释至300ml，摇匀。
置密闭棕色瓶中备用。
5.3.3结晶紫染色液：将结紫1.0g溶解于20ml95%乙醇中后，与80ml1%草酸铵溶液相混合，静置48小时使用。
此液稳定，置密闭的棕色瓶中可储存数月。
5.3.4沙黄染色液：将0.2g沙黄溶解于10ml95%乙醇中，待完全溶解后再加蒸馏水至100ml。
5.3.5生理盐水：称取9g氯化钠，加水1000ml溶解，分装后于121±0.5℃湿热灭菌30分钟。
供作稀释剂用。
5.3.6 75%乙醇量取无水乙醇75ml,加水稀释至100ml，摇匀，即得。
5.3.7 0.1%新洁尔灭：量取5%新洁尔灭20ml，加水稀释至约1000ml，摇匀，即得。
5.4培养基灵敏度检查：5.4.1新购的干燥培养基或采用不同牌号原材料的新鲜培养基，其质量均应符合灵敏度检查要求。
(1)取藤黄微球菌[Micrococcus luteus CMCC（B） 28001］的营养琼脂斜面和白色念珠菌[Candida albicans CMCC（F）98001］的真菌培养基琼脂斜面的新鲜培养物，分别用0.9%无菌氯化钠溶液制成均匀的菌悬液；取生孢梭菌[Clostridium sporogenes CMCC（B）64941]不含琼脂的需气、厌气培养基新鲜培养物，用灭菌毛细管将其吸至灭菌离心管内，离心，弃去上清液，沉淀菌体用0.9%无菌氯化钠溶液制成均匀菌悬液。
然后以10倍系列稀释后，制成1ml中含10-100个菌并计数。
(2)取藤黄微球菌、生孢梭菌的需气、厌气培养基新鲜培养物，白色念珠菌的真菌培养基琼脂斜面的新鲜培养物，取接种至霉菌培养基内，20-25℃用0.9% 无菌氯化钠溶液作10倍稀释，制成1ml中含10-100个菌并计数。
将藤黄微球菌的上述(1)或(2)的稀释液各1ml，分别接种至每管装量为9ml 的需气、厌气菌培养基3管，生孢梭菌的上述(1)或(2)的稀释液各1ml，分别接种至每管装量为12ml的需气、厌气菌培养基3管，白色念珠菌的上述(1)或(2)的稀释液各1ml，接种至每管装量为9ml的真菌培养基3管，以未接种的培养基作对照，按规定的温度培养5天并逐日记录结果。
结果判定：以每株菌接种后的培养基不得少于2管呈现生长，即该培养基的灵敏度检查符合要求。
5.4.2配制的培养基应在凉暗处保存，一般不得超过2周，临用前细菌和霉菌培养基分别经30-35℃和20-25℃培养不少于48小时和72小时，证明无菌生长后方可使用。
5.4.3需气菌、厌气菌培养基在试管中装量高度不得少于7Cm，其指示剂氧化层不得超过培养基深度的1／5，否则须经水浴煮沸10分钟，但只限加热一次。
无菌试验培养时间结束时，指示剂氧化层应不超过培养基深度的1／2。
5.5对照用菌液的制备：5.5.1试验用菌种、菌种的复苏、菌种的接种与保存等均应按照“抗生素微生物检定法”标准操作规程项下操作。
5.5.2金黄色葡萄球菌菌液用接种环取金黄色葡萄球菌[Staphy-lococcusaureus CMCC（B）26003]的营养琼脂斜面新鲜培养物少许，接种至营养肉汤培养基内，在30-35℃培养16-18小时后，用灭菌生理盐水稀释成1:106 5.5.3生孢梭菌菌液用接种环取生孢梭菌[CMCC（B）64941]的需气菌、厌气菌培养基新鲜培养物1白金耳，接种至相同培养基内，在30-35℃培养18-24小时后，用灭菌生理盐水稀释成1:106。
5.5.4白色念珠菌菌液用接种环取白色念珠菌[CMCC（F）98001]的真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物1白金耳，接种至真菌培养基内，在20-25℃培养24小时后，用灭菌生理盐水稀释成1:105。
