遗传学人和动物非显带染色体的镜下观察

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2n=24
二、实 验 原 理
（一）人类染色体的数目和形态特征 1. 形态结构： 短臂p、长臂q、着丝粒、端粒、随体
随体 次缢痕 短臂（p） 着丝粒 动粒 次缢痕
长臂（q）
端粒
2. 分类：
❖ 中央着丝粒染色体 1/2～5/8 ❖ 亚中央着丝粒染色体 5/8～7/8 ❖ 近端着丝粒染色体 7/8～末端
2. 染色体片的制作步骤 （1） 收获血细胞 （2） 低渗 （3） 固定 （4） 调整细胞浓度，滴片 （5） Giemsa染色，风干，封片
（二）小鼠染色体标本片的制作过程
1. 秋水仙素处理 小鼠实验前3.5-4h腹腔注射 0.05%秋水仙素0.2ml。
确保秋水仙素液 注入小鼠腹腔内
2. 取股骨收集骨髓细胞
油镜下观察计数并绘图
❖ 作业： 进行人类染色体标本计数和鉴定性别 绘制人类染色体中期分裂相图 进行小鼠染色体标本计数 绘制小鼠染色体中期分裂相图
实验报告
1.实验目的 2.实验原理 3.实验用品 4.结果观察与绘图
2. 观察内容： 人类染色体标本片的观察 计数染色体的数目（分区计数） 大致分组 鉴定性别
低倍镜下寻找物象
高倍镜下选择染色 均匀，分散良好的 染色体分裂相
油镜下观察计数并绘图
正常女性核型
观察内容 小鼠染色体标本片的观察 小鼠染色体的形态特征，分区计数
低倍镜下寻找物象
高倍镜下选择染色均匀、 分散良好的染色体分裂相
❖ 4个为女性，5个为男性。
正常男性染色体核型
正常女性染色体核型
（二）小鼠染色体的数目和形态特征
小鼠染色体有20对，分为4组，在有丝分裂 中期呈“U” 形，全部为端着丝粒染色体。雄
性 小鼠有3条最短的染色体，而雌性小鼠只有两 条最短的染色体。
小鼠染色体 形态特征
三、实验用品
1.材料：人类常规染色的染色体标本、 小鼠骨髓细胞染色体标本
颈椎脱臼法处死小鼠 取两侧股骨，除去肌肉 并剪去股骨两头，露出 骨髓腔。
吸取柠檬酸钠液冲洗收集股骨骨髓腔中的 骨髓
3.低渗 4. 固定 5. 调整细胞浓度，滴片 6. Giemsa染色，风干，封片
五、镜 下 观 察
1. 观察步骤: ❖ 低倍镜下寻找物象 ❖ 高倍选择合适的分裂相 ❖ 油镜观察绘图
实验四
细胞生物与遗传学教研室
一、实 验 目 的
1. 掌握人类染色体的形态结构及其特征。 2. 初步学会在显微镜下计数人类染色体、
分组和鉴定性别。 3. 了解小鼠骨髓细胞染色体的形态结构。
不同物种染色体数 目不同，同一物种染 色体数目恒定。
❖ 小白鼠：2n=40 ❖ 大白鼠：2n=60
2n=46
2n=58
2.器材：显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸
四、实验内容与步骤
（一）人类染色体标本片的制作过程
1.人类外周血淋巴细胞短期培养法 ① 仪器和试剂的消毒
② 培养液的配制（无菌操作） RPMI 1640培养液 小牛血清
PHA 青链霉素 肝素 NaHCO3
分装接种
③采血接种培养72h ④收获前3h加秋水仙素 ⑤收获外周血淋巴细胞，制作染色体标本
3. 分组：分A～G七组
❖组别 ❖A ❖B ❖C ❖D ❖E ❖F ❖G
染色体编号 大小
1～3
最大
4、5
大
6～12 +X 中
13～15
中
16～18
较小
19、20
小
21、22 +Y， 最小
着丝粒位置 中、亚中 亚中 亚中 近端 中、亚中 中 近端
人类核型模式图
❖ 因此，可以根据G组染色体（最小的近端着 丝粒染色体）的数目是4个还是5个来鉴定性 别。