大赛璐手性固定相讲义的新进展
大赛璐手性柱Chiralpak AD-H使用手册
n 烷烃：正己烷，异己烷或正戊烷，不同的烷烃有不同的选择性。
o
流动相中异丙醇换成乙醇，样品的保留时间缩短。 流动相中醇含量增加，样品的保留时间缩短。 可以使用正丙醇，正丁醇，异丁醇等醇类，但选择性会有差别。
p 甲醇在烷烃中的溶解性不好，正己烷中甲醇的最大含量是 5％。如果要在烷烃中加入甲醇，最好同时加入一定量的乙醇。
配基交换
CHIRALPAK® MA(+) CHIRALPAK® WH3 µm Nhomakorabea
CHIRALPAK® OP(+)
聚甲基丙烯酸酯
CHIRALPAK® OT(+)
北京金欧亚科技发展有限公司 大赛璐公司能提供 20 µm填料的制备柱 (50 & 100mm I.D.) ，如果需要更详细的资料请查阅我们的产品目录册或者登录我们的网
) 清洗色谱柱可以用无水乙醇以适当的流速冲洗 3 个小时（适用于应用烷烃/醇类流动相的色谱柱）。
注意事项：
Ö 不能使用强碱性物质作为流动相添加剂或者溶解样品，因为这样会损坏填料中的硅胶成分。 Ö 本《操作手册》不适用于其他种类的色谱柱。 Ö 如果您在使用过程有任何疑问，请与我们联系。 严格遵照本《使用手册》，可延长色谱柱的使用寿命。
e
50 Bar 之内是有助于柱子最长寿命的理想值，在 100 Bar 以内柱子仍是安全的。
色谱条件：
0 如果您想使用下表溶剂以外的流动相成分，请与我们联系确认。
A – 流动相
烷烃n/ 异丙醇
CHIRALPAK®AD-H
150 x 4.6 mm ID 250 x 4.6 mm ID 250 x 10 mm ID 250 x 20 mm ID
新型高效液相色谱手性固定相选择剂_大环抗生素
Vol. 20 No. 6 November 2002
新型高效液相色谱手性固定相选择剂
丁国生, 黄晓佳, 刘学良,
大环抗生素
王俊德
( 中国科学院大连化学物理研 究所 , 辽宁 大连 116012) 摘要 : 综述了大环抗生素类手性固定相在高效液相色 谱中的 应用和 最新发展 动态 , 根据 其分子结 构探讨 了其手 性 分离的特点 , 并与其他类型的手性固定相进行了 比较 ; 共引用文献 51 篇。 关键词 : 大环抗生素 ; 液相色谱 ; 手性固定相 ; 综述 中图分类号 : O658 文献标识码 : A 文章编号 : 1000 8713( 2002) 06 0519 07
2
大环抗生素类手性固定相的制备和应用
在大环抗生素类物质中, 万古霉素最早被用来
了抗生素类固定相的一般制备方法: 根据抗生素分 子结构上的不同, 用含有不同官能团 ( 酯基、 氨基、 环 氧基) 的硅烷偶联剂作为间隔臂 , 通过两步反应合成 了一系列抗生素类手性固定相。使用两种不同的合 成路线, D∀ Acquaria[ 12] 合成了含有双脲的抗生素类 手性固定相, 研究了不同间隔臂和来源不同的硅胶
[ 2]
理且大多仅适用于一种或数量有限的几种结构类型 对映体的分离。 1994 年 Armstrong 等首次 使用大 环抗生素制备 CSP, 在正相和反相模式下拆分了一 系列光学异构体[ 5] , 开辟了手性分离科学领域一个 新的研究热点。自此以后, 短短几年的时间, 大环抗 生素已成功地应用于高效液相色谱 ( HPL C) 、 薄层 色谱 ( T L C) 、 毛细 管电 泳 ( CE) 、 毛细 管电 泳 质谱 ( CE MS) 和毛细管电色谱 ( CEC) , 用来分离各类光 学异构体, 分离机理的研究也逐步深入[ 6, 7] 。 作为较新的分离技术, 大多数 CE 方法或 CEC 方法的产生得益于 L C 法, 如常使用相同的手性选 择剂或手性添加剂。由 于溶解度和检 测手段的限 制 , 与 LC 法比较, CE 可用的选择剂的种类较少[ 8] 。 因此, 我们仅从较广的范围出发 , 综述大环类抗生素 在 HPL C 中的应用, 根据其分子结构探讨其手性分 离的特点, 并与其他类型的手性固定相进行比较。
多糖类手性固定相超临界流体色谱法分离手性化合物
多糖类手性固定相超临界流体色谱法分离手性化合物李冬艳;吴锡;郝芳丽;杨洋;陈小明【摘要】Eleven kinds of chiral compounds have been well separatedwithin 10 min on poly-saccharide derivative-based chiral stationary phases named Chiralpak IA,IB,IC,ID,IE and IF by supercritical fluid chromatography( SFC). The chiral recognition of these chiral compounds has demonstrated good complementary enantioselectivities of the six chiral columns,which were proved to be useful for chiral SFC. Both the elution time and enantioselectivies could be significantly affected by the modifier types and their concentrations,such as methanol,ethanol and isopropanol,which should be optimized during the experiments. In addition,the solvent versatility of the immobilized chiral stationary phaseon the optimization of the chiral separation was helpful.