葡萄球菌的鉴定
实验金黄色葡萄球菌的检验
实验金黄色葡萄球菌的检验实验5金黄色葡萄球菌的检验1目的和要求（1）掌握金黄色葡萄球菌的检验方法（2）了解金黄色葡萄球菌各检验步骤的依据及原理2基本原理金黄色葡萄球菌进入人体内，可引起局部的痈疾和蜂窝组织炎，还可以引起肺炎、心肌炎、骨骼炎、肾盂肾炎等系统化脓性感染，甚至可发展成败血症。
此外，食品中生长金黄色葡萄球菌是食品卫生中的一种潜在危险，因为金黄色葡萄球菌在是中会产生肠毒素，食用后将引起食物中毒，这在我国细菌性食物中毒事件中，仅次于沙门氏菌和副溶血弧菌。
因此，检验食品中金黄色葡萄球菌是实际意义。
绝大多数金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上产生金黄色色素，菌落周围有透明的溶血圈，在厌氧条件下能分解甘露醇产酸，产生血浆凝固酶和耐热的DNA 酶。
3实验材料3.1检样乳与乳制品（如奶粉、消毒乳）、肉制品、饮料3.2菌种金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌斜面培养物。
3.3培养基7.5%氯化钠肉汤、肉浸液肉汤、血琼脂平板、Baird-Parker氏培养基3.4试剂与染色剂无菌生理盐水、兔血浆、革兰氏染色液等。
3.5仪器与其他用具无菌吸管（1mL、5、10）、无菌试管、载玻片、接种环、酒精灯、显微镜、均质器、恒温箱等。
4检样程序5操作步骤5.15.1.1样品的处理称取25g样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min。
若样品为液态，吸取25mL样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌锥形瓶(瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠)中，振荡混匀。
5.1.2增菌和分离培养将上述样品匀液于36℃±1℃培养18h～24h。
金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长，污染严重时在10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤内呈混浊生长。
葡萄球菌属鉴定
敏感：抑菌圈直径≥16mm 耐药： 抑菌圈直径<16mm
医学检验学院
讨论:
做触酶试验时应注意哪些问题。
试述血浆凝固酶试验的原理、检测方法和用 途。 试述金黄色葡萄球菌的主要鉴定依据。 如何鉴定致病性葡萄球菌。
10
医学检验学院
葡萄球菌属鉴定
实验目的
掌握葡萄球菌的鉴定方法 熟悉葡萄球菌的菌落特点 熟悉葡萄球菌的菌体形态
医学检验学院
1. 菌种
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌
2. 试剂（1）革兰染色液 （2） 3％H2O2（临用时现配）、新鲜兔血浆 （或人血浆）
医学检验学院
3
操作步骤
1、形态观察
＋
（1）触酶试验原理：葡萄球菌属均可产生触酶 触酶
2[O]
触酶
取菌
医学检验学院
（2）血浆凝固酶试验原理：病原性葡萄球菌产生 血浆纤维蛋白原 方法：
生理盐水 血浆
血浆凝固酶
纤维蛋白
取待检菌混匀
医学检验学院
（3）新生霉素敏感试验 待检菌涂布
5¼ g/片 新生霉素纸片 35℃，16h～20h
观察抑菌圈大小
医学检验学院
取菌 NS
革兰染色
革兰阳性球菌， 散在或呈不规则葡萄状排列。
镜检
2、菌落观察 待检菌划Fra bibliotek接种医学检验学院
血琼脂平板
普通琼脂平板
35℃ 培养1 8h～2 4h
观察菌落
（各三块）
3．生化反应 H2O2 2[O]
方法：
3%H2O2
1 2 3 4 1 2 3 4
30”
医学检验学院 H2O O2 (产生气泡）
鉴定葡萄球菌的方法
鉴定葡萄球菌的方法葡萄球菌是一种常见的细菌，常常引起各种感染。
因此，准确鉴定葡萄球菌对于临床治疗和疾病控制至关重要。
本文介绍了几种常见的鉴定葡萄球菌的方法。
下面是本店铺为大家精心编写的5篇《鉴定葡萄球菌的方法》，供大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
《鉴定葡萄球菌的方法》篇1一、生化试验生化试验是鉴定葡萄球菌的一种常用方法。
通过检测葡萄球菌的生化反应，可以初步鉴定其种类。
常见的生化试验包括:1. 葡萄糖发酵试验：葡萄球菌可以发酵葡萄糖，产生酸和气体。
将葡萄球菌接种到含有葡萄糖的培养基上，观察是否产生酸和气体，可以初步鉴定其是否为葡萄球菌。
2. 乳糖发酵试验：葡萄球菌不能发酵乳糖。
将葡萄球菌接种到含有乳糖的培养基上，观察是否产生酸和气体，可以进一步确认其是否为葡萄球菌。
3. 尿酸酶试验：葡萄球菌可以产生尿酸酶，将尿酸分解为尿酸盐和氨。
