植物生理学实验设计李桥善
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茶多酚含量的测定
李桥善
实验目的
• 1、学习用酒石酸铁比色法测定茶多酚含量 的方法。 • 2、了解茶多酚在植物抗氧化活性中的作用。 • 3、对比茶树的老叶和嫩叶中茶多酚的含量。
实验意义
• 茶叶中茶多酚的含量与季节、维度的高低、 老嫩程度等有关。通过实验找到茶多酚含 量最多的再来进行茶多酚的提取，会大大 提高提取率。
• 有助于预防和治疗辐射伤害
• 茶多酚及其氧化产物具有吸收放射性物质锶90和钴60毒 害的能力。
流程图
茶素标准液
稀释 0、20、40、60、80、100ug/ml
分别取lml
1.5%酒石酸钾铁1ml 在540nm处测A
混匀
加0.1mol/L磷酸缓冲液3ml
分别加入2个带50ml蒸馏水的烧瓶中
沸水浴20min 测A值 过滤 滤渣 重复提取 重复上述实验
研磨
分别取老嫩茶叶1g
滤液于5000r/min离心15min
• 有助于抑制心血管疾病
• 茶多酚对人体脂肪代谢有着重要作用。人体的胆固醇、 三酸甘油脂等含量高后形成动脉粥样化斑块等心血管疾 病。茶多酚有助于使这种斑状增生受到抑制，从而抑制 动脉粥化样硬。
• 有助于预防和抗癌
• 茶多酚可以阻断多种致癌物质在体内合成,并具有直接 杀伤癌细胞和提高机体免疫能力的功效。
实验原理
• 茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝 色络合物。是一种重要的天然抗氧化性物 质。它是超氧阴离子自由基和羟自由基的 强捕获剂，能清除自由基。用酒石酸铁比 色法测定植物组织中的茶多酚含量。
实验用具及药品
• • • • •
•
实验仪器与用具 分光光度计、离心机、研钵、水浴锅、移 液管、烘箱、具塞三角瓶 实验试剂 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH6.8） 100μg/ml儿茶素标准液：称取10mg儿茶 素，用蒸馏水定容至100ml。 1.5%酒石酸钾铁
实验步骤
• 1. 分别称取同一颗茶树的老叶和嫩叶各1g，研磨 成粉末。分别用50ml沸蒸馏水将粉末洗入2个三 角瓶，于沸水浴中浸提20min，过滤，滤渣50ml 蒸馏水同样提取一次，分别合并上清液5000r/min 离心15min，分别取上清液待用。 • 2.将茶素标准溶液稀释成0、20、40、60、80、 100μg/ml，分别吸取1ml，加0.1mol/L磷酸缓冲液 3ml，混匀，加1.5%酒石酸钾铁1ml，用分光光度 计测定540nm处的OD值，并绘制浓度-OD标准曲 线。 • 3.分别取样品提取液1ml，按上述同意方法测定 540nm处的OD值。
分别取1ml上清液
Fra Baidu bibliotek意事项
• 注意：如果提取时间过长，所提的茶多酚 会发生氧化反应，转化成其他物质，致使 一部分茶多酚丢失。如果提取时间在1~2h 对茶多酚含量的影响不大。所以要控制好 提取时间。
应用前景
• 茶多酚具有很强的抗氧化性和生理活性,是人体自 由基的清除剂。据有关部门研究证明，1毫克茶多 酚清除对人机体有害的过量自由基的效能相当于9 微克超氧化物歧化酶 (SOD)，大大高于其他同类 物质。茶多酚有阻断脂质过氧化反应，清除活性 酶的作用。据日本奥田拓勇试验结果，证实茶多 酚的抗衰老效果要比维生素E强18倍。
李桥善
实验目的
• 1、学习用酒石酸铁比色法测定茶多酚含量 的方法。 • 2、了解茶多酚在植物抗氧化活性中的作用。 • 3、对比茶树的老叶和嫩叶中茶多酚的含量。
实验意义
• 茶叶中茶多酚的含量与季节、维度的高低、 老嫩程度等有关。通过实验找到茶多酚含 量最多的再来进行茶多酚的提取，会大大 提高提取率。
• 有助于预防和治疗辐射伤害
• 茶多酚及其氧化产物具有吸收放射性物质锶90和钴60毒 害的能力。
流程图
茶素标准液
稀释 0、20、40、60、80、100ug/ml
分别取lml
1.5%酒石酸钾铁1ml 在540nm处测A
混匀
加0.1mol/L磷酸缓冲液3ml
分别加入2个带50ml蒸馏水的烧瓶中
沸水浴20min 测A值 过滤 滤渣 重复提取 重复上述实验
研磨
分别取老嫩茶叶1g
滤液于5000r/min离心15min
• 有助于抑制心血管疾病
• 茶多酚对人体脂肪代谢有着重要作用。人体的胆固醇、 三酸甘油脂等含量高后形成动脉粥样化斑块等心血管疾 病。茶多酚有助于使这种斑状增生受到抑制，从而抑制 动脉粥化样硬。
• 有助于预防和抗癌
• 茶多酚可以阻断多种致癌物质在体内合成,并具有直接 杀伤癌细胞和提高机体免疫能力的功效。
实验原理
• 茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝 色络合物。是一种重要的天然抗氧化性物 质。它是超氧阴离子自由基和羟自由基的 强捕获剂，能清除自由基。用酒石酸铁比 色法测定植物组织中的茶多酚含量。
实验用具及药品
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实验仪器与用具 分光光度计、离心机、研钵、水浴锅、移 液管、烘箱、具塞三角瓶 实验试剂 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH6.8） 100μg/ml儿茶素标准液：称取10mg儿茶 素，用蒸馏水定容至100ml。 1.5%酒石酸钾铁
实验步骤
• 1. 分别称取同一颗茶树的老叶和嫩叶各1g，研磨 成粉末。分别用50ml沸蒸馏水将粉末洗入2个三 角瓶，于沸水浴中浸提20min，过滤，滤渣50ml 蒸馏水同样提取一次，分别合并上清液5000r/min 离心15min，分别取上清液待用。 • 2.将茶素标准溶液稀释成0、20、40、60、80、 100μg/ml，分别吸取1ml，加0.1mol/L磷酸缓冲液 3ml，混匀，加1.5%酒石酸钾铁1ml，用分光光度 计测定540nm处的OD值，并绘制浓度-OD标准曲 线。 • 3.分别取样品提取液1ml，按上述同意方法测定 540nm处的OD值。
分别取1ml上清液
Fra Baidu bibliotek意事项
• 注意：如果提取时间过长，所提的茶多酚 会发生氧化反应，转化成其他物质，致使 一部分茶多酚丢失。如果提取时间在1~2h 对茶多酚含量的影响不大。所以要控制好 提取时间。
应用前景
• 茶多酚具有很强的抗氧化性和生理活性,是人体自 由基的清除剂。据有关部门研究证明，1毫克茶多 酚清除对人机体有害的过量自由基的效能相当于9 微克超氧化物歧化酶 (SOD)，大大高于其他同类 物质。茶多酚有阻断脂质过氧化反应，清除活性 酶的作用。据日本奥田拓勇试验结果，证实茶多 酚的抗衰老效果要比维生素E强18倍。