园林植物遗传育种学实验指导

园林植物遗传育种学实验指导书

（园林专业用）

张菊平编

河南科技大学林学院

二○○七年六月

河南科技大学学生实验守则

1．实验前要认真预习实验指导书和有关基础理论，并接受实验指导人员的检查。否则，不得参加实验。

2．学生必须按时到实验室上实验课。进入实验室后应保持室内安静整洁，不准吸烟、随地吐痰和将赃物带入室内。

3．做实验时必须严格遵守实验室的规章制度和仪器设备的操作规程，服从教师和实验技术人员的指导。

4．爱护仪器设备、节约使用材料，未经许可不得动用与本次实验无关的仪器和其它设施，不准将室内物品带出室外。

5．实验中要细心观察，认真记录各种数据，不得马虎从事，不得抄袭他人数据，不得擅自离开操作岗位。

6．实验时必须注意安全，防止人身和设备事故的发生，若发生事故迅速采取有效措施，包括切断电源等，并注意保护现场，及时向指导人员报告。

7．实验完毕后，要将使用的仪器设备、工具等整理整齐，清扫实验场地，交检实验记录，经实验指导人员同意后方可离开。

8．凡损坏仪器设备和工具者应主动说明原因，并接受检查，填写报废单或损坏情况报告，根据具体情况进行处理。凡不遵守操作规程或擅自动用其它仪器设备造成损坏者按有关规定进行处理。

摘自：河科大教〔２００７〕１９号

河南科技大学实验设备借用与赔偿制度

一、借用制度

1．常规仪器设备校内互借，经所属实验室主任同意，借用方填写借用登记薄，双方严格交接手续。校外原则上不借，特殊情况经院（系）、实验室及实验室与设备管理处三方同意并填写借用登记薄，担保人签字担保，并收押金方可借出。

2．大精设备不外借。校内借用时，设备技术人员应随机操作或指导。

3．计量仪器不准借用。

4．私人不准借用校内各类实验仪器设备和工具。

二、赔偿制度

人为造成实验设备丢失、损坏者，除追究当事人责任外，另按下列规定进行经济赔偿。

1．教职工损坏、丢失实验仪器设备，修复后不影响使用者，赔偿全部修理费。如影响使用精度者，最低可按原价的5%赔偿。

2．外借仪器设备损坏或丢失，除按原价赔偿外，再增加20%的管理费。

3．学生损坏、丢失仪器设备者，一般情况下赔偿50至100元，情况严重者赔偿100至200元。

4．教工、学生借用的工具丢失或损坏，按新旧程度折价赔偿。

摘自：河科大教〔２００７〕１9号

河南科技大学林学院学生实验须知

为了保证实验课的教学效果，要求同学们必须以事实求实、严肃认真的科学态度进行实验，不断提高独立思考和独立工作的能力。在实验课中应注意以下几点。

1、学生要自备实验指导书及实验报告纸、实验记录本等用具。

2、每次实验前，要提前预习实验指导书上的有关内容，以明确该次实验的目的，了解实验的内容和方法步骤。

3、进入实验室后，应按所在组的位置就位，为各组配备的实验仪器和材料不得随便挪动和乱放。未经教师允许，不得乱动室内仪器、药品和用具，以免影响实验。

4、实验前组长领取或清点本组的实验用具，实验后如数交回；贵重仪器在实验前后均应由使用者填写使用记录；实验中所用各种化学药品，要严格按照规范使用；凡不遵守实验规则而造成仪器、用品损坏或者丢失者，视情况按学校有关规定由本人赔偿经济损失。

5、实验过程要认真仔细地按照实验指导书的要求进行，切实熟练掌握实验观察要点及操作技术，有疑问可随时与老师或者同学商讨解决，切忌在实验室嬉闹或喧哗。

6、写实验报告时要抓住重点来进行文字记载或者绘图制表，绘图时要正确、整洁、美观。实验报告按时上交。

7、实验结束后，应将仪器装好，器具清洗干净，摆放整体。由值日同学打扫卫生。关好门窗、电源及水龙头后才能离开实验室。

河南科技大学林学院

二〇〇七年六月

前言

《园林植物遗传育种学实验指导书》是为园林专业编写的。园林植物遗传育种学实验是学好和掌握园林植物育种的基本原理、基本知识和基本操作技能的主要环节。加强实验和实践教学，对培养学生创新精神、动手能力有至关重要的作用，有利于学生对本门课程教学内容的全面了解和掌握，有利于增强学生分析和解决问题的能力以及创新精神的培养，有利于学生掌握先进的育种技术。