将葡萄球菌接种到含有尿酸的培养基上，观察是否产生尿酸盐和氨，可以进一步鉴定其种类。
二、药敏试验药敏试验是鉴定葡萄球菌的另一种常用方法。
通过检测葡萄球菌对不同抗生素的敏感性，可以初步鉴定其种类。
常见的药敏试验包括: 1. 盘状药敏试验：将葡萄球菌接种到含有不同抗生素的培养基上，观察葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
2. 纸片药敏试验：将含有不同抗生素的纸片贴在含有葡萄球菌的培养基上，观察葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
三、分子生物学方法近年来，分子生物学方法也被广泛应用于鉴定葡萄球菌。
常见的分子生物学方法包括:1. PCR 法：利用 PCR 技术，检测葡萄球菌的特异性基因，可以快速、准确地鉴定葡萄球菌。
2. 质谱法：利用质谱技术，检测葡萄球菌的蛋白质指纹，可以鉴定其种类。
鉴定葡萄球菌的方法有多种，包括生化试验、药敏试验和分子生物学方法等。
《鉴定葡萄球菌的方法》篇2鉴定葡萄球菌的方法包括直接镜检、分离培养、PCR 方法等。
直接镜检可通过革兰染色镜检，观察菌体形态和排列方式，判断是否为葡萄球菌。
葡萄球菌鉴定流程
葡萄球菌鉴定流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classicarticles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!葡萄球菌鉴定流程1. 革兰染色观察革兰染色反应，葡萄球菌为革兰阳性球菌。
金黄色葡萄球菌检测ppt
• 3、生化特性：
• 可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲 基红反应阳性，VP反应弱阳性。
• 许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化 明胶。
• 金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感 性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
四金黄色葡萄球菌的流行病学
• 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人 和动物的排泄物中都可找到。作为人和动物的常见病原菌， 其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康 人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染 的机会很多。
• 近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引 起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。
二金黄色葡萄球菌的抗原构造和分型
• 对分型进行简单的了解 • １、血清学分型： • 金葡水解，获得两种抗原成分：蛋白抗原和多糖抗原。 • 蛋白抗原是凝集抗原，无特异性。 • 多糖抗原有特异性。 • 绝大多数金葡含有A型抗原，B型抗原主要存在于凝固酶
阴性菌株，C型抗原在致病性和非致病性菌株中都存在。 • ２、噬菌体分型： • ３、根据肠毒素分型： • ４、根据血浆凝固酶分型：
•
金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：
• 季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、 蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引 起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%， 所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。
• 一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：
• 食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染； 食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生 了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受 到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其 他部位的污染。
