水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验
化学农药环境安全评价试验准则 第14部分：藻类生长抑制试验-最新国标
化学农药环境安全评价试验准则第14部分：藻类生长抑制试验1 范围本文件规定了化学农药藻类生长抑制试验的试验条件、试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤、试验数据处理、质量控制以及试验报告等的基本要求。
本文件适用于为化学农药登记而进行的藻类生长抑制试验。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
NY/T 3273 难处理农药水生生物毒性试验指南NY/T 4195.6 农药登记环境影响试验生物试材培养第6部分：近头状尖胞藻3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1半效应浓度median effective concentration在生长抑制试验中，与对照相比，引起受试藻生物量增长或者平均生长速率下降50％时的被试物浓度，用EC50表示。
在本文件中，通过藻类生物量增长的抑制率计算而得到的EC50用E y C50表示，通过藻类平均生长速率的抑制率计算而得的EC50用E r C50表示。
注：单位为毫克每升（mg/L）。
3.2平均生长速率average growth rate （average specific growth rate）特定暴露时段内的平均生长速率，即暴露结束与暴露开始时受试藻生物量的自然对数值之差除以时长（如3 d），用μ表示。
3.3生物量增长量yield特定暴露时段内的生物量增长量，即暴露结束时的生物量减去暴露开始时的生物量，用Y表示。
4 原理用被试物及藻类培养基配制一系列不同浓度的试验药液，将试验药液与藻液混合后，连续染毒72 h。
试验期间观察受试藻的生长抑制情况，求出半效应浓度72 h- EC50（E y C50、E r C50）及其95％置信区间。
5 试验条件试验期间应满足以下条件：a) 环境温度21 ℃～24 ℃，但单次试验应控制在±1 ℃；b) 连续均匀光照，光源为400 nm～700 nm波长的冷白灯或日光灯，光照强度4440 lux～8880 lux，不同位点光照强度差异应控制在15%范围内；c) 空白对照pH变化范围不超过1.5；d) 以一定转速持续振荡或搅拌藻液，例如每分钟（100±20）转。
质 用单细胞绿藻进行
《水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》（征求意见稿）编 制 说 明《水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》标准编制组二○一一年六月项 目 名 称：水质 用绿藻类栅薄属的Subspicatus和月牙藻属的capricornutum做淡水藻类生长抑制试验项目统一编号：1207.24承 担 单 位：广东出入境检验检疫局编制组主要成员：许崇辉、温巧玲、谢建军、潘芳、刘慧智标准所技术管理负责人：黄翠芳、周羽化标准处项目负责人：谷雪景目 录1项目背景 (1)1.1 任务来源 (1)1.2 工作过程 (1)2标准制订的必要性分析 (2)3国内外相关分析方法研究 (2)4标准制订的基本原则和技术路线 (3)4.1 标准制订的基本原则 (3)4.2 标准制订的技术路线 (3)5标准技术内容说明 (4)5.1 适用范围 (4)5.2 规范性引用文件 (4)5.3 术语和定义 (5)5.4 方法原理 (5)5.5 试剂和材料 (5)5.6 仪器和设备 (5)5.7 分析步骤 (5)5.8 质量保证和质量控制 (5)5.9 结果计算与表示 (5)5.10 精密度 (5)5.11 试验报告 (6)5.12 附录 (6)《水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》编制说明1项目背景1.1任务来源2007年，国家质量监督检验检疫总局以《关于下达2007年第一批国家标准制修订项目经费的通知》（国质检财函[2007]971号），下达了国家环保标准《水质用绿藻类栅薄属的subspicatus和月牙藻属的capricornutum做淡水藻类生长抑制试验》的编制任务（项目编号为20070882-T-467），项目承担单位为广东出入境检验检疫局和原国家环境保护总局化学品登记中心，项目统一编号为：1207.24。
