克拉霉素片溶出度检测方法分析

克拉霉素片溶出度检测方法分析

目的优化克拉霉素片溶出度检测方法。方法采用ZORBAX SB-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱，流动相：磷酸盐缓冲液∶乙腈（60∶40），流速：1.0 ml/min，检测波长：210 nm;柱温：45 ℃，进样量：50 μl。在药典方法基础上去掉稀释步骤，以每批次6片样品分别经溶出仪溶出后直接经高效液相色谱仪测定后按外标法以限度计算溶出度。结果本法与药典方法相比较，溶出度结果一致，均大于限度80%，符合限度要求。结论本研究方法可以作为克拉霉素片溶出度的质量控制方法。

Abstract：Objective To optimize the dissolution test of Clarithromycin tablets.Methods ZORBAX SB-C18（4.6mmx150mm，5μm）chromatographic column was used，mobile phase：phosphate buffer solution：acetonitrile（60：40），flow rate：1.0 ml/min，detection wavelength：210nm，column temperature：45℃，injection volume：50μL.We removed dilution steps on the basis of the Pharmacopoeia method，dissolution of 6 tablets in each batch was determined by high performance liquid chromatography after dissolution by dissolution analyzer，and the dissolution was calculated by external standard method.Results Compared with the Pharmacopoeia method，the dissolution rate was consistent with the limit of 80%，meeting the limit requirement.Conclusion This method can be used as a quality control method for dissolution of clarithromycin tablets.

Key words：Clarithromycin;High performance liquid chromatography;Dissolution;Standard optimization

克拉霉素（clarithromycin）属十四元环半合成大环内酯类抗生素，是一种新型红霉素药物[1]。克拉霉素对胃酸稳定，口服吸收好，主要通过与敏感细菌核蛋白体的50S亚基结合，抑制敏感细菌蛋白合成，发挥抑菌或杀菌作用[2]，抗菌活性和抗菌谱较红霉素、罗红霉素强而广，主要用于敏感菌所致的扁桃体炎、咽喉炎、副窦炎、支气管炎、细菌性肺炎、非典型肺炎、皮肤感染、浓皰病、毛囊炎、疖和伤口感染等[3]。克拉霉素片属于我国基本药物，收载于《中国药典》2015年版二部[4]。本研究于2018年6月对我中心在本辖区内监督抽检的，来源于3个省（区、市）的3批次克拉霉素片的溶出度项目进行了探索研究，在药典方法基础上优化了溶液制备方法，使该品种质量控制过程更快速有效。

1仪器与试药

Agilent1100型高效液相色谱仪，色谱柱：ZORBAX SB-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），RCZ-8M药物溶出仪，Mettler Toledo 205DU 电子天平，雷磁PHS-3C型酸度计。克拉霉素對照品（中国食品药品检定研究院，批号130558-201303，含量97.2%），克拉霉素片（浙江震元制药有限公司，批号：170303，规格：0.25 g;浙江京新药业有限公司，批号：B1701101，规格0.25 g;云南永安制药有限公司，批号：081802，规格：0.125 g），磷酸二氢钾、磷酸、醋酸钠、冰醋酸、三乙胺

均为分析纯，乙腈为色谱纯。

2方法与结果

2.1方法

2.1.1色谱条件流动相：以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾9.11 g，加水溶解并稀释至1000 ml，加三乙胺2 ml，用磷酸调节pH值至5.5）-乙腈（600∶400）;流速：1.0 ml/min，检测波长为210 nm;柱温：45 ℃，进样量：50 μl。2.1.2《中国药典》2015年版[4]溶液的制备方法①对照品溶液：精密称取克拉霉素对照品9.25 mg，置50 ml量瓶中，加少量乙腈溶解后，用溶出介质定量稀释置刻度，摇匀，精密量取10 ml置25 ml量瓶中，制成每1 ml中约含55 μg的溶液，作为对照品溶液。②供试品溶液：取克拉霉素片6片，照中国药典2015年版四部溶出度与释放度测定法[5]（通则0931第一法），以醋酸盐缓冲液（pH 5.0）（取0.1 mol/L 醋酸钠溶液，用冰醋酸调节pH至5.0）900 ml为溶出介质，转速为100 r/min，依法操作。经30 min时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用溶出介质定量稀释制成每1 ml中约含克拉霉素55 μg的溶液，作为供试品溶液。见图1。

2.1.3本研究优化的溶液的制备方法①对照品溶液：精密称取克拉霉素对照品9.25 mg，置50 ml量瓶中，加少量乙腈溶解后，用溶出介质定量稀释至刻度，摇匀，即得。②供试品溶液：取克拉霉素片6片，照中国药典2015年版四部溶出度与释放度测定法[5]（通则0931第一法），以醋酸盐缓冲液（pH 5.0）（取0.1 mol/L醋酸钠溶液，用冰醋酸调节pH至5.0）900 ml为溶出介质，转速为100 r/min，依法操作。经30 min时，取溶液适量，滤过即得。见图1。2.2结果分别取“2.1.2”及“2.1.3”项下的供试品溶液及对照品溶液，在“2.1.1”色谱条件下测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算每片的溶出量，将两种方法的数据进行对比，结果见表1。3批次样品结果显示：本法与药典方法相比较，溶出度结果基本一致。

3讨论

体外溶出度系指是指活性药物成分从片剂、胶囊剂或颗粒剂等制剂在规定条件下溶出的速度和程度，是评价药物口服固体制剂质量及生产工艺的重要指标之一。

2005年版《中国药典》二部[6]标准中收载的克拉霉素片，采用紫外分光光度法测定其溶出度，操作繁琐，重现性差。2010年版及2015年版《中国药典》[5]将其方法修订为高效液相色谱法，此方法能准确、简便的测出其溶出量，且重复性好，专属性强，可有效地控制药品的质量，但是本人在实验过程中发现，修订后的药典标准中溶出度测定的溶液制備部分仍存在稀释步骤繁琐，溶液浓度过低，影响结果准确性的问题，于是建立了本研究方法，使试验过程更简单、高效。

药典标准中规定样品经溶出仪溶出后稀释至55 μg的溶液，再经高相液相色谱法测定，进样体积为50 μl，进样量很大（通常进样量为10～20 μl），但是由