食品中微生物的检测-金黄色葡萄球菌检验
免疫学方法
抗原制备
从金黄色葡萄球菌中提取特异性抗原，制备 成免疫原。
抗体制备
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过凝集 反应、沉淀反应等方法检测样品中的金黄色
葡萄球菌。
抗原抗体反应
将免疫原注射到动物体内，刺激机体产生特 异性抗体。
结果判定
根据反应结果判断样品中是否含有金黄色葡 萄球菌。
分子生物学方法
食品中微生物的检测-金黄 色葡萄球菌检验
目录
• 引言 • 金黄色葡萄球菌概述 • 样品采集与处理 • 微生物学检测方法 • 理化检测方法 • 结果分析与报告 • 质量控制与实验室安全
01
引言
目的和背景
保障食品安全
金黄色葡萄球菌是一种常见的食品污染源，可引起食物中毒，对公众健康构成威胁。因此，检测食品中的金黄 色葡萄球菌对于保障食品安全具有重要意义。
适量性
根据检测方法和目的，采 集适量样品，以满足检测 需求。
样品保存与运
低温保存
样品应尽快放入低温环境 （如4℃冰箱）中保存，以 减缓微生物的生长速度。
避免反复冻融
尽量避免样品在保存过程 中反复冻融，以免影响微 生物的存活和检测结果的 准确性。
快速运输
样品在运输过程中应保持 低温，并尽快送达实验室 进行检测。
04
微生物学检测方法
传统培养法
增菌培养
将液体样品接种到选择性增菌液 中，于适宜温度下培养一定时间 ，使金黄色葡萄球菌得以增殖。
鉴定
通过观察菌落形态、革兰氏染色 、血浆凝固酶试验等生化特征进 行鉴定。
01
02
样品处理
取适量食品样品，进行均质化处 理，得到均匀一致的液体样品。
03
04
葡萄球菌(医学)
葡萄球菌耐药性的传播与流行
传播方式
葡萄球菌耐药性的传播主要通过基因突变和质粒传递实现。基因突变可导致葡萄球菌固有耐药性的产生，而质 粒传递则可导致获得性耐药性的传播。
流行趋势
在全球范围内，葡萄球菌的耐药性问题日益严重，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）等高度耐药菌株的流 行给临床抗感染治疗带来了巨大挑战。
04
葡萄球菌的检测与鉴定
葡萄球菌的分离与培养
样品采集
采集疑似感染病人的体液、分 泌物、组织等样本。
分离培养基
使用选择性培养基，如脑心浸液 血琼脂平板，将葡萄球菌从其他 杂菌中分离出来。
培养条件
在35℃~37℃的环境下培养24~48 小时，观察菌落的形态、颜色、大 小等特征。
葡萄球菌的生化鉴定
氧化酶试验触葡萄球菌感染者或疑 似感染者，特别是在疫情期间要做 好个人防护。
接种疫苗
对于易感人群，如儿童、老年人或 慢性病患者，可以考虑接种疫苗以 预防葡萄球菌感染。
感谢您的观看
THANKS
葡萄球菌(医学)
2023-10-28
目 录
• 葡萄球菌简介 • 葡萄球菌感染与疾病 • 葡萄球菌的耐药性 • 葡萄球菌的检测与鉴定 • 葡萄球菌的治疗与防控
01
葡萄球菌简介
葡萄球菌的分类与分布
分类
葡萄球菌属主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌等。
分布
葡萄球菌广泛分布于自然环境及人类皮肤、黏膜，是常见的病原菌之一。
02
葡萄球菌感染与疾病
葡萄球菌感染的症状与体征
皮肤感染
皮肤感染部位可出现红肿、疼痛、瘙痒及 脓疱等。
胃肠道感染
可导致呕吐、腹痛、腹泻等。
呼吸道感染
葡萄球菌属鉴定
葡萄球菌属鉴定一、目的对某一细菌的鉴定水平，可提供以下几方面的价值：（1）决定治病方法；（2）作流行病学研究；（3）了解细菌与感染的关系；（4）进行学术交流。
二、原理根据葡萄球菌的形态染色、培养特性、生化反应、抗原构造等将葡萄球菌由属鉴定到具体种类。
三、标本不同病种及不同检查目的而定，可为脓汁、渗透液、咽拭子、血、脑脊液、食物、呕吐物、粪便等，置于无菌瓶内送检。
四、试剂及器材革兰氏染液、培养皿、培养瓶、生化鉴定管、血浆、玻片、接种针（环）、酒精灯等。
五、鉴定程序标本涂片、染色痰、脓汁、血、脑脊液粪便、呕吐物平皿可凝菌落纯培养涂片、染色、触酶实验葡萄状（G+）、触酶（+）血浆凝固酶、葡萄糖甘露醇分解、高盐耐受实验甘露醇分解（需O2、甘露醇分解（—）厌O2均+）血浆凝固酶（+）、新生霉素（+）血浆凝固酶（—）新生霉素S R表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌六、质量控制每周进行一次葡萄球菌标准菌株的革兰氏染色、触酶、血浆凝固酶及新生霉素实验。
七、实验室解释及临床意义1、葡萄球菌广泛存在于自然界，医院内葡萄球菌的存在成为院内交叉感染的重要因素。
2、葡萄球菌是化脓性感染的重要病原菌。
3、葡萄球菌引起尿路感染的比例很大。
八、安全防护措施在操作过程中，要穿好工作衣，戴好口罩、手套，必要时戴眼罩，严格按操作规程，结束后，用次氯酸溶液（0.2%）擦拭实验台、显微镜手柄、载物台，浸泡手，然后紫外线消毒30分钟。
