11分光光度法测定芦丁的含量

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2.学生操作教师辅导115min
1.分光光度法的基本原理
2.721型分光光度计的使用方法
1.强调721型分光光度计的正确使用
2.保护比色皿
七、注意事项
八、授课方法
九、使用教材
十、教研室
审查意见教师示范讲述,学生操作
《分析化学实验》自编教材
主任签字
新乡医学院化学教研室 年__月__日实验分光光度法测定芦丁的含量
XX
授课教师姓名及职称:
一、实验名称分光光度法测定XX的含量 药学
二、授课对象授课形式
实验教学
三、教学目标
1.掌握比色分析的一般操作方法
2.学习721型分光光度计的使用
1.标准溶液的配制
2.吸光度A的测定
3.绘制标准曲线
4.xx片中xx含量的测定
四、教学内容
五、教学安排
与课时分配
六、授课重点
1.讲解演示45min
一、实验目的
1.掌握比色分析的一般操作方法;
2.学习分光光度计的使Leabharlann Baidu方法。
二、实验原理
分光光度法定量分析分为单组分定量分析,多组分定量分析,本实验是单 组分定量分析,单组分定量分析方法包括吸光系数法、校正曲线法、对照法 等,分析中最常用的是校正曲线法。校正曲线法:
先配制一系列不同浓度的标准溶液,然后在选定的分析条件下测定吸光 度,然后以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得到一条通过原点的直线, 这条直线称为校正曲线,在相同的测定条件下,测得样品溶液的吸光度,通过 校正曲线就可以求出样品的浓度了。
(1 :20) ,硝酸铝溶液(1:10),1mol?L-1
氢氧化钠。
四、实验步骤
1.标准溶液的制备
取120C真空干燥至恒重的芦丁标准品约50mg精密称定,置于50mL容量 瓶中,加60%乙醇适量,水浴上微热,使溶解,放冷后用60%乙醇稀释至刻 度,摇匀。
2.绘制标准曲线
精密吸取标准溶液0.00,1.00,2.00,3.00,4.00及5.00mL,分别置于50mL容量瓶中,各加60%乙醇使成5.0mL,各精密加入亚硝酸钠溶液(1:20)0.5mL,摇匀,放置6分钟后,加硝酸铝溶(1:10)1.5mL,摇匀,放置6分钟, 加1mol?L氢氧化钠试液4mL,蒸馏水稀释至刻度,摇匀,放置15分钟。在510nm波长下测定各溶液的吸光度。以浓度为横坐标,吸收度为纵坐标,绘制 标准曲线。
3.样品测定-1
精密称取芦丁约50mg,置于50mL容量瓶中,加60%乙醇适量。水浴微热 使其溶解,冷后加60%乙醇至刻度,摇匀。精密吸取3mL,置于50mL容量瓶 中,按照标准曲线的绘制项下的方法,自加60%乙醇使成5.0mL”起操作,测定
吸收度,从标准曲线中读出试样中无水芦丁的含量,并计算样品中的含量。
本实验通过校正曲线法测定芦丁的含量,芦丁溶液的颜色较浅。不能直接 用分光光度法进行测定,那么,需要用显色剂将其变为有颜色的溶液,芦丁与
Al在亚硝酸钠碱性溶液中生成红色配合物,该红色配合物最大吸收波长在
510nm,所以可以在510nm测定吸光度。3+
三、仪器与试剂
721型分光光度计,容量瓶;芦丁标准品,60%乙醇,亚硝酸钠溶液
五、注意事项
1.实验过程中应使用同一比色皿(吸收池),以减小由于光程的不一致所带 来的测定误差。
2.测定标准系列各溶液的吸收度时,一定要遵循先稀后浓的原则,尽可能 的消除测定误差。
六、思考题
1.相同厚度的各比色皿透光性不一致时,为什么要经过多次洗涤后各比色 皿透光率差异无改变的情况下才使用校正值?
2.工作曲线法和标准对比法分析适用何种情况?从本实验的结果看,能否 用标准对比法?
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