1.2工作过程1.2.1 成立标准编制小组2007年，广东出入境检验检疫局在接到《水质—用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》标准任务后，立即成立标准编制组。
试验准备——藻类生长抑制试验(B)
试验准备——藻类生长抑制试验（B）藻类是水体中的初级生产者，也是水生食物链的基础环节。
在光的作用下它们汲取水中的无机养分盐类和，创造有机物。
它们的存在无论是对水体生产力还是水体污染的自净作用均具有非常重要的意义。
因此，在讨论毒物或废水对水环境的影响时，都把藻类测试作为一项重要内容。
藻类生长抑制实验的目的是确定受试物对单细胞藻类生长的影响，可用于受试物对藻类短期裸露效应的初评。
当裸露使藻类的生长率低于未经裸露的对比组时，称为藻类生长抑制。
单细胞藻类个体小，世代时光以小时计算，采纳本办法可以在较短时光内得到受试物（化学品或环境样品）对藻类许多世代及在种群水平上的影响。
所得结果可反映受试物对水体中初级生产养分级的影响。
将不同浓度的受试物加处处于对数生长久的藻培养物中，在规定的条件下举行培养，每隔24h测定藻类种群浓度或生物量（分量）。
实验时光不少于96h。
与对比相比较可确定生长抑制状况。
1.受试化学品的必备资料水溶解度水溶液中的定量分析办法蒸汽压在水中和光中的化学稳定性结构式正辛醇/水的分配系数纯度迅速生物降解实验结果 2.仪器设备①普通的藻类试验室设备。
②实验容器：如三角瓶等，按照需要可挑选一定容量的实验容器，同一批实验的容器应规格全都。
为保证CO2的交换，要有一定的表面积一体积比。
125ml的三角瓶中测试液体积应为40-60ml,250ml三角瓶中为70-100ml,500ml三角瓶中为100-150m1。
③照度计：球面照度计和一般照度计。
④培养设备：建议用法温度范围为21-25℃±2℃且延续匀称光照，光谱范围为400-700nm，光通量为0.72×1020光子／（m2·s）的培养箱（用球面测量计测定可产生光强为80001ux的光），光照周期，即光暗比为12：12或14：10。
⑤机械振荡器100±10次/min或定时人工摇动若干次。
⑥培养容器应用棉塞、海绵塞、滤纸、纱布（(2-3层）、锡箔纸封闭。
生态毒理学实验设计
姓名：刘金鑫学号：201428006037073 培养单位：地理所生态毒理学实验设计一.【实验题目】：砷对两种淡水藻类的毒性作用。
二.【实验设计思想】：砷在环境中是一种普遍存在的污染物，它来源于人为源和自然源的释放，通过一定的途径进入地表、土壤和饮用水体中。
通过目前的研究已经发现进入水体的砷对水中的生物存在影响，我们有必要研究水体中砷对水生生物的毒性作用，在这些研究中要数藻类的研究较多。
我准备通过使用72小时生长速率——一种抑制生物检测方法，来判定五价砷和三价砷对两种在无外来干扰的热带的淡水藻类（绿藻和单针藻）的毒性。
这个实验的意义在于，看砷对藻类的毒害作用是否很强，如果藻类对于砷的耐性较强，可以指导后面的藻类用于砷污染水体修复的研究。
三.【实验目的】：1、掌握藻类的室内无菌培养。
2、学会藻类生长速率测定的方法。
3、掌握72小时生长速率的检测方法。
4、判定砷对两种藻类的毒害作用。
四.【实验原理】：1、藻类的选取：由于不同种类的藻对砷毒性的反应不同，有的藻对砷比较敏感，而有的对砷的耐性较好，所以我选择了一种敏感性的单针藻和一种耐性较好的绿藻。
2、培养液的选择：为了排除自然水体和纯净水体的影响，我用人工合成的软水（内部成分以及含量都是已知的）来进行实验。
3、培养瓶的选择：为了防止砷在普通瓶体上的吸附，我选择250ml 的硼硅酸盐的锥形瓶。
4、检测前处理：将处于指数生长阶段（5-6天）的细胞通过离心（2500rpm，7min），超纯水洗涤三次确保培养液除去后，再用于生物检测。
5、培养条件：将培养瓶放在培养架上进行培养。
培养架周围的环境条件：27±1℃、12：12h的光照和无光、每天用手摇晃两次锥形瓶使其进行充分的气体交换。
6、通过多功能计数仪测定结果。
7、数据分析：通过线性插值法计算72hIC50。
