玉郎伞提取物对超氧阴离子自由基和羟自由基的抑制和清除作用_焦杨

*广西自然科学基金资助项目(桂科自9912038)1第一附属医院药剂科收稿日期:2003-05-10

玉郎伞提取物对超氧阴离子自由基和羟自由基的抑制和清除作用

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焦　杨　段小群　黄仁彬　韦锦斌　蒋伟哲

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(广西医科大学药理学教研室　南宁　530021)

摘要　目的:探讨玉郎伞提取物(Y LS)对氧自由基的抑制和清除作用。方法:采用分光光度法检测Y L S 对超氧阴离子自由基(O 2·-)和羟自由基(·O H )的清除及抑制作用。结果:Y L S 浓度为0.15、0.30、0.60g /ml 在体外对·O H 的清除率分别为7.1%、29.1%、68.5%,对O 2·-的清除率分别为40.5%、49.9%和64.5%,对O 2·-生成的抑制率分别为48.0%、60.3%和68.8%。结论:Y LS 对O 2·-具有明显的抑制及清除作用,对·O H 也有一定的清除作用。关键词　玉郎伞提取物;超氧阴离子自由基;羟自由基;清除作用中国图书资料分类法分类号　R285.5

SCAVENGING AND I NHIBITIING EFFECT OF YULA NGS AN EXTRACT ON SUPEROXI -DE ANION FREE RADICAL AND HYDROXY FREE RADICAL

J iao Yang ,Duan Xiaoqun,Huang Renbin,et al.(Depa rtm ent of Pha rmaco logy ,Guang xi Medical Univ ersi-ty ,Nanning 530021China )

Abstract Objective

:To study the scavenging effect o f YU LANGSAN ex tract on supero xide anio n free radical (O 2·-)and hydrox y free radical (·O H ).Methods :Spectro photometry (w av e leng th 322nm a nd 536nm )w as used to observ e the effects o f YLS o n O 2·-and ·O H .Result :The lev el of ·O H was reduced by 7.1

%,29.1%,68.5%in the presence o f YLS 0.15,0.30,0.60g ·ml -1,the lev el of O 2·-w as reduced by 40.5

%,49.9%and 64.5%,respectively .The genera tion o f O 2·-w as inhibited by 48.0%,60.3%a nd 68.8%,respectiv ely ,in the presence of YLS 0.15,0.30,0.60g ·ml -1in v itro .Conclusion :The results show that YLS can g rea tly scav eng e O 2·-(P <0.01)and ·O H,and inhibit the productio n of O 2·-.Key words YU LANGSAN ex tract;superoxide a nion free radical;hydrox y free radical;scav enging effect

玉郎伞是一种尚未开发利用的民间草药,为蝶形花科植物疏叶崖豆M illettia pulchra Kur z va r .lax io r (Dunn )Z .W ei 的块根,具有舒筋活络、补虚润肺之功能,民间用于腰腿痛、风湿痛、慢性肝炎、肺结核等的治疗[1]。本研究小组的一些药理学研究初步表明,玉郎伞提取物(Y L S )具有降低血压、减轻心肌缺血再灌注损伤、减轻急性化学性肝损伤等作用[2]。本研究探讨其在体外对连苯三酚氧自由化产生的氧自由基(O 2·-)和由邻二氮菲-Fe 2+/H 2O 2体系产生的羟自由基(·O H)的抑制和清除作用。

1　材料和方法

1.1　材料:Y L S 由本室自行提取,每毫升溶液含生药3g 。连苯三酚为中国医药(集团)上海化学试剂公司生产,批号为F010630;邻二氮菲、硫酸亚铁为上海试剂三厂生产,均为分析纯。

1.2　仪器:分光光度计(DU -640,美国Beckman 公司)。1.3　方法[3,4]:

1.3.1　·O H 的生成及清除率的测定:配制含邻二氮菲0.75mmo l /L 、Fe SO 40.75mmol /L 磷酸盐缓冲液(pH 7.3)150mmol /L 的溶液作为反应体系,加0.01%H 2O 2(损害)或不加H 2O 2(未损害),37℃保温60min 后,以磷酸盐缓冲液为参比,分别测536nm 时的吸收值,得A 损害与A 未损害。上述反应体系加入0.01%H 2O 2和一定量的Y L S,以同浓度Y L S 作参比,测536nm 时的吸收值,即得A 样。重复8次。按下式计算·O H 清除率:·O H 清除率(S %)=(A 样-A 损害)/(A 未损害-A 损害)×100

%。1.3.2　O 2·-的生成及清除率的测定:配制含磷酸盐缓冲液(pH8.3)50mmo l /L 、连苯三酚0.2mmo l /L 的溶液作为反应体系,反应温度为25℃,测定波长为322nm 。此反应体系中加入一定量Y L S,以同浓度Y L S 作参比,测定反应启动后10s 时的吸收值(A 样)。另取试剂同上,不加Y L S,作为空白对照,以PBS 为参比,测反应启动后10s 时的吸收值(A 空)。重复8次。按下式计算清除率:O 2·-清除率(S %)=(A 空-A 样)/A 空×100

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22·广西医科大学学报

J OU RNAL O F GUANGXI M EDICAL UN IV ERS ITY

　2004Feb ;21(1)

DOI:10.16190/ k i .45-1211/r.2004.01.010