DB34T 1035-2009 饲料中总砷和无机砷的测定

DB34
安徽省质量技术监督局发布
DB34/T 1035—2009
前 言
本标准由安徽省畜牧兽医局提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。

本标准起草人：丁在亮、刘发全、张尤贞、刘红云、张莉、许世富、丁作坤、陶小平、蔡东东。

本标准首次发布。

DB34/T 1035—2009
饲料中总砷和无机砷的测定
1 范围
本标准规定了用原子荧光光度法测定饲料中总砷和无机砷的方法。

本标准适用于配合饲料、预混合饲料、浓缩饲料和单一类饲料中总砷和无机砷的测定。

2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 14699.1 饲料采样方法
3 原理
3.1 总砷的测定
试样经酸消解或干灰化破坏有机物，使砷成离子状态存在，加入硫脲（或碘化钾、氯化亚锡）将高价砷还原为三价砷，再加入硼氢化钠( NaBH4)或硼氢化钾( KBH4)在盐酸介质中还原成砷化氢( H3As)，由载气(氩气)带入原子化器中进行原子化，在砷特制空心阴极灯照射下，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与砷含量成正比。

与标准系列比较定量，测定总砷。

3.2 无机砷的测定
试样在 1+1 盐酸溶液中，经 70 ℃水浴加热后，无机砷以氯化物的形式被提取，实现无机砷和有机砷的分离，在 2 mol/L 盐酸条件下与硼氢化钠( NaBH4)或硼氢化钾( KBH4)反应还原成砷化氢( H3As)，由载气(氩气)带入原子化器中进行原子化，在砷特制空心阴极灯照射下，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与砷含量成正比。

与标准系列比较定量，测定无机砷。

4 试剂和溶液
实验室用水应符合 GB/T 6682 中二级用水的规格，使用的试剂除另有说明外，应为分析纯。

4.1 盐酸。

4.2 硝酸。

4.3 硫酸。

4.4 高氯酸。

4.5 六水硝酸镁。

4.6 硫脲。

4.7 碘化钾。

4.8 氢氧化钠。

4.9 硼氢化钠。

4.10 10 % 盐酸或硝酸(V/V)：准确量取 100 mL盐酸或硝酸于1000 mL容量瓶中用水定容至刻度，摇匀。

4.11 碘化钾-硫脲混合溶液：称取碘化钾10 g，硫脲5 g溶于水中，溶解后稀释至100 mL，混匀。

4.12 盐酸(1+1)：量取盐酸（4.1）与水1比1混合，摇匀。

DB34/T 1035—2009
4.13 氢氧化钠(8 g/L)：精确称取8 g氢氧化钠(4.8)，于1000 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。

4.14 氢氧化钠(100 g/L)：精确称取10 g氢氧化钠(4.8)，于100 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。

4.15 硼氢化钠溶液(10 g/L):称取10.0 g硼氢化钠(4.9),溶于氢氧化钠溶液(4.13)中，然后稀释至至1000 mL(也可以用14.0 g硼氢化钾代替硼氢化钠)。

此溶液可在冰箱中保存10 天。

4.16 硫酸溶液(1+9)：量取硫酸（4.3）100 mL，小心倒入900 mL水中，摇匀。

4.17 硝酸镁(150 g/L):称取150.0 g六水硝酸镁（4.5）,溶于1000 mL水中，混匀。

4.18 砷标准储备液（0.1 mg/mL）:精确称取0.1320 g于100 ℃干燥 2 小时的基准三氧化二砷（As 2O3），加100 g/L氢氧化钠（4.14）1.0 mL和少量水溶解后水转入100 mL容量瓶中，加25 mL(1+9)硫酸（4.16），摇匀，冷却至室温后，用10 % 盐酸或硝酸(4.10)定容至刻度。

贮存于冰箱中，备用。

此溶液含三价砷（A3+）1 mg/mL。

4.19 1 μg/mL砷标准应用液:砷浓度为。

取1.0 mL砷标准储备液（4.18）于1000 mL容量瓶中，用10 % 盐酸或硝酸(4.10）定容至刻度。

此溶液现用现配。

5 仪器
5.1 原子荧光分光光度计。

5.2 分析天平 分度值 0.0001 g。

5.3 电热板。

5.4 自动控温高温炉。

5.5 电热板（3000 W）或可调温电炉（600 W）。

6 分析步骤
6.1 测定总砷试样制备
6.1.1 湿法消解：
称取 1.0 g ～ 2.5 g 样品（精确到 0.0001 g）于 100 mL 三角烧瓶中，加 30 mL 硝酸(4.2) ,1.25 mL（1+9）硫酸(4.12)，摇匀，过夜。

