2020学年高中生物 第二章 克隆技术 第三节 动物的克隆课件 浙科版选修3

第二章 克隆技术
第三节 动物的克隆
第二章 克隆技术
1．简述动物细胞、组织培养。(重点) 2.描述细胞系及细胞株 的含义。 3．简述动物的克隆培养法。 4.掌握动物细胞核移植的概念和 核移植的程序。(难点)
一、动物细胞的培养和克隆形成 1．动物细胞培养 (1)将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或____胰__酶____ 消化，使其分散成单个的细胞，然后，在人工控制的培养条件 下，使这些细胞得以生存并保持生长、分裂乃至_接__触__抑__制___和 有规律的衰老、死亡等生命活动现象。
多种杂种细胞 ―筛―选→ 能产生专一抗体的且可无限增殖的细胞 群。
单克隆抗体外培养：从细胞培养液中提取抗体 (2)体的获得体内培养：从动物腹水中提取抗体
(3)应用 在疾病诊断、治疗与预防方面与常规抗体相比具有特异性强、 灵敏度高的特点。单抗可作为_特__异__探__针___，研究相应抗原蛋白 的结构、细胞学分布及其功能。
三、动物的克隆繁殖
1．动物细胞全能性的表现程度 (1) ___受__精__卵___及其第一次卵裂所得的 2 个子细胞，都可发育成 完整个体。
(2)有的细胞只具有分化出多种组织细胞的潜能，这样的细胞叫 做__多__能__细__胞__。例如多能造血干细胞，可分化为红细胞、白细 胞和血小板等。 (3)有的只能分化为__一__种__细__胞__，如单能造血干细胞。 (4)有的已经分化，不再分化为其他细胞，甚至终生不再分裂， 如高度分化的神经细胞。 (5)低等动物细胞的全能性一般比较_容__易___体现。
(2)程序(以克隆羊多莉为例) 首先，将未受精_去__核__的__卵__细__胞____融合，形成重组细胞，促使其发育 为早期胚胎，到一定程度时，植入母体子宫中，发育成个体。
2．克隆出来的动物个体和亲本完全一样吗？ 提示：不完全一样。要受核基因、质基因和外界环境的影响。
(2)细胞杂交 ①概念：__基__因___型__不__同___的细胞间的融合就是细胞杂交。 ②过程
③应用：由于细胞杂交中染色体容易丢失，利用杂交细胞检测 特定染色体丢失与特定基因产物(蛋白质)减少的对应关系可以 进行_基__因__定__位___。
2．单克隆抗体的制备 (1)过程(如图)
_____骨B__淋__髓__巴__瘤_______细细胞胞（（能能产无生限抗增体殖））用细灭胞活融―的―合病→并毒筛诱选导 细胞培养
二、细胞的融合技术及其应用 1．细胞融合与细胞杂交 (1)细胞融合 ①概念：是指将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的现象。 ②原理：___细__胞__膜__的__流__动__性_____。 ③诱导融合的方法 a．物理方法和化学方法：电激法、____聚__乙__二__醇____等。 b．生物方法：__灭__活__的__病__毒____ (如仙台病毒)。
(2)动物细胞培养的流程：取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的 器官或组织)→剪碎→用__胰__蛋__白__酶__处理分散成单个细胞→制 成__细__胞__悬__液__→转入特殊培养液中进行_原__代__培__养___→贴满瓶壁 的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续____传__代____培
养。
动物细胞的培养
1．动物细胞培养过程中的几个重要概念 (1)细胞贴壁和接触抑制 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞 数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞 就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。当细胞癌 变后，就失去接触抑制的特点，而无限增殖。
(2)原代培养：原代培养有两种表述：①细胞悬浮液第一次在瓶 中培养，没有分瓶之前的细胞培养；②第 1 代细胞的培养与传 10 代以内的细胞培养统称为原代培养。两种表述没有本质区 别。 (3)传代培养：传代培养同样有两种表述：①细胞悬浮液培养一 段时间后，分瓶再进行的细胞培养；②传 10 代以后的细胞培养， 统称为传代培养。
(4)细胞系：原代培养物经首次传代成功即称为细胞系，因此细 胞系可泛指一般可传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做 连续细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。 (5)细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞 系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。细胞株一般具有 恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等。 细胞株是具有特殊性质的细胞系，可以连续多代传代的细胞株 称为连续细胞株，可传代次数有限的细胞株称为有限细胞株。
2．动物组织培养 动物组织在体外及人工条件下维持__生__活__状__态__或__生__长__特__性____。 由于细胞的运动、变化和培养物的组织成分发生变化，长期的 培养结果最终成了简单的___细__胞_____培养。综合细胞培养和组 织培养的含义和规律，两者在一定程度上可以看作是同义语， 因此可将它们统称为组织培养(组培)。 3．细胞系与细胞株 细胞系泛指可传代的细胞，细胞株是具有__特__殊__性__质__的细胞系。
1．动物细胞培养中，出现遗传物质改变的细胞被称为什么？ 提示：细胞系。
4．克隆培养法 (1)概念：把一个___单__细__胞___从群体中分离出来单独培养，使之 繁衍成一个新的细胞群体的技术。
(2) 细 胞 克 隆 的 最 基 本 要 求 ： 必 须 肯 定 所 建 成 的 克 隆 来 源 于 _单___个__细__胞__。 (3) 提 高 细 胞 克 隆 形 成 率 的 措 施 ： 选 择 适 宜 的 培 养 基 、 添 加 ___血__清_____、以滋养细胞支持生长、___激__素_____刺激、使用 CO2 培养箱、调节 pH 等。
2．动物难以克隆的根本原因 动物细胞的__细__胞__分__化___使得细胞发生了基因的差异表达，有的 开放，有的关闭，细胞中合成了专一的蛋白质。基因组中基因 的活动很不完全，不能像受精卵那样发挥细胞的全能性。 3．动物细胞核移植的概念和程序 (1)概念：所谓核移植，就是利用一个细胞的__细__胞__核__(_供__体__核__) __ 来取代另一细胞中的细胞核，形成一个重建的“合子”。