8、藻对砷和磷的吸收具有竞争性。
五.【实验材料】：绿藻、单针藻、玻璃烧杯、天平、硼硅酸盐锥形瓶、镊子、酒精灯、量筒、真空过滤器、滤膜、试管、无菌操作台、吸管、多功能计数器、移液枪、PH试纸（PH5.4—9）、牛角匙、牛皮纸、棉花、纱绳、高压蒸汽灭菌锅、培养架、温度计、恒温室、冷光源、NaHCO3、CaSO4·2H2O、MgSO4、KCl、CaCO3、10%HNO3、超纯水、Na2AsO4·7H2O、NaAsO2、NaNO3、KH2PO4等。
藻类生长抑制实验
称 为 藻 类 对 数 生 长 期 。对 数 生 长 期 的 藻 类 细 胞 代 谢 活 受 试 物 的 浓 度 范 围 和 浓 度 间 距 。 主要 步 骤 有 ：
跃 ，生 长 速 率 高 ，群 体 中 的 藻 细 胞 化 学 组 成 及 形 态 、生 理
１）灭 菌 包 括 器 皿 与 实 验 用 水 的 灭 菌 。实 验 所 涉 及
行 培 养 。定 期 （每 隔 ２４ ｈ）测 定 藻 类 种 群 的生 长 ，实 验 时
２）浓 度 设 置 至 少 设 ５个 浓 度 组 和 １个 对 照 组 。将
间 为 ９６ ｈ。如 生 长 率 显 著 低 于 对 照 ，表 明对 藻 类 有 抑 制 预 实 验 中得 到 的 １００ 受 抑 制 的 最 低 浓 度 （ＥＣ ）和 不
数 生 长 期 （对 数 生 长 期 ：单 细 胞 藻 类 在 培 养 过 程 中 分 裂 抑 制 的 ＥＣ 。值 （使 藻 类 生 长 或 生 长 率 比 对 照 下 降 ５Ｏ
最 快 ，世 代 时 间 恒 定 ，细 胞 数 目 以 几 何 级 数 增 加 的 时 期 时 的 受 试 物 浓 度 ），根 据 预 实 验 的 结 果 确 定 正 式 实 验 时
特 征 比 较 一 致 。 在 实 践 中 ，常 用 对 数 期 的 藻 类 作 接 种 材 的玻 璃 器 皿 应 灭 菌 ，实 验 用 水 应 为 蒸 馏 水 或 去 离 子 水 。
料 ，效 果 较 好 ）的 藻 类 培 养 物 中 ，在 规 定 的试 验 条 件 下 进 放 入 灭 菌 锅 ，ｌ ２ｌ Ｃ ，ｌ５ ｍｉｎ。
维普资讯
藻 类 生 长 抑 制 实 验
朱 红 梅 宋 福 （国家环境保护局化学品登记中心化学品测试实验室北京１０００１ ２）
UV-C辐照抑制典型藻类生长的效果研究的开题报告
UV-C辐照抑制典型藻类生长的效果研究的开题报告选题背景及研究意义：随着气候变化和环境污染的加剧，微生物生态系统的稳定性受到了威胁。
其中，藻类的快速生长和代谢可引起水体富营养化和藻华暴发等环境问题，给生态系统和人类健康带来极大的威胁。
现代科技提供了多种方法和手段来控制水体中藻类生长，其中UV-C辐照作为一种环保、高效的方法被广泛应用。
然而，在不同的光照强度、水质等条件下，对藻类的抑制效果存在巨大的差异。
因此，探究UV-C辐照对典型藻类生长的影响，对于提高环境保护和水资源优化利用具有重要的价值。
研究目的：本文旨在研究UV-C辐照对典型藻类生长的抑制效果，并探究其抑制机制。
希望能够为水体藻类控制方案的制定和优化提供一些科学依据。
研究内容：1. 确定实验所用藻种，并制备培养基；2. 构建光照强度、UV-C辐照剂量等因素的试验方案，进行试验；3. 通过藻生长速率、荧光素含量等指标分析UV-C辐照的抑制效果；4. 利用qPCR等方法分析UV-C辐照对藻细胞DNA等分子水平的影响；5. 结合试验结果，探究UV-C辐照对藻类的抑制机制。
研究方法：本研究将选用蓝藻、绿藻等典型藻类做为研究对象，采用静态培养法、荧光素含量检测法、qPCR分析法等综合手段进行实验研究，结合数学统计方法对得到的数据进行分析。
预期结果：通过本研究，预期能够深入了解UV-C辐照对藻类生长的影响及其机制，为水体藻类控制提供一些科学依据和数据支持。
研究意义：本研究可为提高水体环境质量、减少藻类污染提供一些新思路和科学依据。
此外，研究成果还可为植物生长、环境保护等领域提供相关数据和参考经验。
临床实验室纯水系统藻类滋生的防治