九、标本处理废弃标本，培养基等统一由专门人员高压消毒处理。
十、参考文献诊断细菌学，李仲兴等主编、第一版、香港、黄河文化出版社，1992。
葡萄球菌属的常规鉴定重点标准操作程序
葡萄球菌属旳常规鉴定原则操作程序1 概述葡萄球菌属是一类触媒实验阳性旳革兰阳性球菌，涉及金黄色葡萄球菌，表面葡萄球菌、腐生葡萄球菌等32个种。
是临床最常用旳化脓性球菌，广泛分布于自然界中，在人体表面鼻、咽、肠道也常常存在。
2 形态与染色革兰阳性球菌，直径0.4~1.2µm成单、双、短链或不规则状排列。
在液体培养基浓汁标本中，往往排列成双或短链状多数有鞭毛。
3 培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上典型菌落为金黄色，周边有明显旳透明（β）溶血环，部分菌落呈橙色，在高盐甘露醇平板上呈橙色菌落。
表皮葡萄球菌等其她葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，不溶血。
4 生化反映触酶实验阳性，多数能分解葡萄糖、麦蚜糖、蔗糖和甘露醇。
不分解棉籽糖和水杨苷，液化明胶，血浆凝固酶和DNA酶实验分阳性。
5 鉴别要点5.1 本菌属特性：触酶实验阳性，革兰阳性球菌，葡萄状排列，菌落中档大小，中档干燥。
5.2 与微球菌属旳鉴别：触酶实验都为阳性，但O∕F实验葡萄球菌属为发酵型，而微球菌为氧化型或无反映，并且菌体较葡萄菌属更大，排列呈四联状为主。
5.3 与链球菌属旳鉴别：葡萄球菌属触酶实验都为阳性，而链球菌为阴性，O∕F实验葡萄球菌属为发酵型而链球菌为氧化型。
5.4 凝固酶阳性葡萄球菌旳鉴别见下表。
结合型凝游离型凝鸟氨酸脱菌名PYP实验DNA实验VP实验固酶实验固酶实验羧酶实验金黄色葡萄球菌+ + - + + -中间型葡萄球菌- + + + - -施氏葡萄球菌+ - + + + -路邓葡萄球菌+ - + - + +注：“+”为90%以上菌株为阳性，“--”为90%以上菌株为阳性。
5.5 凝固酶阳性葡萄球菌旳鉴别见下表+腐生葡萄球菌——+ V + +—。
实验三 食品中金黄色葡萄球菌的检验
计
MPN
三法特点及适用性：
第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定 性检验
第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的 食品中金黄色葡萄球菌的计数 第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而
杂菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌2、分组：每3人一组 3、评分标准：见附表1
大肠杆菌在普通营养琼脂上的菌落特征： 中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘 整齐
金黄色葡萄球菌在普通营养琼脂平板上的菌落
3、具有高耐盐性，在7.5%氯化钠肉汤中呈现浑浊生 长；
4、在BP平板上菌落特征：圆形、光滑凸起，湿润， 直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色， 周围有一浑浊带，外层有一透明圈；
金黄色葡萄球菌性质及培养特征
1、革兰氏阳性球菌，排列为葡萄状，无芽 孢、无荚膜。
金黄色葡萄球菌的 扫描电镜照片
2、在普通营养琼脂平板上的菌落特征：
经18～24小时培养后形成圆形隆起、边 缘整齐、表面光滑、湿润、不透明的菌落，直径 为1～2mm，不同菌株可产生不同色素，出现 金黄色、白色、柠檬色。
2.2转种血平板
在三个平板上寻找周围有浑浊带的黑 色菌落，并从中任选五个菌落，分别接种 血平板， 于36℃±1℃培养24h后进行染 色镜检、血浆凝固酶试验，步骤同增菌培 养方法。
2.3 菌落计数
将三个平板中疑似金黄色葡萄球菌黑 色菌落数相加，乘以血浆凝固酶阳性数， 除以5，再乘以稀释倍数，即可求出每克 样品中金黄色葡萄球菌数。
2、直接计数方法
2.1 梯度稀释转种BP平板
吸取上述1：10混悬液，进行10倍第次稀释， 根据样品污染情况，选择不同浓度的稀释液1mL， 分别加入三块BP平板，每个平板接种量分别为 0.3mL、0.3mL、0.4mL，然后用灭菌涂布器涂布 整个平板，如水分多不易吸收，可将平板放在 36℃±1℃1h，等水分蒸发后反转平皿置 36℃±1℃培养。
金黄色葡萄球菌的测定
金黄色葡萄球菌的测定1 卫生学意义金黄色葡萄球菌定性检验（增菌培养法）：适用于检查含有受损伤的金黄色葡萄球菌的加工食品。
2 检验方法2.1 术语与定义金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为一种革兰氏染色阳性球形细菌。