%采用超临界流体色谱法（ SFC），在多糖固定相 Chiralpak IA、IB、IC、ID、IE和IF上成功拆分了11种手性化合物。
以氨基酸为手性源的手性固定相研究进展
以氨基酸为手性源的手性固定相研究进展【摘要】氨基酸类手性固定相由于其广泛的来源和较高的拆分能力，在手性拆分中得到广泛应用。
本文首先对现有氨基酸类手性固定相进行了归纳和分型，进而简要介绍了各型手性固定相的化学结构、性能及其优缺点。
并对其应用和发展前景进行了展望。
【关键词】氨基酸；手性固定相；性能；结构[Abstract] Chiral stationary phases of Amino acids due to its wide range of sources and high separation ability has been widely used in chiral separation. In this paper，firstly，the chiral stationary phases of the existing amino acids were summarized and typed，and then the chemical structure，performance，advantages and disadvantages of various types of chiral stationary phases of amino acids were described briefly. The trends of the developing and application of chiral stationary phases of Amino acids are also proposed.[Keyword]Amino acids；Chiral stationary phases；performance；structure近几年，由于酶催化和不对称合成的发展，出现了许多新型手性药物，由于不同构型的手性药物具有不同的药理活性[1，2]，因而对外消旋体的手性拆分成为必然趋势。
大赛璐多糖衍生物反相手性柱
大赛璐多糖衍生物反相手性柱产品概述：CHIRALPAK AD-H，AS-H和CHIRALCEL OD-H，OJ-H在正相领域中获得了广泛的应用，大赛璐同时也开发了相应的反相手性柱。
与正相柱相比较，反相柱涂敷的手性聚合物与正相柱相同，但是所用的硅胶不同。
反相高效液相色谱手性系列柱CHIRALPAK AD-RH、CHIRALPAK AS-RH、CHIRALCEL OD-RH和CHIRALCEL OJ-RH是分别将淀粉-3，5-二甲苯基氨基甲酸酯、淀粉-s-a-甲基苄基氨基甲酸酯、纤维素-3，5-二甲苯基氨基甲酸酯和纤维素-4-甲苯甲酸酯涂敷在5μm的硅胶表面。
反相柱也适合应用于LC/MS中。
CHIRALPAK AD-3R、CHIRALPAK AS-3R、CHIRALCEL OD-3R和CHIRALCEL OJ-3R 是填料粒径为3μm 的反相手性色谱柱，使用了高通用性的手性选择剂，可对各类化合物进行光学拆分。
由于能实现很高的理论塔板数，即使是短柱也可以在缩短分析时间的基础上显示出优异的分离能力。
更小粒径填料的优点：更高效更快出峰时间优化HPLC系统一般而言，这四种反相手性柱的应用范围和手性分离性能与它们各自相应的正相柱（CHIRALPAK? AD、CHIRALPAK? AS、CHIRALCEL? OD和CHIRALCEL? OJ）相似，但需要说明的是反相柱里的色谱填料基质与正相柱有所不同。
为避免损坏手性柱，正相与反相两类手性柱不宜混用。
反相柱使用水－有机溶剂流动相，适合分析水溶性样品（比如生物活性样品），或者对pH有特定要求的样品。
要避免极端pH，因为这样会损伤固定相的硅胶基质。
反相柱主要适用于下列分析对象：1. 使用含水的流动相进行手性拆分；2. 手性拆分水溶性样品；3. 离解或可离解样品的拆分；另外，反相手性柱在必要时可以与通常的非手性普通反相柱（如ODS柱）串联使用，以便使待分离组分与样品中的其他杂质分开。
大赛璐键合手性柱使用指南
一、键合手性柱简介多糖涂敷型手性柱，如CHIRALPAK®AD-H/CHIRALPAK®AS-H/CHIRALCEL®OD-H/CHIRALCEL®OJ-H等，其涂敷在硅胶表面上的各种衍生物有可能被一些有机溶剂溶解或溶胀。
因此，可用作流动相组分及样品溶解液的溶剂非常有限。