该书由张菊平和陈迪新老师收集整理和编撰，由于时间和水平有限，书中定有不当之处，恳请批评指正。

编者

2007年6月

目录

实验一分离规律的验证 (1)

实验二独立分配规律和连锁规律的验证 (4)

实验三植物细胞有丝分裂的观察 (7)

实验四花粉生命力的鉴定 (10)

实验五园林植物种质资源调查 (13)

实验六单株选择 (14)

实验七植物有性杂交 (15)

实验八植物多倍体诱导 (17)

实验九花粉母细胞减数分裂制片法 (18)

实验十人工诱变 (21)

实验十一园林植物遗传力的估计 (24)

实验十二园林植物花器结构及开花授粉习性的观察 (26)

实验十三植物培养基的配制与灭菌 (28)

实验十四园林植物的组织培养 (31)

实验十五植物基因组DNA的提取 (33)

实验一分离规律的验证

一、目的

1. 通过对玉米果穗标本的观察，验证并加深理解遗传学三个基本规律。

2. 掌握对植物材料杂种后代分离情况进行分析的基本方法。

二、材料及用具

杂种玉米F2分离果穗标本；手揿计数机。

三、原理

分离规律指出，相对的性状由相对的两个遗传因子控制，一个来自父方，另一个来自母方。两个遗传因子在体细胞内成对存在。

当杂种形成时，成对因子彼此分离，因此，每个配子内只含有相对因子的一个。杂种产生的不同类型的配子，数目相等，并且各种异性配子相互结合的机会均等，从而使杂种植株在自交或测交的情况下，表现出一定的比例（3∶1或1∶1）。

以玉米性状分离和配子分离来证实。

玉米籽粒有胚、胚乳和果皮三部分。由于形成种子前双重受精的结果，胚为二倍体（2n），胚乳为淀粉层和糊粉层均为三倍体（3n），它们性状发育的方向是由父母本的遗传基础共同决定的，当代表现亲本显性性状。因此如父本花粉中含有显性基因时，它所决定的性状就能在当代母本籽粒上表现出来，这种现象叫“花粉直感”。果皮是由子房壁及珠被发育而成，属母本体细胞组织。它的性状发育是由母本的遗传型决定，与当代授粉作用无关，不表现“花粉直感”。

性状分离：玉米胚乳中淀粉层的性状有甜（su）与非甜（Su），糯质（wx）与非糯质（WX），凹陷（Sh）与饱满（sh）等，主要受一对基因的控制。当具有隐性甜胚乳（susu）性状的个体授以显性非甜（SuSu）胚个体的花粉时，由于花粉直感作用，当代就能得到非甜种子（Susu）。由它长成的F1植株在形成性细胞时，相对基因Su、su发生分离，产生两种类型的配子Su、su，其数目相等。F1植株与隐性亲本（susu）测交后，得到甜与非甜为1∶1的分离比例，自交则产生甜与非甜为3∶1的比例。

配子分离：杂合非糯玉米株在花粉粒上的分离，直接证明配子发生分离，也直接说明了相对基因的发生分离。纯合糯玉米（wx wx）产生的花粉粒含支链淀粉，与碘作用呈蓝黑色，杂合非糯性玉米（WXwx）则产生上述两种数目相等的花粉粒，用碘染色后，半数花粉粒呈蓝黑色，半数花粉粒呈红棕色，由此证明，基因的分离是在形成孢子的减数分裂过程中。

如果F1植株上形成的花粉是1∶1的，在其自交所形成的F2穗上将会有3/4种子为非糯，1/4种子为糯质，如下表。