不同生长年限川党参多糖＼总黄酮含量的分析比较

不同生长年限川党参多糖＼总黄酮含量的分析比较

在川党参主要供应地区获取川党参，从而具有一定代表性，通过严格反复实验分析出川党参生长年限对其多糖、总黄酮含量含量的影响，采用UV测定法检测出总黄酮含量，并对其产生的差异进行分析比较探讨。总结出不同年限生长川党参钱3年均成递增趋势，然而4年生党参却减慢，得出结论从经济成本和药用价值方面3年生川党参比较适宜采摘。

标签：川党参；生长年限；多糖；总黄酮

1引言

党参中川党参占重要地位因其耐抗性、便于培植受到很多人欢迎，其产地大多在华南及东南亚地区。川党参在保健行业更受欢迎，在部分乡村区域人们把其作为地区经济发展的重点项目来做并且受益很好，所以对于川党参的研究很有价值。川党参是多年生草本植物，所以其生长年限及其生长代谢产物含量变化不同所以其生药质量以及药用价值也是有差异的。因此要获得最大经济利益，川党参的生长年限尤为关键，在保证川党参生药质量、药用价值符合质量标准的前提下，考虑其生长期的长短对药农的生产投入所产生的经济负担。本文对不同生长年限川党参的多糖和总黄酮含量嘲进行分析比较，对川党参生长年限和采收做了初步的分析，可以作为川党参种植采收的参考。

2实验部分

2．1仪器、试剂与材料UNlC0UV2000型紫外一可见分光光度计（上海精科仪器有限公司）；xc-100型数控超声清洗器(西安康明超声波设备仪器有限公司)；R-1005 (郑州长城仪器有限公司)；XS205DU型分析天平(瑞士Mettler Toledo公司)。川党参(采集于重庆市奉节县，采集时间：2013年9月)。芦丁标准品(99．8％，批号0781-200610，中国药品生物制品检定所)；葡萄糖标准品(99．8％，批号110833-200903，分析纯，中国药品生物制品检定所)；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、石油醚、无水乙醇、乙醚、丙酮、氯仿，苯酚，实验所用试剂皆为分析纯。实验用水为自制蒸馏水[1]。

2．2实验方法

2．2．1供试品溶液制备准确称取不同年份的党参粉5份，每份约5．00g，用石油醚(60℃~90℃)水浴回流脱脂两次(5h/次)。挥干残渣溶剂，置于圆底烧瓶，加70％乙醇40ml。浸泡20h，70°C下回流3h。过滤，另用少量85％乙醇多次洗涤滤渣，入提取液，转入100ml。容量瓶，用85％乙醇定容，得测总黄酮的川党参供试品液一。将提尽黄酮后的川党参残渣置于loomL圆底烧瓶中，加80％乙醇50mI。超声提取20min，以除去单糖及部分苷类。挥干残渣乙醇，加水50ml。在75°C水浴下回流3次，2h/次，合并两次提取液，旋转蒸发至10ml左右，用水定容于100ml容量瓶申，即为测多糖的川党参供试品液二。

2．2．2多糖含量的测定

2．2．2．1校准曲线的绘制准确称取105°C干燥至恒重的葡萄糖20.00mg，置于100mL容量瓶中用水稀释至刻度100，即得o．2mg／ml葡萄糖标准溶液。准确吸取标准溶液0、0.2、0.4、0．6、0．8、1．0mL分别置于10ml具塞试管中，依次加水补足到1.0ml。，分别在试管中加入5％的苯酚溶液1ml，摇匀后迅速加入浓硫酸5ml，并冰浴冷却，然后置于100°C水浴锅中加热10min，自来水下冷却后以蒸馏水补至刻度，于490nm处测定吸光度，绘制校准曲线，以吸光度A对样品浓度c作回归分析，得到回归方程后绘制校准曲线如图1。表明糖含量在。0~0.02mg／ml范围内具有线性特征。

2．2．2．2多糖含量的测定准确吸取供试品液二0．5ml。按照2．2．2．1节的方法测定其吸光度，计算出不同年份川党参多糖含量。

2．2．2．3精密度、稳定性实验准确吸取供试品液二1ml，分别吸取6份，按2．2．2．1节的方法测定其吸光度，求得RsD为3．42％。以其中一份作为参考对象，在0.5、1、2、4、12、24h时测定其吸光度，求得RSD为2．45％。