临床实验室纯水系统藻类滋生的防治王军;顾光煜【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2012(030)005【总页数】1页(P394)【关键词】临床实验室;纯水;藻类;防治【作者】王军;顾光煜【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京210008【正文语种】中文【中图分类】R446分析用纯水是一种特殊的实验试剂，其质量与临床检验的质量密切相关。
临床实验室大多配备纯水系统。
在工作中我们发现纯水系统的滤芯、碳棒及储水桶等常有藻类滋生现象，经参阅有关资料，采取了一些针对性的措施加强纯水系统的保养与维护[1]，有效地解决了藻类滋生现象，保证了纯水的质量。
1 纯水系统藻类的滋生与防治纯水系统藻类的滋生，以春、夏季最为突出。
藻类、细菌在生长过程中产生的离子、酶、内毒素等及自身代谢产物可能污染纯水系统，影响纯水质量。
藻类在自然界分布极为广泛，空气、水中都可能存在藻类孢子。
在合适的环境下，孢子将大量生长并繁殖。
藻类滋生必须具备一定的条件，即孢子、营养(水、矿物质及氧气等)、光照和适宜的温度。
纯水的水质受其来源——自来水的影响。
理论上，自来水的生产过程可清除藻类，但可能会有微量孢子遗留；另外，空气中的孢子也会污染纯水系统。
因此，完全清除孢子是不可能的，但可通过控制藻类的生长条件来抑制藻类生长。
水纯化过程中的“去离子”环节去除了氯化物，使藻类在纯水中因不受抑制而极易生长，因此，相对于自来水，纯水更易滋生藻类。
纯水系统的活性炭和滤芯容易吸附水及空气中的藻类孢子，被认为是藻类滋生的温床。
理论上，密闭的储水桶无藻类孢子污染，不应该滋生藻类。
本实验室的纯水系统因条件限制，常年受到日光的照射。
日光不仅促进了藻类滋生的光合作用还提供了温度条件。
因此，我们采取了一系列的针对措施，安装加厚窗帘以避免阳光直射、降低环境温度；定期清洗储水桶，检查储水桶的密封性，更换密封性好的桶盖，避免孢子进入纯水系统；定期清洗、更换碳棒和滤芯等，有效地控制了藻类滋生。
藻类生长抑制试验课件
生态修复
通过藻类生长抑制试验，可以了解不同环境因素对藻类生长的影响，为生态修复 提供科学依据。
在水产养殖领域的应用
养殖水体质量监测
藻类生长抑制试验可以用于监测养殖水体的质量，评估水质 是否符合养殖要求。
饲料添加剂筛选
试验误差控制
保证试验的一致性
在藻类生长抑制试验中， 应保证试验条件的一致性， 包括温度、光照、pH值等， 以减小误差。
重复试验
为确保试验结果的可靠性， 应进行重复试验，并对结 果进行统计分析，以减小 误差对结果的影响。
标准化操作
在试验过程中，应遵循标 准化的操作流程，确保每 一步操作的准确性，以减 小误差。
为环境风险评估和化学品管理提供科 学依据。
试验原理
基于藻类生长速率测定
通过比较不同浓度的化学物质对藻类生长速率的影响，评估其抑 制作用。
荧光测定法
利用荧光光度计测定藻细胞内的荧光物质，从而快速、准确地测定 藻类生物量。
显微计数法
通过显微镜观察和计数藻细胞，计算藻类密度和生长率。
试验步骤
配置化学物质溶液
培养基
抑制剂
选择具有代表性的藻种， 如蓝藻、绿藻、硅藻等。
选择适宜藻类生长的培 养基，如BG-11、f/2等。
选择具有代表性的化学 物质或天然物质作为抑
制剂。
其他试剂
如无水乙醇、丙酮等。
试验设备
01
02
03
04
培养箱
用于培养藻类，控制温度和光 照。
分光光度计
用于测定藻细胞密度和光合作 用速率。
显微镜
感谢您的观看
数据整理
绿水抑制鱼生长的原理
绿水抑制鱼生长的原理
绿水是一种含有大量悬浮物质和绿藻的水体，对于一些鱼类的生长来说可能具有抑制作用。
绿水抑制鱼生长的原理主要有以下几点：
1. 绿水浑浊度高：绿水中含有大量悬浮物质，包括藻类的细胞、有机物质和无机颗粒等。
这些悬浮物质会使水体变得浑浊，降低透光率，限制光线的穿透能力。
鱼类对光照的需求较高，光照不足会影响鱼类的视觉和食欲，从而抑制其生长。
2. 水体氧气供应不足：绿水中的藻类繁殖较快，消耗水体中的氧气。
当藻类数量过多时，夜晚或阴天藻类通过呼吸过程会消耗更多的氧气，导致水体中的溶氧含量下降。
鱼类需要充足的氧气进行呼吸和新陈代谢，氧气供应不足会导致鱼类活动力下降，食欲不振，从而影响生长。
3. 绿水中的有害物质：绿水中的藻类在光合作用过程中产生氨氮、硝酸盐等代谢产物，同时也会释放出有毒的代谢产物，如硫化氢等。
这些有害物质会对鱼类的健康产生不利影响，抑制其生长。