显微镜下排列成葡萄串状，金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜。
是常见的引起食物中毒的致病菌。
常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。
2.2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：（1）恒温培养箱：36℃±1℃。
（2）冰箱：2℃～5℃。
（3）恒温水浴箱：37℃～65℃。
（4）天平：感量0.1g。
（5）无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。
（6）无菌锥形瓶：容量100mL、500mL。
（7）无菌培养皿：直径90mm。
（8）pH计或pH比色管或精密pH试纸。
2.3 培养基和试剂（1）7.5%氯化钠肉汤1）成分：蛋白胨：10.0g；牛肉膏：5.0g；氯化钠：75g；蒸馏水：1000mL；pH：7.4；2）制法：将上述成分加热溶解，调节pH，分装，每瓶225mL，121℃高压灭菌15min。
（2）B－P琼脂平板1）成分：胰蛋白胨：10.0g；牛肉膏：5.0 g；酵母膏：1.0g；丙酮酸钠：10.0g；甘氨酸：12.0g；氯化锂（LiCl·6H2O）：5.0g；琼脂：20.0g；蒸馏水：950mL；pH：7.0±0.22）增菌剂的配法：30%卵黄盐水50mL与经过除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL 混合，保存于冰箱内。
3）制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，调节pH。
分装每瓶95mL，121℃高压灭菌15min。
临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL摇匀后倾注平板。
培养基应是致密不透明的。
使用前在冰箱储存不得超过48h。
葡萄球菌属检验方法及临床意义
葡萄球菌属检验方法及临床意义摘要】目的：探讨葡萄球菌属检验方法及临床意义。
方法：选取2014年2月至2016年1月期间，我所检查的葡萄球菌属感染患者31例，对其检验方法及临床意义进行回顾性的分析。
结果：经过实验室检验后，所有患者的样本中均存在葡萄球菌属，葡萄球菌属的实验室检验对病因的确定具有较高的指导意义。
结论：同人类疾病相关的葡萄球菌属主要有表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及头状葡萄球菌，其会导致化脓性感染及病毒性休克等。
【关键词】葡萄球菌属；检验方法；临床意义【中图分类号】R378.1 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）08-0088-02葡萄球菌属细菌为一类革兰氏阳性球菌，因其常堆集排列呈葡萄串状而取名葡萄球菌属[1]。
葡萄球菌自然界与人体中广泛的存在，其大多数是非致病菌，少数于人与动物皮肤黏膜内存在的菌株会致使多种化脓性的感染，例如菌血症、痈、疖、脓肿等，其还可导致烫伤样的皮肤综合征与毒性的休克综合征等[2]。
葡萄球菌为较为常见的化脓性球菌，同时也是医源性感染中较为常见的细菌。
1.资料与方法1.1 一般资料选取2014年2月至2016年1月期间，我所检查的葡萄球菌属感染患者31例，其中男性患者16例，女性患者15例，患者年龄15至75岁，平均（43.9±15.1）岁。
31例患者中皮肤软组织感染11例，内脏器官感染10例，全身感染8例，尿路感染2例。
1.2 标本采集根据患者发生感染的疾病的不同，可采集其伤口分泌物、脓汁、渗出液、血液、痰液、粪便及脑脊液等[3]。
因葡萄球菌广泛的分布在人体皮肤及黏膜上，因此在采集时需注意避免患者病灶周围的正常菌群的污染。
2.检验2.1 标本的直接检查取患者的痰、渗出物、脓汁及脑脊液在进行离心后取其沉渣进行涂片，经过革兰染色后进行镜检，若在检查后发现革兰阳性菌，即可初步报告为疑为葡萄球菌[4]。
因在正常情况下，关节穿刺液、脑脊液等为无菌的，当检查时发现细菌则具有重要的价值，其他的体液标本中在检查时发现炎性细胞同样具有参考价值。
金色葡萄球菌毒力强弱的鉴定要点
金色葡萄球菌是一种常见的细菌，它可以引起一系列疾病，包括皮肤感染、食物中毒和肺炎等。
而其毒力的强弱对疾病的严重程度起着重要作用。
鉴定金色葡萄球菌的毒力强弱对于预防和治疗该细菌引起的疾病具有重要意义。
1. 荚膜形成能力金色葡萄球菌的荚膜形成能力是其毒力的重要指标之一。
荚膜是一种由多糖组成的外层结构，能够帮助细菌逃避宿主的免疫系统攻击，从而提高其对宿主的侵袭能力。
