酶工程试卷.
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一、判断题(每题1分,共10分)
1. 酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。(×)
2. 酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度,反应速度越大,意味着酶活力越高。(√)
3. 液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。(√)
4. 培养基中的碳源,其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。(×)
5. 在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对,在酶的亲和层析分离中,可把分子对中的任何一方作为固定相。(√)
6. 补料是指在发酵过程中补充添加一定量的营养物质,补料的时间一般以发酵前期为好。(×)
7. 酶固定化过程中,固定化的载体应是疏水的。(×)
8. 在酶的抽提过程,抽提液的pH应接近酶蛋白的等电点。(×)
9. 青霉素酰化酶不但能催化青霉素侧链的水解作用,而且也能催化逆反应。(√)
10.亲和试剂又称活性部位指示试剂,这类修饰剂的结构类似于底物结构。(√)
11.酶的分类与命名的基础是酶的专一性。(√)
12.膜分离过程中,膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过,而把大于其孔径的颗粒截留。(√)
13.角叉菜胶也是一种凝胶,在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。(╳)
14.α-淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化,但不称为糊精化酶。(╳)
15.酶法产生饴糖使用α-淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。(╳)
二、填空题(每空1分,共10分)
1. 日本称为“酵素”的东西,中文称为____酶_,英文则为__enzyme_,是库尼(Kuhne)于1878年首先使用的。
2. 1926年,萨姆纳(Sumner)首先制得__脲酶_酶结晶,并指出_脲酶_是蛋白质。他因这一杰出贡献,获1946年度诺贝尔化学奖。
3.1960年,雅各布(Jacob)和莫诺德(Monod)提出了操纵子学说,认为DNA分子中,与
酶生物合成有关的基因有四种,即启动基因、操纵_基因和__结构__基因。
4.酶的生产方法有提取分离法,生物合成法和化学合成法。
5.酶的分离纯化方法中,根据目的酶与杂质分子大小差别有_凝胶过滤_法,_超滤法和超
离心法三种。
6.酶的分离方法有沉淀分离、离心分离、过滤与膜分离、层析分离、电泳分离、萃取分离
7.根据生物合成类型可把酶分为两类:组成型酶和适应性酶(调节型酶)
8.优良的产酶微生物所具备的条件:(1)酶的产量高,发酵周期短(2)产酶稳定性高(3)
容易培养和管理,不易变异退化(4)利于酶的分离纯化,最好是产生胞外酶的菌种(5)安全可靠无毒性等。
9.酶发酵的生产方式:固定发酵法,液体深层通气发酵法,固定化细胞核固定化原生质体
发酵。其中最理想的酶合成模式是固定化细胞核固定化原生质体发酵
10.Km值增加,其抑制剂属于(竞争性)抑制剂,Km不变,其抑制剂属于(非竞争性)抑制剂,
Km减小,其抑制剂属于(反竞争性)抑制剂。
11.菌种培养一般采用的方法有(固体液体)培养法。
12.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素,除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影
响,发酵条件一般包括(温度pH 通风量(或氧气)搅拌泡沫湿度)等。
13.打破酶合成调节机制限制的方有(控制条件遗传控制其它方法)。
14.酶生物合成的模式分是(同步合成型延续合成型中期合成型滞后合成型)。
15.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有(热变性法酸碱变性法表面
变性法)
16.通常酶的固定化方法有(吸附法共价键结合法交联法包埋法)。8. 酶分子的体
外改造包括酶的(表面修饰内部修饰)。
17.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的(过渡态),从而降低了底物分子
的(能障),而抗体结合的抗原只是一个(基)态分子,所以没有催化能力.
18.决定酶催化活性的因素有两个方面,一是酶分子结构,二是反应条件。
19.求Km最常用的方法是双倒数作图法。
20.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类,一类是序列机制,另一类是乒乓机制。
21.可逆抑制作用可分为竞争性,反竞争性,非竞争性,混合性;
22.对生产酶的菌种来说,我们必须要考虑的条件有,一是看它是不是致病菌,二是能够利用廉价原料,发酵周期短,产酶量高,三是菌种不易退化,四是最好选用能产生胞外酶的菌种,有利于酶的分离纯化,回收率高。
23.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。
24.酶制剂有四种类型即液体酶制剂,固体酶制剂,纯酶制剂和固定化酶制剂。
25.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。
26.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。
27.1961年,国际酶委会规定的酶活力单位为:在特定的条件下(25o C,PH及底物浓度为最适宜)每1分钟内,催化1μmol的底物转化为产物的酶量为一个国际单位,即1IU。
28.酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能,即提高酶的活力、减少抗原性,增加稳定性。29酶的生产方法有提取法,发酵法和化学合成法。
30借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用,制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。
31由于各种分子形成结晶条件的不同,也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶,因此酶结晶既是纯化手段,也是纯化标志。
32培养基的五大要素:(碳源)(氮源)(无机盐)(水)(生长因子)
33影响酶生物合成模式的主要因素:(mRNA的稳定性)(培养基中阻遏物的存在)
34酶反应器的类型按操作方式区分,可分为(分批式反应)(连续式反应)(流加分批式反应)。
35酶定向进化的一般过程:随机突变构建基因文库筛选目的突变
三、名词解释
1抗体酶:是一种具有催化作用的免疫球蛋白,属于化学人工酶
2酶反应器:是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置,他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件,使底物最大限度的转化为物。
3模拟酶:利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
4底物抑制:在酶促反应中,高底物浓度使反应速度降低的现象。
5稳定pH:酶在一定的pH范围之内是稳定的,超过这个限度易变性失活,这样的pH范围为此酶的稳定pH
6产酶动力学:主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响,包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。
7凝胶过滤:又叫分子排阻层析,分子筛层析,在层析柱中填充分子筛,加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗,样品中的分子经过一定距离的层析柱后,按分子大小先后顺序流出的,彼此分开的层析方法。
8固定化酶:通过物理的或化学的方法,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚于一定的