总结起来，绿水抑制鱼生长的原理主要包括水体浑浊度高，光照不足，氧气供应不足以及有害物质的存在等多个方面，这些因素会影响鱼类的食欲、新陈代谢和健康状况，从而抑制其正常的生长和发育。
校中心广场绿藻资源与水质的关系
５ ｍ Ｌ鲁哥氏液 ， 使水样摇匀即可。鲁哥氏液 固定液 ： 称取 ４ ０ ｇ 碘及 胞、 群体 、 丝状体 、 分枝丝状体和叶状体 。少数单细胞和群体类型 １ ６ ０ ｇ 碘化钾 （ 分析纯 ） ， 溶 于 ｌ Ｏ ０ ０ ｍＬ纯水 中， 定性样 品一般采样 量 的营养细胞前端有鞭毛 。 衣藻属单细胞球 藻型 ， 栅 藻属不分枝丝 ０ ｍ Ｌ （ 指管容积 ） ， 加福尔马林溶液 ｌ ｍＬ 、 甘油 ２ ｍＬ 。为防止样品 状型 ， 丝藻属分枝丝状型 ， 毛枝藻属管藻型 。各种水质条件均可 为 ２ 褪色 ， 可在样 品中加 ｌ 、 ２滴饱 和 硫 酸 铜 溶液 ， 对于浮 于水样 表 生长藻类 ， 但每一种类 皆有其特点 的生 存水质条件 ， 所 以藻类可 层 的样 品（ 如带气 囊的微囊 藻 ） 可在样 品中加入适量皂液 ， 以便沉 以成为不 同水质 条件下 的指示 种 ，因此 藻类 被广泛用 作指示生
１ ． ２实 验方 法
根据实验观察记录及查考资料 总结可得如下表格 表 １ 校 中心广场常见绿藻属
外 形 奄
一
１ ． ２ ． １ 准备器材 采样 器 ： 聚 乙烯或玻璃器 ， 材 质不应 对水样产生影 响； 足够的 强 度， 启动 灵活， 操作 简单， 密 封性好， 一次最大采 水量小于 １ ． ０ Ｌ ～ ５ ． Ｏ Ｌ； 表面光滑， 容易清洗和没有流量干扰。 贮样容器 ： 容器不应引起新的沾污： 容器器壁不应吸收或吸附 某些成分 ； 容器应有一定强度， 并具有抗碰撞 ， 抗 破裂 抗极端温度 成本 费用低和便于清洗。 吸管 ４只； 纱布 ： 剪成小 片方便包 Ｅ ｌ ； 橡皮筋 ， 弹性好 。 １ ． ２ ． ２水池水体的采样 在校 中心广场水池选择 取样点 四处 ， 利用俯瞰图在每处要做 好标记 ， 用纱布包扎好 口的采 样器在表层下 ０ ． ５ ｍ深处以 ２ ０ ｃ ｍ ／ ｓ ３ ０ ｃ ｍ Ｊ ｓ 的速度作来回拖 动至充满容器 。
利用正交方法进行藻类细胞生长抑制试验制定塘入水标准的研究
利用正交方法进行藻类细胞生长抑制试验制定塘入水标准的研
究
杨扬;王亚龄
【期刊名称】《水生生物学报》
【年(卷),期】1994(018)001
【摘要】藻类细胞生长抑制试验在单项毒物条件下进行时，常未考虑毒物对藻类细胞的联合作用（拮抗效应、叠加效应和协同效应）。
本研究采用单项毒物试验和多种毒物同时存在时的正交试验（Ｌ１６＜４＾５＞），评价了进入武汉市黑水湖中试稳定塘的主要污染物（硫化物、挥发酚、石油类）对羊角月牙藻的９６ｈ的毒性效应。
效果表明，正交试验的ＥＣ５０值都比单项毒物试验低多，其９６ｈＥＣ５０降低２０－８０％，受试的几种主要污染物对藻类有
【总页数】6页(P65-70)
【作者】杨扬;王亚龄
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】X173
【相关文献】
1.用藻类生长抑制试验研究光电催化水中五氯酚毒性特征 [J], 刘薇;全燮;阮修莉;赵进英;赵雅芝;赵慧敏;陈硕
2.稳定塘多池结构对藻类生长的影响 [J], 蔡艳荣;李孝民
3.稳定塘藻类生长规律及其影响的中试研究 [J], 徐康宁;汪诚文;刘巍;刘翔;王玉珏
4.水花生塘去除高效藻类塘出水中藻类的研究 [J], 陈广;黄翔峰;何少林;安丽;李旭东;杨殿海;周琪
5.利用灰色关联方法分析水位缓慢下降对藻类生长的影响 [J], 李祥华
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
藻类生长抑制实验
速生 物 降解实 验
限定 条 件
在 知 期暴 露 中最 初 影 响 的 评 价 并可 指 示 藻 的群 休 效 应
。
— 有水 溶性
一
这 种 实 验 室测 试最 适 用 于 那 些 具
、
许 多不 同 的 藻 类 实 验 ( 草案 ) 都 是可 行的
这 个 生 长实 验 容 易 做
. ,
低 挥 发性 和 环 境 稳 定性特 性 而
影 响藻生 长 的那 些 被 试 物
2
A 实验
.
一 一水 溶性
.