鉴定金色葡萄球菌的荚膜形成能力可以通过不同的实验方法，如黏附实验、酚红素实验等，来评估细菌荚膜的形成情况，从而判断其毒力的强弱。
2. 溶血酶和凝集素产生能力金色葡萄球菌产生的溶血酶和凝集素是其主要毒力因子之一。
溶血酶能够破坏宿主的红细胞和其他细胞，导致宿主组织的破坏和溶解。
凝集素则能够促使金色葡萄球菌与宿主细胞粘附并侵入，加剧感染的严重程度。
通过检测金色葡萄球菌产生溶血酶和凝集素的能力，可以评估其毒力的强弱程度。
3. 抗生素敏感性金色葡萄球菌对抗生素的敏感性也是评估其毒力的重要指标之一。
毒力强的金色葡萄球菌往往具有更强的耐药性，能够抵御常规抗生素的杀菌作用。
通过对金色葡萄球菌的抗生素敏感性进行测试，可以为临床治疗提供重要参考依据，同时也间接反映了其毒力的强弱程度。
4. 基因检测最近，分子生物学技术的发展为金色葡萄球菌毒力的鉴定提供了新的途径。
通过检测金色葡萄球菌的毒力相关基因，可以直接评估其毒力的强弱程度。
金色葡萄球菌的pvl基因编码产生毒力相关蛋白，其存在与否与金色葡萄球菌的毒力强弱有密切关系。
通过基因检测，可以准确快速地确定金色葡萄球菌的毒力强弱，为临床治疗提供重要的参考依据。
金色葡萄球菌毒力的强弱鉴定对于预防和治疗金色葡萄球菌引起的疾病具有重要意义。
通过对其荚膜形成能力、溶血酶和凝集素产生能力、抗生素敏感性以及基因检测等多方面指标进行综合评估，可以准确地判断金色葡萄球菌的毒力强弱，为临床治疗提供重要的参考依据。
随着科学技术的不断进步，相信金色葡萄球菌毒力鉴定的方法会越来越准确和可靠，为临床治疗提供更大的帮助。
三种鉴定葡萄球菌凝固酶方法的比较
三种鉴定葡萄球菌凝固酶方法的比较目的评价3种鉴定葡萄球菌凝固酶方法的敏感性和特异性。
方法临床分离的110株葡萄球菌，经过革兰染色，显色培养基显色培养，触酶试验，VITEK32鉴定后，用试管法、玻片法、商品乳胶血凝法（slidex staph-kit），鉴定葡萄球菌和评价凝固酶试验方法。
3种方法结果不一致的菌株进行重复试验。
用兔血浆试管法作为标准，比较其它凝固酶方法的敏感性、特异性。
结果兔血浆试管法检测到65株阳性菌株，以此为标准，兔血浆玻片法有3株假阳性，人血浆玻片法和乳胶血凝法的假阳性分别为8株和2株。
人血浆试管法的鉴定符合率为100%，其余各种方法的敏感性均为100%，而特异性（兔血浆和人血浆玻片法，乳胶凝集试验）分别为95.6%，88%，和98.5%。
结论人血浆凝固酶试管法敏感性特异性均较高，是鉴定葡萄球菌凝固酶试验的好方法，适合于各基层临床实验室对葡萄球菌的鉴定。
标签：金黄色葡萄球菌；血浆凝固酶；乳胶试剂耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是医院内感染的重要病原菌，然而临床标本中金黄色葡萄球菌鉴定中往往困扰者广大检验工作者，血浆凝固酶试验是鉴定金黄色葡萄球菌的重要方法之一。
鉴定的准确性直接关系到进一步上机鉴定及药敏试验判断及MRS纸片法筛选判断。
凝固酶分为两种：游离性凝固酶，结合型凝固酶，游离型凝固酶常用试管法鉴定，结合型凝固酶常用玻片法鉴定。
随着现代微生物技术的不断发展，许多医院开始选用法国梅里埃公司生产的葡萄球菌乳胶凝集试剂作为检出金黄色葡萄球菌的常规筛选试验试剂，虽然乳胶试剂盒简便，快速，但是易出现假阳性且价格昂贵。
为寻找一种适合广大基层医院实验室对葡萄球菌鉴定经济，简便的鉴定方法。
本文以兔血浆试管法为标准[1]，对110株临床分离的葡萄球菌凝固酶分别进行兔血浆，人血浆凝固酶试验和乳胶凝集试验。
评价其敏感性，特异性。
1 材料与方法1.1材料1.1.1菌株来源110株葡萄球菌均来自于我院2011年12月～2013年9月临床分离菌株，保存于-20℃低温冰箱，实验前接种于5%羊血基础平板，取对数生长期菌落进行试验。
微生物检测技术-金黄色葡萄球菌检测
国内检测标准
GB 4789.10-2010
食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
GB/T 20944.32008
食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素的测定 第3部分：黄曲霉毒素 M1的测定
GB/T 23511.42008
食品安全国家标准 食品中脱氢乙酸的测定 第4部分：脱氢乙酸含量的 测定
样品中的快速检测。
纳米技术
纳米材料如纳米金、纳米孔等在 金黄色葡萄球菌检测中展现出巨 大潜力，具有高灵敏度、低检测
限和快速响应等优点。
未来研究方向
开发更高效、特异性的检测方法
01
针对金黄色葡萄球菌的不同表型和基因型，开发更高效、特异
性的检测方法，提高检测的准确性和可靠性。
集成化与自动化
02
将多种检测方法集成于一体，实现金黄色葡萄球菌的自动化检
治疗方案的选择。同时，对于流行病学调查和疾病监测也具有重要意义。
05
CATALOGUE
金黄色葡萄球菌检测技术展望
新技术发展与应用