次日于电热板上加热消解，当烧瓶内溶液约 10 mL 时，观察，如果样品完全消解，取下，冷却后将内容物全部转移至 50 mL 容量瓶或比色管中，加 2.5 mL 碘化钾-硫脲溶液（4.11），用水定容至刻度，待测；如果有未消解物质，补加 10 mL 硝酸(4.2)继续消解至10mL 左右观察，如此反复，直至样品完全消解。

同时做空白试验。

6.1.2 干法消解：
称取 1.0 g ～ 2.5 g 样品（精确到 0.0001 g）于坩埚中。

加入 10 mL 150 g/L 硝酸镁(4.17)，混合后低温蒸干，然后加 1 g 六水硝酸镁（4.5）覆盖于样品上部，再继续加热至不冒黑烟后，转入550℃ 高温炉灰化 4 小时，取出冷却后加 10 mL（1+1）盐酸(4.12)，煮沸后取下，冷却，然后转移至 50 mL容量瓶或比色管中，向容量瓶或比色管中加 2.5 mL 50 g/L 碘化钾-硫脲溶液（4.11），用 1.25 mL （1+9）硫酸(4.16)洗涤坩埚后一并转入容量瓶或比色管中，用水定容到刻度待测。

同时做试剂空白。

6.2 测定无机砷试样制备
称取试样 2.5 g（精确到 0.0001 g）于 50 mL 具塞刻度试管（或 50 mL 比色管）中，加 1+1 盐酸20 mL（4.12）摇匀。

置 70 ℃ 水浴锅中加热 18 小时，其间多次振摇，使试样充分提取，然后取出冷却后用 1+1 盐酸（4.12）定容至刻度，摇匀。

用脱脂棉过滤，准确取 4 mL 滤液于 10 mL 容量瓶中,加 1 mL 碘化钾-硫脲混合溶液（4.11），用水定容至刻度。

放置 10 分钟后测定。

如果出现浑浊，过滤后再测定。

同时做试剂空白。

6.3 砷标准系列溶液的配制
6.3.1 测定总砷用砷标准系列溶液的配制
DB34/T 1035—2009 取 6 个 25 mL 容量瓶或比色管，依次准确加入0.0、0.05、0.2、0.5、2.0、5.0 mL 1 μg/mL 的砷标准应用液（4.19）1.25 mL（1+9）硫酸（4.12）和2.5 mL 50 g/L 硫脲溶液（4.9），用 10 % 盐酸或硝酸(4.8)定容至刻度，摇匀,待测。

此标准砷浓度为：0.0、2.0、8.0、20.0、80.0、200.0 ng/mL。

6.3.2 测定无机砷用砷标准系列溶液的配制
准确量取 0.00、0.05、0.20、0.50、1.00、2.00 mL 的砷标准应用溶液(4.19)，分别于 50 mL 具塞比色管或容量瓶中用 10 % 盐酸(4.10)定容至刻度，其浓度分别是 0.00，1.00，4.00，10.00，20.00，40.00 ng/mL。

6.4 检测
6.4.1 仪器参考条件
光电倍增管负高压: 270 V；
灯电流: 70 mA；
原子化器温度:室温（档）；
炉高: 8 mm；
载气流速: 500 mL/min；
测量方式:标准曲线法；
读数方式:峰面积；
延迟时间: 2 s；
积分时间: 15 s；
采样时间 8 s 加液时间：自动；
泵速: 100 转/分。

6.4.2 总砷的测定
6.4.2.1 在标准曲线界面下，把 6.3.1 中的砷标准系列溶液依次检测，绘制出神标准曲线，要求标准曲线的R2 ≥ 0.9998。

6.4.2.2 样品检测
在样品参数界面， 对 6.1.1 样品溶液进行检测。

6.4.3 无机砷的测定
6.4.3.1 在标准曲线界面下，把6.3.2中的砷标准系列溶液依次检测，绘制出神标准曲线，要求标准曲线的R2 ≥ 0.9998。

6.4.3.2 样品检测
在样品参数界面， 对 6.2 样品溶液进行检测。

6.5 结果
测定完毕后，点击“报告”按钮，即进入“报告”界面，在此界面内选择需要的报告格式然后将测定结果直接打印出来。

取平行样品结果的平均值作为最终结果，结果表示到小数点后两位。

7 检测方法灵敏度、准确度、精密度
7.1 灵敏度
本方法检出限为 0.01 mg/kg。

7.2 准确度
本方法回收率均为 80 ％ ～ 120 ％。

7.3 精密度
本方法的批内变异系数 CV ≤ 10 ％，批间变异系数 CV ≤ 15 ％。