— 指 导 性 资料 — —
蒸 汽压
、
方
、
法
目的
、
的 引言
范翻
、
相关
结构式 物质纯 度 化学 物 在水 和 光 中 的 稳 定性 水 中物质 定 量分析 方 法
p K
二
性
应 用 和限 制
单 细胞 绿 藻 作为 一 个 模 拟系 统 首 先 用
,
/ L 的 最 大浓 度 或 饱 和
,
目
偏 差 不 应与 不 正 确 的 实验 造 成 的 报 差 相
“
在 有效 地 使用这 些 实 验 之 前耍 但是 要 在 可能 的
.
高质 量 实验 室 工 作
。
”
原 叫 九 适 {民
对 它 们 做进 一 步 的 发 展 前提 之 下
。
于 生 态 毒 理 学实 验
这 种 发展 是 非 常 必 要 的
的浓 度
.
告 中写 明方 法
.
例 如 有机 溶 剂
来获 得所 安 求
定 义 和 单位
有机 拓 剂 在 水 中 的 浓 度 不 得 超 过
藻类生长抑制实验new
a) 横坐标为生长时间（天） b) 纵坐标为藻细胞浓度（个/ml） c) 图题：某？ 浓度下斜生栅藻的生长变化趋势。 d) 最后文字描述
备注：每一小组一张图。 附加:绘制一个不同浓度条件下的时间同步生长趋势线
以自己、对照、其它（最高浓度），或者全部
（二） ErC50（半数效应浓度）的计算分析: 96h（培养4天后） （1） 时间要求： 数据来源—96h（培养4天后）的藻类平均生长
2. 数据处理
生长率是单位时间内藻类细胞增长的量。对数生长期的藻类平均生长率 可用下式计算（）：
μ＝(lnNt－lnN0)/t μ——藻类平均生长率； t——藻类培养时间； N——藻类细胞生长量，N0为起始细胞数，Nt为培养时间t后的细胞数。
实验记录表
培养时间(d)
01 2 3 4
56
7
藻细胞浓度(个/mL)
图题：藻类平均生长率与毒物浓度间的关系
（5）计算ErC50：根据上述关系式计算该参数，即a=50%时，求 算C＝？？
（6）文字说明
实验一
藻类生长抑制实验
实验目的和意义
• 实验目的
1. 了解藻类的生长规律 2. 掌握藻类的培养方法 3. 掌握化学物质对单细胞绿藻生长影响的评价方法
• 意义
藻类是水体中的初级生产者,藻类的死 Nhomakorabea影响次 级生产者如浮游动物和鱼类等的生存,进而对整个水 生生态系统产生破坏。因此考察污染物对藻类生长的 抑制，有助于了解污染物对水生生态系统的污染效应。 单细胞藻类世代时间短，可在短期内获得化学物质对 其许多世代及种群水平上的影响。
数据资料处理要求：
1. 每小组资料绘制生长趋势图（时间序列生长动态）
藻类生长抑制实验
配制培养基时可将营养盐类按所需浓度直接加入无菌蒸 馏水或去离子水中。应按顺序逐个加入，待一种盐类完全溶解 后再加另一种。亦可先配制各种营养盐类的浓度储液，经灭菌 后避光冷藏保存。当需要配制营养基时，将一定量的浓储备液
摇匀，依次加入到蒸馏水或去离子水中即可。
表1
水生4号小球藻和栅藻培养基
含量(mg) 0.200 0.030 0.100 0.025 营养盐 FeCl3(1%) 土壤浸出液* 水 含量(mL) 0.015 0.500 1000
验结束时应测定被测物质的实际浓度。
4. 测试液的配制 先在每个试验锥形瓶中加入50mL藻液，再加50mL受试物 溶液。对照组只加50mL培养液。将各瓶摇动混匀后，放入
光照培养箱中培养。实验开始后，每隔24h(即在24，48h)测
定各组藻类的细胞密度。
实验结果
1.藻类生长的测定 藻类生长是指在试验期间每毫升溶液中藻类细胞 数目的增加量。一般用以下三种方法测定藻类的生
2. 藻试液的配制
从储备液中取出一定的藻液，接种到新鲜的无菌培养液中，
接种浓度约为104个/mL。在与试验要求相同的条件下进行预
培养，要求在2–3天内藻类能达到对数生长，然后再次转移到 新鲜的培养液中。如此反复转接培养2–3次，藻类生长健壮并
开始处于对数生长期时即可用来制备实验中需要的藻类试验
液。
特征。
实验原理
单细胞藻类个体小、世代时间短，是水体中的初级生产者。 因为可在短期内获得化学物质对其许多世代及种群水平上的影 响，所以利用污染物对藻类生长的抑制作用，能反映污染物水 平对水体中的初级生产者的作用情况。 通过将不同浓度的受试物加到属于对数生长期的藻类中，在 规定的实验条件下继续培养，每隔24 h测定藻类种群的浓度或 生物量，以观察受试物对藻类生长的抑制作用。经方差分析或t 检验，显著低于对照(P < 0.05)的生长率表明藻类生长受到抑制。
藻类生长抑制实验new
实验原理
• 将不同浓度的受试化合物加到处于对数生
长期的藻类中，在规定的实验条件下继续
培养，每隔24h测定藻类种群的浓度或生物
量，以观察受试化合物对藻类生长的抑制
作用。显著低于对照的生长率表明藻类生
长受到抑制。
仪器与试剂
1. 受试化合物
用于研究藻类生长抑制实验的受试化合物应当是挥发性低、环 境稳定性好且可溶于水的物质。如果需要助溶剂，它在水中的浓度不 能超过0.1mL/L。 本实验所用受试物为对硝基酚。该化合物对皮肤有强烈刺激作 用。能经皮肤和呼吸道吸收。动物实验可引起高铁血红蛋白血症，体 温升高，肝肾损害。急性毒性：LD50250mg/kg(大鼠经口)； 467mg/kg(小鼠经口)。
实验一
藻类生长抑制实验
实验目的和意义
• 实验目的
1. 了解藻类的生长规律 2. 掌握藻类的培养方法 3. 掌握化学物质对单细胞绿藻生长影响的评价方法
• 意义
藻类是水体中的初级生产者,藻类的死亡影响次 级生产者如浮游动物和鱼类等的生存,进而对整个水 生生态系统产生破坏。因此考察污染物对藻类生长的 抑制，有助于了解污染物对水生生态系统的污染效应。 单细胞藻类世代时间短，可在短期内获得化学物质对 其许多世代及种群水平上的影响。
Ca(H2PO4)2· H2O NaHCO3 KCl
含量/(g/L) 0.200
0.030 0.100 0.025
营养盐 MgSO4· 7H2O
FeCl3(1%) 土壤浸出液 水
含量(g/L) 0.080
0.015 0.500 1000