基因组学技术
利用全基因组测序技术，能够快 速准确地检测金黄色葡萄球菌，
并识别其耐药性和毒力基因。
生物传感器技术
生物传感器能够实时、快速地检 测金黄色葡萄球菌，具有高灵敏 度和特异性，适用于食品和环境
测，提高检测效率，降低人工误差。
多重耐药性研究
03
深入研究金黄色葡萄球菌的多重耐药性机制，为遏制耐药性的
传播提供科学依据和技术支持。
对公共卫生的影响与意义
保障食品安全
金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌，通过改进检测技 术，能够及时发现和控制食品中的污染，保障公众的食品 安全。
预防疾病传播
葡萄球菌生化鉴定实验报告
葡萄球菌生化鉴定实验报告
实验目的：
通过生化鉴定方法，对给定的葡萄球菌进行鉴定。
实验原理：
葡萄球菌是一种常见的革兰氏阳性球菌，可以通过其生化特性进行鉴定。
常用的生化鉴定方法包括：表面蛋白酶、凝固酶、氧化酶、稀蛋白酶、脱氧核糖核酸( DNA酶)等。
实验步骤：
1. 提取葡萄球菌菌株：从实验室保存的菌株中，选取一株葡萄球菌，进行营养琼脂平板培养，并培养至菌落生长。
2. 制备菌液：用无菌的生理盐水将菌落取下，制备葡萄球菌的菌液。
3. 表面蛋白酶试验：取一份菌液，滴加到表面蛋白酶试验板上，观察是否出现菌落周围的溶解圈。
4. 凝固酶试验：取一份菌液，滴加到凝固酶试验管中，观察是否出现凝结。
5. 氧化酶试验：取一份菌液，滴加到氧化酶试纸上，观察是否出现颜色变化。
6. 稀蛋白酶试验：取一份菌液，滴加到稀蛋白酶试纸上，观察是否出现颜色变化。
7. DNA酶试验：取一份菌液，滴加到DNA酶试纸上，观察是否出现颜色变化。
实验结果：
根据实验步骤中观察到的结果，记录下每个试验的结果。
实验结论：
根据实验结果，判断葡萄球菌是否具有表面蛋白酶、凝固酶、氧化酶、稀蛋白酶、DNA酶等酶活性，从而鉴定葡萄球菌的菌株。
实验总结：
通过生化鉴定实验，可以对葡萄球菌进行简单的鉴定，从而获得其生化特征，为后续的研究和应用奠定基础。
同时，实验中需要注意无菌操作，以避免实验结果的偏差。
金黄葡萄球菌鉴定步骤
金黄葡萄球菌鉴定步骤金黄葡萄球菌鉴定步骤导语：金黄葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的致病菌，对人类健康造成威胁。
了解金黄葡萄球菌的鉴定步骤对于预防和控制感染具有重要意义。
本文将从简单到深入，介绍金黄葡萄球菌鉴定的全过程。
一、目的金黄葡萄球菌鉴定的目的是确认样本中是否存在金黄葡萄球菌，并进一步了解其特点和性质，以便进行预防和治疗。
二、前期准备1. 确保实验室安全：佩戴实验室必备的防护用品，如手套、口罩和实验室服。
2. 培养基准备：准备适用于金黄葡萄球菌生长的培养基，如牛肉膏蔗糖培养基（Baird Parker Agar）或含有亚硒酸钠的万氏精液胆盐柳糖培养基（Mannitol Salt Agar）。
3. 无菌操作：使用无菌技术，以避免外来细菌的污染。
三、鉴定步骤1. 样本处理：将待检样本在无菌条件下接种于培养基上，可以是涂布法、点状法或环法。
a. 涂布法：将待检样本取适量涂布在培养基表面。
b. 点状法：用匀浆针将待检样本点状刺入培养基内。
c. 环法：用无菌棉签从待检样本中取样后沿培养基表面画环。
2. 培养条件：将培养基培养于37℃恒温培养箱中，培养时间一般为24小时。
3. 金黄葡萄球菌特征：a. 形态特征：金黄葡萄球菌在培养基上生长为黄色或类似葡萄球菌的菌落，呈珠状集聚。
b. 生理特性：金黄葡萄球菌产生酶溶血性作用，可溶解红细胞，形成溶血环。
c. 生化特性：金黄葡萄球菌可产生凝固酶，将凝血蛋白溶解成凝胶。
4. 疑似金黄葡萄球菌鉴定：a. 形态观察：观察菌落形态，如颜色、形状和大小等。
b. 酶溶血性试验：将待检菌落在凝集红细胞上涂布，观察是否形成溶血环。
溶血环直径大于3毫米时，判定为金黄葡萄球菌的溶血作用阳性。
c. 产凝固酶试验：将待检菌悬液与凝血蛋白混合，观察是否形成凝胶。
若凝胶形成，即判定为金黄葡萄球菌的凝固酶阳性。
5. 进一步确认：a. 分子鉴定：可采用PCR等分子生物学方法，通过特定基因的检测来确认金黄葡萄球菌。
食品中金黄色葡萄球菌检验
式（2）
案例
T A1B1/ C1 A2B2 / C2其中Leabharlann 1.1d样品稀释液
10-1
10-2
典型菌落数
183
21
T：样品中金黄色葡萄球菌菌落数；
用于做血浆凝固
A1：第一稀释度（低稀释倍数）典型菌落的总数；
5
5
酶菌落数
A2：第二稀释度（高稀释倍数）典型菌落的总数；
B1：第一稀释度（低稀释倍数）血浆凝固酶阳性的菌落数； 血浆凝固酶阳性
二、金黄色葡萄球菌定性检测
注意事项