通过化学键合的方法将多糖衍生物固定在硅胶表面而制得的键合型手性固定相，即可克服涂敷型手性固定相的不足之处。
为了满足市场的需求，大赛璐公司凭借多年的研究成果和独有的技术，已推出了新一代化学键合型手性色谱柱系列：CHIRALPAK®IA，CHIRALPAK®IB和CHIRALPAK®IC。
CHIRALPAK®IA是将淀粉-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5 µm），相应的涂敷型色谱柱是CHIRALPAK®AD （CHIRALPAK®AD-H）；CHIRALPAK®IB 是将纤维素-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5 µM）, 相应的涂敷型色谱柱是CHIRALCEL®OD （CHIRALCEL®OD-H）；CHIRALPAK®IC将纤维素-3,5-二氯苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5 µM）（注意：相应的涂敷型色谱柱没有商品化）。
其化学结构式如下图所示。
新一代化学键合型手性柱具有下列特点：·通用于所有液相色谱流动相·新分离选择性·样品溶解液没有任何限制·高柱效高分离性能·柱寿命长，可再生·操作方便，简单，灵活新一代共价键合手性柱不仅可以使用那些常用在涂敷型手性柱上的流动相体系，如烷烃/醇类，更为重要的是还适用于诸如乙酸乙酯、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、二氯甲烷、三氯甲烷等这些不适宜用在涂敷型手性柱上的溶剂。
大赛璐手性柱AD-H、OD-H操作常见问题及解决办法
大赛璐手性柱AD-H、OD-H操作常见问题及解决办法1.正相手性色谱柱AD-H、OD-H使用前需要注意什么?将正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H接上液相色谱仪之前先要保证液相色谱系统中的所有管路均为正相流动相。
如果液相系统里面是反相溶液，比如水/乙腈=50/50(v/v)。
那么需要先用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路（包括所有溶剂入口、六通阀、检测器等），然后用正相流动相冲洗液相的所有管路，最后再接上正相手性色谱柱；如果液相系统的反相流动相中含有缓冲盐，要先用纯水冲洗HPLC系统，然后用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路，最后用正相流动相冲洗。
2.正相手性色谱柱中保存液是什么?正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H中的保存液是正己烷/异丙醇=90/10(v/v)。
其它手性色谱柱的保存液请查阅使用说明书上的说明。
3.新柱CHRALPAK IA和CHRALPAK IB与原来的大赛璐手性柱有什么区别？CHRALPAK IA和CHRALPAK IB是将多糖衍生物共价键合在硅胶上，而大赛璐原来的手性柱固定相都是将多糖衍生物涂敷在硅胶表面的。
正因为是共价键合，所以CHRALPAK IA和CHRALPAK IB柱能使用任何液相流动相，比如四氢呋喃、氯仿、丙酮、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯等。
CHRALPAK IA和CHRALPAK IB与大赛璐原有的正相柱相比，扩大了溶剂选择的范围，增加了新的分离选择性，在原来大赛璐手性色谱柱上分不开的化合物有可能在CHRALPAK IA和CHRALPAK IB上得以分开。
4.CHIRALPAK AD-H、CHIRALPAK AS-H、CHIRALCEL OD-H、CHIRALCEL OJ-H四款正相色谱柱的区别是什么？区别是固定相的种类不同。
CHIRALPAK AD-H、AS-H的硅胶表面涂敷的是直链淀粉衍生物；CHIRALCEL OD-H、OJ-H的硅胶表面涂敷的是纤维素衍生物。
高分子手性固定相的研究进展
高分子手性固定相的研究进展戴荣继;王慧婷;孙维维;邓玉林;吕芳;刘秀洁【摘要】手性药物的应用对人类健康产生了深远影响。
随着化学、材料、生命等学科的发展，人们对手性药物分离分析的研究日趋深入。
色谱法在手性药物分离分析中得到了广泛应用，手性固定相的选择是实现手性色谱拆分的关键。
以高分子材料作为手性固定相并对其进行衍生以优化手性分离性能是近些年的研究热点。
本文介绍了近几年高分子手性固定相在手性分离中的研究进展，并对其发展前景进行了展望。