5.5.5上述制备的菌液，一般当日使用。
5.6进入无菌室的操作要点：5.6.1根据试验程序,将用具物品搬入缓冲间,打开紫外光灯和空气过滤装置并使其工作1小时以上。
5.6.2操作人员用肥皂水刷洗双手,关闭缓冲间紫外光灯,进入缓冲间内,关闭第一层门,用2%来苏尔或0.1%新洁尔灭溶液洗双手,用消毒毛巾擦干,换上无菌衣、帽、口罩及消毒鞋。
5.6.3关闭无菌室内紫外光灯，进入第二层门并将用具搬至无菌室内，关闭无菌室门。
5.6.4凡进入无菌室后不应再外出取物品，因此，在每次试验中所用物品必须计划好，并准备好备用物品。
从进入第一层门直至无菌室内，随操作人员的进入应喷雾2%来苏尔或0.1 %新洁尔灭溶液。
5.7检查法：5.7.1无菌检查法包括：直接接种法和薄膜过滤法。
前者适用于非抗菌作用的供试品；后者适用于有抗菌作用的或大容量的供试品。
5.7.2操作时，应先用0.1%新洁尔灭浸泡或擦拭容器表面后，以无菌的方法取内容物。
5.7.3凡无菌检查中，均应取相应溶剂和稀释剂同法操作，作阴性对照。
5.7.4供试品制备：用灭菌镊取出注射器，在火焰旁将针芯插入针管并安上针头，盖为橡皮塞时，用注射器在已消毒好的橡皮塞中心位置刺入吸取药液。
按规定须稀释或灭活的供试品，可直接或将瓶内供试液抽出至灭菌玻璃容器内进行灭活处理并稀释至规定的体积和浓度；抽取瓶中内容液体时，应将供试品倒置并使针头在液面下。
5.7.5直接接种法：按规定量取供试品，以无菌操作将该供试品分别接种于需气菌、厌气菌培养基6管，其中1管接种金黄色葡萄球菌液1ml，作阳性对照，另接种于真菌培养基5管。
轻轻摇动，使供试品与培养基混合。
需气菌、厌气菌培养基管置30-35℃、真菌培养基管置20-25℃培养7日。
在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。
阳性对照管在24小时内应有菌生长，如在加入供试品后，培养基出现浑浊，培养7天后，不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养液适量转种至同种新鲜培养基中或斜面培养基上继续培养，细菌培养2日，真菌培养3日，观察是否再出现浑浊或斜面有无菌生长，或用接种环取培养液涂片，染色，用显微镜观察是否有菌。
5.7.6薄膜过滤法：将微孔滤膜过滤装置、抽滤瓶、排气管与真空泵相连，真空泵可置无菌室外。
取规定量供试品，按规定的方法处理后，加入0.9%无菌氯化钠溶液100ml 中，混合后，通过装有孔径不大于0.45μm 的薄膜过滤器，减压抽干后，用0.9%无菌氯化钠溶液冲洗滤膜3次，每次至少100ml，取出滤膜分成3等份，分别加入上述二种培养基中，按规定温度和时间培养。
阳性对照管应根据供试品特性加入相应对照菌液1ml（抗细菌药物，以金黄色葡萄球菌为对照菌；抗厌氧菌药物，以生孢梭菌为对照菌；抗真菌药物，以白色念珠菌为对照菌）。
阳性对照管细菌应在培养24-48小时，真菌应在培养24-72小时有菌生长。
5.8结果判断：第7页/共7页当阳性对照管显浑浊并确有菌生长，阴性对照管呈阴性时，可根据观察所得的结果判定：如需气菌、厌气菌及真菌培养基管均为澄清或虽浑浊但经证明并非有菌生长，均应判为供试品合格；如需气菌、厌气菌及真菌培养基管中任何1管显浑浊并确证有菌生长，应重新取2倍量供试品，分别依法复试，除阳性对照管外，其他各管均不得有菌生长，否则应判为供试品不合格。