Baird-Parker平板： 胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏:提供碳源、氮源、硫、维生素和痕量矿物元素 丙酮酸钠:生长促进剂 亚碲酸盐:对除金黄色葡萄球菌外的其他能分解卵黄菌株有毒性，并使菌落产生黑色 卵黄:提供营养和有利于观察卵磷脂环 甘氨酸和氯化锂:对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。
36±1℃， 24~48h
圆形，光滑突起，湿润，直径23mm，颜色呈灰色到黑色，边缘 常为淡色（米黄色或灰白色略带 灰色或黄色的白色），周围为一 混浊带，在其外缘常有一透明圈。 用接种针接触菌落似有黄油树胶 的粘稠感。
革兰氏染色
血浆凝固酶鉴别
金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球 菌，排列呈葡萄球状，无芽孢
血平板上其典型菌落呈金黄色，有时也为白色，大 而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血圈。
36℃±1 ℃
45h~48h
计数及血浆凝固酶试验
GB 4789.10-2016 金黄色葡萄球菌的检验第二法
报告
操作规程
样品稀释 同菌落总数检验
选择合适稀释度 接种涂布BP平板
三、金黄色葡萄球菌定量检测
样品处理
移1ml
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血浆凝 固酶
甘露醇 发酵
金葡
表葡
腐生
（4）新生霉素敏感试验
血平板 菌悬液涂布 5ug/L新生霉素纸片 35℃孵育16~18h S:抑菌圈直径>16mm，R:≤16mm
结果 ATCC25923 表葡 S R
腐生
阳性结果 （S）
实验七 葡萄球菌鉴定
检验系微生物教研室
（一）葡萄球菌检验程序
脓液、咽拭子、穿刺液 尿液、痰液脑脊液血液粪便、呕吐 物
直接涂片染色
初报
分离培养 （血平板）
分离培养
增菌培养 （高盐甘露醇 平板）
涂片染色 触媒 血浆凝固酶 甘露醇发酵 耐热核酸酶 其他鉴定试验
取可疑菌落
鉴定试验
药敏试验
报告
（二）目的要求
培养基：血琼脂平板，MH琼脂，甘露醇发酵管 试剂：生理盐水，3%H2O2,EDTA抗凝兔血浆，革兰染液，
新生霉素纸片、头孢西丁、红霉素、克林霉素纸片 其他：酒精灯，接种环，接种针，玻片，显微镜，孵箱等
（四）步骤方法
1.细菌菌落特征观察：
大小 形态 光泽 表面 边缘 透明度 颜色 溶血 金葡 表葡 腐生
玻片法
【操作】取兔血浆和生理盐水各1滴分别滴于载玻 片上，用接种环挑取细菌，混合后观察。
【操作】
试管法
（3）甘露醇发酵试验：
【原理】致病性葡萄球菌多含有分解甘露醇的酶类， 能发酵甘露醇产酸，培养基由紫色变为黄色。
【操作】细菌分别接种甘露醇单糖发酵管，经35℃ 孵育18-24h观察结果。
【结果】金葡为阳性，表皮、腐生为阴性
H2O2
H2O + O2
【操作】取洁净玻片一张，滴加3％ H202一滴，以接
种环分别取待检细菌培养物少许，在H202中磨匀，
立即观察结果
【结果】阳性为半分种内产生大量气泡。葡萄球菌为 阳性，链球菌为阴性。
【意义】 触酶试验可区分葡萄球菌和链球菌。
（2）血浆凝固酶试验
【原理】致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，使血 浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白，附于细胞表 面生成凝块。 【结果】金葡为阳性，表皮、腐生为阴性 【意义】血浆凝固酶试验可区分致病性和非 致病 性葡萄球菌
掌握：葡萄球菌属的菌落形态、菌体特点、 染色性和基本生化反应及分离培养和鉴定 方法； MRS和D试验的方法和结果判定
熟悉：各生化反应原理及和MRS、D试验方 法注意事项
（三）实验器材
菌种：金葡菌（临床菌株，ATCC 25923 ,ATCC29213） 表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、 MRSA D-试验阴性、阳性葡萄球菌
新生霉素敏感试验
Staphylococcus aures （+） 表皮葡萄球菌（S） 腐生葡萄球菌(R)
（5）MRS检测
（6）葡萄球菌诱导性克林霉素耐药试验
思考题：
1.触酶试验注意事项？ 2.头孢西丁纸片法检测MRS注意事项，结果 判定？ 3.D-试验注意事项，结果判定？
金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
腐生葡萄球菌
2.细菌革兰染色：
G+C, d 0.5-1.5um, 散在 或不规则葡萄状
生理 盐水
涂片
接种环
固定
自然干燥
结晶紫
初染 1min
干镜干镜燥检燥检
复红
复染
95%
乙醇
媒染
碘液
30s
脱色30s
1min
3.生化反应鉴定
（1）触酶试验
【原理】
过氧化氢酶