2．2．2．4加标回收率实验准确吸取4份党参样品液lmI。，分别加入0.2mg ／mL葡萄糖标准液0、0.5、1、1．5，按照2．2．2．1节方法，测得吸光度A，计算平均回收率为99．94％，RSD为4．27％。

2．2．3总黄酮含量的测定

2．2．3．1校准曲线的绘制在120°C准确称取减压干燥至恒重的芦丁对照样品20mg，将60％乙醇用于溶剂溶解并定容至1000mI，制得0．02mg／ml的芦丁标准溶液。分别用滴管吸取芦丁的标准溶液0、1．0、2．0、3．0、4．0、5．0ml置于不同10mL的容量瓶中，加5％亚硝酸钠溶液lmL并摇匀后放置10min，加1mL硝酸铝溶液(10％)后摇匀并放置10min，加入1．0ml的氢氧化钠（5％）。加60％乙醇至刻度后摇匀且静置20min。以第一管为空白对照，于波长510nm 扫描，测定吸光度。绘制吸光度一浓度曲线，求得回归方程为A=1．43°C+0.0292，r=0．9995。图2为其校准曲线。说明在0~0.01mg／mI范围内吸光度成正相关且非常稳定。

图1多糖校准曲线

图2总黄酮校准曲线

2．2．3．2总黄酮含量的测定准确吸取供试品液lml，按照2．3．1节的方法测定其吸光度，计算出不同年份川党参总黄酮含量。

2．2．3．3精密度、稳定性实验准确吸取供试品液一1ml，共吸取6份，按2．2．3．1节的方法测定其吸光度，求其RSD为2．07％。以其中一份作為参考对象，在0.5、l、2、4、12、24h时测定其吸光度，求得RSD为4．88％。

2．2．3．4加标回收率实验分别量取藏党参的样品液1mI．，共4份，置于10ml容量瓶里。准确加入0.02mg／mL的芦丁标准品储备液0、0.4、0.8、1．0ml，再加入80％的乙醇溶液补足至10mL，照2．2．3．1节方法，进行吸光度测定，求得回归方程、平均回收率为114．53％，RSD4．50％。

3结果与讨论

3．1不同生长年限川党参多糖含量（见表1）。

由表1可知，川党参生长曲线为驼峰型，并非随年限增长而无限制增加代谢物含量，第2年相对增长率为20．74％左右，第3年相对增长率为86．53％左右，第4年却出现相对负增长20．62％。其中3年生川党参增长率及多糖含量最高。得出结论川党参生长期3年内均为多糖积累阶段，而3年积累最为迅速含量最高。多糖积累但不储存，所做实验为川党参采摘作出指导作用

3．2不同生长年限川党参总黄酮含量（见表2）。

根据表2可知，在川党参种植过程中，总黄酮含量是根据生长年限的增加而增长的。第2年的增长率是83．33％，第3年的增长率是48．48％，第4年的增长率是21．09％。第2年的增长率最高，第3年也保持较高的增长速度，在这个时期，总黄酮含量都是以一个较为快速的速度增长的，到第4年时增长率降低，可见增长速度在放缓[2]。如果仅以总黄酮含量作为指标进行考察，选收4年生的川党参总黄酮含量最高，但是考虑到第4年总黄酮增长速度在下降，加之多1年的生长，成本陪护费用也相应增加，综合表1和表2，结合多糖含量、总黄酮含量进行考察，应该选择采收3年生川党参，既保证了生药质量，又节约了种植成本。因此，采收3年生川党参是较为合适的。

3．3结果分析经过调查，在渝产川党参种植区，由于各方面因素，大多数药农采挖移植2年后的川党参作为药材，可能导致部分川党参药材的生药品质并未达到最佳。因此，综合药农的生产成本、种植年限和生药品质，可以选择采挖3年生川党参作为药材，这样可以保证其药用效果。

4结论

党参为补中益气、健脾益肺大宗药材，其药用含量丰富，许多有效成分有待发掘，然而其糖类与总黄酮含量丰富已毋庸置疑，在提取糖类与总黄酮方面川党参有点突出作为药用种植最为合适。多糖是植物最为普遍的代谢产物，药理实验证明其具有增加机体免疫力，增加脾脏造血功能等功效。黄酮具有抗炎抗病毒等广谱的生理活性和药理作用。川党参多糖黄酮的药理研究也从一个侧面印证了党参补中益气、健脾益肺的功效。多糖的测定有苯酚一硫酸法和蒽酮一硫酸法，蒽