%The applications of chiral drugs had a profound impact on human health. With the development of disciplines of chemistry,materials and life science,the research on the separa-tion and analysis of chiral drugs became intensified. Chromatography and the selection of chiral stationary phase played important roles in resolving chiral drugs. The optimization of polymer materials and their derivatives as chiral stationary phase become the main issue in recent years. Recent studies as well as prospects in polymer materials used as chiral stationary phase are presented in this paper.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】10页(P34-43)【关键词】高分子材料;手性固定相;手性分离;进展;综述【作者】戴荣继;王慧婷;孙维维;邓玉林;吕芳;刘秀洁【作者单位】北京理工大学生命学院，北京 100081;北京理工大学生命学院，北京 100081;北京理工大学生命学院，北京 100081;北京理工大学生命学院，北京100081;北京理工大学生命学院，北京 100081;北京理工大学生命学院，北京100081【正文语种】中文【中图分类】O658手性(chirality)是指化合物的分子式和结构式相同,因分子空间排列不同导致两个分子互为镜像和实物的现象[1]。
手性色谱固定相的研究进展
手性色谱固定相的研究进展摘要：对映体的拆分曾被认为是相当困难及复杂的实验技术, 随着20 世纪70 年代手性色谱的兴起和迅速发展, 该难题得以逐步解决[1 ] , 尤其是近几年, 药物对映体的分析已成为药学领域的研究热点。
将手性化合物键合到固定相表面后, 由于样品中的对映体与键合的子性分子形成非对映异构体络合物的结合能力的差异而达到拆分目的, 该固定相即被称为手性固定相(Chiral stationary p hase , CSP) 。
由手性固定相液相色谱分离测定对映体已成为对映体分离发展最为迅速的领域[2 ]。
目前,采用高效液相色谱法(HPLC) 分离手性化合物取得了显著进展, 已广泛应用于众多领域, 并已制备出大量用于HPLC 的CSP 。
本文拟就目前应用较广泛的几类CSP 作一简要介绍。
1 多糖类衍生物CSP多糖类衍生物包括纤维素衍生物和直链淀粉衍生物。
纤维素自身具有手性识别能力, 但不能直接做固定相, 然而其衍生物作为CSP 具有较高的手性识别能力, 能拆分大量的对映体;直链淀粉与纤维素同样系由d - 葡萄糖单元构成, 但直链淀粉因在其d - 葡萄糖单元α键上存在1 个螺旋结构而致使其结构更有序;同时,上述2 种衍生物的手性识别能力存在较大差异,可能是因葡萄糖单元构象不同、结构有序性存在差异所致。
目前,其广泛用于HPLC ,可分离众多药物对映体。
Miyazawa T 等[3 ] 研究用纤维素—三(3 , 5 —二甲基苯基氨基甲酸酯) (CDMPC) CSP 对非蛋白氨酰基酯类的对映体化合物进行拆分, 结果显示, 其对几乎所有的烷基酯类和苯甲基酯类对映体化合物的拆分性优于甲基酯类, 而对β- 氨基酸衍生物的拆分性不及α- 氨基酸衍生物。
In WK 等[4 ]制备了涂锆CDMPC(CDMPC - Zirconia) CSP 并与CDMPC 比较,发现其可增强分离对映体的识别能力。
Kubota T 等[5 ] 对CDMPC CSP 进行了研究,并在HPLC 上实现了对乙烯基聚合物的拆分, 结果显示, 其识别能力较好, 但稳定性差。
气相色谱手性固定相研究进展
收稿:2006年3月,收修改稿:2006年5月 3国家自然科学基金项目(N o.30160092)、高等学校青年教师教学科研奖励计划(N o.2001298)以及云南省自然科学基金项目(N o.2005E0006Z )资助33通讯联系人 e 2mail :yuan -limingpd @气相色谱手性固定相研究进展3李 莉 字 敏 任朝兴 袁黎明33(云南师范大学化学化工学院 昆明650092)摘 要 本文评述了气相色谱手性分离的发展过程,介绍了氨基酸、二肽、金属配合物、环糊精、多糖、手性离子液体、环肽、键合以及交联类气相色谱手性固定相以及各类型的拆分机理,展望了气相色谱手性固定相的研究前景。
