葡萄糖细菌内毒素检查方法验证报告 模版

葡萄糖细菌内毒素检查方法验证报告文件编码：D01-5301 版本号：01

目录

一、目的 (1)

二、适用范围 (1)

三、内容 (1)

四、附件 (14)

五、变更历史 (14)

一、 目的

建立葡萄糖细菌内毒素检查方法，即按照《葡萄糖细菌内毒素检查方法验证方案》D01-5301进行验证，在本实验条件下的适用性，所采用的检验方法能够始终如一地获得符合客观实际的数据或结果，确保检验结果的准确性。

二、 适用范围

适用于本公司所生产的葡萄糖细菌内毒素检查方法的验证。

三、 内容 1. 概述

按照《2015年分析仪器、实验设备确认总计划》进度安排，验证小组按《葡萄糖细菌内毒素检查方法验证方案》D01-5301中既定检查项目，对葡萄糖细菌内毒素检查方法进行了检查、测试，且所有测试结果已收集齐全，现特此起草《葡萄糖细菌内毒素检查方法验证报告》，分析、总结各项验证情况，对葡萄糖细菌内毒素检查方法做出客观评价，提出合理化使用建议，以确保该检验方法的检验结果准确可靠。

2. 验证组织

3. 验证实施时间：2015.10.12

4. 验证内容

根据公司《验证管理规程》C05-0001的有关规定，对葡萄糖细菌内毒素检查方法进行验证。验证内容包涵鲎试剂灵敏度复核试验、干扰试验以及凝胶限度试验，以

部 门

部门职责

责任人 职 务

工作划分 备注 质量部 方案起草、组织

实施、过程监

控、书写报告

方案、报告起草，验证实施及操作结果的

复核

进行验证操作

过程监控 验证委

员会

方案、报告审核、批准、验证

合格证发放

方案、报告审核

方案、报告批准；验证合格证发放

确认所建立的葡萄糖细菌内毒素检查方法可行性、准确性。

5.验证依据

5.1.验证的法规依据

《药品生产质量管理规范（2010年修订）》

《药品GMP指南·质量控制实验室与物料系统》

《中华人民共和国药典》2015年版四部

6.验证前完成工作检查6.1.文件资料的检查

确认项目认可标准确认方法确认结果是否符合是否

验证方案已起草，并经过审核、批准对验证方案进行检查验证方案已完成起草，并按照规定结果验证委员会成

员审核，验证委员会组长批准。

√

参与人员已经过验证方案培训检查人员培训签到表已对验证参与人员进行了验证方案的培训，培训签到

表作为验证方案附件保存。

√

执行标准符合《中华人民共和国药

典》2015年版四部《细菌

内毒素检查法》

检查验证方案是否符合《中

华人民共和国药典》2015年

版四部《细菌内毒素检查法》

的要求

检查验证方案符合《中华人民共和国药典》2015年

版四部《细菌内毒素检查法》的要求

√

结论验证方案已起草，并经审核、批准，并对相关人员进行了培训，且符合相关法规规定要求。

检查人：日期：

复核人：日期：

Q A ：日期：

确认项目认可标准确认方法确认结果

是否符合

是否

工作标准品应由有资质的单位提供

且在有效期内

检查工作标准品瓶身

由中国食品药品检定研究所提供，且在定值后有效期

内。

√

鲎试剂应由有资质的单位提供

且在有效期内

检查鲎试剂瓶身的信

息

鲎试剂由湛江安度斯生物有限公司提供，有效期至

2017年04月。

√

细菌内毒检查用水应由有资质的单位提供

且在有效期内

检查细菌内毒素

瓶身的信息

细菌内毒素检查用水由湛江安度斯生物有限公司提

供，有效期至2018年06月。

√

结论根据《葡萄糖细菌内毒素检查方法验证方案》D01-5301中既定项目进行确认，所有确认结果均符合规定要求。

检查人：日期：

复核人：日期：

QA ：日期：

确认项目认可标准确认方法确认结果

是否符合

是否

干燥箱已进行过检定，且在有

效期内

检查干燥箱检定合格

证

由仙桃市检定计量测试所进行检定，检定有效期至

2016年03月10日。

√

结论根据《葡萄糖细菌内毒素检查方法验证方案》D01-5301中既定项目进行确认，所有确认结果均符合规定要求。

检查人：日期：

复核人：日期：

QA ：日期：

7.方法验证

7.1.鲎试剂灵敏度复核试验

鲎试剂

生产单位：湛江安度斯生物有限公司批号：1505151 灵敏度：0.125EU/ml

生产日期：2015.05.15 规格：0.1ml/支/ / 细菌内毒素工作标准品生产单位：中国食品药品检定研究所批号：150601-201580 效价：80EU/支细菌内毒素检查用水/BET水生产单位：湛江安度斯生物有限公司批号：1504130 / /

7.1.2.内毒素标准溶液的制备：

80EU/ml 10EU/ml 1EU/ml 0.5EU/ml 0.25EU/ml

0.5EU/ml 0.25EU/ml 0.125EU/ml0.06 EU/ml0.03EU/ml （4λ）（2λ）（λ）（0.5λ）（0.25λ）

验证项目认可标准验证方法

鲎试剂

灵敏度复核0.5λ≤λc≤2

λ

检验操作：将已充分溶解的待复核鲎试剂18支（管）放在试管架上，排成5列，其中4列4支（管），1列2支（管）。4 支（管）4 列每列每支分别加入0.1ml 的2λ、λ、0.5λ、和0.25λ的内毒素标准溶液；另2支（管）加入0.1ml 检查用水。加样结束后，将试管中溶液轻轻振动混匀，封闭管口，避免产生气泡，垂直放入37℃±1℃的恒温器中，保温60±2 分钟。

观察并记录结果：将试管架从恒温器中轻轻取出，避免振动，将每管拿出缓缓倒转180°观察，若管内形成凝胶，并且凝胶不变形，不从管壁滑脱者记录为阳性（+）；未形成凝胶或形成的凝胶不坚实、变形并从管壁滑脱者记录为阴性（－）。

实验结果判断与计算：当最大浓度2λ 4管均为阳性，最低浓度0.25λ 4管均为阴性，阴性对照为阴性时实验方为有效，按下式计算反应终点浓度的几何平均值，即为鲎试剂灵敏度的复核结果（λc）。

计算公式：λc = lg-1(∑X/4)

式中：x为反应终点浓度的对数值（lg）。反应终点浓度是系列递减内毒素标准溶液中最后一个呈阳性结果浓度。

0.5ml

3.5ml BET水

0.5ml

4.5ml BET水

3ml

3ml BET水

1ml

1ml BET水

1ml

1ml BET水

1ml

1ml BET水

1 ml

1ml BET水

1ml

1ml BET水