生物医学工程学概论考试重点

生物医学工程(Biomedical Engineering，BME)，是用自然科学和工程技术的理论方法，研究解决医学防病治病，增进人民健康的一门理、工、医相结合的边缘科学。它综合运用工程学的理论和方法，深入研究、解释、定义和解决医学上的有关问题。

生物传感器应有以下几个条件：①高可靠；②少损伤或无损伤；③微型化；

④重复性好；⑤数字信号输出；⑥组织相容性好；⑦寿命长；⑧容易制造。

生物工程(bioengineering)亦称生物技术(biotechnology) , 它是通过工程技术手段，利用生物有机体或生物过程，生产有经济价值的产品的技术科学。它的实际应用包括对生物有机体及其亚细胞组分在制造业、服务性工业以及环境管理等方面的应用。细胞工程(cell engineering)是应用细胞生物学和分子生物学技术，按照预定的设计改变或创造细胞遗传物质，使之获得新的遗传性状，通过体外培养，提供细胞产品，或培育出新的品种，甚至新的物种。

细胞工程的三个发展阶段：

第一阶段：～70年代中期，确立了细胞培养技术、核型分析技术、细胞融合技术及其应用

第二阶段：70年代后期～80年代后期，基因工程与细胞工程结合，应用DNA 导入技术分析了人体基因的微细结构。

第三阶段：80年代后期～，基因打靶为基础，胚胎发生工程与基因工程结合作为新的研究发展趋势。即在培养细胞水平上同源基因重组的“基因打靶”

“基因打靶”是指利用基因转移方法，将外源DNA序列导入靶细胞后通过外源DNA序列与靶细胞内染色体上同源DNA序列间的重组，将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的点，或对某一预先确定的靶位点进行定点突变的技术

细胞融合(cell fusion)是指用自然或人工方法，使两个或更多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。它包括质膜的连接与融合，胞质合并，细胞核、细胞器和酶等互成混合体系。

应用：淋巴细胞杂交瘤技术，其产物为单克隆抗体单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)是由单一克隆(clone)的B淋巴细胞产生的抗单一抗原的高度特异性抗体。

细胞拆合就是把细胞质与细胞核分离开来，然后把不同来源的细胞质和细胞核相互配合，形成核质杂交细胞

基因工程(genetic engineering)概念：

用分离纯化或人工合成的DNA在体外与载体DNA连接成重组体，并以重组体转化入宿主细胞，进而筛选出能表达重组DNA的活宿主细胞，再使之繁殖和扩增，直至表达出目的基因所编码的多肽（polypeptide）等一系列过程称为基因工程(genetic engineering)，或者称为基因克隆(gene cloning)，分子克隆(molecular cloning)。

基因工程主要步骤：一是构建DNA重组体，二是DNA重组体的扩增和表达

基因工程的主要目的：

◆按意图生产基因产物◆制取某些DNA片段和DNA探针(DNA probes)

◆改造基因，探讨基因的结构和功能

人工合成基因的不足之处：

◆不能合成太长的基因；◆人工合成基因时，遗传密码的兼并现象会为选择密码带来很大困难；◆费用较高。

载体要求：①一个较小的，能进行复制的分子；②具有较少的限制酶的切点；

③外源DNA片段插入载体后，载体的复制功能不会丧失；④具有某种明显的标志；⑤携带外源DNA的幅度较宽；⑥生物防护是安全的

DNA分子的体外重组

重组体或重组DNA分子(重组子)就是把外源性DNA(目的基因)插入载体，使两种DNA分子连接起来。

(1)粘性末端连接法；(2)钝性末端连接法

次级代谢特点：(1) 生长后期形成；(2) 代谢酶合成期短；(3) 代谢酶系往往是一种复合体，(4) 代谢酶系对底物要求的专一性不强，(5) 代谢酶在细胞中有特定的位置

微生物代谢的调控方式：(1) 营养代谢阻遏，(2) 诱导，(3) 反馈调节，(4) 细胞通透性的调节，(5) 前体或抑制剂的调节

酶(enzyme)是生物体内活细胞产生的一种起催化剂作用的蛋白质。又称为生物催化剂(biological catalyst)。

酶催化的特点：

①反应条件温和；②选择性特别高；③催化效率特别高；④酶的活性可受调节控制

酶工程：把酶从细胞中分离出来，在体外以游离状态催化特定的化学转化反应的应用技术称为酶工程(enzyme engineering)或酶技术(enzyme technology)用微生物生产酶的优点：①微生物种类多；②微生物容易培养；③可进行菌株选育、突变、诱导及选择生长条件亦可大幅度提高酶的产率和改变酶的类型；④微生物中酶的特性有较宽的幅度可供使用时选择；⑤利用微生物生产酶，原料不受限制

酶的化学修饰的目的：

■使其更稳定■适应不同的温度及pH■抵抗蛋白酶及抑制剂的影响■改变天然酶的动力学常数■减少或消除在体内的抗原性■使酶分子具有对某些组织或细胞的亲合力或穿透性等。

酶的固定化是指将酶用物理或化学方法进行处理，使之从水溶性和可移动状态变成仍具有酶活性的非水溶性固定状态的过程。

固定化酶(immobilized enzyme) 特点：

A. ◆耐热性、工作稳定性和贮存稳定提高

B. ◆具有一定的机械强度

C. ◆避免酶蛋白和其它杂质混入产品

D. ◆可以回收

（一）酶的固定化方法：

1. 载体结合法：(1)离子结合法：(2)共价结合法：(3)物理吸附法：

2. 交联法

3. 包埋法：(1)网格法(凝胶包埋法)：(2)微囊法(酶胶囊法)：

人工肝，原理：肝脏部分功能的暂时性辅助替代装置。

使用：肝衰竭、等待肝细胞再生、等待肝移植

材料：活性炭、树脂、聚丙烯腈

基本功能：(1)血灌流吸附解毒（2）血透析及超滤（3）血浆及氨基酸的平衡补充