关键词 气相色谱 手性固定相 手性分离中图分类号:O657.7+1 文献标识码:A 文章编号:10052281X (2007)02Π320393211The Development of Chiral Stationary Phase in G as ChromatographyLi Li Zi Min Ren Chaoxing Yuan Liming33(Department of Chemistry ,Y unnan Normal University ,K unming 650092,China )Abstract The development of chiral separation in gas chromatography is briefly described in this paper ,and the advances in chiral stationary phases of G C are reviewed ,including amino acids ,dipeptides ,coordinated metal com plexes ,cyclodextrins ,polysaccharides ,chiral ionic liquids ,cyclopeptides ,covalently bonded and linked chiral group.The prospects of chiral stationary phases are als o discussed.K ey w ords gas chromatography ;chiral stationary phases ;chiral separation1 早期的气相色谱手性分离 利用气相色谱分离手性化合物的研究始于1950年代末期,但真正第一次成功地分离是在1966年,G il 2Av 等首次报道了氨基酸对映异构体的分离,手性固定相为N 2三氟乙酰基2D 2异亮氨酸月桂醇酯[1]。
大赛璐手性分析方法筛选与优化 (2)-65页文档资料
三氟乙酸 (TFA) 醋酸
*1 主要用于1级胺 *2 主要用于1级氨基醇
添加量
≦0.5％ 通常0.1％
≦0.5％ 通常0.1％
不同添加剂对手性分离的影响
mv
mv 12.240
14.853 mv
mv
1200
1: 220 nm, 4 nm Retention Time
1000
F 0.4
0.2
35
（没出峰 )
30
25
20
15
10
5
0.0
COOH
0
5
10 15 20 25 30 35 40
Minutes
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Minutes
流量：1.0mi/min.温度：40℃、检测波长：ＵＶ（254ｎｍ）
流动相 Hex/IPA=90/10
Minutes
Minutes
Minutes
4.36
80
80
70
OF 70
OG
60
60
50
50
40
40
30
30
20
20
10
10
0
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 150 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Minutes
Minutes
其它
Chiral -AGP ® CROWNPAK® CR (＋), (－)
CHIRALPAK® OT(＋), OP (＋) CHIRALPAK® WH, MA (＋) CHIRALPAK ® QD-AX CHIRALPAK ® QN-AX
HPLC中的手性固定相
经典手性固定相
• Pirkle型手性固定相：
– 由于Pirkle型固定相的主要相互作用是π-π相互 作用，因而其主要用于分离含芳香基团的对映 体。 – Pirkle型固定相大都适用于正相HPLC。 – 大多Pirkle型固定相用于分离氨基酸、氨基醇、 胺类及某些酸性手性化合物时，可得到较好的 拆分能力。
经典手性固定相
• 环糊精型手性固定相：
– 环糊精从1970年代开始被尝试用于手性分离。 – 环糊精是一类由环形低聚糖构成的杯状化合物， 通常由淀粉经环糊精转糖基酶催化得来，含有 6（α-环糊精）、7（β-环糊精）或8（γ-环糊精） 个经α-（1,4）-糖苷键连接而得到的吡喃型葡 萄糖单位。 – 环糊精杯状结构的腔内部，不含有羟基，呈疏 水性，而杯状的外沿则是亲水性的。
经典手性固定相
• 环糊精型手性固定相：
经典手性固定相
• Байду номын сангаас糊精型手性固定相：
– 大多数环糊精手性固定相只适用于反相色谱， 分析极性有机化合物。
– 部分改性后的环糊精手性固定相可以被用于正 相色谱，如Cyclobond I RN或SN，因其可作为 π电子供体，具有π电子接受能力的被分析物可 以正相色谱的方式保留在这种手性固定相上。
经典手性固定相
• 现有的经典手性固定相，已可满足小分子 药物分析领域内的多数手性分离的需要， 主要包括药物分析与对映体拆分制备等。 • 根据手性固定相的不同来源，可以分为自 然来源的、半合成的、全合成等3大类。
经典手性固定相
• 配体交换型手性固定相：
– 1960年代末，最早采用色谱方法对消旋体进行拆分， 即为使用一种配体交换型的手性固定相分离氨基酸对 映体。 – 将脯氨酸固定化在聚苯乙烯载体上，在流动相中加入 Cu（II），由于脯氨酸、金属离子及被分析的氨基酸间 非对映的三重复合结构，被分析氨基酸被吸附在中心 离子的配位层。 – 通过对该手性分离现象的研究，后来陆续研制出基于 硅胶载体的固定相，以及连接其他类型手性固定相的 多聚物类型的色谱柱。由环氧树脂作用的（L）脯氨酸 结合硅胶是最早上市的手性键合固定相（Chiral Procu， Serva，Heidelberg，Germany）。