实验步骤
1. 藻类培养
光照培养箱中培养。培养温度为24 ±2 ℃；光照强度4000 ±400lx；培养容器用棉塞封闭。
四因素对淡水微藻的抑制效应
四因素对淡水微藻的抑制效应
陈娟;黄敏;王洋
【期刊名称】《黑龙江生态工程职业学院学报》
【年(卷),期】2017(030)002
【摘要】探讨水上培养绿色植物、水体pH值、活性炭及六价铬的添加对淡水微藻的抑制效应.结果表明,绿植可有效抑制绿藻的生长,效果不低于金属铬对绿藻的抑制;活性炭的添加对藻类的抑制并未显示出优势;水体呈酸性也会抑制微藻的生长,但这些藻类会改变水体偏向碱性.结论:较低的pH值(6)和绿植的添加(绿萝和水葫芦)以及适当铬(5mg·L-1)的存在可有效抑制藻类的增殖.
【总页数】4页(P24-26,114)
【作者】陈娟;黄敏;王洋
【作者单位】哈尔滨师范大学生命科学与技术学院生态系,黑龙江哈尔滨150025;哈尔滨师范大学生命科学与技术学院生态系,黑龙江哈尔滨150025;哈尔滨师范大学生命科学与技术学院生态系,黑龙江哈尔滨150025
【正文语种】中文
【中图分类】Q949
【相关文献】
1.华南地区淡水产油微藻藻株的分离与筛选 [J], 许瑾;张成武;李爱芬;桑敏;吴洪;刘敏胜;朱振旗
2.壳聚糖没食子酸新型抑藻剂的制备及其对淡水微藻生长的影响 [J], 刘杨;郭沛涌;
鲁贝贝;黄伟;万禁禁
3.三种海洋微藻和三种淡水微藻脂肪酸组成特征的比较分析 [J], 董丽华;游江涛;林秋奇;胡韧;韩博平
4.几种酞酸酯对海洋微藻的生长抑制效应 [J], 陈静宁;林秀春;许茂松
5.有机磷农药对海洋微藻致毒性的生物学研究Ⅰ．四种海洋微藻对久效磷的耐受力与其SOD活性的相关性 [J], 唐学玺;李永祺;李春雁;董宝贤
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
3mg/L
3µg/L
CoCl2·6H2O
1.5mg/L
1.5µg/L
CuCl2·2H2O
0.01mg/L
0.01µg/L
贮备液 4：NaHCO3
Na2MoO4·2H2O NaHCO3
7mg/L 50g/L
生长抑制试验指南（Water quality–Guidance for algal growth inhibition tests with pooly soluble
materials ,volatile compounds ,metals and waste water）
BS EN ISO 8692:2004
3.2 比生长率 specific growth rate
指单位时间内细胞浓度的增长比率，以 μ 表示。计算公式为： μ = 1 ⋅ dx 。 x dt
式中： μ ——比生长率，d-1；
x ——细胞浓度，细胞数/ml；
t——时间，用 d 表示。 3.3
生长培养基 growth medium 混合水（5.2）和营养物质组成的培养基，绿藻细胞在其中培养生长，主要用于前期培 养和空白对照。
环境保护部
发布目次Βιβλιοθήκη 前 言..........................................................................................................................................................II 1 适用范围.................................................................................................................................................. 1 2 规范性引用文件...................................................................................................................................... 1 3 术语和定义.............................................................................................................................................. 1 4 方法原理.................................................................................................................................................. 2 5 试剂和材料.............................................................................................................................................. 2 6 仪器和设备.............................................................................................................................................. 3 7 分析步骤.................................................................................................................................................. 3 8 质量保证和质量控制 .............................................................................................................................. 