植物提取物中总糖测定方法
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植物提取物中总糖测定方法
1．仪器：UV-Agilent8453紫外-可见分光光度计
2．试剂：5%苯酚水溶液浓硫酸
二、测定步骤
1．对照品溶液制备：精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖约50mg，置50ml 容量瓶中，加水溶解定容，
2．标准曲线制备：分别精密量取对照品溶液0、0.5、1、2、5、10ml于50ml 容量瓶中加水定容至刻度，各取2ml上述溶液于25ml，具塞试管中，分别加入5%苯酚溶液1.0ml摇匀，加入浓硫酸10ml摇匀。于沸水浴中煮沸3-5min，取出后放置至室温，在485nm和以试剂空白作参比测吸收度。以吸收度为纵坐标，浓度C（mg/ml）为横坐标，绘声绘制标准曲线，求回归方程，
3．样品溶液制备：精密称取待测样品约150mg置50ml容量瓶中，加入80～90℃热水适量超声溶解后，放冷定容。取上述溶液2mL稀释至50ml即为供试品溶液。再取供试品液2ml于25ml具塞试管中，加入5%苯酚溶液1.0ml摇匀，加入浓硫酸10ml摇匀。于沸水浴中煮沸3-5min，取出后放至室温，即为待测样品溶液。
三、样品测定
打开仪器电源，预热20min，待仪器自检通过后，在485nm处以试剂空白作能比测待测样品溶液吸收度，求得样品溶度。
四、结果计算
50×25×Ci
总糖含量（%）=––––––×100
Wi
Ci：由标准曲线求得样品浓度（mg/ml）
Wi：样品称取量（Mg）