5 9 结果计算与表示...................................................................................................................................... 5 10 精密度.................................................................................................................................................... 7 11 试验报告 ................................................................................................................................................ 7 附录 A（资料性附录）本标准章条编号与 BS EN ISO 8692:2004 章条编号对照.................................. 9 附录 B（资料性附录）本标准与 BS EN ISO 8692:2004 的技术性差异及其原因 ................................ 10 附录 C（规范性附录）废水中绿藻生长抑制试验的快速筛选方法........................................................11
5 试剂和材料
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂， 5.1 试验生物：可使用以下任意一种浮游的淡水海藻物种，在海藻酸微胶囊中可保存几个 月，并且很容易从中释放出来用于进行毒性试验。 5.1.1 近具刺链带藻（Desmodesmus subspicatus(86.81 SAG) 5.1.2 羊角月芽藻（Pseudokirchneriella subcapitata(Korshikov)Hindak(ATCC 22662,CCAP 278/4 或 61.81 SAG)）
Water quality Freshwater algal growth inhibition test with
unicellular green algae（水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验）
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。 3.1
细胞浓度 cell density
指每单位容积培养基中的细胞数量，通常用每毫升中的细胞数表示浓度，以 x 表示。
注 1：这两种浮游海藻属于绿球藻目（绿藻门，绿藻纲），通常是单细胞培养。 注 2：可以按照 5.3 和 7.1 中的培养基进行贮存培养。然而需要经常进行传代培养（每周一次）以防止生 长失败。贮存培养物在丰富的藻类培养基中能延长保存时间。
5.2 水：去离子水或同等纯度的水（电导率<10µS/cm），用于制备生长培养基和溶解试验
3.4 测试样品 test sample 指水溶性样品（如废水）、化学物质或混合物，用于测定其对海藻的生长抑制作用。
3.5
1
测试培养基 test medium 由水、营养物质和测试样品混合组成。 3.6 测试组 test batch 指由水、营养物质和测试样品组成的测试培养基（3.5）与海藻一起培养。 3.7 对照 control 指不含测试样品，由水和营养物质组成的生长培养基（3.3）与绿藻一起培养。 3.8 效应浓度 effective concentration 相对于对照，引起绿藻细胞比生长率降低 x%时的测试样品浓度。建议用符号“ErCx” 表示。
I
前言
为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》，保护环境，保障人体 健康，规范水中生物类监测分析方法，制定本标准。
本标准规定了测定水或废水中含有的物质和混合物对单细胞绿藻生长抑制的试验方法。 本标准的技术内容为等同采用《水质—用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》（BS EN ISO 8692:2004）。附录A给出了本标准章条编号与BS EN ISO 8692:2004章条编号的对照一览表，附录B给出 了本标准与BS EN ISO 8692:2004的技术性差异及其原因。 本标准为首次发布。 附录A和附录B为资料性附录，附录C为规范性附录。 本标准由环境保护部科技标准司组织制订。 本标准主要起草单位：广东出入境检验检疫局、环境保护部化学品登记中心。 本标准环境保护部 201□年□□月□□日批准。 本标准自 201□年□□月□□日起实施。 本标准由环境保护部解释。
物质。 在配制和贮存过程中需要避免被无机或有机物质污染，而且不能使用铜制设备。
5.3 营养物 按照表 1 配制四种溶于水的营养物贮备液。加以稀释可配制测试溶液中的最终营养物浓
度（见 7.1 和 7.4），也可将常量营养物质直接加入水中获得。 用 0.2µm 滤膜过滤贮备液除菌，或使用高温高压灭菌（120℃，15min）。该贮备液应于
15mg/L
贮备液 2：Fe-EDTA
KH2PO4 FeCl3·6H2O
0.16g/L 64mg/L
1.6mg/L 64µg/L
贮备液 3：微量元素
Na2EDTA·2H2O H3BO3a
100mg/L 185mg/L
100µg/L 185µg/L
MnCl2·4H2O
415mg/L
415µg/L
ZnCl2